原花青素和原儿茶酸对淀粉消化酶的联合抑制作用

淀粉是人体获取能量主要来源,原花青素(Procyanidin,PC)和原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)等天然产物能够控制淀粉的消化,从而达到降低餐后血糖的效果。本文通过抑制率测定、Lineweaver-Burk双倒数图法、紫外光谱、荧光淬灭、等效线图解法和傅里叶红外光谱研究了PC和PCA对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制效果。结果表明:PC对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制的IC_(50)值分别为0.0524和0.0106 mg/mL,PCA分别为1.9426和1.0667 mg/mL,PCA表现出更好的抑制能力;Lineweaver-Burk双倒数图法表明PC和PCA对α-淀粉酶的抑制为混合型抑制,对α-葡萄糖苷酶的抑制分别为非竞争性抑制和竞争性抑制。与α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的结合主要依靠疏水键和氢键,通过改变酶氨基酸残基微环境,进一步改变酶结构。复配比例为1:21时对α-葡萄糖苷酶的抑制效果最优,1:37时对α-淀粉酶的抑制效果最优。两物质复配比例为1:21时CI小于1,对α-葡萄糖苷酶表现出协同抑制作用;复配比例为1:37时CI小于1,对α-淀粉酶表现出协同抑制作用。本研究揭示了PC和PCA复合使用对淀粉消化酶的抑制作用机制,为开发天然降糖膳食补充剂作为健康食品辅料或药物开发提供一定理论基础。

原儿茶酸促进铁循环强化Fenton体系降解避蚊胺

为了减少传统Fenton体系中Fe(Ⅱ)的投加量,提高H_(2)O_(2)的利用率,选择添加原儿茶酸(PCA)实现Fenton体系中的铁循环。以避蚊胺(DEET)为目标污染物,在最佳反应条件:c(DEET)0=0.2 mmol/L,c(H_(2)O_(2))=1.0 mmol/L,n(H_(2)O_(2))/n[Fe(Ⅱ)]=20∶1,n(PCA)/n[Fe(Ⅱ)]=1∶1,pH值=3.0下,DEET在20 min内降解率可达75%。对DEET降解过程中的总铁(TFe)和Fe(Ⅱ)浓度的变化进行记录,证明了PCA除了作为络合剂提高溶液中Fe离子的溶解度,也可作为还原剂促进体系中的Fe循环。利用叔丁醇(TBA)和对苯醌(PBQ)作为自由基淬灭剂鉴别反应体系中主要活性物质,得出PCA/Fe(Ⅱ)/H_(2)O_(2)体系中起主要氧化作用的是羟基自由基(·OH)。共存离子试验结果表明,SO^(2-)_(4)的存在对DEET的降解没有影响。对常见的污染物降解试验表明,Fe(Ⅱ)/PCA/H_(2)O_(2)体系普适性较好。

基于多光谱技术对原儿茶酸抑制低密度脂蛋白氧化及其与牛血清白蛋白相互作用的研究

植物多酚被称作人类健康的“第7类营养素”,在医药、食品和营养保健等多个领域受到广泛关注。红心猕猴桃果皮(RKP)中多酚含量丰富,是提取植物多酚的优良原料,但常被视为加工废料遭弃用。该研究拟通过脉冲超声(PU)辅助天然深共晶溶剂(NADES)提取RKP多酚,并通过荧光光谱和紫外-可见光谱探究RKP中重点多酚—原儿茶酸(PCA)抑制低密度脂蛋白(LDL)氧化功效及其与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。结果表明,NADES对RKP多酚的提取率显著高于常规溶剂(如水或乙醇)。在超声功率400 W、料液比1﹕40(g·mL^(-1))、温度70℃、提取20 min及含水率20%(ω/ω)条件下,所筛选的6种NADES溶剂中,氯化胆碱-乙二醇组合提取率最高(29.84 mg GAE/g DW)。光谱实验结果表明,PCA具有较强的DPPH自由基清除能力,清除率最高可达94.39%。PCA能够显著延长LDL氧化过程中共轭二烯(CD)生成的延滞时间及达到峰值时间,有效抑制脂质氧化过程中脂褐素及总荧光产物生成,减少LDL氧化过程中色氨酸(Trp)及赖氨酸(Lys)残基的氧化修饰,显示出对LDL氧化极强的抑制效果。多光谱法对PCA与BSA相互作用研究发现,两者之间存在相互作用,具有较强的亲和力,且只有一个结合位点,疏水作用力在相互作用过程中起主要作用;相互作用后酪氨酸(Tyr)周围微环境几乎不发生改变,而Trp周围微环境极性降低、疏水性增加;三维荧光光谱进一步证明二者之间存在相互作用,并由此引起蛋白质结构发生变化;综合荧光光谱和紫外-可见光谱的实验结果,PCA与BSA相互作用猝灭机理为静态猝灭。该研究为开发RKP及PCA提供参考。

