破壁前后灵芝孢子粗多糖含量、结构及单糖组成对比分析

为明确破壁对灵芝孢子粗多糖含量、结构及单糖组成的影响,以灵芝粗多糖提取含量为指标,对灵芝粗多糖的提取工艺进行优化,获得灵芝孢子粗多糖超声辅助水提取的最佳工艺参数为超声温度55℃、超声时间8 h,此工艺条件下从破壁灵芝孢子粉中提取的粗多糖含量为(15.873±0.746)mg/g。采用最佳提取工艺条件提取破壁前后灵芝孢子粗多糖,对比其灵芝孢子粗多糖含量、纯度、DPPH自由基清除率以及单糖组成和多糖结构,结果显示破壁处理后灵芝孢子粗多糖含量提高233.396%,但其纯度下降了19.898%;破壁后灵芝孢子多糖DPPH自由基清除率也有较大提升;破壁处理对灵芝孢子多糖的单糖组成种类没有明显改变,但在单糖含量上存在显著性差异,特别是岩藻糖、半乳糖和甘露糖;红外光谱结果显示破壁前后灵芝孢子粉提取的灵芝孢子粗多糖在结构、组成上无明显差异,均是含有D⁃吡喃葡萄糖环的多糖。

松茸粗多糖的提取工艺优化、单糖组成及体外抗氧化活性

【目的】提高松茸粗多糖提取率,探究松茸多糖纯化组分及抗氧化作用。【方法】采用超声波辅助水提醇沉法提取松茸粗多糖,优化提取工艺,使用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱分离纯化粗多糖,采用离子色谱法分析单糖成分,并测定体外抗氧化活性。【结果】最优提取工艺参数为:浸提时间2.25 h,料液比1∶31(g∶mL),浸提温度83.50℃,该条件下多糖提取率为8.67%。松茸粗多糖经分离纯化后收集到3种多糖组分(TMP-1、TMP-2、TMP-3),主要由岩藻糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成,其中TMP-1存在鼠李糖,TMP-2和TMP-3存在葡萄糖醛酸。松茸粗多糖和3种纯化多糖组分均具有一定的抗氧化活性且存在量效关系,抗氧化能力强弱为:松茸粗多糖>TMP-2>TMP-3>TMP-1。【结论】松茸多糖有一定的抗氧化活性,且松茸粗多糖效果最好,分离纯化后的多糖组分抗氧化活性有所降低。本研究为松茸多糖的开发利用提供了理论基础,对其功能食品研发具有重要意义。

不同生长时期酸枣果肉多糖相对分子质量分布和单糖组成及抗氧化活性研究

为了探究不同生长时期酸枣果肉中多糖含量、相对分子质量、单糖组成及抗氧化活性变化规律,以野生型和种植型酸枣为研究对象,分别采用苯酚-硫酸比色法、高效凝胶色谱法、高效离子色谱法和DPPH自由基清除实验研究其不同生长时期的果肉多糖含量、相对分子质量、单糖组成和自由基清除能力。研究发现野生型和种植型的酸枣果肉中多糖含量均表现出先下降后上升的趋势;两种类型的酸枣果肉多糖的相对分子质量均随着酸枣的发育逐渐降低;两种类型酸枣果实发育前期果肉多糖中单糖鼠李糖含量最高可达46.14 mg/g,半乳糖次之可达33.10 mg/g;果实发育后期,两种类型的酸枣果肉多糖中单糖含量最高的为阿拉伯糖可达60.30 mg/g,半乳糖醛酸次之可达45.02 mg/g;两种类型酸枣果肉多糖的DPPH自由基清除能力变化趋势与其果肉中多糖含量变化趋势基本相同;种植型酸枣与野生型酸枣在多糖含量、多糖相对分子质量、单糖组成和自由基清除能力方面均表现为相同的趋势,且均属于还原糖积累类型果实。研究结果为酸枣果肉资源进一步开发与利用提供参考。

