叉头框蛋白M1和程序性细胞死亡受体1配体在胃癌组织中的表达及其与临床预后的相关性研究

目的 分析叉头框蛋白M1(FOXM1)和程序性细胞死亡受体1配体(PD-L1)在胃癌组织中表达及其与临床预后的相关性。方法 选取2017年7月~2019年7月间本院接受手术治疗的胃癌病人在术中切除的胃癌组织及相应癌旁组织124例;FOXM1和PD-L1 mRNA表达采用qRT-PCR检测;FOXM1和PD-L1蛋白表达采用免疫组化法检测;采用Kaplan-Meier生存曲线分析FOXM1和PD-L1与预后的关系;采用Cox回归分析影响胃癌病人预后的危险因素。结果 胃癌组织中FOXM1和PD-L1 mRNA表达水平和蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中FOXM1和PD-L1表达与TNM分期和浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析表明,胃癌组织FOXM1和PD-L1阳性表达病人3年生存率(39.47%)均低于阴性表达(62.50%),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析表明,FOXM1阳性表达和PD-L1阳性表达是影响胃癌病人预后的危险因素(P<0.05)。结论 FOXM1和PD-L1在胃癌组织中表达升高,与病人临床病理特征和预后密切相关,是影响胃癌病人预后的危险因素。

叉头框蛋白M1在肿瘤信号转导中的作用

叉头框蛋白M1(forkhead box M1,Fox M1)属于Fox转录因子家族,在多种恶性肿瘤中异常高表达,与多个癌基因信号通路相关,在肿瘤的发生、进展和转移等方面发挥重要作用。Fox M1已成为肿瘤治疗研究的一个新靶点。

MicroRNA-134通过下调叉头框蛋白M1/人基质金属蛋白酶2表达抑制乳腺癌细胞迁移及侵袭

目的探讨microRNA-134(miR-134)在乳腺癌中的表达及其影响乳腺癌迁移、侵袭能力的分子机制。方法选取2013年1月-2015年2月于本院乳腺病科行手术切除并经病理检查证实的乳腺导管内原位癌组织30例、乳腺浸润性导管癌组织35例及正常乳腺组织15例。通过实时定量聚合酶链式反应法分别检测miR-134在肿瘤和正常乳腺组织中的表达,统计分析miR-134表达与患者临床特征间的相关性;通过miR-134模拟物转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用细胞划痕愈合试验评价过表达miR-134对细胞迁移能力的影响,采用Transwell侵袭小室试验评价过表达miR-134后MDA-MB-231细胞侵袭能力的变化。通过免疫组织化学染色检测miR-134与下游潜在靶点叉头框蛋白M1蛋白表达关系,实时定量聚合酶链式反应、蛋白免疫印迹检测转染miR-134模拟物后其下游潜在靶点叉头框蛋白M1及下游效应分子人基质金属蛋白酶2的表达变化。结果 miR-134在正常乳腺组织、乳腺导管内原位癌组织及乳腺浸润性导管癌组织中的表达量依次降低(P<0.05)。乳腺癌组织中低水平的miR-134与肿瘤淋巴结转移及高TNM分期显著相关(P<0.05);在体外试验中,过表达miR-134能够显著降低MDA-MB-231细胞的迁移及侵袭能力(P<0.05);免疫组织化学染色结果证实miR-134与叉头框蛋白M1蛋白的表达呈负相关关系(P<0.05);实时定量聚合酶链式反应及蛋白免疫印记结果显示,过表达miR-134后可显著抑制乳腺癌细胞中叉头框蛋白M1及人基质金属蛋白酶2的表达水平(P<0.05)。结论 miR-134在乳腺癌组织中表达下调,miR-134可能通过下调叉头框蛋白M1/人基质金属蛋白酶2的表达来抑制乳腺癌细胞的迁移及侵袭。

