参元丹干预氧化三甲胺诱导人脐静脉内皮细胞损伤的机制研究

目的:探讨参元丹对氧化三甲胺(TMAO)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的干预作用及机制。方法:建立TMAO诱导的HUVEC细胞损伤模型,将HUVEC分为正常对照组、模型组(300μmol/L TMAO)、参元丹低剂量组(300μmol/L TMAO+25μg/mL参元丹)、参元丹中剂量组(300μmol/L TMAO+50μg/mL参元丹)、参元丹高剂量组(300μmol/L TMAO+100μg/mL参元丹)。分别检测各组细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-1β含量。结果:TMAO可诱导HUVEC发生氧化应激反应及炎症反应,参元丹可降低TMAO损伤细胞内ROS、MDA水平(P<0.05),同时抑制IL-1β的表达水平(P<0.05)。结论:参元丹可能通过抑制氧化应激反应及炎症反应,减轻TMAO诱导的内皮细胞损伤。

参元丹与合心爽治疗不稳定型心绞痛血瘀证疗效观察

目的观察中药参元丹治疗不稳定型心绞痛证属血瘀者的临床疗效。方法将符合观察标准的患者随机分为治疗组及对照组,在原有治疗基础上分别加用参元丹及合心爽治疗。结果治疗组总疗效及心电图疗效与对照组相近,在改善全身症状方面作用则较好。结论参元丹可以有效缓解心绞痛,在改善患者全身症状方面疗效亦佳。

参元丹对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子GRP78、CHOP表达的影响

目的：观察参元丹对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子Grp78、CHOP表达的影响。方法：离体培养新出生1~3 d大鼠心肌细胞,并分为正常组、模型组、参元丹组及空白血清组。应用三气培养箱制造缺血（2 h）/再灌注（4 h）模型。采用RT-PCR法测定内质网应激相关因子GRP-78、CHOP因子的表达。结果：模型组细胞内Grp78、CHOP表达均明显上升（P〈0.01）。与模型组比较10%参元丹组中,Grp78（P〈0.01）及CHOP（P〈0.05）均有明显下降,10%空白血清组Grp78、CHOP较模型组无明显变化。结论：参元丹可以通过减轻内质网应激减少心肌细胞的凋亡,保护心肌细胞。

参元丹胶囊对动脉内皮损伤大鼠血管内膜增生的影响研究

目的观察参元丹胶囊对动脉内皮损伤大鼠动脉内皮损伤后内膜增生的影响。方法应用导管拉伤加高渗液损伤的方法建立大鼠主动脉内皮损伤模型,检测中药参元丹胶囊后大鼠动脉内皮内膜的增生情况。结果经导管拉伤加高渗液损伤后,动脉内膜被覆单层内皮细胞,内膜不规则增厚,血管平滑肌增生。经参元丹治疗后动脉内皮损伤后血管内膜过度增生得到抑制。结论参元丹对血管内皮功能具有一定的保护作用。

参元丹含药血清对心肌缺血保护作用及其微管相关蛋白及自噬相关基因表达的影响

目的:通过参元丹胶囊含药血清对心肌细胞活性、培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、LC3微管相关蛋白LC3及自噬相关基因Beclin1-mRNA表达影响的研究,探讨参元丹胶囊对心肌缺血保护作用及作用机制。方法:分离1～3天龄Wistar大鼠心肌细胞进行细胞培养,采用无血清无糖培养建立心肌缺血细胞模型,于不同时间点加入参元丹胶囊含药血清,采用MTT法、比色法、蛋白免疫印迹技术(Western Blot)及逆转录PCR(RT-PCR)测定细胞活性、上清培养LDH含量、微管相关蛋白LC3蛋白(LC3I及LC3II)表达及哺乳动物自噬相关基因Beclin1-mRNA表达。结果:10%参元丹含药血清与相应时间点10%空白血清比较,能明显增加心肌缺血模型中3、6、18及24h心肌细胞活性(P<0.01)、降低培养液上清LDH活性(P<0.05);通过计算LC3II/LC3I比值发现参元丹含药血清能明显抑制缺血诱导24h的细胞自噬活性(P<0.05),而对心肌缺血模型各个时间点Beclin1-mRNA的表达没有影响。结论:参元丹含药血清对心肌细胞缺血损伤有保护作用,并可以在心肌细胞缺血较长时间后抑制自噬的活性,但其对自噬活性的影响可能与Beclin1表达无关。

