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原位分子杂交检测上海真厉螨与柏氏禽刺螨体内肾综合征出血热病毒的研究 被引量:6
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作者 吴建伟 孟阳春 +4 位作者 李允鹤 周洪福 诸葛洪祥 赖培新 王建明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期441-444,共4页
目的:提供革螨传播肾综合征出血热病毒(HFRSV)的分子生物学证据。方法:用上海真厉螨与柏氏禽刺螨叮咬HFRSV接种乳小鼠,取叮咬后d10及d100以上的上海真厉螨与柏氏禽刺螨冰冻切片,用地高辛标记HFRSVcDNA... 目的:提供革螨传播肾综合征出血热病毒(HFRSV)的分子生物学证据。方法:用上海真厉螨与柏氏禽刺螨叮咬HFRSV接种乳小鼠,取叮咬后d10及d100以上的上海真厉螨与柏氏禽刺螨冰冻切片,用地高辛标记HFRSVcDNA核酸探针原位分子杂交检测其体内病毒RNA。结果:叮咬野鼠型(76-118株)接种乳小鼠后d10上海真厉螨检出病毒RNA,在细胞浆、细胞核中及核膜上呈细密颗粒状或全浆阳性,见于生殖器官细胞、胃及支囊上皮细胞及脑皮质细胞;叮咬家鼠型(UR株)病毒接种乳小鼠后d12螨亦检出病毒RNA,病毒的细胞组织分布与野鼠型相同;分别检测野鼠型螨31只和家鼠型23只,其中阳性分别为17只和10只;叮咬野鼠型病毒接种乳小鼠后d132,家鼠型d102螨仍能检出病毒RNA。柏氏禽刺螨叮咬野鼠型病毒接种乳小鼠d10,检测螨20只,其中阳性12只,病毒RNA主要分布于生殖器官细胞内。结论:上海真厉螨与柏氏禽刺螨均可经叮咬获得HFRSV,上海真厉螨可分别感染野鼠型和家鼠型HFRSV,野鼠型在螨群体内至少可维持132d,家鼠型102d,具有贮存两型病毒的作用,是HFRSV的适宜媒介和贮存宿主,在动物宿主间交叉传播两型HFRSV中? 展开更多
关键词 上海真厉螨 柏氏禽刺螨 原位分子杂交 HFRSV
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应用核酸原位分子杂交法检测弓形虫SAG1抗原基因在免疫小鼠体内的表达 被引量:5
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作者 陈海峰 陈观今 +2 位作者 王又红 郑焕钦 郭虹 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期13-15,共3页
PCR扩增RH株弓形虫抗原基因SAG1编码序列 ,构建pcDNA3 -SAG1重组表达质粒。DNA免疫接种小鼠 ,3周后处死动物 ,取注射部位肌肉作冰冻切片 ,用原位分子杂交方法检测弓形虫 pcDNA3 -SAG1重组质粒在免疫小鼠肌肉内的表达。结果PCR扩增出SAG... PCR扩增RH株弓形虫抗原基因SAG1编码序列 ,构建pcDNA3 -SAG1重组表达质粒。DNA免疫接种小鼠 ,3周后处死动物 ,取注射部位肌肉作冰冻切片 ,用原位分子杂交方法检测弓形虫 pcDNA3 -SAG1重组质粒在免疫小鼠肌肉内的表达。结果PCR扩增出SAG1编码区目的基因 ,片段大小为 10 2 0bp。测序、酶切分析表明构建的 pcDNA3 -SAG1重组表达质粒含有扩增的基因。利用原位分子杂交在免疫接种 pcDNA3-SAG1的小鼠骨骼肌中检测到紫蓝色的阳性杂交信号 ,提示局部肌肉有目的基因mRNA转录的发生。 展开更多
关键词 弓形虫 基因免疫 SAG1抗原 原位分子杂交 PCR DNA免疫
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原位分子杂交法检测恙螨体内肾综合征出血热病毒核酸的研究 被引量:12
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作者 张云 朱进 +4 位作者 李先富 唐家琪 吴光华 张家驹 周燕平 《中国病毒学》 CSCD 1998年第1期40-44,共5页
