人巨细胞病毒pp65特异性抗体测定在原发感染诊断中的应用

目的通过测定患者单份血清人巨细胞病毒(HCMV)pp65特异性IgM抗体和IgG亲和指数(AI),建立HCMV原发感染的临床判断标准。方法从临床收集40份患儿血清和尿标本,以本室自制的pp65为抗原,运用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标本中HCMVpp65特异性IgM抗体;同时通过尿素变性实验,以6M尿素作为温和蛋白变性剂,测定HCMVpp65IgGAI。尿标本常规处理后接种人胚成纤维(HF)细胞进行病毒分离,观察HCMV特异性细胞病变效应(CPE),聚合酶链反应(PCR)试验检测细胞培养物UL83基因,间接免疫荧光试验检测细胞玻片HCMV抗原。并将病毒分离结果同血清学方法进行比较。结果40例标本中,IgM阳性13例,IgG阳性30例,其中,仅IgM阳性4例,病毒分离结果亦为阳性,可诊断为原发感染;30例IgG阳性标本中,2种抗体均为阳性9例(A组),其中,5例AI<50%,病毒分离结果均为阳性,判断为原发感染;1例AI在50%与60%之间,为可疑原发感染,需要进一步鉴定;3例AI>60%,判断为继发感染。IgG阳性21例(B组),其中仅3例(14.29%)AI<50%,但病毒分离结果为阴性,提示患者不久前曾发生HCMV原发感染,特异性IgM抗体已经转阴,病毒进入潜伏状态;余18例患者AI均>60%,判断为继发感染;2种抗体均为阴性的标本有6例,病毒分离结果亦为阴性,说明患者未被感染。统计学分析,A组与B组之间差异有统计学意义(P<0.05)。血清学方法与病毒分离比较,一致率为75.49%,该方法灵敏度为100%,特异度为87.10%,准确度为90.00%。结论以HCMVpp65重组蛋白为抗原检测特异性抗体以及相应IgGAI的ELISA,可快速诊断HCMV原发感染和继发感染;该方法具有高度特异性与敏感性,操作简便,重复性好,具有良好的临床应用前景。

区分孕期巨细胞病毒原发与非原发感染的ELISA方法的研究

目的:根据机体对巨细胞病毒重组抗原pp52和pp150不同的IgG免疫反应,建立一种快速、简便和适用的ELISA方法,用于区分孕妇巨细胞病毒近期原发与非原发感染。方法:应用间接ELISA方法测定巨细胞病毒两种重组抗原pp52和pp150 IgG,计算pp52 OD与pp150 OD的比值(pp52 OD/pp150 OD)。结果:共检测858份血清,其中812例为既往感染,46例为活动性感染(15例为原发感染、31例为继发或再感染)。当以pp52 OD/pp150 OD比值>1.5作为原发感染标准时,4组的阳性率分别为1.5%、32.6%、66.7%和16.1%,各组间差异有统计学意义(P<0.05),方法的敏感性和特异性分别为66.7%和98%。结论:本研究建立的测定巨细胞病毒重组蛋白pp52 OD/pp150 OD的酶联免疫吸附方法是辅助区分巨细胞病毒原发与非原发感染的较好的血清学方法,有待扩大样本量进一步证实。

检测特异性IgG亲和力指数诊断围产期CMV原发感染的临床研究

目的探讨CMVIgG亲和力指数诊断围产期CMV原发感染的临床意义。方法根据孕妇血清CMV抗体的不同分为3组对照研究其CMVIgG亲和力指数。A组为42例CMVIgG阳转的孕妇;B组为32例CMVIgG抗体阳性的孕妇;C组为613例CMVIgG抗体阳性但CMVIgM抗体阴性的孕妇。结果A组CMVIgG亲和力指数小于30%的发生率明显高于其他组。CMVIgG亲和力指数小于30%的孕妇生产的新生儿中先天性CMV感染发生率明显高于其他组。结论CMVIgG亲和力指数小于30%是1个非常有用的判断指标。临床中通过对这些孕妇的监测有利于降低新生儿先天性CMV感染的发生率。

