长期碳酸盐碱度胁迫对脊尾白虾生长及卵巢发育的影响

为探讨碳酸盐碱度对脊尾白虾生长及卵巢发育的影响。本研究设置3 mmol/L(对照组)、5 mmol/L和8 mmol/L三种碳酸盐碱度梯度养殖脊尾白虾60 d,比较不同碳酸盐碱度胁迫对脊尾白虾生长性能、组织结构、酶活性以及卵巢发育的影响,结果显示,5 mmol/L组与对照组体长增长率、体重增长率以及成活率差异不显著,8 mmol/L组体长增长率、体重增长率以及成活率显著低于对照组。肝胰腺组织切片显示,5 mmol/L组中部分B细胞体积增大,部分转运泡内出现颗粒物质,8 mmol/L组管腔的形态结构严重变形。鳃组织切片显示,5 mmol/L组出现轻微鳃丝肿大现象,角质层略有变形,且角质层下间隙扩张变长,上皮细胞与支柱细胞排列紊乱;8 mmol/L组鳃丝肿大,排列不规则,出现血细胞肿胀现象,鳃丝上皮细胞严重破坏,毛细血管网结构形态改变,角质层下间隙变形。肌肉组织酶活性测定结果显示,5 mmol/L组的碳酸酐酶活性显著高于对照组,Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性在肌肉中差异不显著;肝胰腺组织酶活性测定结果显示,碳酸酐酶在肝胰腺组织中差异不显著,8 mmol/L组Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性显著低于其他组,鳃组织中,5和8 mmol/L组鳃组织中和Na^(+)/K^(+)-ATP酶活性均显著高于对照组,且两组间差异显著。卵巢发育统计结果显示,三组脊尾白虾卵巢均能发育,其发育至Ⅱ期的百分比分别为20.51%、10.52%和6.25%,其中5 mmol/L组与对照组间无显著差异,8 mmol/L组显著低于对照组;3 mmol/L组和5 mmol/L组均有卵巢发育至Ⅲ期的脊尾白虾,但两组差异不显著,8 mmol/L组未见有卵巢发育至Ⅲ期的脊尾白虾。卵巢组织切片显示,8 mmol/L组卵原细胞细胞排列疏松,周围滤泡细胞排列疏松且数量较少。研究表明,脊尾白虾可以在低于8 mmol/L的碳酸盐碱度中生长发育,但高碳酸盐碱度可能会造成脊尾白虾鳃和肝胰腺组织损伤,导致其生长受到影响,同时猜测高碳酸盐碱度可能也会影响卵巢的发育速率。本研究可为开展脊尾白虾在盐碱水中的增养殖提供基础数据和参考信息。

软颗粒饲料对三疣梭子蟹卵巢发育和营养品质的影响

软颗粒饲料具有水分含量高、诱食性好和易消化等优点,在水产养殖上具有一定的应用前景。在6个生产池塘(80 m×40 m×1.8 m)中放入5500尾三疣梭子蟹幼蟹[初始体质量为(3.12±0.54)g],每3个池塘作为1个处理,分别全程投喂软颗粒饲料和传统饵料养殖4个月后,探究软颗粒饲料对三疣梭子蟹雌体卵巢发育和营养成分的影响。试验结果显示:(1)软颗粒饲料组肝胰腺指数、卵巢指数和总可食率分别比传统饵料组高32.27%、17.70%和8.69%,特级红膏蟹和大红蟹所占比例比传统饵料组分别高42.37%和53.19%,但组间无显著差异(P>0.05)。(2)软颗粒饲料组卵巢和肝胰腺中粗蛋白含量分别比传统饵料组高21.41%和31.32%,但组间并无显著差异(P>0.05)。(3)软颗粒饲料组卵巢红度值和黄度值明显高于传统饵料组,但差异不显著(P>0.05);软颗粒饲料组卵巢总类胡萝卜素、虾青素、叶黄素、β-胡萝卜素和肝胰腺中的总类胡萝卜素含量均显著高于传统饵料组(P<0.05)。(4)软颗粒饲料组肝胰腺和卵巢中的二十二碳六烯酸含量显著低于传统饲料组(P<0.05),而亚油酸含量显著高于传统饲料组(P<0.05)。综上,投喂软颗粒饲料可以促进卵巢发育,改善红膏蟹比例和可食组织中的营养组成。

