去氢骆驼蓬碱诱发PC12细胞凋亡时对线粒体融合分裂的影响

目的探讨去氢骆驼蓬碱(HM)对PC12细胞线粒体功能损伤和线粒体融合分裂相关蛋白表达水平的影响。方法PC12细胞分为细胞对照组、HM组、线粒体分裂抑制剂Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、线粒体裂变激动剂WY14643组、HM+WY14643组,药物浓度均为1、10、25、50、100μmol·L^(-1),处理24 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,显微镜观察细胞形态;MitoTracker Red探针染色观察线粒体形态和纵横轴长度比值,JC-1染色检测线粒体膜电位,试剂盒检测ROS、ATP水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,免疫荧光染色法和Western blotting检测胱天蛋白酶3(caspase-3)、促凋亡蛋白(Bax)、细胞色素C(cyt-c)和线粒体融合蛋白(Mfn2)、线粒体分裂蛋白(Drp-1)的表达水平;电穿孔法转染Drp1的干扰序列,筛选转染效果好的siRNA序列,协同药物干预,通过荧光法、MTT法、免疫印迹法检测相关指标。结果MTT结果显示,与细胞对照组比较,HM组、Mdivi-1组、HM+Mdivi-1组、WY14643组和HM+WY14643组存活率显著下降(P<0.01),EC 50分别为(11.48±2.32)、(12.35±1.67)、(14.88±2.07)、(39.14±3.25)、(20.09±1.97)μmol·L^(-1),依此后续实验选择20μmol·L^(-1)浓度的HM、Mdivi-1和HM+Mdivi-1作为构建PC12细胞模型的工作浓度;显微镜和MitoTracker Red探针染色观察发现,药物组细胞密度呈不同程度减少,树枝状突起减少变圆;线粒体形态趋向圆形,纵横轴长度比值分别为细胞对照组(3.33±0.72)、HM组(2.19±0.58)、Mdivi-1组(2.45±0.44)、HM+Mdivi-1组(1.43±0.62)。JC-1染色检测结果显示,与细胞对照组相比,HM组线粒体模电位显著下降(P<0.01);ROS显著升高(P<0.01)、ATP水平下降(P<0.01),LDH酶活性上升(P<0.01);免疫荧光染色法和Western blotting结果显示,与细胞对照组比较,HM组促凋亡蛋白Bax、细胞色素C、胱天蛋白酶3表达水平均显著上升(均P<0.01);与细胞对照组比较,HM组细胞线粒体分裂相关蛋白Drp1表达水平显著上升(P<0.01),而线粒体融合相关蛋白Mfn2的表达水平显著下降(P<0.01);特异性干扰Drp1并协同HM干预后,各干扰组较各单独药物干预组PC12细胞存活率下降,Drp1和Mfn2表达下调,均差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论HM可通过ROS累积降低PC12细胞膜电位及ATP,进而激活caspase-3凋亡途径促使细胞凋亡,线粒体融合分裂可能参与HM造成PC12细胞的损伤,启动细胞线粒体途径凋亡。

去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴中EgTP53蛋白生物信息学表达的影响

目的基于生物信息学表达分析去氢骆驼蓬碱对细粒棘球蚴中EgTP53蛋白(Echinococcus granulosus of Tumor protein p53,EgTP53)的影响。方法将EgTP53蛋白与去氢骆驼蓬碱进行分子对接,从美国国家生物技术信息中心数据库(National Center for Biotechnology Information,NCBI)下载EgTP53的氨基酸序列,使用ProtParam蛋白分析工具进行EgTP53蛋白理化性质的预测,通过生信工具ProtScale进行疏水性的预测。使用SignalP5.0在线软件对信号肽进行预测,使用生物学在线软件工具TMHMM分析跨膜区域。借助NetPhos3.1在线软件预测磷酸化位点,利用SOMPA在线软件进行二级结构的预测。使用SWISS-MODEL在线软件对EgTP53的三级结构进行预测,采用IEDB在线软件进行B细胞抗原表位预测。使用MEGA6.0软件构建系统进化树并进行分析;采用实时荧光定量PCR技术检测去氢骆驼蓬碱作用后EgTP53蛋白的mRNA表达水平。结果分子对接结果显示,EgTP53与去氢骆驼蓬碱的对接能量为-4.44 kcal/mol,有良好的对接位点。生物信息学分析EgTP53氨基酸数量1108个,分子量121799.11,等电点9.29,属于亲水性蛋白,有一个信号肽,无跨膜区,有多个磷酸化位点,28个B细胞抗原表位。其中存在TUDOR蛋白结构域,存在2个BRCT保守蛋白结构域。EgTP53与亚洲带绦虫病、带状泡尾绦虫同属一个分支,与长膜带绦虫、矮小齿壳绦虫、微口膜壳绦虫同属绦虫纲,进化关系较近,与智人、家鼠、果蝇进化关系较远。实时荧光定量PCR结果显示去氢骆驼蓬碱干预组的EgTP53蛋白的mRNA表达较空白对照组明显上调。结论生物信息学分析表明EgTP53蛋白具有保守的功能结构域,对接点位稳定性良好,抗原表位多。