为探讨肾综合征出血热病毒(HFRSV)在恙螨体内的分布和定位,采用原位分子杂交技术检测恙螨体内HFRSVRNA。结果发现:原位分子杂交技术的检出阳性率较IFAT高;HFRSV阳性信号颗粒呈弥散分布,多见于恙螨幼虫和... 为探讨肾综合征出血热病毒(HFRSV)在恙螨体内的分布和定位,采用原位分子杂交技术检测恙螨体内HFRSVRNA。结果发现:原位分子杂交技术的检出阳性率较IFAT高;HFRSV阳性信号颗粒呈弥散分布,多见于恙螨幼虫和若虫的腹部组织细胞内,该部位是恙螨的卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞。前体组织细胞内少见;个别幼虫和若虫的前足和中足细胞内亦可见到HFRSVRNA阳性信号。在原位分子杂交中,若虫组织细胞内的HFRSVRNA阳性信号较幼虫密集而且量多。 展开更多
关键词 原位分子杂交 肾综合征出血热 病毒 恙螨
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原位分子杂交图象中银粒的分割方法研究 被引量:8
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作者 王浩军 毛柏鑫 +1 位作者 毕笃彦 张旭 《中国图象图形学报(A辑)》 CSCD 1999年第6期454-457,共4页
图象分割是图象处理的一个基本技术。运用一种改进的快速Otsu阈值分割法,并结合其它处理方法对原位分子杂交图象中的银粒进行分割。实验结果表明,该方法在精度和速度方面有其优势,适合于对原位分子杂交图象中银粒的自动分割。
关键词 图象分割 阈值 二值图象 原位分子杂交 小波变换
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原位分子杂交研究肾综合征出血热尸检组织中汉坦病毒M和SRNA的分布 被引量:6
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作者 杨守京 刘彦仿 +3 位作者 张劲凤 尚高峰 晏培松 胡明华 《中国病毒学》 CSCD 1995年第1期48-55,共8页
本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区HFRS尸检病例组织中病毒RNA的分布和定位。结果在19例病例组织中均可检测到病毒RNA。陕西及沈阳地区病例,阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例,病毒RNA主要... 本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区HFRS尸检病例组织中病毒RNA的分布和定位。结果在19例病例组织中均可检测到病毒RNA。陕西及沈阳地区病例,阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例,病毒RNA主要出现于各脏器组织内血管壁及毛细血管内皮细胞。广州一例,病毒RNA主要分布于肝脏灶性溶解性坏死区域,肺泡壁和肾间质血管等部位。病毒RNA主要定位于细胞胞浆,呈颗粒状或全浆阳性,也出现干部分组织少数细胞胞核中。此外,病毒RNA还出现于细胞外液和红细胞表面。结果说明,HFRS病毒具有泛嗜性感染及上皮性组织或血管内皮细胞易感的特点,后者可能取决于不同地区HFRS病例所感染的病毒的血清型或毒株不同,从而引起不同类型HFRS及其病理和发病机理的差异。 展开更多
关键词 汉坦病毒 原位分子杂交 RNA 肾病综合征 出血热
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HBV感染者胃十二指肠粘膜HBV DNA地高辛原位分子杂交研究 被引量:4
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作者 江建宁 韦敏怡 +4 位作者 梁秀就 周桂英 赵伟佳 玉艳红 姜海行 《广西医科大学学报》 CAS 2001年第3期308-310,共3页
