单羧酸转运蛋白1在动物体内的转运调控机制

单羧酸转运蛋白1(MCT1)是动物体内最重要的单羧酸转运蛋白亚型,广泛分布于动物体的各个组织细胞中,通过参与乳酸、短链脂肪酸等单羧酸物质的跨膜转运,发挥着多种生物学功能,包括参与营养物质转运、调节pH、作为癌症治疗的靶点、调控葡萄糖代谢平衡等。本文就近年研究,总结了MCT1在单胃和反刍动物体内的定位分布、表达差异,并重点阐述了MCT1通过转运单羧酸发挥的生物学功能和转运调控机制,为MCT1在动物体内的调控机制研究提供参考。

胎盘SLC16A1基因及单羧酸转运蛋白1表达量与妊娠期糖尿病的关系

目的探讨胎盘SLC16A1基因及单羧酸转运蛋白1(MCT1)表达量与妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法选取该院1361例妊娠女性为研究对象,其中GDM患者281例纳入GDM组,健康妊娠女性1080例纳入正常妊娠组。正常妊娠组及GDM组按1∶1匹配(n=105)后比较两组胎盘MCT1及SLC16A1基因表达量,并采用Logistic回归分析MCT1及SLC16A1基因表达量与GDM的关系。匹配参数为体质量指数、年龄、生产史、GDM病史(匹配容差分别为0.3、0、0、0)。结果GDM组、正常妊娠组SLC16A1基因表达量分别为0.390(0.006,2.980)、0.561(0.014,4.205),GDM组明显低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。GDM组、正常妊娠组MCT1表达量分别为0.097±0.044、0.166±0.030,GDM组明显低于正常妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示SLC16A1基因表达量增加是GDM的保护因素(OR=0.740,95%CI 0.561~0.974,P<0.05)。结论GDM患者胎盘SLC16A1基因及MCT1表达量均下降,SLC16A1基因表达量增加是GDM的保护因素。

抑制单羧酸转运蛋白1可增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性

目的探讨siRNA沉默单羧酸转运蛋白1(MCT1)增强鼻咽癌细胞HNE1/DDP对顺铂诱导凋亡的敏感性及其可能机制。方法 Western blot检测HNE1和HNE1/DDP细胞中MCT1的表达及siRNA转染沉默MCT1在HNE1/DDP细胞中MCT1的表达;MTT法检测不同浓度顺铂和MCT1 siRNA联合顺铂对HNE1/DDP细胞的增殖抑制作用;PI单染流式细胞术检测细胞凋亡;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞线粒体膜电位;Western blot检测Mcl-1、Bak、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 MCT1在HNE1/DDP细胞中高表达,抑制MCT1的表达可增加HNE1/DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05),部分逆转鼻咽癌细胞对顺铂的耐药。此外,抑制MCT1的表达可增强HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的作用,MCT1 siRNA与8μmol/L顺铂联合作用于HNE1/DDP细胞24 h的凋亡率为(51.23±2.86)%,较单用MCT1 siRNA、顺铂的凋亡率明显升高(P<0.05)。同时使细胞线粒体膜电位降低,下调Mcl-1、Bcl-2的表达和上调Bax的表达。结论抑制MCT1的表达可增强鼻咽癌HNE1/DDP细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,其机制可能与下调Mcl-1、Bcl-2和上调Bax有关。

单羧酸转运蛋白1、2在乳腺浸润性导管癌中的表达变化及其与病理级别之间的关系

目的探讨单羧酸转运蛋白(MCT)1、2在人不同病理级别乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达变化及其对增殖、生长的分子机制。方法收集人不同病理级别乳腺IDC标本37例,以肿瘤周围相对正常乳腺组织作为对照,运用苏木素-伊红(HE)染色作病理诊断分级,石蜡切片免疫组织化学显色,并用Western印迹方法观察MCT 1、2的表达变化。结果与正常乳腺组织相比,MCT 1、2在乳腺IDC中均有高表达;其表达量随病理级别的升高逐渐增强。结论 MCT 1、2在乳腺IDC组织中表达增强,其强度变化与肿瘤的恶性程度呈正相关。