测定抗HCMV-IgG抗体亲合力指数鉴别原发感染和再激活感染

目的通过抗体亲合力指数(AI)鉴别人巨细胞病毒(HCMV)原发感染和再次或再激活感染。方法ELISA测定50例患者血浆(包括8例为系列标本)抗HCMV-IgM和抗HCMV-IgG,温育法测定血浆抗HCMV-IgG抗体AI,同时提取白细胞DNA用巢式PCR检测HCMV DNA。结果高浓度抗HCMV-IgG影响温育法检测AI;4例抗HCMV-IgM强阳性标本中3例AI<30%;DNA和抗HCMV-IgM均阴性组17例标本中15例(88.2%)抗HCMV-IgG为中等或高亲合力;根据8例患者抗HCMV-IgG AI的动态变化,其中2例诊断为原发感染。结论温育法测定血浆抗HCMV-IgG AI能够鉴别HCMV原发感染和再次或再激活感染。

巨细胞病毒原发感染与非原发感染的鉴别诊断方法

目的建立一种快速、简便和实用的测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数的方法,作为有效的诊断工具,用于区分孕妇巨细胞病毒近期原发与非原发感染(继发、再感染及持续感染)。方法用标准的间接ELISA技术测定巨细胞病毒IgG抗体亲和指数(CMV-IgGAI),以35mmol/L浓度的二乙胺(温和蛋白变性剂)作为洗脱液。结果通过比较4种温和蛋白变性剂对检测方法各个环节的影响,确定了检测方法的最佳工艺流程;对127份血清标本进行了检测,其中84例为既往感染标本、17例继发感染标本、15例可疑原发感染和11例原发感染标本,以CMV-IgGAI<40.0%作为诊断CMV原发感染的临界值,其方法的灵敏度为72.7%,特异性为98.8%,方法的可用度为73.5%。结论用35.0mmol/L浓度的二乙胺洗脱1次,10min的方法适用于CMV-IgGAI的测定,目前认为该测定联合CMV-IgM检测是区分原发与非原发CMV感染的最佳血清学方法之一。

Let-7在KSHV原发感染过程中的表达变化

为研究在KSHV原发感染过程中Let-7表达水平的变化情况。采用20ng/mL TPA诱导培养BCBL-1细胞4d,收集并裂解细胞;超速离心制备KSHV病毒颗粒;感染293T细胞,采用实时定量聚合酶链反应(quantitative Real-timepolymerase chain reaction,qRT-PCR)检测感染1-6d内Let-7的表达水平。结果显示,Let-7在KSHV原发感染293T细胞的1-4d表达水平均下调,感染后1-2d表达水平最低。7a、7b、7g、7i均下调为对照细胞的0.01倍以下。之后随感染天数增加Let-7表达水平逐渐增加,其中Let-7c(7d、7f)表达水平在第6天分别达到未感染对照细胞的0.9倍,Let-7b、Let-7e、mir-98在第6天的表达水平与对照细胞接近除了Let-7e上调3倍。由此可知,Let-7在KSHV原发感染过程中总体表现为下调趋势。因此推测,Let-7可能在KSHV原发感染过程中产生重要调控作用。

两种蛋白变性剂检测巨细胞病毒IgG抗体亲和指数对孕期原发感染诊断的探讨

目的探讨测定巨细胞病毒IgG抗体(CMV蛳IgG)亲和指数(AI)的方法对诊断孕期巨细胞病毒(CMV)原发性感染的可行性。方法以35mmol/L二乙胺和8mol/L脲素作为温和蛋白变性剂,采用间接ELISA方法检测CMV蛳IgGAI。结果检测111份血清标本,其中68例为CMV既往感染,43例为CMV近期原发或近期再感染。CMV蛳IgM阳性、CMV蛳IgGAI<45%作为近期原发感染;AI>55%作为既往感染。脲素和二乙胺方法的敏感性分别为50%和64.3%,特异性分别为97.1%、91.2%。结论用35mmol/L二乙胺洗脱一次10min的简易快速的方法检测CMV蛳IgGAI是可行的。CMV蛳IgGAI和CMV蛳IgM联合检测可能是目前用血清学方法区分近期原发与既往感染的较好方法之一。