盐屋霉素A下调叉头框蛋白M1表达可抑制喉癌细胞恶性生物学行为

目的探讨盐屋霉素A下调叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,FoxM1)对喉癌细胞增殖、凋亡、侵袭能力等恶性生物学行为的影响。方法取处于对数生长期的Hep-2细胞,使用不同浓度盐屋霉素A进行处理,对照组不加盐屋霉素A。分别在培养24、48、72h后通过CCK-8法检测细胞活力;24、48h后通过CFSE染色法检测细胞增殖能力;48h后AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Transwell小室法检测细胞侵袭能力。蛋白质印迹法检测FoxM1、Ki-67、cleaved caspase-3蛋白的表达变化,ELISA法检测细胞上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达变化。结果 (1)盐屋霉素A作用后FoxM1蛋白的表达量降低(P<0.05)。CCK-8检测结果显示不同浓度盐屋霉素A对Hep-2细胞活力均有抑制作用,并随着盐屋霉素A浓度的增加和作用时间的延长,Hep-2的细胞活力逐渐下降,呈现浓度和时间依赖性。(2)1.3、1.5μmol/L盐屋霉素A处理后Hep-2细胞的增殖能力均降低(P<0.05),并呈现浓度依赖性;同时Ki-67蛋白的表达下调。(3)1.3、1.5μmol/L盐屋霉素A作用后,Hep-2细胞的凋亡率(10.60%,27.90%)均高于对照组(4.91%,P<0.05),并呈药物浓度依赖性;同时cleaved caspase-3蛋白的表达上调。(4)1.3、1.5μmol/L盐屋霉素A作用后Hep-2细胞的侵袭能力较对照组均下降(P<0.05),并呈药物浓度依赖性;同时MMP-2、MMP-9蛋白的表达下调。结论盐屋霉素A下调FoxM1可抑制喉癌细胞的增殖、侵袭等生物学行为。

肝细胞癌中Kruppel样因子4与叉头框蛋白M1基因表达相关性及临床意义

目的探讨人肝细胞癌中核转录因子Kruppel样因子4(KLF4)与叉头框蛋白M1(FOXM1)基因表达相关性,以及两种转录因子表达对肝细胞癌生长和增殖的影响。方法采用实时荧光定量PCR技术检测50例肝细胞癌患者肝癌组织及8株肝癌细胞中KLF4m RNA和FOXM1 m RNA表达水平并分析其相关性;KLF4过表达质粒和KLF4 si RNA分别转染人肝癌细胞Hep3B和BEL-7402,采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹实验检测KLF4 m RNA、FOXM1m RNA及KLF4蛋白、FOXM1蛋白表达水平;通过CCK8实验检测KLF4和FOXM1基因对细胞增殖的影响。结果肝癌组织和细胞中KLF4低表达,而FOXM1高表达,两者呈负相关(r=-0.462,P=0.001);KLF4基因过表达抑制肝癌细胞增殖,而FOXM1基因过表达促进肝癌细胞增殖,FOXM1基因过表达能恢复KLF4对肝癌细胞抑制增殖作用。结论在肝细胞癌中,KLF4和FOXM1基因表达呈负相关,两者不同的表达水平可影响肝癌细胞的增殖。

叉头框蛋白M1、环氧合酶2在结肠癌组织中的表达及相关性分析

目的探讨叉头框蛋白M1(fork head box M1,FoxM1)和环氧合酶2(cyclooxygenase2,COX-2)在结肠癌(colorectal carcinoma,CRC)中的表达及两者的相关性。方法采用免疫组织化学法检测FoxM1和COX-2在95例CRC组织和40例正常结肠组织中的表达,分析FoxM1和COX-2与结肠癌临床病理参数间的关系及两者表达的相关性。结果 FoxM1和COX-2在CRC组织中表达阳性率分别为85.3%(81/95)和87.4%(83/95),显著高于正常结肠组织的7.5%(3/40)和12.5%(5/40)(P<0.05)。FoxM1和COX-2的高表达与较多的淋巴结转移及较晚的临床分期密切相关(P<0.05),且两者在CRC中的表达强度呈正相关(r=0.638,P<0.05)。结论 FoxM1和COX-2的表达与CRC临床分期和淋巴结转移密切相关,提示其可能与CRC患者较差的预后相关。