单羧酸转运蛋白1、4在甲状腺乳头状癌中的表达及其相关性研究

目的研究单羧酸转运蛋白(MCT)1、4在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及临床病理学意义。方法收集2015年1月-2018年2月在新疆医科大学第一附属医院接受手术治疗的220例PTC标本及104例良性甲状腺组织标本。采用免疫组化SP法检测MCT1和MCT4的表达水平,探讨二者与临床病理的关系。结果MCT1在188例PTC组织中呈阳性表达,在29例良性甲状腺组织中呈阳性表达;MCT4在190例PTC组织中呈阳性表达,在35例良性甲状腺组织中呈阳性表达;PTC组织中MCT1、MCT4阳性率均明显高于良性甲状腺组织(P<0.01)。MCT1和MCT4蛋白表达水平与PTC患者年龄、性别、肿瘤大小均无明显相关性,而与颈部淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论MCT1和MCT4在PTC中高表达,且与颈淋巴结转移密切相关,有望成为甲状腺乳头状癌生物行为的有效标志。

消化道上皮单羧酸转运蛋白1(MCT1)跨膜转运功能的调控机理

良好地吸收营养物质是家畜高效养殖的重要前提。单羧酸是饲粮在消化道发酵产生的重要供能物质,其吸收主要通过单羧酸转运蛋白(MCT1)来实现。深入研究MCT1的转运功能及调控机理对提高家畜生产性能具有重要意义。本文就MCT1的基因及蛋白结构特点、消化道分布与定位特点、转运机制和调控因素及机理进行综述,以期为MCT1的功能调控研究提供参考。

单羧酸转运蛋白1增强乳腺癌细胞对3-溴丙酮酸的敏感性

目的探究单羧酸转运蛋白1(MCT1)在增强乳腺癌细胞对3-溴丙酮酸(3-Br PA)敏感性中的作用,为乳腺癌治疗提供新思路。方法 MTT法检测3-Br PA对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,溴化丙啶单染法流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA试剂盒检测细胞内己糖激酶Ⅱ、乳酸脱氢酶、乳酸、三磷酸腺苷水平,Western blot检测MCT1蛋白的表达,瞬时转染c DNA上调MCT1的表达后,检测3-Br PA对MDA-MB-231细胞的增殖和三磷酸腺苷水平的影响。结果 3-Br PA对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响不明显,200μmol/L作用24 h后增殖抑制率和凋亡率仅为8.72%和7.8%;但200μmol/L 3-Br PA作用MCF-7细胞24 h后其增殖抑制率和凋亡率为84.6%和82.3%。MDA-MB-231细胞的MCT1过表达后,200μmol/L 3-Br PA对细胞的增殖抑制率为72.44%,明显高于对照组(P<0.05);25、50、100、200μmol/L 3-Br PA作用细胞6 h后,细胞内三磷酸腺苷水平和对照组相比分别为96.98%、88.44%、43.3%、27.56%。结论 MCT1能增强乳腺癌细胞对3-Br PA的敏感性,其机制可能是将3-Br PA转运到细胞内,从而抑制细胞糖酵解来发挥抗肿瘤作用。