参元丹对大鼠心肌缺血预适应心肌梗死面积及一氧化氮合酶、蛋白激酶C的影响

目的通过检测大鼠缺血心肌梗死面积的大小、血清一氧化氮合酶(NOS)变化、蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨参元丹的药理性预适应作用及其机制。方法选取清洁级健康成年Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重(274±42)g,鼠龄4月左右,随机分为6组,分别为对照组、再灌注组、假性缺血预处理组、缺血预处理组、药物预处理+缺血预适应组、药物预处理组,每组10只。分别造模、取血、取心肌组织。将心肌组织浸入10%甲醛溶液中固定,脱水,封蜡,切片,染色。应用HE染色方法对组织切片进行染色,4倍镜下采用彩色病理图像分析系统分析心肌梗死面积。将所取血液离心后取血清,用紫外分光光度法检测血清总NOS的活力和分NOS的活力。应用蛋白激酶C(PKC)免疫组化试剂盒对组织切片进行处理,20倍镜下观察PKC表达情况。结果参元丹能减少大鼠的心肌梗死面积,并与缺血预适应有协同作用,能够加强彼此的抗心肌缺血的能力。各组间血清NOS的变化差异无统计学意义(P>0.05)。缺血预处理组、药物预处理+缺血预适应组和药物预处理组的PKC有明显表达,其余各组没有表达。结论参元丹能够减少心肌梗死的面积,具有药理性预适应样心肌保护作用,其作用机制可能与PKC介导有关。

参元丹后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血清MDA、SOD水平的影响

目的:研究参元丹后处理对心肌缺血/再灌注大鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)水平的影响。方法:采用结扎前降支方法建立缺血/再灌注模型,即经历30min缺血和180min持续再灌注。40只大鼠随机分为5组,假手术组、缺血/再灌注模型组(模型组)、缺血后处理组、缺血后参元丹低剂量处理组(参元丹低剂量组)、缺血后参元丹高剂量处理组(参元丹高剂量组);于再灌注末检测各组大鼠血清MDA、SOD浓度的变化。结果:与模型组相比,缺血后处理组和参元丹各剂量组血清MDA含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);缺血后处理组和参元丹各剂量组血清SOD活性较模型组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:参元丹后处理能减轻缺血/再灌注大鼠心肌的氧化应激损伤,从而起到保护心肌的作用。

参元丹与通心络胶囊治疗不稳定型心绞痛血瘀证对比研究

目的探讨参元丹胶囊治疗不稳定型心绞痛的疗效特点与安全性。方法将66例患者采用随机单盲对照法分为两组,治疗组31例予参元丹胶囊,对照组29例予通心络胶囊;4周为1疗程。结果根据心绞痛、心电图、症状改善的结果综合评定,参元丹胶囊治疗组总有效率90.32%,通心络对照组总有效率为89.66%,两组差异无显著性。结论参元丹胶囊对气虚血瘀证有较好疗效;且中医证候积分的改善优于通心络对照组,综合疗效与对照组相当。

体外心肌细胞缺氧/复氧模型损伤及参元丹干预的影响

目的:建立体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型,观察益气逐瘀组方参元丹(SYD)对模型心肌细胞存活率和细胞损伤程度的影响,以进一步探讨其改善冠心病围手术期心肌损伤的作用机制。方法:体外培养大鼠乳鼠原代心肌细胞,建立缺氧复氧细胞模型并予分组处理,CCK法检测心肌细胞存活率,酶法检测各组细胞培养上清液中磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:模型组存活率低于正常组(P<0.05),而CPK、LDH释放量高于正常组(P<0.05);SYD含药血清组、PDTC+SYD组以及PDTC+空白血清组细胞存活率均高于模型组和空白血清组(P<0.05),细胞酶释放量均低于模型组和空白血清组(P<0.05),此3组间的数据比较,差异不具有统计学意义。结论:参元丹能够提高心肌细胞缺氧/复氧损伤模型的细胞存活率,降低细胞损伤程度;其机制可能通过抑制核因子NF-κB及其介导的氧化应激和炎性反应降低细胞损伤;提示参元丹可能具有围手术期心肌损伤的保护作用。