异黏蛋白与叉头框蛋白M1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨异黏蛋白(MTDH)和叉头框蛋白M1(FoxM1)在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法:收集156例肝细胞癌(HCC)手术切除标本,免疫组织化学和反转录PCR(RT-PCR)分别检测MTDH、FoxM1蛋白和mRNA在HCC中的表达情况,并分析其表达与临床病理指标及预后的关系。结果:免疫组织化学结果显示,MTDH在HCC中的阳性表达率为71.2%(111/156),FoxM1在HCC中的阳性表达率为64.7%(101/156),其表达与肿瘤数目、TNM分期、微血管侵犯、卫星结节等相关(P<0.05)。RT-PCR方法检测显示,MTDH和FoxM1在肝细胞癌中的表达较对照组明显升高(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,MTDH与FoxM1的表达存在明显的相关性(r=0.507,P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析结果显示肝细胞癌患者生存时间与TNM分期、微血管侵犯、卫星结节、MTDH和FoxM1有关,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示TNM分期和MTDH的表达是影响患者生存时间的主要因素。结论:对于HCC患者,MTDH和FoxM1与诸多临床因素有关,MTDH为患者预后影响因素,且MTDH和FoxM1的表达存在相关性。

叉头框蛋白M1与胰腺癌发病机制的研究进展

叉头框蛋白M1(forkhead box M1,Fox M1)是一种转录因子蛋白质,具有调节细胞周期等重要作用.近年研究发现,Fox M1与胰腺癌的发病有明显的相关性.本文就Fox M1在胰腺癌的新生、增殖、转移等方面进行综述.

支气管哮喘患儿血清小窝蛋白-1水平和叉头框蛋白M1基因表达与气道重塑的相关性

目的探讨支气管哮喘患儿血清小窝蛋白-1(Cav-1)水平、叉头框蛋白M1(FOXM1)基因表达与气道重塑的相关性。方法选择2020年1月至2021年7月郑州大学附属儿童医院收治的178例支气管哮喘患儿为研究对象,其中急性发作期92例(急性发作组)、临床缓解期86例(临床缓解组);急性发作期患儿根据病情程度分为轻度组(n=47)和中重度组(n=45)。采用酶联免疫吸附法检测患儿血清Cav-1水平,实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清中FOXM1 mRNA表达;应用肺功能检测仪检测患儿第1秒用力呼气量(FEV_(1))、用力肺活量(FVC),并计算FEV_(1)/FVC;应用胸部CT检查患儿气道重塑情况,计算支气管管壁厚度与外直径的比值(T/D)、支气管壁占支气管总横截面积的百分比(WA)。结果急性发作组患儿血清Cav-1水平显著低于临床缓解组,FOXM1 mRNA相对表达量显著高于临床缓解组(P<0.05)。急性发作组患儿FEV_(1)、FEV_(1)/FVC显著低于临床缓解组,T/D、WA显著高于临床缓解组(P<0.05)。中重度组患儿血清Cav-1水平及FEV_(1)、FEV_(1)/FVC显著低于轻度组,血清中FOXM1 mRNA相对表达量及T/D、WA显著高于轻度组(P<0.05)。Pearson分析结果显示,急性发作期支气管哮喘患儿血清Cav-1水平与FOXM1 mRNA表达呈负相关(r=-0.512,P<0.05);血清Cav-1水平与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC呈正相关(r=0.516、0.499,P<0.05),与T/D、WA呈负相关(r=-0.508、-0.514,P<0.05);血清中FOXM1 mRNA表达水平与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC呈负相关(r=-0.494、-0.487,P<0.05),与T/D、WA呈正相关(r=0.504、0.512,P<0.05)。结论支气管哮喘患儿血清中Cav-1水平降低,FOXM1基因表达上调,二者可能参与了气道重塑的发生与发展;血清Cav-1和FOXM1基因表达水平对评估支气管哮喘患儿病情严重程度有重要价值。