黑果枸杞果实多糖的超声辅助双水相萃取工艺优化、单糖组成分析及胰脂肪酶抑制活性评价

目的:优化黑果枸杞果实多糖的制备工艺,分析单糖组成,并对其体外胰脂肪酶抑制活性进行评价。方法:采用超声辅助双水相萃取法,以多糖回收率和提取率的总评值为评价指标,在单因素实验基础上,通过响应面试验优化黑果枸杞果实多糖提取工艺;采用柱前衍生化高效液相色谱法研究其单糖组成;通过棕榈酸对硝基苯酯法测定黑果枸杞果实多糖的体外胰脂肪酶抑制活性。结果:黑果枸杞果实多糖的最佳提取工艺为:乙醇-硫酸铵体系,乙醇质量分数30.89%,硫酸铵质量分数17.00%,提取温度49.05℃,提取时间81.85 min,液料比29.80 g/g,预测总评值为0.9242,多糖提取率为104.76 mg/g,回收率为96.96%;黑果枸杞果实多糖由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,相对摩尔比分别为4.92:0.29:4.80:0.40:9.69:44.79:17.04:18.06;黑果枸杞果实多糖抑制胰脂肪酶活力的IC_(50)值为1.51 mg/mL。结论:响应面试验优化得到的黑果枸杞果实多糖制备工艺稳定,单糖组成检测方法准确可靠,制备所得多糖具有良好的体外胰脂肪酶抑制活性,为黑果枸杞果实多糖的进一步开发利用提供了依据。

吉祥草多糖的单糖组成及抗氧化活性分析

优化吉祥草多糖(RCP)提取工艺,探讨RCP的单糖组成和体外抗氧化活性。以吉祥草全草为原料,经烘干、粉碎、脱脂、脱色等前处理,在单因素基础上,利用正交试验优化RCP的提取工艺,采用高效液相色谱仪(HPLC)测定单糖组成,并探讨RCP体外抗氧化活性。RCP提取最佳工艺为料液比1∶40(g∶mL),提取温度100℃,提取时间60 min,提取次数3次,此条件下RCP提取率为17.23%±0.78%。经HPLC分析表明,RCP主要由8种单糖组成,分别是半乳糖醛酸41.90%±0.01%、半乳糖9.14%±0.01%、阿拉伯糖4.20%±0.03%、鼠李糖1.99%±0.02%、葡萄糖1.98%±0.01%、甘露糖1.06%±0.01%、葡萄糖醛酸0.49%±0.01%。体外抗氧化活性分析表明,RCP具有较强的体外抗氧化能力,在1.0 mg/mL质量浓度时,DPPH自由基、羟自由基、O_(2)^(-)·自由基、模拟胃液NO_(2)^(-)自由基的清除率各为91.49%±2.76%,29.33%±2.09%,42.37%±2.65%,25.17%±1.06%,IC_(50)值分别为0.08,1.67,1.11,2.42 mg/mL。吉祥草有一定的抗氧化能力,本研究有利于吉祥草多糖在功能性食品、保健品和药物等领域的开发利用,为吉祥草的开发利用提供理论依据。

高效液相色谱法测定罗望子胶的单糖组成

采用柱前衍生化高效液相色谱法,对罗望子胶中主要单糖组分进行检测。选用Diamonsil-plus C 18-A^(*)色谱柱,用磷酸盐缓冲液-乙腈溶液流动相进行等度洗脱,流速设置1.0 mL/min,柱温35℃,进样量5μL,检测波长245 nm。罗望子胶中主要单糖组分葡萄糖、木糖和半乳糖的比例为52.05%、20.03%和12.17%。数据在各自浓度范围内线性关系良好(R≥0.9992),加样回收率在100.33%~101.34%之间,RSD小于2.0%,检测限在0.0005~0.0009 mg/L之间。综上,该检测方法适用于罗望子多糖胶中单糖组分测定。

PMP柱前衍生HPLC法测定八月瓜果皮多糖中单糖组成

为建立同时测定八月瓜果皮中6种单糖组分的色谱分离方法,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)柱前衍生和高效液相色谱法测定八月瓜果皮中6种单糖组分。色谱柱为SHIMADZU-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05 mol/L甲酸铵溶液(B)梯度洗脱(0~10 min:18%A;10~20 min:18%~20%A;20~40 min:20%~23%A;40~60 min:23%A),柱温30℃,流速1 m L/min,检测波长245 nm。结果表明,所建立的PMP-HPLC柱前衍生化法可准确地测定八月瓜果皮中的D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖含量,6种单糖成分在各自质量浓度范围内线性关系良好(R2≥0.998 3),加样回收率为92.58%~100.02%。10批八月瓜果皮样品中均检出6种单糖,D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖和D-阿拉伯糖平均物质的量比为1.18∶1.00∶23.25∶11.73∶3.51∶5.88,其中D-半乳糖醛酸含量为51.84~212.84 mg/g,D-葡萄糖含量为22.44~73.23 mg/g,D-阿拉伯糖含量为6.14~60.01 mg/g,是八月瓜果皮中的单糖主要成分。该试验所建立的方法操作简便、重复性好和准确度高,适用于八月瓜果皮多糖中单糖成分的分析。