参元丹对去氧肾上腺素诱发家兔主动脉环收缩的拮抗作用及与内皮功能的关系

目的 观察参元丹对PHE诱发家兔离体主动脉环痉挛的拮抗作用及其是否具有内皮依赖关系。方法 用家兔离体主动脉环灌流的方法 ,以PHE诱发组织肌条痉挛 ,观察参元丹对PHE的拮抗作用及不同浓度参元丹拮抗PHE引起家兔主动脉环收缩的剂量反应关系。结果 参元丹对内皮完整及去内皮家兔主动脉环PHE引起收缩均有拮抗作用 ,对内皮完整动脉环作用明显强于去内皮动脉环 ,其作用明显强于香丹注射液及黄芪注射液。参元丹拮抗PHE引起家兔主动脉环收缩的作用存在量效关系。结论 参元丹具有拮抗PHE引起的血管平滑肌收缩作用 ,其作用可能部分需要内皮功能参与。

参元丹胶囊干预气虚血瘀证缺血性心力衰竭的随机、对照临床研究

目的评价参元丹胶囊干预气虚血瘀证缺血性心力衰竭(IHF)的临床疗效。方法选取2020年2月—2020年12月期间于首都医科大学附属北京中医医院心血管科就诊的气虚血瘀证IHF患者66例(研究过程中有5例患者脱落)。采用随机、双盲、安慰剂对照的研究方法,随机分为参元丹组29例和安慰剂组32例,两组患者在规范化治疗基础上分别加用参元丹或安慰剂,两组患者均连续服药30 d。观察记录两组患者治疗前后中医证候积分及疗效指数、血清脑钠肽(B-type Natriureticeptide,BNP)水平及治疗前后BNP下降幅度、超声心动参数[左室射血分数(Left Ventricular Ejection Fraction,LVEF)、左室舒张末径(Left Ventricular End-diastolic Ddiameter,LVEDD)]以及治疗30 d后药物应用不良反应及心血管事件(Major Adverse Cardiovascular Events,MACE)发生情况。结果治疗后两组患者BNP水平较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05);且参元丹组治疗后BNP水平明显低于安慰剂组,参元丹组BNP下降幅度明显大于安慰剂组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者LVEF水平较治疗前提升,LVEDD水平较治疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后LVEF、LVEDD水平及其LVEF上升幅度、LVEDD下降幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。参元丹组及安慰剂组患者在治疗30 d后,均无患者死亡情况发生。安慰剂组有2例患者出现心衰加重再住院,两组患者MACE事件发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者中医证候积分水平较治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);且参元丹组治疗后中医证候积分明显低于安慰剂组,疗效指数明显高于安慰剂组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参元丹具有改善气虚血瘀证IHF患者心功能的潜在作用。

参元丹治疗冠心病心绞痛络病理论初探

冠心病心绞痛作为心血管常见病之一,其辨证论治有着丰富的中医理论基础,而络病理论在其病机理论的形成中具有重要作用,主要体现在"络脉阻滞、络脉空虚、络毒蕴结、络脉损伤"四个方面,运用络病理论可以从血液及血管两方面指导冠心病的治疗,参元丹切合络病理论的研究内容,其通过改善血管内皮功能、预适应样心肌保护作用等方面为从络病理论论治冠心病心绞痛提供实验研究证据支持。参元丹的理法内涵由此得到进一步的扩充,并且丰富了络病现代理论研究的领域。