原儿茶酸对肠毒素大肠杆菌K88诱导的猪小肠上皮细胞程序性坏死和Toll样受体4信号通路的影响

本试验旨在研究原儿茶酸(PCA)对肠毒素大肠杆菌K88(ETEC K88)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-1细胞)程序性坏死和Toll样受体4(TLR4)信号通路的影响。试验采用2×2因子设计,分为4个组:对照组、PCA组(40μmol/L PCA作用24 h)、ETEC K88组(50倍细胞数ETEC K88作用2 h)和PCA+ETEC K88(40μmol/L PCA作用24 h+50倍细胞数ETEC K88作用2 h)组,每组3个重复。结果显示:1)与对照组相比,ETEC K88组细胞活力显著降低(P<0.05),细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性显著升高(P<0.05);与ETEC K88组相比,PCA+ETEC K88组细胞活力显著升高(P<0.05),细胞上清液LDH活性显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,ETEC K88刺激导致细胞形态损伤,超微结构破坏,表现为细胞膜破裂,细胞核皱缩,染色质外溢,线粒体出现肿胀并且空泡化;ETEC K88组细胞坏死率显著升高(P<0.05)。与ETEC K88组相比,添加PCA能够保护细胞形态,PCA+ETEC K88组细胞坏死率显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,ETEC K88组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、脂多糖结合蛋白(LBP)、髓样分化蛋白2(MD2)、白细胞介素受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和髓样分化因子88(MyD 88)的mRNA相对表达显著升高(P<0.05);与ETEC K88组相比,PCA+ETEC K88组TNF-α、TLR4、LBP、MD2、IRAK1、TRAF6和MyD88的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比,ETEC K88组肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、Fas相关死亡结构域(FADD)、混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)、高迁移率蛋白1(HMGB1)、动力相关蛋白1(Drp1)和磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与ETEC K88组相比,PCA+ETEC K88组TNFR1、FADD、HMGB1、Drp1和PGAM5的mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。由此可见,PCA可能通过抑制细胞程序性坏死和TLR4信号通路的激活,缓解ETEC K88诱导的IPEC-1细胞的炎症反应和损伤。