饲料中虾青素对凡纳滨对虾雌虾肝胰腺脂代谢和卵巢发育的影响

研究旨在探讨不同虾青素水平对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)雌虾肝胰腺脂代谢和卵巢发育的影响。实验设计了4种不同虾青素含量(0、40、80和120 mg/kg)的等氮等能饲料,并进行了30d的投喂试验。结果显示,与对照组相比,80 mg/kg组显著提高雌虾增重率、性腺指数和平均产卵量(P<0.05),而在120 mg/kg组中无显著影响(P>0.05),并伴有肝胰腺萎缩现象。添加80 mg/kg虾青素能显著增加T-AOC活性和T-SOD含量(P<0.05),提高雌虾抗氧化能力。添加80 mg/kg虾青素还能显著降低肝胰腺中SFA的含量(P<0.05),显著提高MUFA、EPA和ARA的含量(P<0.05),降低雌虾肝胰腺中fas和srebp1的表达(P<0.05),并提高fabp1和fatp的表达(P<0.05)。通过对卵巢组织进行转录组分析发现,差异表达基因主要涉及“类固醇激素合成”“甘油磷脂代谢”“谷胱甘肽代谢”等途径。此外,与对照组相比,80 mg/kg组在gls、pla2和mfe等氨基酸代谢和类固醇激素合成相关基因表达量显著上调(P<0.05),而在120 mg/kg组显著下调(P<0.05)。综上所述,研究表明,在凡纳滨对虾雌虾饲料中添加80 mg/kg虾青素,能减少脂肪酸合成和沉积,促进脂肪酸的吸收转运;更能够促进雌虾性腺发育及相关基因表达,提高雌虾繁殖性能。

广西北部湾海域织锦巴非蛤卵巢发育、卵子及卵黄发生的研究

采用解剖观察、卵巢组织切片和透射电镜技术对广西北部湾海域织锦巴非蛤(Paphia textile)的卵巢发育、卵子发育及卵黄粒合成过程和特点进行探讨。结果表明,织锦巴非蛤在1周年内具有1个繁殖周期,根据卵巢发育时期划分为5个时期,分别为增殖期(5月-7月)、生长期(7月-9月)、成熟期(9月-11月)、排放期(11月-翌年1月)、休止期(翌年1月-4月)。根据织锦巴非蛤卵子发育和卵黄合成的相关特点,可将卵子发育划分4个主要阶段,第一阶段为卵原细胞,第二阶段为卵黄合成前期卵母细胞,第三阶段为卵黄合成期卵母细胞,第四阶段为卵黄合成后期卵母细胞,其中卵黄合成期是卵黄粒生成的重要时期,在此期线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器通过不同的方式合成卵黄粒。此外,海区水温与织锦巴非蛤卵巢发育密切相关,是影响织锦巴非蛤卵巢发育的重要因素。广西北部湾海域织锦巴非蛤为雌雄异体,未发现雌雄同体现象。

布氏乳杆菌和枯草芽孢杆菌对广西麻鸡繁殖性能和卵巢发育的影响

试验旨在研究饲粮中添加布氏乳杆菌和枯草芽孢杆菌活菌液对产蛋高峰期广西麻鸡繁殖性能和卵巢发育的影响。选取健康状况良好、27周龄产蛋高峰期广西麻鸡480只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复40只鸡。试验期9周。对照组饲喂基础饲粮,M1组在基础饲粮中添加布氏乳杆菌和枯草芽孢杆菌比例为1∶1的活菌液,L1组在基础饲粮中添加布氏乳杆菌活菌液,B1组在基础饲粮中添加枯草芽孢杆菌活菌液,益生菌制剂活菌数均为4.5×10^(8) CFU/mL。结果显示:与对照组相比,M1组第2~8周的产蛋率显著提高(P<0.05),平均产蛋率和合格种蛋率显著提高(P<0.05)。M1组血清雌激素(E)、孕酮(PROG)、促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的生殖激素水平及卵巢雌激素受体(ER)mRNA、孕酮受体(PR)mRNA、促卵泡素受体(FSHR)mRNA和促黄体素受体(LHR)mRNA的相对表达量均显著提高(P<0.05)。研究表明,在饲粮中添加布氏乳杆菌和枯草芽孢杆菌混合菌液可改善产蛋高峰期广西麻鸡种鸡的繁殖性能,促进卵泡成熟和卵巢发育。