结肠腺癌中叉头框蛋白M1表达及其与上皮型黏附蛋白的关系

目的检测叉头框蛋白(FOX)M1在结肠腺癌中的表达,探讨其与上皮型黏附蛋白(E-cadherin)的关系。方法结肠腺癌组(观察组)和正常结肠黏膜组(对照组)术后的标本,应用免疫组化方法检测两组中FOXM1和E-cadherin的表达,观察FOXM1和E-cadherin在不同临床特征中的表达差别,分析FOXM1和E-cadherin相关性。结果观察组中FOXM1表达的阳性率明显高于对照组,观察组中E-cadherin表达的阳性率明显低于对照组。观察组中FOXM1过表达、E-cadherin低表达均与淋巴结转移和微血管浸润密切相关。FOXM1过表达与肿瘤体积密切相关。线性相关分析显示观察组中FOXM1和E-cadherin表达呈负相关性。结论 FOXM1过表达可以促进结肠腺癌的发生和发展,FOXM1过表达可以在一定程度上下调E-cadherin的表达,对细胞间的黏附进行调节,促进肿瘤的进展。

微小RNA-325-3p和叉头框蛋白M1在胃腺癌中的表达及靶向关系研究

目的:探究微小RNA-325-3p(miR-325-3p)与叉头框蛋白M1(FOXM1)在胃腺癌中的表达,分析miR-325-3p与FOXM1的靶向关系。方法:选择人胃腺癌MGC-803、SGC-7901细胞系,分别构建miR-325-3p mimic组、miR-325-3p inhibitor组,并设立空白对照组,应用Western blot法检测FOXM1蛋白的表达,应用双荧光素酶报告基因实验验证miR-325-3p与FOXM1的靶向关系。收集确诊为胃腺癌并行根治术的42例患者的肿瘤组织和距肿物边缘>2 cm的癌旁正常胃黏膜组织,应用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测miR-325-3p的表达,应用免疫组化染色(EnVision法)检测组织中FOXM1的表达。结果:胃癌MGC-803和SGC-7901细胞系miR-325-3p mimic组FOXM1蛋白表达明显低于空白对照组,miR-325-3p inhibitor组FOXM1蛋白表达明显高于空白对照组(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-325-3p与FOXM1具有靶向关系。胃腺癌组织中miR-325-3p相对表达量明显低于癌旁正常胃黏膜组织,FOXM1阳性率明显高于癌旁正常胃黏膜组织(均P<0.05)。miR-325-3p和FOXM1在胃腺癌不同肿瘤最大径、浸润深度方面比较差异有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-325-3p与FOXM1呈负相关(r=-0.630,P=0.027)。结论:胃腺癌中miR-325-3p与FOXM1异常表达,参与肿瘤的形成和进展。miR-325-3p与FOXM1具有靶向调控关系。

叉头框蛋白M1和ADAM17在乳腺癌中的表达及意义

目的:探讨叉头框蛋白M1(Forkhead box protein M1,Fox M1)与解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinase17,ADAM17)在乳腺癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫印迹(Western blot)法检测浸润性乳腺癌(乳腺癌组)、乳腺纤维腺瘤(乳腺纤维腺瘤组)、正常乳腺组织(对照组)新鲜标本各7例。结果:乳腺纤维腺瘤组中Fox M1及ADAM17蛋白表达水平较对照组高(P<0.05)。乳腺癌组中Fox M1及ADAM17蛋白表达水平较乳腺纤维腺瘤组高(P<0.01)。在乳腺癌组中Fox M1和ADAM17蛋白的表达呈正相关性(r=0.68,P<0.05)。结论:在乳腺癌中Fox M1和ADAM17呈高表达,两者存在正相关性,且其表达强度明显高于乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织。

叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中作用的研究进展

胶质瘤是成人中枢神经系统中最常见的原发性肿瘤。叉头框蛋白M1(FOXM1)是叉头框转录因子家族的成员之一,其可通过调控Wnt/β-catenin、Akt/FOXM1、p53通路及其自身的翻译后修饰过程促进神经胶质瘤的恶性增殖、迁移和侵袭等过程。本文总结叉头框蛋白M1在脑胶质瘤中的作用,以期为临床脑胶质瘤的治疗提供新的理论依据和治疗靶标。