目的 :探讨 HBV在胃十二指肠粘膜的分布、复制、表达及其意义。方法 :应用地高辛原位分子杂交法检测 6 2例 HBV感染者胃十二指肠粘膜 HBV DNA的分布状态 ,并与血清 HBVM、胃十二指肠粘膜 HBs Ag、 HBc Ag、肝炎病情程度进行相关分析。结... 目的 :探讨 HBV在胃十二指肠粘膜的分布、复制、表达及其意义。方法 :应用地高辛原位分子杂交法检测 6 2例 HBV感染者胃十二指肠粘膜 HBV DNA的分布状态 ,并与血清 HBVM、胃十二指肠粘膜 HBs Ag、 HBc Ag、肝炎病情程度进行相关分析。结果 :6 2例 HBV感染者 ,2 7例 (4 3.5 5 % )胃肠粘膜检出 HBV DNA,检出率与肝炎病情程度、血清 HBs Ag、HBe Ag无明显相关 ,与血清 HBV DNA、胃肠粘膜 HBs Ag、HBc Ag密切相关 ;胃肠粘膜 HBV DNA的表达表现为 4种模式。结论 :HBV DNA可在胃肠组织原位复制 ,其不同的表达模式反映了病毒复制或整合的状态。 展开更多
关键词 胃十二指肠粘膜 乙型肝炎病毒 脱氧核糖核酸 原位分子杂交
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丁型病毒性肝炎的原位分子杂交及免疫组化研究 被引量:3
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作者 程瑞雪 冯德云 +1 位作者 梁英锐 蒋海鹰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期95-97,共3页
利用原位分子杂交和免疫组化方法对142例乙型肝炎活检肝组织进行丁型肝炎病毒RNA及其抗原的定位研究。28/142例丁型肝炎病毒标记阳性。其中慢性重症型6例;慢性活动性17例;慢性持续性5例。慢性活动性乙肝重叠丁型肝炎... 利用原位分子杂交和免疫组化方法对142例乙型肝炎活检肝组织进行丁型肝炎病毒RNA及其抗原的定位研究。28/142例丁型肝炎病毒标记阳性。其中慢性重症型6例;慢性活动性17例;慢性持续性5例。慢性活动性乙肝重叠丁型肝炎病毒感染组发生早期肝硬变的比例明显高于无重叠感染组(P<0.05)。28例丁型肝炎病毒感染肝组织19例HBcAg阳性,并以核浆型为主,提示活动性HBV复制与HDV感染的正相关性,两者相加作用导致肝损害加重并加速发展为肝纤维化。HDVRNA在肝细胞内大量蓄积,HDAg在碎屑状坏死边缘肝细胞或气球样变肝细胞内呈浆膜型分布,提示HDV直接细胞毒在丁型肝炎发病学中的作用。 展开更多
关键词 丁型肝炎 原位分子杂交 免疫组织化学
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原位分子杂交检测HFRSVRNA方法研究 被引量:8
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作者 朱进 张云 +4 位作者 唐家琪 李先富 吴光华 张家驹 周燕萍 《中国公共卫生学报》 1997年第4期200-202,共3页
采用非放射性标记物-地高辛碱性磷酸酶标记肾综合征出血热病毒(HFRSV)cDNA制备分子探针,检测HFRSV在鼠肺、恙螨体内分布定位,并对原位分子杂交的各环节进行探讨。结果表明:鼠肺的吞噬细胞、支气管粘膜上皮细胞、血... 采用非放射性标记物-地高辛碱性磷酸酶标记肾综合征出血热病毒(HFRSV)cDNA制备分子探针,检测HFRSV在鼠肺、恙螨体内分布定位,并对原位分子杂交的各环节进行探讨。结果表明:鼠肺的吞噬细胞、支气管粘膜上皮细胞、血管内皮细胞等均见有阳性颗粒,在恙螨卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞也存在阳性颗粒;在前处理中,明胶硫酸铬钾与多聚赖氨酸的铺片效果相似;室温2h,42℃1h,4%多聚甲醛处理冰冻切片,可有效防止脱片,且保持良好的细胞形态结构;探针PCR标记法优于随机引物标记法;预杂交液加入spermDNA和yeasttRNA,不用硫酸萄聚糖,可有效地减少背景染色;42℃杂交16h。 展开更多
关键词 原位分子杂交 恙螨 鼠肺 HFRSV-RNA 肾综合症
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地高辛配基标记探针在流行性出血热尸检组织中原位分子杂交技术的应用和探讨 被引量:3
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作者 唐志佼 张波 +1 位作者 邢寿富 邱慧玲 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1992年第2期180-183,共4页