原儿茶酸对高脂血症大鼠血脂代谢及MAPK通路的影响

目的:探究原儿茶酸(PCA)对高脂血症大鼠血脂代谢及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响。方法:将SD大鼠按照随机数表法分为对照组、模型组、阳性药物对照组(阳性组)、低PCA组和高PCA组,每组10只。对照组大鼠给予基础对照饲料喂养,模型组、阳性组、低PCA组和高PCA组大鼠均给予45%高脂饲料喂养造模。建模第3周开始,阳性组大鼠每日给予阿伐他汀钙溶剂(5 mg/kg)灌胃;低PCA组和高PCA组大鼠每日分别给予100 mg/kg和200 mg/kg的PCA溶剂灌胃;对照组和模型组大鼠每日分别灌胃等量的生理盐水,各组大鼠均持续给药4周。给药过程中,每周分别测量各组大鼠的体质量。给药结束时,各组大鼠采用腹腔1%戊巴比妥钠麻醉,开胸腔后分离大鼠肝脏组织和采集腹主动脉血,分离收集血清。通过全自动生化分析仪检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。采用试剂盒检测各组大鼠肝脏和血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组大鼠肝脏组织中胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)基因的相对表达量。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠肝脏组织中SREBP2、HMGCR、p38MAPK、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、Jun氨基末端激酶(JNK)和磷酸化JNK(p-JNK)表达水平。采用苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠肝脏组织的病变情况。结果:与对照组比较,模型组、阳性组、低PCA组和高PCA组大鼠肝脏指数、TC、TG、LDL-C、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平均升高(P<0.05),HDL-C、SOD和GSH-Px水平均降低(P<0.05);与模型组比较,阳性组、低PCA组和高PCA组大鼠肝脏指数、TC、TG、LDL-C、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平均降低(P<0.05),HDL-C、SOD和GSH-Px水平均升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组、阳性组、低PCA组和高PCA组大鼠肝脏组织中HMGCR和SREBP2的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),p38MAPK、ERK和JNK蛋白磷酸化水平均升高(P<0.05);与模型组比较,阳性组、低PCA组和高PCA组大鼠肝脏组织中HMGCR和SREBP2的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),p38MAPK、ERK和JNK蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05)。结论:原儿茶酸可有效调节高脂血症大鼠的血脂水平,抑制肝脏组织的氧化应激反应和炎症损伤,可能通过MAPK信号通路调节脂质合成与代谢水平,进而发挥降血脂作用。

HPLC法测定赤瓟不同药用部位中原儿茶醛和原儿茶酸的含量

[目的]建立中药材赤瓟不同药用部位(块根和果实)中原儿茶醛和原儿茶酸的含量测定方法。[方法]采用高效液相色谱法(HPLC)测定赤瓟(块根和果实)中原儿茶醛和原儿茶酸的含量。色谱条件:Discovery C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-5%磷酸水溶液进行梯度洗脱(0~40 min,甲醇:20%~100%),紫外检测波长:280 nm,流速:1 m L/min。[结果]原儿茶醛的含量在0.003~0.052 mg/m L范围内具有良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率为100.6%,RSD为1.27%;原儿茶酸的含量在0.002~0.042 mg/m L范围内具良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率为100.6%,RSD为1.76%。[结论]该测定方法操作简单、结果可靠、重复性好、定量准确,可用于赤瓟(块根和果实)中原儿茶醛和原儿茶酸的含量测定。

原儿茶酸对子宫内膜异位症大鼠炎症反应及血管生成的作用机制研究

目的:观察原儿茶酸(Protocatechuic acid,PA)对大鼠子宫内膜异位症(heterotopia endometriosis,EMS)组织血管生成的作用及机制。方法:选择动情期雌性SD大鼠,通过子宫内膜自体缝合术建立SD大鼠的EMS疾病模型,将54只SD大鼠随机均分为空白组、模型组、PA(高、中、低)剂量组和孕三烯酮组,PA各剂量组和孕三烯酮组每天灌胃给药1次,模型组给予等容积的生理盐水,连续灌胃28d,空白组大鼠正常喂养。测量大鼠的异位组织体积,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠腹腔积液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)及白介素1β(IL-1β)水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测组织中血管生成素(Ang)-1和Ang-2水平、血清及组织中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)含量、组织中总细胞外信号调节激酶1/2(t-ERK1/2)和磷酸化总细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠14d、42d的病灶体积升高,腹腔液炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β均显著升高,子宫内膜组织Ang-1、Ang-2蛋白表达均显著升高,血清中VEGF和MMP-2、MMP-9蛋白表达均显著升高,子宫内膜异位症组织中p-ERK1/2、VEGF、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均显著升高(P<0.05)。原儿茶酸低剂量组、原儿茶酸中剂量组、原儿茶酸高剂量组呈浓度依赖性负向调控上述指标的变化(P<0.05)。结论:原儿茶酸可减轻子宫内膜异位症大鼠创面损伤,抑制炎症反应和血管生成,其潜在的机制可能与失活ERK/VEGF/MMP通路有关。