63株厌氧菌血流感染的病原菌分析及原发感染疾病调查

目的了解引起血流感染的厌氧菌病原菌的分布情况及其耐药性,并调查原发感染疾病,以期指导临床有效控制厌氧菌血流感染的发生。方法采用Bac T/ALERT 3D全自动血培养仪进行血液检测,ATB鉴定仪进行病原菌鉴定和体外药物敏感性试验。结果 63株厌氧菌血流感染病原菌主要是产气荚膜杆菌(31.7%)、脆弱拟杆菌(25.4%)和具核梭杆菌(11.1%)。这些病原菌对甲硝唑、碳青霉烯类抗菌药物、氯霉素和酶抑制剂药物的耐药率均<10.0%,其中对甲硝唑的耐药率<2.0%;对青霉素类抗菌药物和克林霉素的耐药率>30.0%。革兰阳性厌氧菌对头孢西丁和头孢替坦敏感,革兰阴性厌氧菌对头孢西丁和头孢替坦的耐药率分别为15.4%和20.5%。主要原发感染疾病为肠道术后感染(22.2%)、脓胸(17.5%)和阑尾穿孔(11.1%)。结论致厌氧菌血流感染的病原菌主要是革兰阴性无芽胞厌氧杆菌和革兰阳性梭状芽胞杆菌;在药物敏感性试验结果未出来之前,临床医生可选择甲硝唑、碳青霉烯类抗菌药物和酶抑制剂作为抗厌氧菌的经验用药。引起厌氧菌血流感染的原发感染疾病主要为肠道、胸腔、女性生殖道的多种疾病,尽早做好原发疾病的防控工作,将有利于减少厌氧菌血流感染的发生和发展。

HIV原发感染者自然杀伤样T细胞NKG2A/NKG2D变化的研究

目的深入了解人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)原发感染者(primary HIV infection,PHI)NKT样细胞表面NKG2A/NKG2D受体表达的变化。方法选取25例未经高效抗逆转录病毒治疗的HIV原发感染者和27例HIV抗体阴性健康对照,用流式细胞仪检测研究对象外周血NKT样细胞表面NKG2D和NKG2A的表达。结果 HIV原发感染者NKT样细胞绝对数和百分率显著低于健康对照(P<0.01)。HIV原发感染者NKT样细胞表面NKG2A、NKG2D受体表达与健康对照并无显著差异。HIV原发感染者病毒调定点低组NKG2A+NKT样细胞、NKG2A+NKG2D-NKT样细胞以及NKG2A+NKG2D+NKT样细胞百分率均显著低于病毒调定点高组(P<0.05);NKT细胞绝对数和百分率、NKG2D+NKT样细胞、NKG2D+NKG2A-NKT样细胞百分率在两组间相似,没有显著性差异。NKG2A+NKT细胞的百分比与病毒载量正相关(R=0.430,P=0.032)。结论 NKT样细胞数量以及其表面NKG2A受体的表达可作为HIV疾病进程的预测指标之一。

特异性IgG抗体亲和指数在人梅毒原发感染中的诊断价值

目的:探讨梅毒螺旋体特异性IgG抗体(Tp-IgG)亲和指数(AI)在人梅毒原发感染诊断中应用的可行性。方法:选取2019年4月—2021年4月间我院收治的梅毒螺旋体感染患者87例作为实验对象,采用间接ELISA法对Tp-IgG、Tp-IgM抗体进行检测,依据测定结果进行分组:既往感染组(A组)、继发/再感染组(B组)、原发感染组(C组),分别检测各组患者Tp-IgG AI差异。结果:87例梅毒螺旋体感染患者经TP-IgG及TP-IgM检测结果显示,既往感染组(A组)52例(59.77%),继发/再发感染组(B组)14例(16.09%),原发感染组(C组)21例(24.14%);以TP-IgG与TP-IgM检测结果将患者分为原发感染组(21例)及非原发感染组(66例),分析显示当TP-IgG AI判断标准在>35%且<40%时Youden指数最高(0.732)。非原发感染组患者AI值为(68.52±14.11),显著高于原发感染组的(40.36±13.05)(t=8.105,P<0.05);非原发感染组患者AI值多分布在45%~50%,而原发感染组多集中在<35%。结论:TP-IgG AI判断标准在35%~40%时对原发人梅毒螺旋体感染诊断的敏感度、特异度较高,能够作为鉴别原发性梅毒感染的诊断措施。

原发感染期间与HIV相关的B细胞功能异常

据Medscape．com 12月23日报道（原载AIDS 2006，20：35—40），欧洲研究者发现慢性HIV-1感染者B细胞的异常始于原发感染HIV-1。在感染HIV-1后马上开始抗逆转录病毒治疗可有助于预防最早的这些损害。