基于转录组数据挖掘外源褪黑激素影响水貂卵巢发育的分子机制

旨在探究外源褪黑激素(melatonin,MLT)影响水貂卵巢发育的分子机制。本研究随机选取相同饲养条件下、体重相似的200只3月龄健康白色雌性水貂,均分为试验组和对照组。试验组埋植1粒含MLT 18 mg·粒-1的埋植剂,对照组埋植1粒不含MLT的空粒,当水貂处于准备配种期时随机采集试验组和对照组各4只水貂的卵巢,然后采用Trizol法进行总RNA提取,构建cDNA文库,并利用Illumina平台测序后进行生物信息学分析,对差异表达基因进行GO功能分类和KEGG通路注释,寻找MLT调控卵巢发育的相关候选基因和代谢通路。为进一步验证测序数据的可靠性,随机选取6个差异表达基因进行qPCR验证。转录组结果显示,试验组和对照组的SNPs位点均在120000个以上,且均主要出现在基因区,两组的SNP突变类型均为转换型多于颠换型和杂合型;试验组与对照组相比,差异表达基因发生SE事件的数量最多;本试验共获得9631个新基因,其中有1323个、1317个新基因分别注释到TrEMBL和NR数据库,注释比例明显高于其他数据。试验组与对照组相比共发现206个差异表达基因(其中有36个未被注释的基因),69个为上调基因,137个为下调基因;GO功能富集显示,共计7个差异表达基因富集于生殖过程;KEGG通路富集结果显示,共计7个差异表达基因富集于5条与繁殖相关的通路。综合GO功能分类和KEGG通路注释结果分析,共筛选得到4个与MLT影响卵巢发育相关的候选基因,均为上调基因,分别是KRT19、GSTT1、ALAS 1和NR 4A1。本研究通过对MLT埋植和未埋植MLT的准备配种期水貂卵巢进行转录组学分析,挖掘出MLT可能通过调节KRT19、GSTT1、ALAS1、NR 4A1等基因促进卵巢发育,研究结果对水貂的育种工作提供了理论基础。

褪黑素埋植138 d对水貂血清主要生殖激素含量和卵巢发育的影响

为探究褪黑素(MLT)埋植剂对准备配种中期水貂血清主要生殖激素含量和卵巢发育的影响,试验在埋植MLT 138天时,随机选取试验组(埋植MLT 1粒,18 mg/粒)和对照组(不做任何处理)水貂各3只,采集血液测定血清主要生殖激素含量,采集卵巢测量长径、宽径、厚径和重量,计算体积,并制备石蜡切片观察卵巢组织结构。结果表明:与对照组相比,试验组水貂血清促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)含量极显著升高(P≤0.01),促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)和孕酮(progesterone,P4)含量均显著升高(P≤0.05);卵巢表面出现可视卵泡,卵巢长径、宽径、厚径、重量、体积均不同程度增大,其中宽径和体积增加显著(P≤0.05);卵巢皮质中提前出现成熟卵泡,且三级卵泡的数量、直径和卵母细胞直径均显著升高(P≤0.05)。说明埋植MLT埋植剂138 d可使准备配种中期水貂血清GnRH、FSH、LH和P_(4)含量升高,并促进卵巢形态学参数增加和有腔卵泡发育。

松墨天牛成虫卵巢发育过程及引诱剂诱集雌虫发育状态

【目的】探究松墨天牛Monochamus alternatus雌成虫卵巢发育过程,从日龄的角度对松墨天牛卵巢发育进行分级,并且判断引诱剂野外诱捕雌成虫的发育状态,为松墨天牛高效防控提供参考。【方法】对达到0, 5, 10, 15, 20, 30, 40和15日龄交配前后的松墨天牛雌成虫以及引诱剂诱集雌成虫进行生物解剖,观察卵巢发育状态。【结果】松墨天牛雌成虫卵巢发育过程分为5级:发育前期(0-5日龄):卵巢管透明纤细,无卵黄沉积;卵黄沉淀期(5-15日龄):卵巢管内含有少数乳白色和淡黄色未成熟的卵粒;卵巢成熟期(15-20日龄):卵巢管内包含大量完全成熟的卵粒,呈长纺锤形,黄色饱满有光泽;产卵盛期(20-40日龄):输卵管萼中堆满成熟卵粒,中输卵管和侧输卵管中存在待产的卵粒;衰老期(≥40日龄):卵巢管、输卵管萼和输卵管逐渐萎缩。交配后的雌成虫能够产生受精卵,输卵管萼膨大、形态清晰;未交配的雌成虫无法产生受精卵,卵粒堆积在输卵管中无法产出,输卵管萼未分化完全、形态不清晰。野外诱集结果显示,诱集的不同日龄的雌成虫量具有显著性差异,其中处于产卵盛期的雌成虫占比最多,占总量的54.90%±5.50%;卵巢成熟期、衰老期和卵黄沉淀期的雌成虫占比较少,分别占总量的31.37%±5.52%, 11.76%±1.54%和1.96%±0.51%;没有诱集到发育前期的雌成虫。【结论】松墨天牛雌成虫发育至15-20日龄达到性成熟;交配行为能够促进松墨天牛雌成虫卵巢发育。引诱剂可以诱捕到大量刚性成熟的松墨天牛成虫,对于减少松墨天牛产卵量,降低下一代发生基数,降低松材线虫Bursaphelenchus xylophilus传播几率具有积极意义。