将地高辛配基(Dig)标记的探针应用于流行性出血热(EHF)尸检组织的石蜡切片中,进行原位分子杂交四例。方法要点:(1)采用Dig标记的探针及碱性磷酸酶系统、提高其敏感性;(2)为达到被检核酸的暴露彻底、准确,选择合适的消化酶;(3)选择适当... 将地高辛配基(Dig)标记的探针应用于流行性出血热(EHF)尸检组织的石蜡切片中,进行原位分子杂交四例。方法要点:(1)采用Dig标记的探针及碱性磷酸酶系统、提高其敏感性;(2)为达到被检核酸的暴露彻底、准确,选择合适的消化酶;(3)选择适当的杂交温度和时间,防止了非特异性背景,并避免了组织脱片。结果表明此方法操作简便、安全、快速、敏感。 展开更多
关键词 Dig标记 CDNA探针 流行性出血热 原位分子杂交
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原位分子杂交技术的几点体会 被引量:3
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作者 张新华 黄进 钱源澄 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期339-339,共1页
非同位素标记探针应用于原位分子杂交,虽取得了很大进展,但因其操作步骤较多,时间较长等因素,仍存在一些问题有待克服。以下介绍我们在实际操作中得到的一点初步体会。 1 减少或避免组织掉片的方法 除非蛋白性防脱片胶外,还需注意以下几... 非同位素标记探针应用于原位分子杂交,虽取得了很大进展,但因其操作步骤较多,时间较长等因素,仍存在一些问题有待克服。以下介绍我们在实际操作中得到的一点初步体会。 1 减少或避免组织掉片的方法 除非蛋白性防脱片胶外,还需注意以下几点:(1)载玻片一定要干净。 展开更多
关键词 原位分子杂交 技术
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利用荧光素原位分子杂交检验水样中嗜肺军团菌的研究 被引量:3
11
作者 吴守芝 汪宗江 +2 位作者 李恒新 黄河清 张锋 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第4期609-611,625,共4页
目的:利用针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和军团菌致病基因-巨噬细胞感染增强因子(mip)序列探针原位分子杂交建立嗜肺军团菌的快速、特异性检验方法。方法:设计特异性针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和mip探针,采用荧光素标记探针... 目的:利用针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和军团菌致病基因-巨噬细胞感染增强因子(mip)序列探针原位分子杂交建立嗜肺军团菌的快速、特异性检验方法。方法:设计特异性针对嗜肺军团菌种特异性16SrRNA和mip探针,采用荧光素标记探针对采自西安市8家宾馆中央空调冷凝水、贮水池水各8份进行原位分子杂交,并且结合细菌分离、生化鉴定技术检验水样中嗜肺军团菌。结果:细菌分离鉴定表明2份冷凝水、5份贮水池水分离到可疑菌落,抗体凝集实验证实嗜肺军团菌血清Ⅰ型3份、Ⅴ、Ⅵ型各1份,2份阴性。实验周期约10~12d;原位分子杂交显示16SrRNA、mip的探针杂交信号成堆分布于原虫细胞内,形如杆菌状,16SrRNA与mip的杂交信号存在完全双标记,但有少数mip的杂交信号不与16SrRNA共存,5株鉴定为嗜肺军团菌Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ型的水样原虫中,经16SrRNA、mip探针杂交均为阳性,对2株非嗜肺军团菌水样原虫进行16SrRNA、mip的杂交结果均为阴性。实验周期约20h。结论:结果表明该方法适用于对存在于原虫内致病性嗜肺军团菌进行检验,是种快速、特异性的致病性嗜肺军团菌检验方法。 展开更多
关键词 嗜肺军团菌 原位分子杂交 16SrRNA 巨噬细胞感染增强因子 鉴定
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原位分子杂交技术一些体会 被引量:2
12
作者 贺占国 江泓 +1 位作者 张文 郭宏 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期217-218,共2页