去氢骆驼蓬碱治疗细粒棘球蚴病的作用机制研究

目的 应用网络药理学方法预测去氢骆驼蓬碱(HM)治疗细粒棘球蚴病的作用机制。方法 从中药系统药理学数据库(TCMSP)、瑞士靶点预测数据库(SwissTargetPrediction)、药物银行数据库(Drugbank)获取HM相关基因,在基因卡数据库(GeneCards)、DISGENET数据库、DrugBank数据库获取细粒棘球蚴病的作用靶点,将HM的预测靶点和细粒棘球蚴病相关基因相互映射,得到HM作用细粒棘球蚴病的靶点基因,导入String数据库进行网络拓扑属性分析,筛选重要靶点蛋白,构建蛋白质-蛋白质互作(PPI)和成分-疾病-靶点网络。采用DAVID数据库进行基因本体论(GO)功能分析和Kyoto京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,筛选与DNA损伤相关的基因靶点。采用Autodock Vina软件及Pymol软件对相关靶点进行分子对接验证和展示。将活力不低于98%的细粒棘球蚴随机分为空白对照组、1%DMSO组、25μmol/L HM组、50μmol/L HM组、100μmol/L HM组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRTPCR)法、免疫印迹(Western blot)法体外验证HM干预细粒棘球蚴肿瘤蛋白P53(TP53)、拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)、染色体组蛋白H2A的变异体(H2AX)、共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)mRNA和蛋白表达水平。结果 共获得HM靶点105个,细粒棘球蚴病相关基因88个,二者共有靶点为2个。HM干预细粒棘球蚴病的作用靶点主要有促分裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、MAPK1、TP53、热休克蛋白90α家族A类成员1(HSPAA1)、MAPK14、Jun,机制可能涉及MAPK信号通路、受体酪氨酸激酶(ERBB)信号通路、DNA损伤与DNA修复通路、细胞凋亡等过程。体外验证结果显示,与空白对照组相比,25μmol/L HM组、50μmol/L HM组、100μmol/L HM组的TP53,TopoⅠmRNA和蛋白表达均呈下调趋势(P <0.05),H2AX,ATM mRNA和蛋白表达均呈上调趋势(P <0.05)。结论 HM可通过多种生物学过程和相关信号途径治疗细粒棘球蚴病,HM参与细粒棘球蚴病DNA损伤与DNA修复信号通路的调控作用,TP53,TopoⅠ,H2AX,ATM均可能是其作用靶点。该研究为进一步阐明HM治疗细粒棘球蚴病的分子机制奠定了基础。

去氢骆驼蓬碱抗骨肉瘤作用机制研究

目的探讨去氢骆驼蓬碱抗骨肉瘤的作用机制。方法本实验分为体外实验和体内实验。体外实验中,设置不同浓度的去氢骆驼蓬碱组及空白对照组,测定去氢骆驼蓬碱对处于生长期的人骨肉瘤细胞的影响:借助细胞活力测定(MTS)法对细胞增殖的影响进行探讨;通过划痕实验分析去氢骆驼蓬碱的侵袭能力,通过Transwell实验分析去氢骆驼蓬碱的迁移能力;应用流式细胞仪(FCM)分析去氢骆驼蓬碱对骨肉瘤细胞周期的影响,并观察其中的诱导凋亡效应及相关分子机制。体内实验开展裸鼠荷瘤实验,实验完毕后,比较肿瘤的重量、裸鼠的重量,并进行免疫组化切片对肝、肺、脾进行HE染色,观察其中的抗肿瘤效果。结果体外实验表明,去氢骆驼蓬碱对细胞增殖具有一定的抑制效果(P<0.05),且去氢骆驼蓬碱组的抗凋亡基因相对表达量、相对迁移能力以及侵袭能力明显低于空白对照组(P<0.05)。FCM分析显示,随着去氢骆驼蓬碱浓度的增加,凋亡率也明显增加(P<0.05)。体内实验表明,去氢骆驼蓬碱能够明显抑制Saos-2移植瘤。结论去氢骆驼蓬碱对骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭有明显的抑制作用,具有较高的应用价值,值得临床推广。