蠋蝽卵巢发育动态及其与光周期的关系

蠋蝽Arma chinensis是一种重要的商品化天敌昆虫,而卵巢发育动态及其调控机制的研究有助于准确预测昆虫的产卵盛期和繁殖能力,对于规模化繁育蠋蝽的种群动态预测和调控具有重要意义。本文研究了蠋蝽卵巢的发育过程以及光周期对卵巢发育的影响,结果表明,蠋蝽雌成虫的内生殖系统由卵巢、侧输卵管、中输卵管、受精囊和端丝等组成。根据卵巢形态、卵黄沉积水平和卵子发生情况等典型特征,将其卵巢发育过程分为Ⅰ级(乳白透明期)、Ⅱ级(卵黄沉积期)、Ⅲ级(成熟待产期)、Ⅳ级(产卵盛期)和Ⅴ级(产卵末期)等5个级别。进一步研究发现,光周期对蠋蝽雌成虫的卵巢发育进程有显著影响,在长日照光周期L∥D=18 h∥6 h和16 h∥8 h时卵巢发育较快,卵巢长度、宽度,卵巢指数和卵子数量均显著高于其他光周期;而在光周期L∥D=14 h∥10 h、12 h∥12 h、10 h∥14 h、8 h∥16 h和6 h∥18 h下,卵巢发育明显减缓,大多处于乳白透明期。研究结果可为蠋蝽的生殖生物学研究提供科学依据,并为其规模化人工繁育和生防应用提供参考。

短梗长尾啮小蜂雌性生殖系统结构与卵巢发育特点

关于短梗长尾啮小蜂Aprostocetus brevipedicellus卵巢结构和发育的相关研究在国内外尚无报道。本研究对短梗长尾啮小蜂的雌性生殖系统结构、卵子形态及卵巢发育特点进行了观察。结果表明,短梗长尾啮小蜂雌性内生殖系统由1对卵巢、1对侧输卵管、1条中输卵管、受精囊、毒囊等组成;雌性外生殖器由产卵管、产卵管鞘、内瓣和外瓣构成。同时,短梗长尾啮小蜂属于卵育型寄生蜂,雌蜂初羽化时卵巢内只含有少量成熟卵子,随着营养的补充和时间的推移,成熟卵子和总卵子数量逐渐增加,并在羽化后72 h数量达到最高值。此外,研究发现,卵巢管内成熟卵子数量和总卵子数量与雌蜂的体长均呈正相关,相关系数分别为0.936和0.941。以上研究结果为科学合理地研究和开发利用短梗长尾啮小蜂提供了理论基础。

罗氏沼虾Spo11基因克隆、表达及其在卵巢发育中的作用

为研究减数分裂相关基因Spo11(meiotic protein covalently bound to DSB homolog)在罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵巢发育中的调控作用,采用RACE技术、荧光定量PCR、原位杂交和RNA干扰等方法,对罗氏沼虾Spo11基因(MrSpo11)及其编码氨基酸的分子特征、MrSpo11基因的组织表达、分布和生物学功能进行了研究。结果表明:MrSpo11基因cDNA序列全长为2298 bp,其中,5′端和3′端非编码区分别为457、701 bp,开放阅读框为1140 bp,共编码379个氨基酸残基;MrSpo11基因在罗氏沼虾鳃中的相对表达量最高,在卵巢、肝胰腺和心脏中表达量较高,在脑、眼和肌肉中微量表达;MrSpo11基因在罗氏沼虾卵巢发育Ⅰ期相对表达量最高,在卵巢发育Ⅲ期次之,在Ⅱ期和Ⅳ期表达量最低;MrSpo11基因在卵黄发生前期、中期、晚期卵母细胞的细胞质,以及卵黄发生早期卵母细胞的细胞质和细胞核中均有表达;注射dsRNA后第2、4天,试验组MrSpo11基因的表达量分别比对照组下降45.8%、11.6%,注射dsRNA后第4天,试验组卵巢发育成熟度略低于对照组。研究表明,MrSpo11基因参与了罗氏沼虾卵巢发育过程,本研究结果可为进一步探究罗氏沼虾卵巢发育分子调控机制提供有益参考。

