桫椤原叶体增殖及幼孢子体形成试验

采用正交试验,研究培养基类型、激素配比及浓度、蔗糖浓度对桫椤原叶体增殖及幼孢子体形成的影响。结果表明:不同NAA和蔗糖浓度对原叶体增殖的影响差异极显著,不同BA浓度对幼孢子体的形成影响极显著;桫椤原叶体增殖的适宜配方为MS+0.5 mg/L NAA+0.01 mg/L BA+0.1 mg/L TDZ+20 g/L蔗糖,增殖率为20.31%;合适分化培养基为N6+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L TDZ+20 g/L蔗糖,分化率为13.60%。试验结果对桫椤孢子再生体系的建立提供技术支撑。

不同比例和不同N含量MS培养基对蕨菜原叶体生长及受精的影响

采用不同比例和不同N含量的MS培养基,对蕨菜孢子萌发后的原叶体进行培养,以观测最适宜原叶体生长和受精的MS培养基比例及N浓度。试验结果表明,1/2MS培养基为促进原叶体受精的最适培养基;全MS培养基对前期孢子萌发效果最好,但后期不利于受精。N含量为4/5的MS培养基最有利于原叶体受精;全N含量的MS培养基致使原叶体营养生长过旺,不利于受精;而N含量较低的MS培养基致使原叶体生长瘦弱,受精效果也较差。

蕨菜原叶体组织培养及植株再生

通过孢子萌发、产生原叶体,将叶原体进行增殖培养,增殖的原叶体植栽、生根、出苗。为蕨菜组织培养植株再生,苗木快繁,探索一条新的途径和方法。

不同培养条件对紫萁原叶体发育的影响

研究不同碳源浓度、不同激素水平、不同孢子成熟度等条件对紫萁(Osmunda japonica Thund.)原叶体萌发的影响。结果表明,蔗糖浓度为2%的培养基有利于孢子的萌发和原叶体的形成;随着无机盐浓度的降低,孢子萌发率上升,以1/4MS浓度最佳;1.0 mg/L 6-BA更有利于原叶体的发育;0.01 mg/L NAA上的原叶体长势较好;0.1~1.0 mg/L 2,4-D均有利于原叶体的发育,以0.5 mg/L为最佳浓度;还未完全成熟的孢子的萌发率较高,最高达50%以上。培养基配方为2%蔗糖+1/4MS+1 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D和孢子未完全成熟等条件更有利于紫萁原叶体的发育。

金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化条件的优化

为探究不同浓度的无机盐、蔗糖、KT、NAA和6-BA等对金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的影响,采用正交设计实验方法,设置5因素4水平正交试验,筛选金毛狗脊原叶体增殖和孢子体转化的最佳培养基。结果表明,原叶体增殖最佳培养基为1/2MS+2%蔗糖+0.1 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT。孢子体转化最佳培养基为1/4MS+1%蔗糖+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA。

蕨类植物贯众原叶体的毛状体观察

大多数蕨类植物的原叶体是裸露的，不具有任何毛状体。毛状体一般位于原叶体边缘或表面。有的毛状体在原叶体发育早期出现，有的仅在成熟原叶体上形成。原叶体毛状体的形态结构是同型孢子蕨类植物属的特征，亲缘关系较近的属具有类似的毛状体，而且毛状体在原叶体生长发育过程中是稳定性状。因此，在蕨类植物中毛状体是重要的分类依据。

蛇足石杉原叶体的培养及孢子体的诱导

以蛇足石杉孢子囊为材料培养得到蛇足石杉原叶体,进一步对原叶体进行增殖培养并诱导产生蛇足石杉孢子体。结果表明,适合蛇足石杉原叶体增殖的培养基是无激素的MS培养基,在该培养基上培养60d,原叶体的增殖倍数达到131·1;较高浓度的外源激素对原叶体的增殖有抑制作用,而低浓度的外源激素对原叶体的增殖影响不大;原叶体在无激素培养基上培养90d,孢子体的诱导频率为4·0%;通过HPLC检测蛇足石杉原叶体中石杉碱甲的含量为0·0059%,是野生孢子体中含量的0·25倍。

铁线蕨原叶体背面腹面都可产生生殖器官

据目前国内外高校植物学教材记载,真蕨类植物的精子器、颈卵器和假根均产生于原叶体(配子体)的腹面(下面),但我们发现在人工培养基上培养的铁线蕨(Adianlus capillus-veneris L.)的原叶体大多在腹面和背面均产生精子器、颈卵器和假根。