原位分子杂交技术一些体会贺占国,江泓,张文,郭宏原位分子杂交技术是近几年来发展起来的一项新技术。在基础研究和临床诊断上已开始广泛应用。在临床病理诊断中可为早期诊断、鉴别诊断、判断预后提供重要依据。与免疫组织化学相比,... 原位分子杂交技术一些体会贺占国,江泓,张文,郭宏原位分子杂交技术是近几年来发展起来的一项新技术。在基础研究和临床诊断上已开始广泛应用。在临床病理诊断中可为早期诊断、鉴别诊断、判断预后提供重要依据。与免疫组织化学相比,其特异性更强,敏感性更高,已受到病... 展开更多
关键词 原位分子杂交 诊断 分子遗传学
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一种基于流式细胞仪分选后的细胞原位分子杂交 被引量:1
13
作者 李红丽 何家全 +1 位作者 杨忠 蔡文琴 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期245-245,共1页
关键词 流式细胞仪 分选 细胞原位分子杂交 细胞涂片
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一种新原位分子杂交技术 被引量:1
14
作者 刘贤华 白晓东 胡川闽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期86-87,共2页
关键词 分子杂交 地高辛标记 CDNA探针 原位分子杂交
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用原位分子杂交和免疫组化研究肾综合征出血热肾组织中的病毒感染 被引量:2
15
作者 杨守京 刘彦仿 +2 位作者 胡锡祺 李明升 胡明华 《中国病毒学》 CSCD 1996年第1期21-28,共8页
应用原位分子杂交和免疫组化技术研究了陕西、沈阳、上海、江西、广州等地收集的36例肾综合征出血热(HFRS)尸检肾组织中的病毒RNA和抗原的定位和分布。病毒RNA检测34例,28例阳性;抗原检测34例,30例阳性,病毒... 应用原位分子杂交和免疫组化技术研究了陕西、沈阳、上海、江西、广州等地收集的36例肾综合征出血热(HFRS)尸检肾组织中的病毒RNA和抗原的定位和分布。病毒RNA检测34例,28例阳性;抗原检测34例,30例阳性,病毒RNA及其抗原主要定位于细胞胞浆中。西安及沈阳地区的病例,病毒RNA和抗原阳性部位主要是肾小管上皮细胞,较少出现血管阳性。上海、江西和广州地区病例病毒RNA主要出现于肾间质血管和少数病例的个别肾小球毛细血管和肾小管上皮细胞;病毒抗原分布于肾间质血管和肾小管上皮中。1例(广州病例)肾血管平滑肌细胞检测到空泡状病毒NP抗原。另外在3例西安病例和9例上海病例肾远曲小管和集合管上皮中检测到NP和HA阳性的病毒包涵体。结果说明HFRS病毒可感染肾脏中肾小管上皮和血管内皮,并在肾小管上皮细胞产生包涵体。不同地区病例肾脏中病毒感染的部位不同,可能与不同地区病例所感染的病毒毒株或血清型不同有关。肾小管上皮细胞和血管内皮的损伤除病毒直接作用外,还可能有免疫因素参与。 展开更多
关键词 肾综合征出血热 原位分子杂交 病毒感染
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用原位分子杂交法检测大肠癌p53癌基因表达及其意义 被引量:1
16
作者 李玉松 赖大年 +2 位作者 吴金生 何泽生 卢青 《第四军医大学学报》 1997年第1期26-28,共3页
目的:研究p53抑癌基因与大肠癌发生与发展的关系.方法:应用原位分子杂交技术对62例大肠癌区、癌移行区及癌旁分区大肠组织中p53癌基因(p53 mRNA)进行检测.结果:大肠癌区呈 p53 mRNA杂交阳性反应,阳性颗粒主要分布在癌细胞浆内,少部分阳... 目的:研究p53抑癌基因与大肠癌发生与发展的关系.方法:应用原位分子杂交技术对62例大肠癌区、癌移行区及癌旁分区大肠组织中p53癌基因(p53 mRNA)进行检测.结果:大肠癌区呈 p53 mRNA杂交阳性反应,阳性颗粒主要分布在癌细胞浆内,少部分阳性颗粒核浆共存,阳性癌细胞多呈灶状分布;癌区p53 mRNA杂交阳性率及阳性强度较癌移行区为高(P<0.01),癌旁区为阴性;大肠癌伴有淋巴结及肝转移组,p53 mRNA杂交阳性率明显高于无淋巴结及肝转移组.结论:p53 mRNA表达与大肠癌发生及发展有密切关系,癌组织中 p53 mRNA杂交阳性结果可作为评估大肠癌转移和生存预后的分子生物学指标,对手术切除缘范围评估具有一定临床指导意义. 展开更多