外源性磷脂对脊尾白虾卵巢发育及组织营养素积累的影响

磷脂有助于甲壳动物生长和繁殖,但其对脊尾白虾亲体卵巢发育及营养素积累的作用尚不清楚。为此,探究了饲料中不同磷脂水平(0%、1%、2%、4%和6%)对脊尾白虾亲虾卵巢发育、营养物质积累及抗氧化能力的影响。结果表明,1%、2%和4%磷脂组的卵巢蛋白质和磷脂含量超过6%磷脂组,且高于肝胰腺中含量,表明适宜磷脂会促进性腺发育及相关营养物质转运和积累。其中,1%磷脂组不仅能促进虾体LC-PUFA,尤其是ARA等脂肪酸积累,还提高了血淋巴SOD和CAT酶活力,有助于改善虾的抗氧化应激能力。综上可知,适合脊尾白虾亲体性腺发育和营养积累的最适磷脂添加量为1%。

TGF-β/SMAD信号通路在哺乳动物卵巢发育调控中的作用研究进展

TGF-β/SMAD信号转导通路是典型的跨膜转导通路,该通路通过一组配体与受体结合,将细胞外的信号转导入细胞内,激活下游的SMAD蛋白、转录调节靶基因,从而介导配体对细胞的生物学作用。在卵母细胞成熟过程受到多种因子调控,其中一些细胞外信号通过TGF-β/SMAD信号通路发挥调控作用。TGF-β/SMAD信号通路主要通过不同的下游信号分子SMADs以自分泌/旁分泌途径方式发出信号,调控颗粒细胞增殖和卵母细胞生长,影响着卵巢发育。近年来,TGF-β/SMAD信号通路对卵巢发育的调控机制已成为生殖生理学领域研究热点之一,本文综述了TGF-β/SMAD蛋白的受体、TGF-β/SMAD信号通路,并分别从配体、调控因子以及与其他通路的作用关系的角度阐述了不同家畜TGF-β/SMAD通路在卵巢发育中的调控作用,为卵巢发育的调控机制研究提供思路,同时为畜牧业生产提供理论基础。

云杉花墨天牛雌成虫卵巢发育的研究

[目的]明确云杉花墨天牛雌成虫羽化后至性成熟的发育历期,及取食和交配行为对雌成虫卵巢发育的影响。[方法 ]采集云杉花墨老熟幼虫在室内饲养至羽化,将初羽化1日龄的雌成虫分别用4种方式处理:1)单独饲喂;2)单独饲养但不饲喂;3)与雄成虫一起饲喂;4)与雄成虫一起饲养但不饲喂。每日连续剖检雌成虫卵巢直至观察到雌成虫卵巢萎蔫或死亡。[结果 ]表明:1)云杉花墨天牛的卵巢发育过程分为5级;2)未饲喂的云杉花墨天牛雌成虫卵巢发育至第2级后就停止发育;3)饲喂并交配的雌成虫卵巢在第14天发育成熟,饲喂但未交配的雌成虫卵巢在第17天发育成熟。[结论 ]可见云杉花墨天牛雌成虫需进行取食后其卵巢才能正常发育至成熟。此外,交配对雌成虫的卵巢发育具有促进作用,使发育历程缩短3天。