去氢骆驼蓬碱对炎症性肠病模型小鼠的防护作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱对炎症性肠病(IBD)模型小鼠肠道屏障的防护作用。方法将64只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白对照组(等体积水)、药物对照组(0.05 mg/mL去氢骆驼蓬碱)、模型组(等体积水)及药物观察组(0.05 mg/mL去氢骆驼蓬碱),各16只。在小鼠饮水中添加2%硫酸葡聚糖钠连续喂养7 d以复制IBD小鼠模型;期间2个对照组小鼠均饮水。建模成功后,各组小鼠连续4 d予相应药物或水。观察小鼠生存率、体质量及结肠长度变化情况。采用苏木素-伊红染色,观察小鼠结肠组织病理改变,并评分。采用Western blot法检测小鼠肠道ZO-1和Occludin蛋白表达水平。结果与模型组比较,药物观察组小鼠生存率明显升高,体质量变化率明显减小,结肠长度明显增加(P<0.05);结肠黏膜和黏膜下层上皮损伤明显减轻,炎性细胞浸润明显减少,且病理学评分明显降低(P<0.05);肠道ZO-1和Occludin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论去氢骆驼蓬碱对IBD模型小鼠肠道屏障具有防护作用,其机制可能为提高ZO-1和Occludin蛋白的表达水平。

去氢骆驼蓬碱改善阿尔茨海默病作用及其机制研究进展

去氢骆驼蓬碱(HM)是一种在自然界中丰富存在的β-咔啉类生物碱,具有多种生物学作用。近年体内外研究发现,HM对阿尔茨海默病(AD)具有明显改善作用。其机制可能与HM降低β-淀粉样蛋白(Aβ)异常沉积和Tau蛋白过度磷酸化、调节胆碱能系统、抗氧化应激和神经炎症等作用有关。该文综述HM改善AD的作用及其机制研究进展,以期为HM的临床应用和AD防治药物的开发提供参考。

去氢骆驼蓬碱对MODS大鼠肺组织炎症损伤的影响

目的观察去氢骆驼蓬碱(HAM)是否对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠肺组织炎症损伤具有保护作用。方法构建MODS动物模型,大鼠随机分为对照组、MODS组和HAM组。检测肺湿干重比值、肺系数,HE染色观察肺组织形态,采用ELISA试剂盒检测血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫组织化学染色检测肺组织S100钙结合蛋白A8/A9(S100 A8/A9)的定位表达,Western blotting法检测肺组织S100 A8/A9、M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型巨噬细胞标志物精氨酸酶1(Arg-1)的蛋白表达。结果与MODS组相比,HAM组肺湿干重比值、肺系数减小,肺泡腔炎性渗出减少,肺间质充血水肿减轻,血清IL-6、TNF-α水平降低,IL-10水平升高,肺组织S100 A8/A9、iNOS表达下降,Arg-1表达升高。结论HAM可通过抑制炎症反应降低MODS大鼠肺组织损伤。

基于在体单向肠灌流模型探究去氢骆驼蓬碱衍生物HM-Y-A的肠吸收特性

目的考察去氢骆驼蓬碱衍生物(HM-Y-A)在小肠不同肠段、不同条件下的吸收特性,探究HM-Y-A的吸收机制。方法采用大鼠在体单向肠灌流模型结合HPLC测定法,考察不同肠段、不同药物浓度、不同pH值及P-糖蛋白抑制剂对HM-Y-A吸收参数(K_(a)和P_(app))的影响。结果HM-Y-A在小肠各段均有吸收,最佳吸收肠段是十二指肠和空肠;随着药物浓度升高,吸收参数K_(a)和P_(app)不断降低,低浓度与中、高浓度间差异具有统计学意义(P<0.05);在pH 6.4和7.4时K_(a)和P_(app)显著增高(P<0.05);加入P-糖蛋白抑制剂前后,吸收参数差异无统计学意义。结论HM-Y-A在小肠全段均有吸收,在十二指肠和空肠吸收较好;吸收机制可能以主动吸收或促进扩散为主;药物在偏碱性条件下吸收较好;HM-Y-A可能不是P-gp的底物。