参元丹对不稳定型心绞痛气虚血瘀证患者药物洗脱球囊介入术后炎症因子影响观察

目的 观察参元丹对择期经皮冠状动脉药物洗脱球囊介入治疗的气虚血瘀证不稳定型心绞痛患者炎症因子水平的影响。方法 选择首都医科大学附属北京中医医院心血管科2021年1月—2022年4月收治的不稳定型心绞痛患者61例,均成功行药物洗脱球囊PCI治疗。用随机数字表法分为观察组31例、对照组30例。2组均给予药物洗脱球囊介入治疗,对照组术前5 d给予阿司匹林肠溶片100 mg/次,1次/d (术前总量>300 mg);氯吡格雷75 mg/次,1次/d (术前累计服用总量>300 mg);单硝酸异山梨酯片20 mg/次、2次/d,阿托伐他汀钙20 mg/次、每晚1次。观察组在对照组治疗基础上,服西药后1 h用温水送服参元丹4粒/次,3次/d;术后继续服用7 d。分别于术前及术后24 h用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-8、IL-6。结果 术后2组血清CRP、TNF-α、IL-8、IL-6水平均升高,但仅对照组与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);术后对照组血清CRP、TNF-α、IL-8、IL-6水平均高于观察组(P<0.05)。结论 参元丹配合西药对不稳定型心绞痛气虚血瘀证患者具有围手术期心肌保护作用。

参元丹对垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血影响的血液学研究

目的观察中药复方制剂参元丹胶囊(SYD)对垂体后叶素诱发大鼠急性心肌缺血的拮抗作用及作用机理。方法采用Wistar大鼠尾静脉注射垂体后叶素诱发心肌缺血的方法，观察SYD的抗缺血作用及其对内皮功能与神经内分泌功能的影响。结果与病理模型组比较，SYD有抑制磷酸肌酸激酶同功酶(CK—MB)升高的趋势；明显降低大鼠急性心肌缺血时血浆内皮素(ET)水平及ET／一氧化氮合酶(NOS)比值的升高；抑制去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)水平，并有抑制5一羟色胺(5一HT)升高的趋势。结论中药复方制剂SYD具有抗心肌缺血作用．能够调整垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血时血管舒／缩物质水平及神经内分泌功能。

参元丹晚期药理预适应对大鼠缺血再灌注心肌PKC及HSP70的影响

目的应用免疫组化法观察蛋白激酶C(PKC)及热休克蛋白(HSP70)表达,探讨参元丹(SYD)的晚期药理性预适应作用及其机制。方法选取清洁级健康成年Wistar大鼠60只。随机分为6组,分别为对照组、再灌注组、晚期假性缺血预处理组、晚期缺血预处理组、晚期药物预处理加缺血预处理组、晚期药物预处理组。每组10只。分别造模,取血、心肌组织。应用HE染色方法对组织切片进行染色,彩色病理图像分析心肌梗死面积。20倍镜下观察PKC及HSP70表达情况。结果彩色病理图像分析,SYD能够代替心绞痛缺血、缺氧刺激,减小心肌梗死面积,具有晚期药理性预适应的心脏保护作用。晚期假性缺血预处理组、晚期药物预处理加缺血预处理组、晚期药物预处理组无PKC的表达,提示PKC未参与晚期缺血预适应的细胞内信号转导。晚期缺血预处理组、晚期药物预处理加缺血预处理组均有HSP70大量表达,晚期药物预处理组亦有HSP70表达,提示晚期缺血预处理的心肌保护作用机制与HSP70有关,SYD具有独立的晚期药理预适应作用,晚期药物预处理组+缺血预处理组的HSP70表达有SYD作用存在;SYD的心肌保护作用机制与HSP70有关。结论SYD具有晚期药理预适应样心肌保护作用;SYD晚期预适应心肌保护作用的机制可能与HSP70的介导有关;SYD晚期预适应可能与缺血预适应协同发挥心肌保护作用。

参元丹优化方对动脉粥样硬化小鼠胰岛素抵抗及血清血栓素A2/前列环素比值和DNA甲基化水平的影响

目的观察参元丹优化方对高脂喂养Apo E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)胰岛素抵抗及血清血栓素A2(TXA2)/前列环素(PGI2)比值和DNA甲基化(5-m C)水平的影响,探讨其相关作用机制。方法 40只8周龄雄性Apo E-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、立普妥组、参元丹原方组和参元丹优化方组,各给药组给予相应药物干预6周。检测小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT1)和5-m C水平。HE染色,图像分析测量小鼠主动脉AS斑块面积。结果与模型组比较,参元丹原方组和参元丹优化方组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P<0.01),AS指数明显降低,校正后主动脉AS斑块面积显著降低(P<0.05),参元丹优化方组小鼠血清5-m C、DNMT1、胰岛素水平及TXA2/PGI2比值显著降低(P<0.05),参元丹优化方组优于参元丹原方组(P<0.01)。结论参元丹优化方降低血清胰岛素、5-m C水平和TXA2/PGI2比值均优于原方,改善血脂和AS效果与原方相当。