广西北部湾施氏獭蛤卵巢发育、卵子和卵黄发生的研究

为探究广西北部湾海域施氏獭蛤卵巢发育、卵子和卵黄发生,采用组织切片分析卵巢周年变化,并利用光学和电子显微镜观察雌性生殖细胞的变化过程。结果表明,广西北部湾海域施氏獭蛤卵巢发育周期为一年,每年12月至翌年4月性腺饱满,为繁殖盛期,产卵高峰期略滞后于性腺成熟期,每期5%~15%个体发育滞后于群体。卵子发生过程中,雌性生殖细胞逐渐脱离滤泡壁,进入滤泡腔。卵子发育过程中,卵径由6.9~8.3μm变大至70.0~74.9μm,细胞质内细胞器数量增加,出现卵黄粒,自噬泡吞噬脂滴和线粒体。卵黄发生期间,核仁经染色后分为两部分,颜色深浅不一,核质间出现物质交换,卵母细胞质膜内出现多泡小体,在靠近卵周隙处形成微吞饮泡,分别从卵周隙和滤泡吸收外源性卵黄物质。此外,本实验还观察到施氏獭蛤存在滤泡混合型和滤泡共存型雌雄同体,性转换方向表现为雌性向雄性转换。本研究结果为施氏獭蛤的人工繁育提供基础资料。

原发性卵巢发育不全一家系HROB致病等位基因遗传学分析

一例13岁6个月女童因月经未初潮就诊,实验室检查提示卵泡刺激素及黄体生成素增高,抗米勒管激素降低,盆腔超声未发现双侧卵巢,条索状子宫。进一步完善患儿妹妹检查,与先证者表型类似,可诊断为原发性卵巢发育不全。全外显子组测序及家系桑格测序结果提示,患儿及妹妹均携带HROB基因c.718C>T(p.Arg240*)及c.1351C>T(p.Arg451*)杂合变异,分别遗传自父母亲,符合常染色体隐性遗传规律。先证者予以起始剂量0.125 mg/d戊酸雌二醇口服,半年后第二性征开始发育。

红螯螯虾CHH2基因的表达特征及其在卵巢发育中的功能

为研究高血糖激素基因(CHH)在红螯螯虾卵巢发育中的作用,基于转录组学数据鉴定到红螯螯虾CHH2基因序列,并对其基本特性进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了CHH2在红螯螯虾不同组织和卵巢发育阶段的表达情况。结果表明,CHH蛋白在甲壳类物种中高度保守,同源性高达66.84%。qRT-PCR结果表明,在红螯螯虾的肝胰腺中几乎检测不到CHH2表达,在其他组织均有表达,包括肌肉、鳃、肠、心,且在卵巢中的表达水平最高;另外,CHH2在卵巢发育各个时期(未发育、发育期、快速发育期、成熟期)均有表达,表达水平先升高后降低,在卵巢发育成熟期表达水平最低。此外,在切除单侧眼柄和雌二醇活体注射的红螯螯虾卵巢中,CHH2表达水平显著降低。通过注射体外合成CHH2-dsRNA对红螯螯虾进行RNAi干扰试验,结果显示,卵巢发育重要标记卵黄蛋白原基因(VTG)表达水平显著上升。综上所述,CHH2可能负调控红螯螯虾卵巢发育,研究结果为进一步开发基于RNAi的促性腺成熟技术奠定理论基础。

早期开食对雏鹅卵黄囊吸收和卵巢发育的影响

【目的】旨在探究雏鹅育雏期开食对卵黄囊吸收和后期卵巢发育的影响。【方法】试验筛选体质量差异(90.32±2)g的1日龄母雏鹅126只,随机分为开食组和禁食组,每组3个重复,每个重复42只。出雏后48、60、72 h每个重复取3只雏鹅称质量后屠宰取卵黄囊并称质量,气相色谱分析卵黄囊脂肪酸组成;于1、2、3、4周龄末每个重复取3只雏鹅称质量,屠宰后卵巢称质量,苏木精-伊红(HE)染色法观察卵巢结构,实时荧光定量PCR检测卵泡发育调控相关细胞周期检测点激酶1(CHK1)、成纤维生长因子12(FGF12)和SMAD同源物4(SMAD4)基因相对表达量。【结果】开食组体质量在48h至4周龄末均显著高于禁食组(P<0.05)。卵黄囊中饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)主要由C16:0、C18:0、C22:0、C16:1、C18:1n9t和C20:4n6组成。开食组4周龄末卵巢质量、原始卵泡数、初级卵泡数和原始卵泡直径显著高于禁食组(P<0.05)。开食组1、2和4周龄CHK1表达量显著高于禁食组(P<0.05),开食组1、2和3周龄FGF12和SMAD4表达量显著高于禁食组(P<0.05)。【结论】48 h开食有助于确保雏鹅获得较高的体质量,且可促进雏鹅脂肪酸吸收,并上调CHK1、FGF12、SMAD4卵巢发育相关基因表达,促进雏鹅卵泡发育。