盐酸去氢骆驼蓬碱抗恶性黑色素瘤B16F10凋亡的实验研究

目的:探讨盐酸去氢骆驼蓬碱(HH)抗恶性黑色素瘤细胞(B16F10)的体外作用机制。方法:CCK-8检测HH对B16F10细胞的生长抑制率,普通光学显微镜检测HH作用后B16F10的细胞形态变化,流式细胞术检测HH作用于B16F10的细胞周期的改变、细胞凋亡率以及活性氧的变化,荧光显微镜检测HH作用后B16F10细胞内自噬小体染色情况。结果:与阴性对照组相比,实验组B16F10的生长抑制率、细胞凋亡率显著上升(P<0.05),G2/M期比例升高(P<0.05),细胞内活性氧含量升高(P<0.05),细胞形态呈圆形或者不规则改变,细胞内自噬小体比例升高。结论:HH能够诱导恶性黑色素瘤细胞B16F10发生凋亡及自噬,并将细胞周期阻滞在G2/M期。

7-取代去氢骆驼蓬碱衍生物的毒性评价及机制研究

目的 根据构效关系对去氢骆驼蓬碱的7位进行结构修饰以得到低毒性化合物,并基于代谢组学探讨其减毒机制。方法 将去氢骆驼蓬碱衍生成哈尔酚后,通过酯化反应得到7-取代去氢骆驼蓬碱衍生物,并用^(1)H NMR、^(13)C NMR、IR和MS对其进行表征。通过CCK-8法测定衍生物对Hep G2细胞增殖的影响,并以秀丽隐杆线虫为模型进行毒性评价,然后基于液质研究药物对线虫内源性代谢物的影响。结果 去氢骆驼蓬碱给药导致线虫体长变短、身体弯曲频率降低、死亡率上升,而7-取代衍生物对线虫的毒性反应均下降,其中高浓度(320μmol·L^(-1))1b给药组与空白组的线虫相比也未见显著性差异。代谢组学结果表明,相比于去氢骆驼蓬碱,1b给药对线虫体内嘌呤代谢通路的影响力水平显著降低。此外,两种药物都会下调线虫体内多种氨基酸(如L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-精氨酸等)含量,还会上调线虫SOD-3蛋白水平。结论 1b对线虫的生长、发育、运动能力的毒性比去氢骆驼蓬碱显著降低,其减毒效应可能与降低对线虫体内的嘌呤代谢通路的影响有关。此外,去氢骆驼蓬碱和1b都会导致线虫氨基酸代谢通路紊乱,这可能会影响活性氧稳态并激活氧化应激反应。

6-(哌嗪-1-基)-去氢骆驼蓬碱酰胺衍生物的合成及抑菌活性

为探索6-(哌嗪-1-基)-去氢骆驼蓬碱酰胺衍生物的抑菌活性,结合前期的衍生化研究,设计并合成了15个新型6-(哌嗪-1-基)-去氢骆驼蓬碱衍生物,并对其抑菌活性及构效关系进行了研究。离体抑菌活性测定结果表明,目标化合物在50μg/mL下对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea、小麦赤霉病菌Fusarium graminearum、梨树腐烂病菌Valsa pyri、棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum均有一定的抑制活性,尤其化合物5j对棉花枯萎病菌表现出较好的活性,抑制率达61.7%,强于阳性对照啶酰菌胺。

去氢骆驼蓬碱蛋白靶点虚拟筛选及其潜在药理作用机制初探

去氢骆驼蓬碱是从药用植物骆驼蓬中提取到的生物碱类化合物,具有抗炎、神经保护、抗糖尿病和抗肿瘤等多种药理活性。虽然对去氢骆驼蓬碱的药理活性进行了大量的研究,然而目前关于其作用靶点及相关作用机制尚缺乏相关实验数据。本研究基于此目的,利用计算生物学的方法,旨在寻找其可能的作用靶点,并对其进行相关生物信息学分析,初步探讨涉及的分子机制,为后续开发、优化药物提供有力依据。