PMP柱前衍生反相高效液相色谱—紫外检测法结合离子色谱—脉冲安倍法测定不同产地泽泻多糖的单糖组成

本文建立了1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生高效液相色谱-紫外检测法结合离子色谱-脉冲安倍法测定泽泻中10种单糖含量的测定方法,并比较了不同产地泽泻多糖中的单糖组成差异。经测定泽泻多糖中含有葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸和阿拉伯糖,其中葡萄糖含量最高,说明泽泻多糖是以葡聚糖为主的杂多糖。不同产地泽泻多糖中葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸含量差异显著(P<0.05),葡萄糖含量由高到低依次为广泽泻(166.940~264.724 mg/g)、川泽泻(82.647~155.019 mg/g)和建泽泻(51.148~97.746 mg/g);广泽泻多糖中半乳糖含量(3.511~3.840 mg/g)显著高于川泽泻(1.193~1.797 mg/g,P<0.01)和建泽泻(低于定量限);仅有广泽泻中半乳糖醛酸含量(1.342~1.823 mg/g)高于方法定量限。广泽泻中葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸摩尔比为60.13∶1∶0.40,川泽泻中葡萄糖、半乳糖摩尔比为1545.05∶1,建泽泻多糖中几乎都是葡萄糖,葡萄糖占比在上述产地多糖中依次增加,三种单糖的杂合程度依次减弱。研究结果将为泽泻多糖的结构研究和质量控制奠定基础。

香加皮多糖的分离纯化、单糖组成及其抗氧化活性研究

目的:分离纯化香加皮多糖(Cortex Periplocae Polysaccharides,CPP),并对其进行单糖组成和抗氧化活性研究,以期为香加皮多糖在食品领域的开发和应用提供参考。方法:通过水提醇沉和Sevag法除蛋白得到香加皮粗多糖,经DEAE-52纤维素柱分离纯化得到4种多糖组分CPP0、CPP1、CPP2和CPP3,并对其进行化学成分检测、分子量测定、单糖组成分析、红外光谱和抗氧化活性分析。结果:4种多糖的糖含量分别为82.20%、77.13%、75.23%和72.85%,且都含有糖醛酸;相对分子量分别为685、477、411和572 kDa。4种多糖均为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖按照不同摩尔比组成的杂多糖。红外光谱表明4种多糖含有β-糖苷键且具有呋喃环。抗氧化实验结果显示4种多糖均具有一定的抗氧化性,总体抗氧化能力顺序为:CPP0>CPP3>CPP1>CPP2。结论:从香加皮中提取得到的4种酸性多糖,糖含量高、相对分子量大且均具有抗氧化活性,其中CPP0组分抗氧化活性最好。

人参及其近缘种粗多糖含量测定和单糖组成分析

目的优化人参多糖提取、水解和衍生化工艺,探讨人参及近缘种多糖的单糖组成及抗氧化应激活性。方法通过正交实验优化多糖提取工艺;采用苯酚-硫酸法测定总多糖含量;通过单因素实验考察水解及衍生化条件,并进行单糖组成分析;构建氧化应激损伤模型评价人参属多糖抗氧化应激活性。结果提取工艺优选为100℃,4h,料液比1∶15,乙醇浓度85%;6种人参属药材中总多糖含量为14.59%-35.58%。水解:TFA浓度2 mol·L^(-1),110℃水解5 h;衍生化:PMP浓度0.3 mol·L^(-1),70℃反应30 min;主要单糖组成:鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖。经红参和珠子参多糖处理后的细胞活性及GSH-Px、SOD相对含量回升,丙二醛相对含量减少。结论人参及其近缘种的单糖类型基本一致,但其含量具有一定差异。红参和珠子参多糖具有减缓H9c2细胞中由H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤的潜力。研究结果为人参属药材多糖的开发利用提供参考依据。