晒田环境胁迫对克氏原螯虾卵巢发育相关生化指标和激素的影响

【目的】探究晒田环境胁迫下克氏原螯虾卵巢发育相关生化指标和激素的变化及对卵巢发育的影响,为晒田环境胁迫促进克氏原螯虾卵巢成熟这一生产操作的改良和标准化提供理论依据,促进克氏原螯虾产业可持续发展。【方法】将2个面积为1300 m2的池塘中投放的克氏原螯虾分别作为晒田组和对照组,以晒田组排干水为试验起点,晒田组排水晒田10 d,对照组正常养殖。分别在晒田环境胁迫0、3、7、10 d采集2组中的雌性克氏原螯虾,每次采样数量为30只,测量、称重后取卵巢、肝胰腺和血清,检测卵巢发育相关的生化指标[碱性磷酸酶(AKP/ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)]、性类固醇激素[雌酮(Estrone)、17β-雌二醇(17β-E2)、睾酮(T)、孕酮(PROG)]、高血糖家族激素[高血糖激素(CHH)、性腺抑制激素(GIH)、蜕皮抑制激素(MIH)、大颚器抑制激素(MOIH)]和卵巢发育相关激素[蜕皮激素(Ecdysone)、甲基法尼酯(MF)、皮质醇(Cortisol)],并进行对比分析。【结果】随着时间增加,晒田组雌性克氏原螯虾卵巢成熟率高于对照组,卵巢发育分期主要分布在IV期。生化指标试验结果表明,晒田胁迫0 d时,晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中AKP/ALP、ACP、GSH-Px、PGF2α和PGE2含量均显著低于对照组(P<0.05,下同)或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异(P>0.05,下同);晒田胁迫3和7 d时,晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异;晒田胁迫10 d时,晒田组雌性克氏原螯虾不同组织中生化指标含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。性类固醇激素试验结果表明,晒田胁迫0和3 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中Estrone、17β-E2、T和PROG含量显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异;晒田胁迫7和10 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中性类固醇激素均显著高于对照组雌性克氏原螯虾。高血糖家族激素试验结果表明,晒田胁迫0 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中CHH、GIH、MIH和MOIH含量均显著高于对照组雌性克氏原螯虾;晒田胁迫3和7 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素含量显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异;晒田胁迫10 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中高血糖家族激素显著低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异。卵巢发育相关激素试验结果表明,晒田胁迫0 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中Ecdyone、MF和Cortisol含量均显著高于、低于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异;晒田胁迫3 d时,晒田组雌性克氏原螯虾血清中卵巢发育相关激素显著高于对照组或与对照组雌性克氏原螯虾无显著差异;晒田胁迫7和10 d时,晒田组中卵巢发育相关激素均显著高于对照组。【结论】晒田环境胁迫能促进克氏原螯虾卵巢成熟,加快卵巢发育相关生化指标和激素的变化。晒田胁迫7~10 d时,促进卵巢发育成熟的效果达峰值。

日本沼虾核糖体蛋白S3a基因cDNA的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能初探

为了探究日本沼虾(Macrobrachium nipponense)核糖体蛋白S3a(MnRPS3a)在其卵巢发育中的功能,利用cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR技术获得了MnRPS3a基因的全长cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光(IF)技术分别进行了该基因的表达模式和蛋白定位分析。结果显示,MnRPS3a基因cDNA全长902 bp,共编码266个氨基酸;MnRPS3a与墨吉对虾(Fenneropenaeus merguiensis)RPS3a氨基酸序列相似性最高,进化上的亲缘关系也最近;在不同组织中,MnRPS3a基因在肌肉中的表达量最高;在不同发育阶段卵巢中,MnRPS3a基因在Ⅰ期卵巢中的表达量最高;注射5-羟色胺(5-HT)能诱导日本沼虾卵巢MnRPS3a和卵黄蛋白原(Vg)基因表达升高,而注射多巴胺(DA)则抑制这2个基因表达。MnRPS3a蛋白主要定位于日本沼虾Ⅰ期和Ⅱ期卵巢的滤泡细胞、Ⅲ期和Ⅳ期卵巢卵母细胞的细胞质中。结果表明MnRPS3a可能在日本沼虾卵巢发育调控中发挥重要的作用。