单羧酸转运蛋白1、2、4在急性心衰大鼠模型肾上腺的表达变化

目的观察单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter,MCT)1、2、4在急性心衰大鼠肾上腺的表达变化,以探讨急性心衰肾上腺的能量代谢变化。方法随机将成年健康SD大鼠(雌雄不限,250±20 g)50只,分为3组:正常组(n=10)、假手术组(n=20,2 subgroups,10 in each)和模型组(n=20,2subgroups,10 in each)。用1.5%戊巴比妥钠静脉注射制作大鼠急性心衰模型;注毕,运用BL-420F生物机能实验系统记录左室内压峰值(LVSP)和左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)的变化曲线;用IHC和Western Blot检测模型鼠,肾上腺MCT1,2,4的表达变化。结果在急性心衰发生10 min时,肾上腺皮质和髓质MCT1、2、4的表达均有升高,此时假手术组MCT1、2、4也有升高。与正常对照组相比较,两组的MCT1、2、4的表达升高均具有统计学意义(P<0.05);在20 min时,大鼠肾上腺MCT1、2、4的表达较正常组却有所下降,与正常组相比较,仅MCT1的表达下调具有统计学意义(P<0.05),而MCT2、4则无明显差别(P>0.05)。假手术20 min组与10 min组相比较,MCT1、2、4的表达无明显差别(P<0.05)。结论在急性心衰和创伤性应激状态下,肾上腺MCT1、2、4的表达,在十分钟内呈代偿性增加,但随着心衰时间的延长,其表达反而降低,机体的能量代谢出现失代偿,提示MCT1、2、4参与创伤性应激及急性心衰的能量代谢过程。

单羧酸转运蛋白1促进胰腺导管癌细胞浸润转移的机制研究

背景与目的:单羧酸转运蛋白1(monocarboxylate transporter 1,MCT1)是细胞转运乳酸、丙酮酸等代谢产物及能量物质的一种重要蛋白质,其在胰腺导管癌中的作用及机制鲜有研究报道。该研究旨在探讨MCT1在胰腺导管癌中的表达及临床病理学意义。方法:纳入78例胰腺导管癌患者的癌组织及癌旁正常组织,运用免疫组织化学技术检测MCT1在癌组织和癌旁正常组织中的表达水平并分析其临床病理学意义。在体外细胞系水平上,我们运用胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1,运用细胞克隆形成实验、细胞划痕和Transwell实验分析沉默MCT1后胰腺癌细胞增殖、迁移和浸润的改变。为明确MCT1的相关作用机制,我们通过生物信息学分析,预测miR-124-3p是MCT1的潜在调控微小RNA;为了进一步验证,我们运用双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p对MCT1的调控效果;运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)分别检测51对新鲜胰腺癌组织中MCT1和miR-124-3p的基因表达并分析两者的相关性。结果:MCT1的阳性表达主要位于细胞膜和细胞质。相比癌旁正常组织,MCT1在胰腺导管癌组织中显著高表达,其表达水平与胰腺导管癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移和不良预后具有显著相关性。在体外细胞系水平上,沉默MCT1能够显著抑制胰腺癌细胞系PANC-1和Capan-1的增殖、迁移和浸润;miR-124-3p在胰腺癌组织中显著低表达,并且与MCT1 mRNA的表达具有显著负相关性,能够负调控MCT1的蛋白表达。结论:MCT1是胰腺导管腺癌的致癌基因,miR-124-3p能够负调控MCT1的表达。

直肠癌组织中单羧酸转运蛋白1、单羧酸转运蛋白4的表达情况及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨直肠癌组织中单羧酸转运蛋白1(MCT1)、单羧酸转运蛋白4(MCT4)的表达情况及与患者临床特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测106例直肠癌患者直肠癌组织中MCT1、MCT4的表达情况,分析其与患者临床特征及预后的关系。对Ⅲ期直肠癌患者(术后均接受辅助性放化疗)进行亚组分析,比较不同MCT1、MCT4表达情况的Ⅲ期直肠癌患者的生存预后。结果106例患者中,57例患者MCT1呈高表达,48例患者MCT4呈高表达。不同临床分期、淋巴结转移情况、血管浸润情况、术后5年内复发和(或)转移情况的直肠癌患者直肠癌组织中MCT1和MCT4的表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。MCT1低表达患者的生存情况优于MCT1高表达患者,MCT4低表达患者的生存情况优于MCT4高表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。MCT1低表达的Ⅲ期直肠癌患者的生存情况优于MCT1高表达的Ⅲ期直肠癌患者,MCT4低表达的Ⅲ期直肠癌患者的生存情况优于MCT4高表达的Ⅲ期直肠癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论直肠癌组织中MCT1和MCT4表达情况与患者临床分期、淋巴结转移情况、血管浸润情况及生存情况有关,可将MCT1、MCT4作为直肠癌预后预测的重要指标。