新生儿先天性症状性巨细胞病毒感染与母源性原发及复发CMV感染的相关性

目的:探讨新生儿先天性症状性巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)感染与母源性原发及复发CMV感染的相关性。方法:选取48例先天性症状性CMV感染新生儿及其母亲为感染组,30例未感染CMV新生儿及其母亲为阴性组,应用化学发光法(CLIA)检测两组病例外周血特异性抗体IgM/IgG(CMV-IgM/IgG)及CMV-IgG亲合力水平,荧光定量PCR法检测两组母亲乳汁、新生儿外周血及尿液中CMV-DNA含量,分析比较其检测结果的差异并回顾性分析比较了两组母亲孕早期CMV-IgG的浓度水平与本次结果的差异。结果:感染组母亲外周血CMV-IgG抗体水平及乳汁CMV-DNA阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);病例组患儿与母亲CMV特异性IgG抗体比值小于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);感染组子母间IgG测定值为负相关性,差异有统计学意义(P<0.01);阴性组子母间IgG测定值为正相关性,差异有统计学意义(P<0.01);感染组母亲孕早期CMV-IgG浓度水平显著低于本次结果,差异有统计学意义(P<0.01);阴性组母亲孕早期CMV-IgG浓度水平与本次结果无显著性差异(P>0.05)。结论:孕妇体内CMV活化或再感染导致CMV-IgG水平升高,是新生儿先天性症状性CMV感染的高危因素,孕期应关注CMV-IgM/IgG动态监测。

人类免疫缺陷病毒原发感染的实验室检测

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）的原发感染期（primary infection）指从病毒进入人体到抗体产生后的3~12个月,根据其临床表现及机体免疫应答的出现又可进一步分为急性感染期（acute infection）和之后的新近感染期（recent infection）。

牙髓卟啉单胞菌在原发性感染和再感染根管内的定植

目的采用16s r DNA PCR和实时荧光定量聚合酶链反应(RTFQ-PCR)分析和比较牙髓卟啉单胞菌(P.endodontalis)在原发性感染和再感染根管中的定植情况。方法将120例慢性根尖周炎患者的120颗单根管患牙按原发性感染和再感染分为2组,每组60颗。采用16s r DNA PCR分析P.endodontalis在两种感染根管内的检出率,对于P.endodontalis检出阳性者用RTFQ-PCR比较P.endodontalis在两种感染根管内的DNA相对表达量。结果 P.endodontalis在原发性感染根管内的检出率明显高于再感染根管的检出率(P=0.001)。RTFQ-PCR检测结果表明P.endodontalis在原发性感染根管内的DNA表达量和再感染根管内DNA表达量差异无统计学意义(P=0.303)。结论 P.endodontalis在原发性感染和再感染根管内均有定植,但与原发性感染根管关系更为密切。

原发与再激活EB病毒感染相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症的比较分析

目的:比较原发性EB病毒(EBV)感染及EBV再激活相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)患儿的临床特征,探讨不同EBV感染状态对HLH临床指标及预后的影响。方法:收集河南省儿童医院2016年6月至2021年6月收治的51例EBV相关HLH患儿的临床资料,根据血浆EBV抗体谱检测结果,将患者分为EBV原发性感染HLH组(18例)和EBV再激活HLH组(33例)。分析比较两组的临床特征、实验室指标及预后。结果:两组患者在年龄、性别、肝肿大、脾肿大、淋巴结肿大、外周血中性粒细胞数、血红蛋白含量、血小板数、血浆EBV-DNA载量、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、纤维蛋白原、甘油三酯、铁蛋白、骨髓噬血现象、NK细胞活性、sCD25等方面均无显著差异(P>0.05),EBV再激活HLH组中枢神经系统受累及CD4/CD8明显高于原发EBV感染HLH组(P<0.05),而总胆红素明显低于原发EBV感染HLH组(P<0.05);参照HLH-2004方案治疗后,EBV再激活HLH组患者的缓解率、5年OS率、5年EFS率均明显低于EBV原发感染HLH组(P<0.05)。结论:EBV再激活HLH比原发感染HLH更易引起中枢受累,预后更差,需加强治疗。