辣蓼中性多糖单糖组成分析、抗小鼠大肠杆菌性腹泻作用及其分子机制

目的分析辣蓼中性多糖(NPP)的单糖组成,评价其抗大肠杆菌性腹泻作用,并基于高通量转录组测序技术探讨其作用机制。方法水提醇沉法制备辣蓼粗多糖,通过反复柱色谱分离纯化得到中性多糖组分NPP,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化-高效液相色谱(HPLC)法分析NPP单糖组成。雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、模型+恩氟沙星5 mg·kg^(-1)组、模型+NPP 40和80 mg·kg^(-1)组。除正常对照组外,其余各组小鼠ip给予大肠杆菌菌液(1.0×10^(12)CFU·L^(-1),10 mL·kg^(-1)),每日1次,连续8 d造摸;正常对照组小鼠注射同体积生理盐水。给药组于造模前2 d ig给药,每日2次,连续给药10 d;正常对照组和模型组小鼠ig给予等量生理盐水。HE染色观察小鼠十二指肠组织病理变化;高通量转录组测序技术分析正常对照组、模型组和模型+NPP组小鼠肠组织的差异表达基因(DEG),并对DEG进行GO功能富集和KEGG信号通路富集分析;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DEG mRNA表达量。结果NPP主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及半乳糖醛酸组成,单糖在各自浓度范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9995),平均加样回收率为99.03%~102.41%,各单糖摩尔比为13.66∶10.33∶2.34∶1.00。HE染色结果表明,模型组小鼠十二指肠细胞水肿变性,少量细胞坏死或凋亡;模型+NPP组十二指肠组织结构清晰,仅见少量炎症细胞浸润。转录组测序结果显示,与正常对照组相比,模型组共筛选出1020个DEG;与模型组相比,模型+NPP组共筛选出960个DEG。GO功能分析显示,DEG主要富集于细胞过程、单有机体过程、代谢过程、细胞等生物学过程;KEGG通路分析显示,DEG主要富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用通路、Toll样受体信号通路和趋化因子信号通路等炎症相关信号通路。RT-qPCR验证结果表明,选取的8个DEG的差异表达倍数趋势与转录组测序结果基本一致。结论建立的PMP-HPLC方法简单可行、重复性好,可用于NPP的分析检测及质量控制。NPP对大肠杆菌性腹泻小鼠的受损十二指肠具有明显的修复作用,其作用机制可能与调控机体的趋化因子信号通路,Toll样受体信号通路等有关。

枸杞多糖提取工艺优化与酒泉地产枸杞中多糖及其单糖组成测定

以甘肃省酒泉地产枸杞为试验对象,采用超声辅助优化枸杞多糖提取工艺,并对酒泉地产枸杞药材中多糖及其单糖组成进行测定分析。以多糖提取率为指标,以固液比、提取温度、提取时间、超声时间为考察因素,开展单因素试验,并结合Box-Behnken响应面法优化提取工艺。按照苯酚-硫酸法测定枸杞中总多糖,利用柱前衍生化高效液相色谱(HPLC)法测定枸杞多糖的单糖组成。结果显示,枸杞多糖超声辅助最佳提取工艺为固液比1∶20(g∶mL),超声时间30 min,提取温度90℃,提取时间90 min。采用上述工艺,酒泉玉门市柳河乡产的枸杞中多糖净提取率最高,为3.83%;利用苯酚-硫酸法和柱前衍生化HPLC法分别测定9批枸杞总多糖含量和自制枸杞多糖的单糖组成,酒泉玉门市花海镇和瓜州县布隆吉乡产的枸杞中总多糖含量较高,为3.21%和3.01%;自制枸杞多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖7种单糖组成,平均含量分别为0.62%、1.01%、3.59%、8.22%、3.59%、0.76%和4.79%,且玉门市和瓜州县产的枸杞多糖中单糖含量较高。枸杞多糖的超声辅助提取工艺稳定可靠,为其加工生产提供了理论依据,节约了时间及经济成本;对酒泉地产枸杞的多糖及单糖组成进行比较分析,可为当地枸杞特色中药材质量状况评价提供依据,有助于枸杞多糖深加工产业的发展。

4种食源性多糖的单糖组成及其对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

旨在为致病菌耐药性问题提供了可能的替代方案。以木耳、山药、百合、枸杞为原料,采用水提醇沉法、离子色谱法、结晶紫染色法等技术对比分析4种食源性多糖的单糖组成及其对致病菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑制效应。结果表明:4种多糖均以葡萄糖为主要单糖,木耳多糖对MRSA的生长、生物被膜的形成、细胞粘附和毒性均有明显的抑制作用;百合多糖和山药多糖仅对MRSA的细胞粘附和毒性有较为显著的抑制作用,对MRSA的生长和生物被膜的形成无明显的抑制效应;枸杞多糖对MRSA几乎没有抑制能力。木耳多糖对致病菌MRSA的抑制能力优于其他3种食源性多糖,作为潜在抗MRSA的天然产物具有进一步表征及优化的价值。