参元丹含药血清对缺氧复氧心肌细胞自噬的影响

目的:观察参元丹含药血清对缺氧复氧心肌细胞自噬的影响,探讨参元丹心肌保护作用机制。方法:建立缺氧复氧心肌细胞损伤模型,采用免疫细胞化学法观察心肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)和磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)表达,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法测定自噬相关基因(Beclin-1)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA表达量。结果:与正常对照组相比,缺氧复氧组LC3和PI3K荧光表达增强,参元丹含药血清组与相应浓度空白血清组相比,细胞LC3和PI3K荧光表达强度减弱,其中参元丹含药血清10%组PI3K荧光强度明显降低,具有统计学意义(P<0.05);缺氧复氧组细胞Beclin-1和Caspase-3 mRNA表达量明显升高,与相应浓度空白血清组相比,参元丹含药血清组Beclin-1 mRNA表达水平明显降低;参元丹含药血清5%组Caspase-3 mRNA表达量降低。结论:参元丹含药血清对缺氧复氧细胞自噬具有抑制作用,可能与抑制PI3K,下调Beclin-1和Caspase-3基因有关。

参元丹药理预适应对大鼠缺血再灌注心肌梗死面积、蛋白激酶C及热休克蛋白70的影响

目的:应用免疫组化法观察蛋白激酶C(PKC)及热休克蛋白70(HSP70)表达,探讨参元丹的药理性预适应作用及其机制。方法:选取Wistar大鼠60只,随机分为6组,分别造模、取血、取心肌组织。应用HE染色方法对组织切片进行染色,4倍镜下采用彩色病理图像分析系统分析心肌梗死面积。应用免疫组化试剂盒对组织切片进行处理。20倍镜下观察PKC及HSP70表达情况。结果:彩色病理图像分析参元丹能够代替心绞痛的缺血、缺氧的刺激,减小心肌梗死面积,具有药理性预适应的心脏保护作用。PKC的表达情况:假性缺血预处理组的心肌组织中偶见微弱的一处表达。缺血预处理组和药物预处理+缺血预处理组的大鼠心肌组织中PKC大量的表达,药物预处理组大鼠心肌组织的PKC表达充分,提示PKC在参元丹的药理性预适应样心肌保护过程中起作用。HSP70的表达情况:对照组、再灌注组、假性缺血预处理组、缺血预处理组HSP70没有表达,药物预处理组HSP70有表达,药物预处理+缺血预处理组HSP70表达明显,提示HSP70的表达与参元丹的作用相关。结论:参元丹具有药理预适应样作用;参元丹预适应心肌保护作用的机制可能与PKC和HSP70的介导有关。

参元丹后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究参元丹后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并尝试探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为5组:假手术组,缺血再灌注组,缺血后处理组,参元丹0.2 g/kg组,参元丹0.1 g/kg组。采用结扎冠状动脉左前降支(LAD)建立心肌缺血再灌注模型,缺血30 min再灌注180 min,再灌注同时通过十二指肠灌注给予相应药物。常规记录Ⅱ导联心电图,分别记录再灌注期室速(VT)和室颤(VF)的发作次数、持续时间和发生率,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法法测定心肌梗死面积,化学比色法测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法测定组织蛋白激酶C(PKC)mRNA的表达。结果再灌注同时给予参元丹能够减少VT、VF发生次数、缩短VT、VF持续时间,有效降低心律失常发生率(P<0.05);减小心肌梗死面积;升高组织SOD活力,降低MDA含量;并增加组织中PKCαmRNA、PKCδmRNA的表达,其中参元丹0.2 g/kg组有统计学意义(P<0.05)。结论参元丹后处理具有抗心肌缺血再灌注氧化损伤的作用,其作用机制与激活PKC介导的信号转导通路有关。