宫颈鳞状上皮叉头框蛋白M1与子宫颈上皮内瘤变的关系

目的 探讨宫颈鳞状上皮叉头框蛋白M1(FOXM1)蛋白表达与子宫颈上皮内瘤变(CIN)的关系。方法 选取103例手术切除的CIN组织石蜡标本作为试验组,其中CIN 1~3级分别有39,42和22例;另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除的正常宫颈组织石蜡标本101例为对照组。用免疫组化法测定宫颈鳞状上皮FOXM1蛋白的表达情况。用多因素Logistic回归模型分析影响CIN发生的因素,并分析不同组织标本中宫颈鳞状上皮FOXM1蛋白的表达情况。结果 Logistic多因素回归分析显示:口服避孕药[优势比(OR)=5.77,95%CI=2.38~14.03]、高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染(OR=8.576,95%CI=3.53~20.84)、FOXM1蛋白阳性(OR=5.44,95%CI=2.24~13.22)是影响CIN发生的独立危险因素(均P<0.05)。正常宫颈组织和CIN 1~3级组织中宫颈鳞状上皮FOXM1蛋白阳性表达率分别为23.76%,59.09%,90.48%和100.00%,正常宫颈组织与其他3组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 宫颈鳞状上皮FOXM1蛋白在CIN组织中异常高表达,不仅与CIN发生有关,而且随着CIN分级程度增加,其阳性表达水平呈升高趋势。

叉头框转录因子M1对人结肠癌细胞恶性表型的影响

目的结肠癌的侵袭和转移是结肠癌患者死亡的主要原因。文中拟探讨叉头框蛋白M1(Forkhead box M1,FoxM1)对人结肠癌细胞恶性表型的影响。方法应用实时荧光定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)和Western blot方法筛选出高表达细胞株HT-29及低表达细胞株HCT-116,应用RNA干扰技术有效下调FoxM1在HT-29细胞中的表达,同时采用过表达质粒调高FoxM1在HCT-116中的表达,2种细胞株根据不转染、转染空载质粒及转染干扰或过表达FoxM1质粒各分为3组:空白对照组、实验对照组、实验组。分别采用划痕实验和Transwell小室法检测上述转染细胞的细胞增殖、迁移与侵袭能力的变化。结果 RT-PCR及Westen blot结果提示,FoxM1在HT-29细胞中高表达,而在HCT-116细胞中呈低表达。应用PEX-2-FoxM1上调HCT-116细胞中FoxM1表达后,细胞的划痕愈合能力HCT-116实验组[(70.92±1.48)%]较HCT-116实验对照组[(18.43±3.01)%]及HCT-116空白对照组[(16.66±2.63)%]显著增强(P<0.05)。HCT-116实验组Transwell小室穿膜细胞数[(186.0±6.8)个]较HCT-116实验对照组[(42.0±2.0)个]及HCT-116空白对照组[(37.0±2.2)个]均增加(P<0.05)。应用pGPH-sh FoxM1下调HT-29细胞中FoxM1表达后,HT-29实验组细胞的划痕愈合能力[(10.37±3.86)%]较HT-29实验对照组[(39.79±2.17)%]及HT-29空白对照组[(67.36±2.61)%]显著下降(P<0.05)。HT-29实验组Transwell小室穿膜细胞数[(53.0±1.8)个]较较HT-29实验对照组[(95.0±2.2)个]及HT-29空白对照组[(118.0±4.0)个]均减少(P<0.05)。结论FoxM1表达与结肠癌的侵袭、转移等关系密切;FoxM1的siRNA干扰可有效抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,人为调高结肠癌细胞株中FoxM1表达则促进细胞的增殖、迁移和侵袭。提示FoxM1可能成为抑制结肠癌细胞增殖和转移新的分子靶点。