HPLC-ELSD法快速测定枸杞多糖的单糖组成及含量

采用热水提取法对枸杞中的多糖成分进行提取,并用三氟乙酸对多糖提取液进行水解。利用蒸发光高效液相色谱(HPLC-ELSD)技术,使用单标葡萄糖溶液进行液相方法的优化,并对糖单标以及混标进样分析,确定标准品出峰时间。对多糖提取液以及水解液进样分析,根据标准品出峰情况,确定了水解液中枸杞多糖的单糖组成主要为葡萄糖、果糖,含量分别为8.15%、4.75%。

气相色谱-质谱法分析研究野生菱角壳中多糖化合物的单糖组成

采用乙醇分级沉淀法,首次从野生菱角壳中提取出 4种多糖化合物,利用气相色谱 质谱法,确定了菱角多糖分别由阿拉伯糖,鼠李糖,木糖,甘露糖,半乳糖,葡萄糖,乳糖和蜜二糖组成,其中以葡萄糖,半乳糖,甘露糖和木糖为主。

柱前衍生化高效液相色谱法分析当归多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化反相高效液相色谱(HPLC)法,建立了9种常见单糖的分离模式,并成功地用于当归多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,当归多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0.57∶1.00∶0.13∶3·06∶8.16∶7.17∶12.69。该HPLC方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于当归多糖的质量控制。

TLC快速分析多糖的单糖组成

本文采用薄层色谱法分析多糖的单糖组成。从斑点分离度、清晰度、有无拖尾现象及展层时间等方面综合评价展层效果。通过实验确定了适合的展开剂为展开系统(乙酸乙脂:吡啶:无水乙醇:水=8:1:1:2)、合适的显色剂为苯胺-二苯胺磷酸显色剂。通过此体系确定了单糖的Rf值,可用于快速分析水解多糖的单糖组分。

8种多糖的单糖组成、活性及其相关性分析

为探究多糖的结构与其体外抗氧化活性间的相关性,采用水提醇沉法提取了8种中药材中的多糖,用苯酚-硫酸法测定其多糖含量、用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化(PMP)-高效液相色谱法(HPLC)测定各多糖中的单糖组成及含量并对其进行主成分投影分析.以清除1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基为模型测定了8种多糖的体外抗氧化活性.用简单相关分析探究样品中各单糖之间及各单糖与体外抗氧化活性间的相关程度,采用典型相关分析研究单糖组成与体外抗氧化活性的整体相关性.结果表明8个样品在主成分空间分布离散,有较好的代表性;除葡萄糖(Glc)外,各单糖之间、单糖与体外抗氧化活性间的简单相关系数均较高,单糖组成与抗氧化活性的第一典型相关系数为0.844,4;多糖的单糖组成与体外抗氧化活性有较强相关性.

GCMS法分析茶叶中提取物TGP的单糖组成及机理探讨

用水提取茶叶并采用凝胶纯化,从茶叶中分离得到一种多糖蛋白复合物TGP.TGP被硫酸完全水解,单糖产物用盐酸 羟胺和乙酸酐进行衍生化处理,GC MS进行分析.研究结果表明,TGP的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖.同时探讨了单糖的糖腈乙酰酯衍生化及衍生产物在质谱中的电离机理.

印度块菌水溶性多糖的单糖组成与抗氧化活性研究

采用水提醇沉法对印度块菌子实体水溶性粗多糖进行提取,并通过酶法-Sevag法联用脱蛋白,DEAE52纤维素SephadexG-100柱层析对其进行分离纯化,得到主要多糖组分TIP-A。采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)对其均一性进行验证,测定出相对分子质量(Mr)为17500。气相色谱质谱联用(GC-MS)分析表明,TIP-A是由D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-鼠李糖组成的均一杂多糖,物质的量比约为7:2:2:2。对TIP-A抗氧化活性研究表明,其对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)、1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基有较强的清除能力,半抑制质量浓度(IC50值)分别为1.06、1.02、1.13mg/mL。对过氧化氢(300mmol/L)诱导的PC12细胞损伤有较好的抑制力,具备开发成天然抗氧化剂的潜力。