单羧酸转运蛋白1在低糖条件下促进M1型小胶质细胞中诱导型一氧化氮合酶表达

目的探讨在缺血环境下诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)与M1型促炎性小胶质细胞的关系。方法小鼠6只,采用光化学栓塞法制作脑缺血模型;BV2细胞使用含5 mmol/L低糖培养基刺激2 h。使用免疫荧光染色、Western blotting方法检测缺血小鼠大脑中小胶质细胞和低糖刺激的BV2细胞中iNOS、MCT1及精氨酸酶1(ARG1)的表达。用RNA干扰及质粒转染技术分别调控未处理BV2细胞中的MCT1表达,检测iNOS及ARG1的变化。结果激光制作脑缺血模型成功后,缺血侧半球中iNOS和MCT1以及ARG1的表达升高(P<0.01),且MCT1主要表达在离子钙接头蛋白分子1(Iba1)阳性和iNOS阳性的小胶质细胞中。低糖刺激BV2小胶质细胞后,iNOS和MCT1表达升高(P<0.001),而ARG1表达降低(P<0.01),MCT1主要表达在iNOS阳性的BV2细胞中。RNA干扰BV2细胞后,细胞中MCT1表达降低,iNOS表达下降(P<0.01);质粒转染BV2细胞后,MCT1表达增高,iNOS表达增加(P<0.01)。但在两种情况下,ARG1表达水平均未发生明显变化。结论在低糖环境中小胶质细胞向M1表型极化,MCT1和iNOS表达同时增高,MCT1参与iNOS的表达上调,可能处于iNOS调节通路的上游。

单羧酸转运蛋白1抑制剂AZD3965对胃癌BCG-823细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究单羧酸转运蛋白1(MCT1)抑制剂AZD3965通过抑制肿瘤细胞MCT1对胃癌细胞BCG-823增殖及凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:MTT法检测不同浓度AZD3965(0、20、40、80μmol/L)对胃癌细胞的增殖抑制作用。通过倒置显微镜观察胃癌细胞BCG-823在不同浓度AZD3965(0、20、40、80μmol/L)处理后细胞形态的改变。集落克隆形成实验观察AZD3965对胃癌细胞BCG-823集落形成能力的影响。PI单染流式细胞术检测AZD3965对胃癌细胞BCG-823细胞凋亡的影响。Western blotting检测AZD3965作用下MCT1和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达。结果:经AZD3965作用后BCG-823细胞的生长受到抑制,且随着药物浓度和作用时间的增加,AZD3965对人胃癌细胞BCG-823的增殖抑制作用逐渐增强(P <0. 01)。通过倒置显微镜观察不同浓度AZD3965(20、40、80μmol/L)处理胃癌细胞后,相较空白对照组(0μmol/L AZD3965)胃癌细胞数目明显减少,细胞发生皱缩破裂,细胞形态发生改变。集落克隆形成实验表明AZD3965对胃癌细胞BCG-823有增殖抑制作用。PI单染流式细胞术结果显示,20、40、80μmol/L AZD3965处理BCG-823细胞24 h后,细胞的凋亡率分别为(13. 33±4. 13)%、(22. 53±2. 97)%和(36. 63±5. 23)%,与空白对照组(0μmol/L AZD3965)相比明显升高(P <0. 01)。Western blotting结果显示,AZD3965可以下调BCG-823细胞中MCT1、Bcl-2的表达和上调Bax的表达。结论:AZD3965可通过抑制MCT1活性,并且激活Bax和抑制Bcl-2,从而抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。