东亚对开蕨离体快繁的研究

利用东亚对开蕨(Phyllitis japonica Kom.)孢子叶为外植体,进行了组培快繁的研究。结果表明:不同接种方式、不同的培养方法对东亚对开蕨孢子萌发和原叶体生长均有明显影响,破碎孢子囊后的孢子以及液体培养中的孢子萌发较快;原叶体在无植物生长调节剂的MS培养基中以5倍的速率增殖;喷施0.1%KH2PO4溶液的试管外培养更适于原叶体向孢子体植株的转化。

江南星蕨配子体形态发育的研究

用无机培养基和土壤培养基分别培养江南星蕨(Microsoriumfortunei(Moore)Ching)孢子,显微镜下观察记录其孢子萌发及配子体形态发育过程。结果表明:孢子黄色,赤道面观豆形,极面观椭圆形,单裂缝,外壁具刺状纹饰。接种后7～12d孢子萌发,萌发类型为书带蕨型,配子体发育为槲蕨型。接种后25d左右发育为片状体,片状体形成顶端细胞的时间较晚,有的甚至不形成。无机培养基培养的原叶体常在基部发生营养繁殖。毛状体出现在片状体形成之后,数量丰富,多为单细胞,分布于原叶体背腹面及边缘。接种后60d左右发育形成幼原叶体,成熟原叶体呈心脏形。接种后80d左右开始有性器官出现,精子器的出现较颈卵器早10d左右。颈卵器成熟后,颈部常向原叶体基部倾斜或弯曲。

水蕨配子体发育的研究

研究了我国产水蕨(Ceratopteristhalictroides)配子体发育的全过程,水蕨孢子为四面体型,三裂缝,孢子萌发为向心型,丝状体4～8个细胞长,无明显的顶端细胞,丝状体顶部细胞同时分裂形成片状体,分生组织位于片状体一侧,使原叶体成为不对称的心脏形,原叶体发育为水蕨型,无毛状体,精子器和颈卵器较大,该配子体表现为较原始的性状。

光照条件及外源物质对蕨菜孢子萌发成苗的影响

为了提高蕨菜孢子培养成苗率 ,研究了不同光照条件及外源物质 (GA3 、 6 BA、腐殖酸等 )对孢子萌发成苗的影响。结果表明 :孢子萌发及生长发育速度与光照强度密切相关 ,以试验中所设最高光强180 0lx连续光照下的孢子萌发及成苗最好 ,而光强低于 10 0 0lx时孢子萌发速度极慢且不能成苗 ;无光照时孢子不能萌发 ;GA3 对孢子萌发及生长发育具有明显促进作用 ,0 .2mg/LGA3 处理成苗率最高 ,达6 1.4 2 %。光照条件与外源物质没有显著的互作效应。

蕨类植物配子体发育的研究

研究了福建观音座莲、华南紫萁、粗齿紫萁、粗齿桫椤、溪边凤尾蕨、蜈蚣草、狭翅铁角蕨、乌毛蕨等21种蕨类植物的配子体发育过程。结果如下:(1)对孢子和配子体性状的UPG-MA法聚类分析结果表明,秦仁昌分类系统中亲缘关系近的种类在孢子和配子体性状方面相似性也高,但也有少数例外的情况;(2)蕨类植物的配子体发育有许多共性,但也存在许多不同点;(3)配子体发育中出现的某些性状是稳定的,可以作为分类的依据。

薇菜孢子人工繁殖的环境条件

薇菜孢子适于在4～5℃低温下保存；薇菜孢子具有休眠特性,但光照可打破其休眠；孢子萌发温度为10～30℃,适宜温度为20～28℃,温度超过30℃时孢子萌发开始受抑制；原叶体可耐受2℃的低温,受精适宜温度为20～28℃；孢子体生长最适温度为25～28℃；孢子体繁殖的光照条件以2000lx为佳；A3(腐熟有机肥+草炭土+山林土)可作为薇菜孢子体繁殖技术推广的最佳基质.