天然产物去氢骆驼蓬碱糖基偶联物的合成及抗肿瘤活性评价

基于本课题组前期工作基础,在天然产物去氢骆驼蓬碱(harmine)的C7位氧上引入环己基甲基,并在N9位上通过不同长度的烷基链偶联甲基2-氨基-β-D-葡萄糖苷,设计并合成了8个去氢骆驼蓬碱糖基偶联物(14a~14h)。体外抗肿瘤活性筛选和构效关系研究发现,偶联物的抗肿瘤活性随连接臂中烷基链长度的延长而增加。化合物14h对MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖抑制活性显著优于去氢骆驼蓬碱。与去氢骆驼蓬碱相比,糖基的引入改善了化合物14h的水溶性,并通过Warburg效应提高了化合物14h的肿瘤细胞选择性。机制研究发现化合物14h可诱导MDA-MB-231细胞凋亡和G_(0)/G_(1)期细胞阻滞,并能通过干扰细胞上皮-间充质转化进程抑制肿瘤细胞迁移。本研究为基于去氢骆驼蓬碱的抗肿瘤药物的开发提供了新思路。

去氢骆驼蓬碱及其衍生物DH-004的急性毒性研究

目的研究去氢骆驼蓬碱及其衍生物DH-004的急性毒性。方法采用Bliss法测定小鼠经腹腔注射去氢骆驼蓬碱和去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004的LD50,记录各组小鼠的中毒症状。结果去氢骆驼蓬碱经腹腔注射的LD50及95%可信限为49.40 mg/kg体质量(41.44~57.62 mg/kg体质量);去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004经腹腔注射的LD50及95%可信限为252.66 mg/kg体质量(220.60~289.72 mg/kg体质量)。小鼠中毒症状主要表现为震颤、躁动不安、抽搐等情况。结论小鼠经腹腔注射给药去氢骆驼蓬碱衍生物DH-004毒性小于去氢骆驼蓬碱毒性,去氢骆驼蓬碱经结构修饰能达到减毒作用。

骆驼蓬属植物种子中去氢骆驼蓬碱和骆驼蓬碱的HPLC-荧光检测法测定

建立了HPLC-荧光检测法测定不同产地骆驼蓬、骆驼蒿、多裂骆驼蓬种子(共15个样品)中去氢骆驼蓬碱(1)和骆驼蓬碱(2)的含量。采用C18色谱柱,以乙腈-醋酸铵缓冲液(19∶81)为流动相,激发波长为250nm、发射波长为460nm。结果显示,骆驼蓬中1的含量(3.6%～5.0%)高于2(2.8%～3.5%);多裂骆驼蓬则相反,1、2的含量分别为1.6%～2.0%和2.3%～3.1%;骆驼蒿中2的含量较高(4.4%),但1含量低于检测限。

去氢骆驼蓬碱在小鼠的抗炎镇痛及止痒作用

目的:观察去氢骆驼蓬碱的抗炎、镇痛及止痒作用。方法:以二甲苯鼠耳致炎及角叉菜胶致小鼠足跖肿胀观察抗炎作用;以小鼠扭体反应及热板法观察镇痛作用;以右旋糖酐-40致小鼠全身瘙痒模型观察药物止痒作用。结果:去氢骆驼蓬碱以剂量依赖的方式显著抑制鼠耳肿胀,在25mg/kg显著抑制足跖肿胀;剂量依赖地减少发生扭体反应的鼠数,提高小鼠的痛阈;明显抑制小鼠全身瘙痒的发作次数及发作持续时间。结论:去氢骆驼蓬碱具有抗炎、镇痛及止痒作用。