单羧酸转运蛋白1调节乳酸转运对大鼠脊髓损伤后星形胶质细胞分化的影响

目的 探讨单羧酸转运蛋白1(MCT1)调控乳酸转运对大鼠脊髓损伤(SC1)后星形胶质细胞(AS)分化的作用及其机制.方法 成年雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠购自山西医科大学实验动物中心,使用改良Allen's法制作SCI模型,分为假手术组、SCI(12 h)组、SCI+LA组、SCI+AZD组,每组5只,共20只,观察SCI后腹腔注射外源性乳酸钠或MCT1抑制剂对大鼠脊髓AS分化的作用.培养SD大鼠脊髓AS并建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,首先观察不同时间点OGD/R处理AS的乳酸含量和MCT1表达.其次观察OGD/R后添加外源性乳酸钠或MCT1抑制剂对AS分化的影响,分为正常组,OGD/R(OGD4.5 h/R12 h)组,OGD/R+乳酸钠组,OGD/R+乳酸钠+AZD组.最后分析Bay 11-7082(NF-κB抑制剂)或Stattic(STAT3抑制剂)处理通路蛋白对AS分化的影响,分为OGD/R+乳酸钠组,OGD/R+乳酸钠+BAY组,OGD/R+乳酸钠+STA组.采用单因素方差分析,组间比较采用t检验.结果 SCI 12 h组大鼠脊髓MCT1表达高于假手术组(2.776±0.353比1.000,q=13.460,P<0.01).SCI+LA 组脊髓 MCT1(2.767±0.208 比 1.900±0.100,q=10.840,P<0.01)和 S100A10(1.933±0.153 比 1.630±0.061,q=5.924,P<0.05)蛋白表达高于 SCI 组,C3蛋白表达低于 SCI 组(1.603±0.035 比 1.830±0.147,q=4.561,P<0.05);而 SCI+AZD 组脊髓MCT1(1.233±0.153 比 1.900±0.100,q=8.341,P<0.05)和 S100A10(1.237±0.067 比 1.630±0.061,q=7.681,P<0.01)蛋白表达低于 SCI 组,C3 蛋白表达高于 SCI 组(2.340±0.082 比 1.830±0.147,q=10.260,P<0.01).体外培养的原代星形胶质细胞在OGD4.5 h/R12 h组MCT1蛋白表达高于正常组(1.760±0.053 比 1.000,q=6.415,P<0.01),OGD/R+LA 组 AS 胞内乳酸含量(0.028±0.001 比 0.022±0.001,q=6.415,P<0.01),MCT1(2.200±0.100 比 1.633±0.058,q=13.870,P<0.01)和 p-STAT3 蛋白(3.400±0.173 比 2.133±0.252,q=12.850,P<0.01)表达高于OGD/R 组,细胞核 NF-κB 蛋白表达低于 OGD/R 组(1.153±0.129 比 1.933±0.153,q=12.100,P<0.01),A1 分化低于 OGD/R 组(1.133±0.058 比 1.600±0.100,q=7.000,P<0.01),A2 分化高于OGD/R 组(2.300±0.173 比 1.433±0.058,q=15.920,P<0.01).而 O GD/R+LA+AZD 组 AS 胞内乳酸含量(0.014±0.002 比 0.022±0.001,q=9.278,P<0.01),MCT1(1.430±0.082 比 1.633±0.058,q=4.976,P<0.01)和 p-STAT3 蛋白(1.533±0.153 比 2.133±0.252,q=6.085,P<0.05)表达低于OGD/R组,细胞核NF-κB蛋白表达高于OGD/R组(2.400±0.100比1.933±0.153,q=7.239,P<0.01),A1 分化高于 OGD/R 组(2.200±0.200 比 1.600±0.100,q=9.000,P<0.01),A2分化低于 OGD/R组(1.133±0.047 比 1.433±0.058,q=5.510,P<0.05).OGD/R+LA+BAY组A1 分化低于 OGD/R+LA组(0.846±0.050 比 1.000,q=6.527,P<0.01),A2 分化高于 OGD/R+LA 组(1.300±0.100 比 1.000,q=7.491,P<0.05);而 OGD/R+LA+STA 组 A1 分化高于OGD/R+LA组(1.177±0.049 比 1.000,q=7.520,P<0.01),A2 分化低于 OGD/R+LA 组(0.813±0.066 比 1.000,q=4.661,P<0.01).结论 MCT1 调控 SCI 后 AS 乳酸转运,增加 AS 胞内乳酸含量促进其向A2分化,可以通过NF-κB/STAT3信号通路发挥上述调节作用.