叉头框蛋白M1促进三阴性乳腺癌进展的分子机制

目的:探讨叉头框蛋白M1(FOXM1)在乳腺组织表达水平及其对乳腺癌细胞进展的影响。方法:选取2022年1月至2023年1月郑州大学第一附属医院择期手术的68例乳腺癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用蛋白质印迹法(Western blot)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析FOXM1蛋白和mRNA表达水平;采用对照短发卡RNA(shRNA)和FOXM1 shRNA慢病毒感染乳腺癌细胞MDA-MB-231,建立对照组和FOXM1 KD组细胞,采用噻唑蓝(MTT)法测定两组细胞的活力;流式细胞术分析两组细胞的周期和凋亡水平;Transwell分析两组细胞迁移和侵袭能力,Western blot分析两组细胞上皮细胞和间质细胞标志物表达水平;采用荧光定量PCR分析肿瘤和细胞中FOXM1靶基因KIF4A、MYBL2和Integrinβ1 mRNA表达水平。组间比较采用t检验。结果:癌旁组织FOXM1蛋白表达水平(1.29±0.28)明显低于三阴性乳腺癌组织(1.90±0.26),差异有统计学意义(t=12.890,P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,癌旁组织FOXM1 mRNA(0.80±0.23)明显低于三阴性乳腺癌组织(1.66±0.24),差异有统计学意义(t=21.630,P<0.05)。对照组细胞活力[(88.41±3.04)%]明显高于FOXM1 KD组细胞[(66.54±5.81)%],差异有统计学意义(t=8.173,P<0.05)。对照组细胞G 0/G 1期比例[(33.17±3.61)%]明显低于FOXM1 KD组细胞[(42.17±3.82)%],差异有统计学意义(t=4.201,P<0.05)。对照组细胞S期比例[(31.33±4.46)%]明显高于FOXM1 KD组细胞[(25.67±3.08)%],差异有统计学意义(t=2.563,P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(3.67±0.78)%]明显低于FOXM1 KD组细胞[13.70±3.39)%],差异统计学意义(t=7.701,P<0.05)。对照组细胞迁移和侵袭数量[(135.33±9.50)个和(94.67±12.32)个]明显高于FOXM1 KD组细胞[(102.83±13.64)个和(67.67±10.42)个],差异有统计学意义(t=4.788、4.097,P<0.05)。对照组细胞E-cadherin蛋白表达水平(0.99±0.08)明显低于FOXM1 KD组细胞(1.34±0.09),差异有统计学意义(t=7.194,P<0.05)。对照组细胞β-catenin、vimentin和Twist蛋白表达水平(1.10±0.11、1.03±0.13、1.21±0.13)明显高于FOXM1 KD组细胞(0.77±0.12、0.73±0.09、0.83±0.09),差异有统计学意义(t=4.898、4.738、5.851,P<0.05)。对照组细胞KIF4A、MYBL2和Integrinβ1 mRNA表达水平(1.01±0.11、1.02±0.12、1.25±0.14)明显高于FOXM1 KD组细胞(0.70±0.08、0.73±0.11、0.66±0.09),差异有统计学意义(t=5.684、8.518、6.110,P<0.05)。结论:FOXM1在三阴性乳腺癌组织中呈高表达,通过调节KIF4A、MYBL2和Integrinβ1等基因表达,促进三阴性乳腺癌细胞增殖和转移等过程。