去氢骆驼蓬碱诱导HepG2细胞凋亡并增强其对5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性

目的:研究去氢骆驼蓬碱体外诱导HepG2细胞凋亡过程中c-Jun N末端激酶(JNK)途径的作用,并观察其联合化疗药物对HepG2细胞的影响。方法:CCK-8法检测联合或不联合使用JNK特异性抑制剂SP600125对细胞增殖的抑制作用;克隆形成实验观察不同浓度药物对细胞克隆形成的影响;Hoechst 33258染色法观察细胞形态变化;PI单染检测细胞亚二倍体率;Annexin V-PI双染测定细胞早期凋亡水平;Western blotting检测细胞聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)、JNK和p-JNK蛋白表达的改变;联合5-氟尿嘧啶(5-FU)或顺铂(DDP)观察细胞对化疗药物的敏感性。结果:去氢骆驼蓬碱随药物浓度的升高而抑制作用增强,48 h后IC50为9.80 mg/L;去氢骆驼蓬碱能显著抑制细胞克隆形成,并且导致细胞凋亡形态学变化;PI单染检测发现细胞周期的G1期前有亚二倍体凋亡峰,Annexin V-PI双染检测细胞出现明显的早期凋亡细胞群;Western blotting检测到随着去氢骆驼蓬碱浓度增加PARP及p-JNK蛋白表达增加,JNK蛋白表达减少;联合使用SP600125对细胞增殖的抑制作用减弱;联合5-FU或顺铂明显增强化疗药物对肿瘤细胞的抑制作用,增敏倍数分别为1.47和5.78倍。结论:去氢骆驼蓬碱对HepG2细胞有增殖抑制作用,并诱导其凋亡,激活JNK信号通路可能是其主要机制之一;同时去氢骆驼蓬碱可以增强HepG2细胞对5-FU和顺铂的敏感性。

盐酸去氢骆驼蓬碱诱导人胰腺癌AsPC-1细胞凋亡

目的:探讨盐酸去氢骆驼蓬碱对人胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用及其可能的作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法及克隆形成抑制实验观察盐酸去氢骆驼蓬碱对胰腺癌AsPC-1细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,Western blotting检测细胞凋亡及自噬相关蛋白的表达水平。结果:盐酸去氢骆驼蓬碱作用人胰腺癌AsPC-1细胞后,不同浓度的药物对其生长均有抑制作用,且呈剂量-效应关系(P<0.01),24、48及72h的IC50分别约为116.5、66、22.3μmol.L-1;与对照组相比随着盐酸去氢骆驼蓬碱浓度的增加,细胞克隆逐渐减少;不同浓度盐酸去氢骆驼蓬碱作用后,均出现明显的晚期凋亡及坏死细胞群,且呈剂量-效应关系;盐酸去氢骆驼蓬碱作用后,胰腺癌AsPC-1细胞出现Caspase-3、PARP酶切活化,同时自噬标记性蛋白LC3Ⅱ增加,P62减少。结论:盐酸去氢骆驼蓬碱通过诱导细胞凋亡及自噬的方式抑制人胰腺癌AsPC-1细胞的生长。

去氢骆驼蓬碱诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡

目的:探讨去氢骆驼蓬碱(Harmine,HM)诱导人胃腺癌SGC7901细胞凋亡的作用。方法:MTT法检测HM对该细胞系的生存抑制率,光镜下观察凋亡细胞,流式细胞仪(FCM)检测凋亡率,基因组DNA琼脂糖凝胶电泳(DNALadder)检测凋亡梯状条带。结果:HM处理SGC7901细胞后,细胞的存活率明显降低;细胞形态观察到有核固缩与核断裂的凋亡现象;流式细胞仪测定细胞周期的G1期前有亚二倍体的凋亡峰;基因组DNA琼脂糖凝胶电泳检测到明显的凋亡梯状条带。结论:HM能诱导人胃腺癌SGC7901细胞的凋亡。

定量评价去氢骆驼蓬碱注射用乳剂的组织靶向性

目的:定量评价静脉注射用乳剂作为药物载体给药后对主要脏器的靶向性并对给药系统靶向性的定量评价参数进行讨论和评价。方法:用3H标记的去氢骆驼蓬碱(harmine,HAR)分别制成静脉注射乳剂、水溶液和脂质体,经小鼠静脉注射后测定主要脏器组织中的总放射性强度,计算重量-平均总靶向性系数Te和靶向性系数Te,并对乳剂的靶向性意义作出定量评价。结果:静脉乳剂可显著提高放射性在肝、脾、淋巴器官的分布,降低放射性向脑组织的转运。结论:静脉注射乳剂是一很有意义的靶向给药系统,重量-平均总靶向性系数Te是较全面的靶向性评价参数。