原儿茶酸通过Toll样受体4/核因子κB途径减轻高脂饮食诱导的肝脏炎症

原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)是花青素在体内的主要代谢产物之一,具有良好的抗炎活性。本实验利用高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导C57BL/6J小鼠肝脏炎症,通过灌胃100 mg/(kg mb·d)PCA研究其对小鼠肝脏的保护效果,并通过体外实验进一步研究其潜在机制。体内研究结果表明,PCA干预12周后,可显著降低HFD诱导C57BL/6J小鼠的体质量和肝脏脂肪含量;血清和肝脏中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)等炎症因子水平均明显降低。体外转录组测序及原代肝细胞和肝脏的免疫印迹分析结果表明,PCA可显著降低Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)基因和蛋白的表达,然后通过下调核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的磷酸化抑制炎症因子(如IL-6)的表达。综上,PCA可有效改善HFD诱导的肝脏炎症,其可能是通过下调TLR4/NF-κB信号通路来实现。

原儿茶酸对顺铂所致急性肾损伤小鼠NGAL、KIM-1、Caspase的影响研究

目的:探析原儿茶酸对顺铂所致急性肾损伤(AKI)小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾脏损伤因子1(KIM-1)、半胱天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)的影响。方法:选择健康雄性C57小鼠45只,采用随机数字表法分为模型组、高浓度组、低浓度组各15只。三组均进行顺铂所致AKI造模,其中模型组给予同等剂量生理盐水,高浓度组、低浓度组分别给予40 mg/kg、20 mg/kg原儿茶酸治疗。采用TUNEL实验检测肾组织细胞凋亡,采用酶联免疫法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮合成酶(NOS)、一氧化氮(NO),采用Western blot检测肾组织NGAL、KIM-1、Caspase3蛋白表达。结果:与模型组比较,高浓度组、低浓度组小鼠肾组织细胞凋亡率、MDA、NO、NOS、NGAL、KIM-1、Caspase3蛋白表达均明显降低,且高浓度组低于低浓度组(P<0.05)。与模型组比较,高浓度组、低浓度组SOD、GSH-Px均明显升高,且高浓度组高于低浓度组(P<0.05)。结论:原儿茶酸治疗顺铂所致AKI机制是通过下调NGAL、KIM-1、Caspase3蛋白水平,抑制氧化应激反应,减少肾组织细胞凋亡发挥作用。

高效液相色谱法同时测定复方赤红颗粒中没食子酸和原儿茶酸含量

目的 建立同时测定复方赤红颗粒中没食子酸和原儿茶酸含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法 色谱柱为Elite Supersil ODS-B C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液(8∶92,V/V),流速为0.9 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果 没食子酸和原儿茶酸质量浓度分别在50~1 600μg/mL(R^(2)=0.999 8,n=6)和2.625~84.000μg/mL(R^(2)=0.999 9,n=6)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性和重复性试验结果的RSD均小于2%(n=6);平均加样回收率分别为101.56%和100.23%,RSD分别为1.88%和2.19%(n=9)。结论 该方法操作简单,结果准确可靠,重复性好,适用于同时测定复方赤红颗粒中没食子酸和原儿茶酸的含量。

响应面法优化叶下珠中没食子酸、咖啡酸和原儿茶酸的提取工艺

目的:响应面法优化叶下珠中没食子酸、咖啡酸和原儿茶酸含量提取工艺参数。方法:在单因素试验的基础上,以超声提取时间(A)、甲醇浓度(B)和料液比(C)为考察因素,没食子酸含量(Y1)、咖啡酸含量(Y2)、原儿茶酸含量(Y3)为考察指标,使用Box-Behnken中心组合设计,根据最佳数学模型描绘响应面,再根据响应面优化最佳条件确定最佳提取工艺。结果:叶下珠中没食子酸、咖啡酸和原儿茶酸成分最佳提取工艺为甲醇浓度70.15%,提取时间44.06min,甲醇用量42.07mL。结论:响应面法优化了叶下珠中没食子酸、咖啡酸和原儿茶酸成分的提取工艺,且稳定可行,设计方便。