过表达微小RNA-877-5p通过靶向叉头框转录因子M1调控胃癌细胞活力和凋亡

目的探讨微小RNA-877-5p(miR-877-5p)对胃癌细胞活力、凋亡的影响及其分子机制。方法本研究时间为2020年1—7月。胃癌和正常胃黏膜上皮细胞株购自美国典型培养物保藏中心。实时定量基因扩增荧光检测(qPCR)检测胃癌细胞株HGC-27、SUN-1、AGS和正常胃黏膜上皮细胞株GES-1中miR-877-5p和叉头框转录因子M1(FOXM1)信使核糖核酸(mRNA)表达。建立miR-877-5p过表达或抑制FOXM1表达细胞株,观察其在HGC-27细胞的活力、凋亡中的作用。MTT法检测细胞的活力,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blotting)检测FOXM1、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p21、p27、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved-caspase 3)蛋白表达。TargetScan预测结合双荧光素酶报告实验分析miR-877-5p和FOXM1的靶向关系。共转染miR877-5p模拟物和FOXM1过表达载体(pcDNA-FOXM1),研究FOXM1过表达对miR-877-5p过表达诱导的HGC-27细胞增殖和凋亡的影响。结果与正常胃黏膜上皮细胞GES-1比较,胃癌细胞HGC-27、SUN-1、AGS中的miR-877-5p表达下调(1.00±0.08比0.34±0.03,0.51±0.05,0.44±0.04,P<0.05),FOXM1 mRNA和蛋白表达上调(1.00±0.09比2.41±0.23,2.58±0.24,2.26±0.23,P<0.05)。miR-877-5p过表达显著降低HGC-27细胞48 h、72 h的细胞活力(P<0.05),明显提高细胞凋亡率、p21、p27、Bax、cleavedcaspase3蛋白的水平(P<0.05),显著减少cyclinD1、Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)。抑制FOXM1表达显著降低48 h、72 h的细胞活力(P<0.05),提高细胞凋亡率、p21、Bax蛋白水平(P<0.05),减少cyclinD1、Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)。miR-877-5p靶向调控FOXM1的表达。FOXM1过表达后,miR-877-5p过表达对HGC-27细胞增殖、cyclinD1、Bcl-2蛋白表达的抑制作用被逆转,其对细胞凋亡、p21、Bax蛋白表达的促进作用也被逆转。结论过表达miR-877-5p通过靶向调控FOXM1表达抑制胃癌细胞的活力,并诱导细胞凋亡。

超声造影联合血清Ficolin-3,FOXM1对2型糖尿病下肢动脉病变的诊断价值分析

目的超声造影联合血清纤维胶凝蛋白-3(Ficolin-3)、叉头框蛋白M1(FOXM1)对2型糖尿病(T2DM)下肢动脉病变的诊断价值分析。方法选取2022年2月至2023年2月我院收治的T2DM患者114例,以下肢动脉血管造影检查为金标准,将患者分为下肢动脉病变组23例(病变组)和无下肢动脉病变组91例(T2DM组),另选取同期于本院进行体检的健康志愿者91例为对照组。对患者及健康志愿者进行血清Ficolin-3、FOXM1及超声造影检查;ROC曲线分析血清Ficolin-3、FOXM1对T2DM下肢动脉病变的诊断价值;采用四格表法分析血清Ficolin-3、FOXM1、超声造影及3项联合对T2DM下肢动脉病变的诊断价值。结果病变组、T2DM组血清Ficolin-3水平显著高于对照组,且病变组血清Ficolin-3水平显著高于T2DM组(均P<0.05);病变组、T2DM组血清FOXM1水平显著低于对照组,且病变组血清FOXM1水平显著低于T2DM组(均P<0.05);血清Ficolin-3诊断T2DM下肢动脉病变的曲线下面积为0.868,敏感度为86.96%,特异度为75.82%,最佳截断值为35.12μg/ml;血清FOXM1诊断T2DM下肢动脉病变的曲线下面积为0.854,敏感度为82.61%,特异度为78.02%,最佳截断值为0.57;血清Ficolin-3、FOXM1检查结果与金标准均具有中度一致性(Kappa=0.480、0.481,均P<0.001);超声造影检查结果显示,T2DM下肢动脉病变的阳性检出率为73.91%,与金标准具有较高一致性(Kappa=0.631,P<0.001);3项联合检测的敏感度、漏诊率均显著优于超声造影单独诊断,准确度显著优于Ficolin-3、FOXM1单独诊断,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论血清Ficolin-3、FOXM1联合超声造影检查在T2DM下肢动脉病变诊断中的应用价值较高,进一步提升了诊断的敏感度、准确度,减少了误诊率。