缺氧诱导因子1α介导单羧酸转运蛋白1表达参与短链脂肪酸对肠道缺氧保护作用的研究

目的明确缺氧条件下缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肠上皮细胞单羧酸转运蛋白1(MCT-1)的表达调控,并初步探究短链脂肪酸(SCFAs)在缺氧条件下对肠屏障的保护作用。方法取健康回肠组织及肠缺血坏死患者的回肠组织,进行免疫组织化学染色,检测肠上皮MCT-1表达情况。正常C57小鼠、肠上皮特异性HIF-1α敲除鼠(HIF-1α^(ΔIEC))以及对照小鼠(HIF-1α^(flox/flox))构建小肠缺血再灌注(I/R)损伤模型,随机分为假手术组(Sham组)、I/R组,I/R+丁酸组,取回肠末段的组织行免疫组织化学染色及肠液行SCFAs检测,透射电镜观察小鼠回肠超微结构变化。培养肠上皮细胞系Caco-2,建立缺氧模型,用Western blotting法分别检测常氧组、缺氧组、缺氧+siHIF-1α组、丁酸+缺氧组、siMCT-1+丁酸+缺氧组MCT-1、HIF-1α和肠上皮紧密连接蛋白Claudin1、Occludin的表达情况;跨上皮电阻(TER)测定评估各组肠上皮屏障功能变化。结果与假手术组相比,I/R组肠道内SCFAs无明显变化。缺血、缺氧均可以诱导肠上皮细胞高表达MCT-1。HIF-1α^(ΔIEC)小鼠较对照小鼠肠道低表达MCT-1,且对I/R损伤更为敏感。丁酸在HIF-1α、MCT-1正常表达时可以介导肠屏障保护和上调Claudin1、Occludin表达。结论缺氧条件下,HIF-1α介导肠上皮细胞表达MCT-1,参与SCFAs对肠屏障的保护。

微小RNA-342-3p靶向调节单羧酸转运蛋白1对肝癌细胞增殖、周期和迁移的影响

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-342-3p靶向调节单羧酸转运蛋白1(MCT1)对肝癌细胞增殖、周期核迁移的影响。方法选取2019年9月至2021年9月黄淮学院附属驻马店市中心医院和河南省人民医院收治的100例肝癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量PCR分析肝癌组织和癌旁组织中miR-342-3p表达水平。人肝癌细胞系HepG2分为对照组和miR-342-3p组,分别采用对照miRNA和miR-342-3p慢病毒感染,建立稳定细胞系。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、EdU染色、流式细胞术、划痕实验和Transwell分析两组细胞增殖、周期和迁移水平。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-342-3p靶基因;蛋白质免疫印迹分析肿瘤组织和细胞系靶基因表达水平。组间比较采用t检验。结果肝癌组织中miR-342-3p表达水平(0.51±0.14)明显低于癌旁组织(1.22±0.22),差异有统计学意义(t=27.800,P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(1.98±0.13)明显高于miR-342-3p组(1.29±0.12),差异有统计学意义(t=9.384,P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率[(88.01±5.41)%]明显高于miR-342-3p组[(76.13±6.01)%],差异有统计学意义(t=3.598,P<0.05)。对照组细胞G0/G1期百分比[(35.50±3.56)%]明显低于miR-342-3p组细胞[(42.17±2.64)%],差异有统计学意义(t=3.682,P<0.05)。对照组细胞S期百分比[(31.33±2.58)%]明显高于miR-342-3p组细胞[(24.33±3.01)%],差异有统计学意义(t=4.323,P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(134.50±18.35)个]高于miR-342-3p组细胞[(105.83±5.56)个]比较,差异有统计学意义(t=3.662,P<0.05)。MCT1是miR-342-3p的靶基因。肝癌组织中MCT1蛋白表达水平(1.48±0.23)明显高于癌旁组织(1.01±0.17),差异有统计学意义(t=17.010,P<0.05)。对照组细胞MCT1蛋白表达水平(1.13±0.17)高于miR-342-3p组细胞(0.63±0.07),差异有统计学意义(t=6.687,P<0.05)。结论miR-342-3p在肝癌组织中呈低表达,过表达miR-342-3p抑制肝癌细胞增殖、周期和迁移,可能与其靶向调节MCT1有关。