鸭脚木配方颗粒制备工艺研究及原儿茶酸含量测定

目的:对鸭脚木配方颗粒的制备工艺进行研究,并测定其原儿茶酸含量。方法:采用单因素考察的方法,选取颗粒外观性状、融化性、成型率作为指标,对颗粒的稀释剂比例、干膏粉与稀释剂配比、润湿剂、干燥温度以及干燥时间进行考察,确定最佳制备工艺;采用高效液相色谱法(HPLC)测定鸭脚木配方颗粒中原儿茶酸的含量,流动相为乙腈-0.1%冰醋酸,检测波长为260 nm。结果:鸭脚木配方颗粒的最佳制备工艺为稀释剂为糊精∶乳糖(2∶1),干膏粉与稀释剂的配比为1∶1.5,润湿剂为80%乙醇,烘干温度为60℃,烘干时间为0.5 h。3次平行验证结果显示,该工艺稳定可行,可用于鸭脚木配方颗粒的制备。HPLC方法测定结果显示本品每克含原儿茶酸含量约1.03 mg。结论:本实验研究所得的鸭脚木配方颗粒工艺制备方法稳定可行,质量可控。

原儿茶酸与卵白蛋白的相互作用

原儿茶酸(protocatechuic acid,PCA)是一种分布广泛的天然酚类化合物,也是花色苷、原花色苷等复杂多酚的主要代谢物之一,具有抗氧化、神经保护等功能。采用多光谱技术研究PCA与卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的相互作用及其对ABTS+自由基清除能力的影响。结果显示,PCA对OVA本征荧光产生猝灭作用;猝灭常数Ksv随温度升高而降低,表明相互作用为静态猝灭机制;PCA与OVA存在一个结合位点,结合常数约为104量级;结合属于自发产生的吸热反应,疏水作用是主导作用力;相互作用后Tyr残基周围微环境极性增加、疏水性降低,Trp残基所处微环境没有变化。PCA-OVA复合物ABTS+自由基清除能力较PCA和OVA有显著提高(p<0.05)。因此,PCA与OVA的相互作用使OVA构象发生改变,对ABTS+自由基清除能力具有一定影响。

基于网络药理学探讨咖啡酸、绿原酸和原儿茶酸对骨关节炎的作用机制

目的:基于网络药理学探讨咖啡酸、绿原酸和原儿茶酸治对骨关节炎的作用机制。方法:根据前期研究,得到了骨炎消方中的8个化学成分。通过PubChem数据库得到其2D结构后,于STP数据库中预测其相应靶点,同时应用CTD数据库获得骨关节炎的相关靶点,利用韦恩图取成分靶点和疾病靶点的交集,得到关键靶点,并在Cytoscape软件中建立“化学成分–关键靶点–疾病”网络,最后应用分子对接验证成分和关键靶点之间的关系。结果:以Probability > 0.5为条件,筛选出其中3个化学成分(咖啡酸、绿原酸、原儿茶酸)的17个相应靶点,取交集后得到15个关键靶点,利用分子对接,发现成分与关键靶点的对接较稳定。结论:通过网络药理学的研究方法,发现骨炎消方中这三个成分对骨关节炎的发病机制具有一定的影响作用,其可通过抑制炎症反应,调节细胞在生长、凋亡及脂质过氧化等方面发挥重要作用,进而可以降低OA的病理变化,并缓解疾病的症状,延迟病程的进展。

高效液相色谱法测定砀山秋梨膏中原儿茶酸含量

建立了高效液相色谱法测定砀山秋梨膏中原儿茶酸含量的分析方法。实验采用EcoPak120 C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以2%甲酸溶液+乙腈(95+5)为流动相进行等度洗脱,流量为1.0 mL·min^(-1),检测波长为260 nm,柱温为40℃。原儿茶酸在0.1~10.0 mg·L^(-1)具有良好的线性关系,相关系数大于0.999,方法检出限为0.1 mg·L^(-1),方法定量限为0.3 mg·L^(-1),在3个加标浓度下的平均回收率为91.5%~108.6%,相对标准偏差为0.62%~0.73%。该方法样品预处理操作简单,目标峰实现较好分离,方法检出限较低、加标回收率高、方法重复性好,测定结果准确可靠,适用于砀山秋梨膏的质量控制,可为砀山秋梨膏生产企业和市场监管部门提供技术依据。