紫萁孢子繁殖快速成苗技术研究

为了筛选出最佳的紫萁孢子育苗基质,弄清紫萁孢子育苗所需的环境条件,利用在湖北民族学院和杭州城郊两地采集的紫萁孢子,以壤土、山林腐殖土、红砂壤为试验基质进行紫萁孢子遮荫条件下育苗研究。结果表明:在保湿、控制温度、覆盖遮光率为75%的遮阳网的条件下孢子发芽率高,能正常形成原叶体,继续培养均能进入有性世代形成孢子体幼苗,其中在山林腐殖土和壤土按1:1的比例混合的基质上最适于孢子萌发和幼苗生长,出苗量可达3500株/m2;在杭州采集的紫萁孢子萌发后形成的原叶体、孢子体均比在湖北民族学院采集的耐高温性好。

不同因素对石韦孢子萌发及生长的影响

以石韦孢子为外植体,研究不同蔗糖浓度、生长调节剂和培养基等对石韦孢子萌发生长的影响。结果表明,1%～2%蔗糖有利于孢子的萌发生长,萌发率达80%以上;无机盐浓度较低的1/8MS和Knop,s培养基较利于孢子的萌发,萌发时间仅为6d,萌发率分别为83.2%、84.1%;在培养基中加入1.0mg/L NAA、0.5mg/L 6-BA,可以缩短孢子萌发时间,并获得最高的萌发率。此外,1/2MS培养基比较适合原叶体的增殖;以河沙为基质的不完全培养基比较适合孢子体诱导,诱导率达90%以上。

香鳞毛蕨配子体发育的研究

研究了香鳞毛蕨（Dryopteris fragrans（L.）Schot）配子体的发育过程。结果发现孢子极面观为椭圆形，赤道面观为半圆形，单裂缝。孢子萌发为书带蕨型；丝状体2～9个细胞长，有明显顶端细胞，可形成多细胞的广阔板状片状体；片状体顶端分生组织继续分裂，发育为幼原叶体；原叶体发育为三叉蕨型；毛状体数量丰富，均为羊细胞；颈卵器和精子器几乎同时形成，较小；成熟原叶体倒卵状心脏形。该配子体表现为进化性状。

剑叶凤尾蕨配子体发育的研究

剑叶凤尾蕨(Pterisensiformis)是凤尾蕨科(Pteridaceae)凤尾蕨属(Pteris)多年生常绿草本植物,具有较高的观赏和药用价值。但是,目前对其繁殖过程还缺乏了解,限制了剑叶凤尾蕨资源的开发利用。本文报道了成功地采用混合土培养剑叶凤尾蕨的孢子,并系统地观察记录其孢子萌发及配子体发育过程。剑叶凤尾蕨的孢子呈褐色,赤道面观豆形,极面观三角形,单裂缝。播种1周左右孢子萌发,萌发类型为书带蕨型,配子体发育为水蕨型。播种3周左右发育为片状体。幼原叶体不对称,成熟原叶体裸露,无毛状体,呈心脏形。播种5周左右开始有性器官出现,精子器由3细胞组成,成熟颈卵器颈部由4列细胞组成,4层细胞高。原叶体受精后1个月内即可观察到从原叶体上生成的幼胚。该研究为园艺学研究提供了用孢子人工繁殖剑叶凤尾蕨的方法,也为分子生物学、遗传学和蕨类植物系统学研究提供了基础。

粤紫萁离体再生技术研究

粤紫萁(Osmunda mildei)为新近形成的自然杂交种,其分布区狭窄、种群个体数量少、有性繁殖能力极低。该文以孢子为外植体,以MS、3/4MS、1/2MS和1/4MS为基本培养基,探讨不同生长调节剂对粤紫萁孢子萌发、原叶体增殖和孢子体形成的影响。结果表明:粤紫萁孢子中极少的可育孢子在植物生长调节剂的作用下,能够萌发并发育形成原叶体;原叶体生长及增殖的最适组合为1/2MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1) NAA和1/2MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1) IBA;在1/4MS基本培养基中,原叶体增殖的同时生长发育完善,形成正常的幼孢子体,形成率达83.49%;孢子体最佳生根配方为MS+0.5 mg·L^(-1) IBA;组培苗在河沙∶黄土∶腐殖质=1∶1∶3的栽培基质中成活率在98%以上,且生长旺盛。综上结果,该研究为粤紫萁的人工繁育及其资源保护以及其他濒危蕨类植物的人工保育提供了参考。

扇蕨孢子的组织培养

1 植物名称 扇蕨[Neocheiropteris palmatopedata（Baker）Christ]。 2 材料类别 成熟孢子。 3 培养条件 孢子萌发培养基：（1）B5＋20g·L^-1蔗糖。原叶体增殖培养基：（1）B5＋20g·L^-1蔗糖；（2）1／2B5＋20g·L^-1蔗糖；（3）1／485＋20g·L^-1蔗糖；