抑制单羧酸转运蛋白1的表达对神经胶质瘤细胞增殖的影响

目的探讨下调单羧酸转运蛋白1(MCT1)的表达对神经胶质瘤细胞增殖抑制的分子机制。方法将siMCT1、siMCT4和阴性对照siRNA分别转染神经胶质瘤细胞系U-251和U-87,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测U-251和U-87细胞的增殖活性,采用克隆形成实验检测U-251和U-87细胞的克隆形成能力,采用分光光度-比色法测定U-251和U-87细胞的葡萄糖消耗量和乳酸外流量。采用Western blot法检测U-251和U-87细胞中MCT1、MCT4、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、GLUT4、结节性硬化症相关蛋白2(TSC2)、p-TSC2、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)、p-4EBP1、S6和p-S6蛋白的表达。结果与阴性对照组比较,siMCT1和siMCT4干扰均能明显抑制U-251和U-87细胞中MCT1和MCT4蛋白的表达(均P<0.05)。但仅siMCT1转染后24~96 h,U-251和U-87细胞的细胞增殖活性明显降低(均P<0.05)。干扰MCT1的表达后,U-251和U-87细胞的克隆形成率分别下降至(55.20±3.27)%和(68.33±4.58)%,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与72 h阴性对照组U-251和U-87细胞的葡萄糖消耗量[分别为(82.65±6.66)pmol/L和(63.33±5.27)pmol/L]比较,siMCT1转染组U-251和U-87细胞的葡萄糖消耗量明显降低[分别为(31.70±3.17)pmol/L和(26.41±3.19)pmol/L,均P<0.05)];与72 h阴性对照组U-251和U-87细胞的乳酸外流量[(155.49±8.15)mmol/L和(135.37±8.21)mmol/L]比较,siMCT1转染组U-251和U-87细胞的乳酸外流量明显降低[分别为(42.69±4.66)mmol/L和(38.91±4.83)mmol/L,均P<0.05]。Western blot检测结果显示,U-251和U-87细胞转染siMCT1后能抑制GLUT1的表达,p-TSC2、p-4EBP1和p-S6蛋白的表达水平也明显降低。结论下调MCT1表达能抑制神经胶质瘤细胞的增殖和克隆形成,其可能通过调控mTOR信号通路抑制GLUT1的表达,进而抑制其糖酵解代谢。

单羧酸转运蛋白1、2在不同病理级别星形细胞瘤组织中的表达

目的分析单羧酸转运蛋白(MCT)1、2在人星形胶质细胞瘤组织中的表达变化,探讨其与病理级别的关系。方法从神经外科选取55例不同病理级别星形细胞瘤标本作为研究组,以正常脑组织标本(12例)作为对照组。使用HE染色进行病理诊断分级,免疫组织化学显色与免疫印迹观察不同标本MCT1、2的表达变化。结果不同病理级别肿瘤组织中MCT1、2表达均明显高于对照组(P均<0.05),且随着病理级别的升高,肿瘤组织中MCT1、2表达递增(P均<0.05),不同病理级别肿瘤组织间比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论人星形胶质细胞瘤组织中MCT1、2表达明显增强,其强度与病理级别(肿瘤恶性程度)呈正相关。