关键词 大肠癌 P53 MRNA 原位分子杂交
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力竭性游泳对大鼠胰岛 A、B 细胞形态学变化的影响——免疫组化及原位分子杂交结果分析 被引量:3
17
作者 郑陆 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期95-100,共6页
采用免疫组化及原位分子杂交技术,本文研究了负重力竭性游泳对大鼠胰岛A、B细胞分泌功能的影响。主要结果发现:力竭状态下,①大鼠胰岛Ins-IR细胞呈色反应强度增加,而Glu-IR细胞呈色反应强度降低,说明B细胞Ins释... 采用免疫组化及原位分子杂交技术,本文研究了负重力竭性游泳对大鼠胰岛A、B细胞分泌功能的影响。主要结果发现:力竭状态下,①大鼠胰岛Ins-IR细胞呈色反应强度增加,而Glu-IR细胞呈色反应强度降低,说明B细胞Ins释放被抑制,A细胞Glu释放增多。②大鼠胰岛B细胞内Pro-InsmRNA杂交信号明显减弱,说明Pro-Ins-mRNA转录受到抑制,Ins合成受抑。③Ins-IR和IAPP-IR细胞未呈现相同程度的呈色反应变化,提示B细胞内存在着含IAPP/Ins不同比率的分泌颗粒,可随机体的机能状态需要而分别释放。 展开更多
关键词 免疫学 原位分子杂交 胰岛 B细胞 A细胞 游泳
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原位分子杂交电镜技术在胃癌细胞角蛋白mRNA定位中的应用 被引量:1
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作者 苏长青 曹祥荣 +1 位作者 乐美兆 宋小明 《诊断病理学杂志》 CSCD 1995年第2期113-113,共1页
原位分子杂交电镜技术在胃癌细胞角蛋白mRNA定位中的应用苏长青,曹祥荣,乐美兆,宋小明(解放军八一医院电镜室南京210002南京师范大学生物系)随着原位分子杂交技术在组织学、病理学、遗传学等学科的应用,国内外已有人开... 原位分子杂交电镜技术在胃癌细胞角蛋白mRNA定位中的应用苏长青,曹祥荣,乐美兆,宋小明(解放军八一医院电镜室南京210002南京师范大学生物系)随着原位分子杂交技术在组织学、病理学、遗传学等学科的应用,国内外已有人开始尝试进行超微结构水平的原位分子杂... 展开更多
关键词 胃癌 角蛋白 MRNA 原位分子杂交 电镜
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电镜原位分子杂交技术及其应用
19
作者 谢潮添 杨盛昌 +2 位作者 缪颖 陈德海 张平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期249-252,共4页
将原位分子杂交技术应用于电镜水平 ,观察标记的特定DNA、mRNA和RHA在细胞和 或组织内的超微结构定位的方法 ,称为电镜原位分子杂交技术。本文综述了电镜原位分子杂交技术的建立及其分类 ,并详细介绍了非放射性电镜原位分子杂交技术的... 将原位分子杂交技术应用于电镜水平 ,观察标记的特定DNA、mRNA和RHA在细胞和 或组织内的超微结构定位的方法 ,称为电镜原位分子杂交技术。本文综述了电镜原位分子杂交技术的建立及其分类 ,并详细介绍了非放射性电镜原位分子杂交技术的基本操作程序及注意事项 ,最后对电镜原位分子杂交技术的应用做了简要介绍。 展开更多
关键词 电镜 原位分子杂交技术 操作程序 应用
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小波变换方法对原位分子杂交中银粒的检测和增强
20
作者 王浩军 毛柏鑫 +2 位作者 毕笃彦 郑崇勋 张旭 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期94-96,89,共4页
关键词 小波变换 双正交样条小波基 图象处理 银粒 原位分子杂交
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