HPLC双波长法同时测定骨碎补中原儿茶酸、新北美圣草苷和柚皮苷的含量

目的:建立采用高效液相色谱(HPLC)双波长法同时测定骨碎补中原儿茶酸、新北美圣草苷和柚皮苷含量的方法。方法:用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 m,5 m)色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸水溶液进行梯度洗脱,流速1 ml/min,柱温30℃,检测波长260 nm(原儿茶酸)、283 nm(新北美圣草苷和柚皮苷),进样量20μl。结果:3个待测成分与相邻色谱峰分离度大于1.5,原儿茶酸、新北美圣草苷、柚皮苷分别在2.472~17.303μg/ml、12.226~85.579μg/ml和12.143~85.003μg/ml范围内线性关系良好(均为r=1.0000);精密度(n=6)、重复性(n=6)、稳定性(48 h内)试验的RSD均低于1.0%;平均回收率在95.87%~99.09%,RSD%(n=6)均低于1.0%。结论:该方法操作简便、专属性强、准确度高,可为骨碎补药材的质量控制提供参考。

毛细管电泳法分离丹参水溶性有效成分——丹参素、原儿茶醛和原儿茶酸

毛细管电泳法分离丹参水溶性有效成分丹参素 (DSS)、原儿茶醛 (PAH)和原儿茶酸 (PA )。分别考察电渗流改向剂十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)的浓度、电泳缓冲液 p H值及电解质浓度、有机添加剂种类及浓度、运行电压、样品溶剂组成 ,以及检测波长等因素对有机阴离子类分析对象的峰迁移时间、分辨率、柱效的影响 ,优化选择的分离条件为 :以 p H为 7.0 ,含 0 .5 m mol/ L CTAB,浓度为 2 0 0 mm ol/ L的磷酸盐溶液与乙腈按 2 0∶ 5混合配制电泳缓冲液 ,在 75 μm(id)× 34 .5 (eff. 30 ) cm的毛细管柱 (柱温控制于 2 0℃ )上 ,10 k V(6 s)电迁移进样 ,运行电压为 8k V。在 8min内能将以 2 0 %乙腈 -水为溶剂的样品 ,即内标 (对羟基苯甲酸 ,p- HBA) ,DSS、PAH和 PA完全基线分离 ,柱效达 40万 /米理论塔板数。

RP-HPLC法测定滇桂艾纳香中原儿茶酸与原儿茶醛的含量

目的:采用高效液相色谱法测定了滇桂艾纳香中原儿茶酸、原儿茶醛的含量.方法:Lichrocart C18(250×4 mm)柱;流动相:甲醇-水(冰醋酸调pH值2.8)(15∶ 85);检测波长为256 nm.原儿茶酸线性范围0.057～0.57 μg,相关系数r＝0.99999,平均加样回收率97.60%,RSD 0.45%(n＝5).原儿茶醛线性范围0.03～0.30 μg,相关系数r＝0.9997,平均加样回收率99.44%,RSD 1.52%(n＝5).结论:方法简便,结果准确,可用于该中药的质量控制.

没食子酸和原儿茶酸在大鼠肠道菌群中的代谢研究

目的研究大鼠肠道菌群对没食子酸和原儿茶酸2个单体成分的代谢作用。方法建立UHPLC-Q-TOF/MS检测条件,流动相为体积分数0.1%甲酸水溶液(A)-体积分数0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱,流速为0.3 m L·min-1,扫描方式为电喷雾(ESI)负离子模式。采用负离子和多反应离子监测模式分析没食子酸和原儿茶酸分别与大鼠肠道菌群共孵育后的代谢产物。结果从药物菌群孵育液中鉴定出没食子酸和原儿茶酸在大鼠肠道细菌各种酶的作用下发生脱羧和甲基化反应。结论阐明了没食子酸和原儿茶酸在大鼠肠道菌群中的代谢特征。