葡萄糖转运蛋白1和单羧酸转运蛋白1、单羧酸转运蛋白4在结肠癌组织中的表达和意义

目的观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)、MCT4在结肠癌组织中的表达及其与临床特征之间的相关性。方法收集杭州市第一人民医院2008年1月至2016年1月经手术切除的结肠癌组织标本84例和相应的癌旁正常结肠组织标本40例,采集患者的临床资料,采用免疫组化检测患者GLUT1、MCT1、MCT4的表达,进行统计分析。结果结肠癌组织中GLUT1、MCT1、MCT4阳性表达率分别为54.8%(46/84)、47.6%(40/84)、58.3%(49/84),均显著高于正常结肠组织的12.5%(5/40)、7.5%(3/40)、15.0%(6/40),两者差异均有统计学意义(χ^2=19.987、19.253、20.615,均P<0.01);GLUT1、MCT1、MCT4的表达与性别、年龄、肿瘤大小无关,与病变部位、分化程度、淋巴结转移、远处转移和临床分期有相关性(GLUT1:χ^2=6.227、11.629、10.029、14.817、4.709;MCT1:χ^2=6.891、8.615、9.185、5.337、16.131;MCT4:χ^2=8.641、7.077、12.131、6.917、7.077;均P<0.05)。结论结肠癌组织高表达GLUT1、MCT1、MCT4,GLUT1、MCT1、MCT4可能通过能量代谢途径影响结肠癌的发生、发展。

人肺癌组织单羧酸转运蛋白—1基因的表达及其意义

目的：研究人肺癌组织中单羧酸转运蛋白－1（MCT1）基因的表达水平，探索肿瘤治疗新策略。方法：以寡聚脱氧核苷酸为探针，用原位分子杂交法探测人肺癌组织和人正常肺组织MCT1mRNA的表达水平。结果：人 肺癌组织的MCT1mRNA的表达显著强于正常肺组织，呈过表达。结论：MCT1基因的过表达可能是肺癌组织细胞的分子生物学特征之一。

CD147/HAb18G单克隆抗体对人脑胶质瘤细胞乳酸转运及细胞生长的影响

目的研究CD147/HAb18G基因工程单克隆抗体对体外培养U251细胞单羧酸转运蛋白-1(monoc arboxylatetransporter-1,MCT1)表达分布和糖酵解乳酸代谢的影响。方法体外培养U251细胞分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别加入不同剂量的CD147/HAb18G单抗封闭细胞表面CD147分子。免疫荧光法检测各组细胞膜上MCT1表达分布改变,分光光度计检测各组细胞内乳酸含量,分别绘制生长曲线并记录生长数据。结果低剂量组和高剂量组MCT表达分布改变,相比对照组其胞膜有效表达减少[随机计数500个细胞中胞膜完整表达细胞数:对照组(367.34±6.92),低剂量组(161.92±7.33),高剂量组(54.58±4.80),P<0.01],胞质无效表达增多[胞质表达细胞数:对照组(12.08±3.03),低剂量组(70.83±4.71),高剂量组(264.58±6.14),P<0.01];细胞内乳酸浓度在低、高剂量组明显增高[对照组(0.222±0.020)mmol/L,低剂量组(0.418±0.015)mmol/L,高剂量组(0.713±0.018)mmol/L,P<0.01],生长指标抑制,生长曲线低平[对照组最大细胞密度(5.24±0.37)×105/ml,低剂量组(4.23±0.48)×105/ml,高剂量组(3.19±0.46)×105/ml,P<0.01]。以上改变在低剂量组和高剂量组间差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论 CD147/HAb18G单抗通过干扰CD147对MCT1表达的引导使胶质瘤细胞膜上MCT1有效分布减少,影响其糖酵解产生乳酸的排出,具有抑制肿瘤生长作用。