不同年龄段儿童原发性EB病毒感染发病的临床特点

目的:探讨不同年龄段儿童原发性EB病毒感染(EBI)发病的临床特点。方法:回顾性分析330例住院患儿的临床资料,分为婴儿、幼儿、学龄前期、学龄期4组。结果:婴儿组24例(7.27%)、幼儿组172例(52.12%)、学龄前期组88例(26.67%)、学龄期组46例(13.94%)。季节分布幼儿组秋季高发,其余各组春季高发。各年龄段临床表现中均以传染性单核细胞增多症(IM)发生率最高(43.6%),呼吸道感染(41.2%)次之,其中婴儿组咳嗽、皮疹发生率最高(P<0.05),学龄前期组肝脾大发生率最高,分别为68.2%、59.1%;检验方面血CD4+/CD8+随着年龄增加逐渐降低(P<0.05),婴儿组肝损最大ALT(241±101.85)IU/L,婴儿组血清EBV-DNA阳性率为87%,EBV-CA-Ig M阳性率为13%,相差最大。结论:不同年龄组EBI在发病高峰、季节分布、临床表现、检验方面不完全相同,血清EBV-DNA有助于早期诊断。

原发性感染性心内膜炎的外科治疗

目的 :总结 4 7例原发性感染性心内膜炎的外科治疗经验。方法 :1992年 1月至 2 0 0 2年 12月连续手术治疗感染性心内膜炎 4 7例 ,手术原则是清除感染病灶 ,纠治瓣膜病变及心脏畸形。其中心脏瓣膜置换 4 0例 ,二尖瓣成形 2例 ,三尖瓣成形 1例。同期行室间隔缺损修补 19例 ,动脉导管未闭直视缝合 4例。结果 :术后早期死亡 1例 ,病死率 2 17%。随访 4 0例 ,随访率 86 95 % ,随访时间 3～ 10 8个月 ,无 1例心内膜炎复发。结论 :外科治疗感染性心内膜炎的远期效果满意 ,把握手术指征 ,适时手术对治愈本病至关重要。

原发性腰椎间隙感染病灶清除植骨融合内固定临床疗效分析

目的探讨原发性腰椎间隙感染后经一期后路病灶清除、植骨融合内固定并术后闭合式伤口灌注冲洗治疗效果。方法回顾性分析于2013年1月至2015年6月在西安市红会医院脊柱外科住院治疗的腰椎间隙感染患者36例,其中女性21例,男性15例,平均年龄61岁(43~68岁);所有患者均为单一的腰椎间隙感染,其中L_(2~3)3例,L_(3~4)11例,L_(4~5)18例,L_5S_14例;所有患者诊断明确后均行一期后路病灶清除、自体髂骨植骨融合内固定,术后伤口闭合式灌注冲洗2~3周;术中留取标本行病理学检查及细菌培养+药敏检测,术后常规应用抗生素治疗。结果所有36例患者手术均获得成功,手术时间平均(101±16.3)min,术中失血量180~550mL,平均(368±75)mL,细菌培养结果提示6例患者为金黄色葡萄球菌,2例患者为铜绿假单胞杆菌,1例为大肠埃希菌,其余27例患者均提示阴性,病理学检查结果提示符合急慢性炎性反应表现。术后3周,所有患者切口均甲级愈合,血常规、血沉、C反应蛋白均明显下降,血清降钙素原恢复至正常水平,术后3个月,患者炎性指标均恢复至正常。术后随访6~18个月,所有患者腰背部疼痛症状均明显缓解,无感染复发病例,椎间隙植骨均获得骨性融合。结论一期后路病灶清除、植骨融合内固定、术后伤口闭合式持续灌注冲洗治疗原发性腰椎间隙感染,具有病灶清除彻底、操作简便易行、避免二次手术创伤的优点,可使患者获得满意的临床疗效。

EB病毒原发性感染研究进展

EB病毒（Epstein—Barr virus，EBV）是Epstein和Barr于1964年首次用电镜在非洲儿童Burkitt淋巴瘤细胞中观察到的疱疹病毒样颗粒4年后EBV被确定为传染性单核细胞增多症的病原体。EBV属于疱疹病毒属γ亚科，是一种常见的人类疱疹病毒，具有嗜B细胞性，人群普遍易感，约有90％的成人血清中可检测到EBV阳性抗体，感染后为终生携带病毒。EBV感染在发展中国家的发病高峰年龄为2～6岁，在发达国家则多见于青少年，