miR-21及FOXM1在妊娠期高血压与子痫前期患者血清中的表达

目的探讨微小RNA-21(miR-21)及叉头框蛋白M1(FOXM1)在妊娠期高血压(GHT)与子痫前期(PE)患者中的表达及意义。方法选取妊娠期高血压疾病(HDP)患者150例,其中GHT患者112例作为GHT组、PE患者38例作为PE组,选择年龄及孕周匹配同期产检正常孕妇150例作为对照组;3组均于入组当天采集晨空腹外周静脉血4 mL,检测血清miR-21及FOXM1水平;分析GHT组及PE组患者血清miR-21与FOXM1 mRNA的相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)计算曲线下面积(AUC),评估PE的影响因素;分析miR-21及FOXM1 mRNA对PE的预测价值及对妊娠结局的影响。结果PE组、GHT组血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于对照组,PE组低于GHT组(P<0.05);PE组、GHT组miR-21与FOXM1 mRNA均呈正相关(P<0.05);miR-21及FOXM1 mRNA是PE的独立保护因素(P<0.05);基于miR-21及FOXM1 mRNA构建的风险模型评估PE的AUC值为0.841,高于miR-21及FOXM1 mRNA单独评估的AUC值(P<0.05);PE组不良妊娠结局发生率高于GHT组(χ^(2)=4.053,P=0.044),不良妊娠结局患者血清miR-21及FOXM1 mRNA水平低于正常妊娠者(P<0.05)。结论miR-21表达降低可能会靶向下调FOXM1 mRNA表达,促进GHT与PE的发生、发展,且与不良妊娠结局有关。

circFOXM1作为新型胃癌标志物调控胃癌发生、发展的机制研究

目的分析新型胃癌标志物环状叉头框蛋白M1(circFOXM1)在胃癌发生、发展机制中的调控作用。方法选取2022年1月至2023年4月该院肿瘤科收治的60例胃癌患者作为研究对象,检测其胃癌组织及癌旁组织中circFOXM1的表达水平。根据circFOXM1的表达水平,将60例患者分为circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组。比较circFOXM1高表达组和circFOXM1低表达组的临床病理资料(淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测GES-1、HGC-27、BGC-823、MKN-45、MKN-1细胞中circFOXM1信使RNA(mRNA)、微小RNA(miR)-182-5p mRNA与母亲信号蛋白同源物7(SMAD7)mRNA及SMAD7蛋白的表达水平。体外培养MKN-45细胞,将其随机分为对照组、circFOXM1敲低组[转染circFOXM1小干扰RNA(siRNA)质粒]、circFOXM1过表达组(转染circFOXM1过表达质粒)、共转染阴性对照组(转染空载质粒和miR-182-5p抑制剂阴性对照)、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组(转染circFOXM1 siRNA质粒和miR-182-5p抑制剂),分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组MKN-45细胞circFOXM1 mRNA、miR-182-5p mRNA与SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白的表达水平;采用Transwell侵袭及细胞划痕试验检测各组MKN-45细胞侵袭迁移情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组MKN-45细胞增殖情况。取50只裸鼠随机分为对照小鼠组、circFOXM1敲低小鼠组、circFOXM1过表达小鼠组、共转染阴性对照小鼠组、circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,每组10只。将各组MKN-45细胞接种在对应裸鼠右腋附近背部皮下构建胃癌移植瘤模型,饲养4周后检测各组移植瘤裸鼠MKN-45细胞增殖率、肿瘤体积及肿瘤质量。将MKN-45细胞随机分为野生miR-182-5p+空载组、野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组、突变miR-182-5p+空载组、突变miR-182-5p+circFOXM1过表达组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、野生SMAD7+miR-182-5p mimic组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组、突变SMAD7+miR-182-5p mimic组,再按照不同方式对各组MKN-45细胞进行转染。采用荧光素酶报告试验检测各组MKN-45细胞circFOXM1对miR-182-5p、SMAD7的靶向调控。结果circFOXM1低表达组有17例患者,circFOXM1高表达组有43例患者。circFOXM1低表达组和circFOXM1高表达组患者淋巴结转移、肿瘤侵袭深度和临床分期情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。MKN-45、HGC-27、BGC-823、MKN-1细胞中circFOXM1 mRNA、SMAD7 mRNA、SMAD7蛋白表达水平均高于GES-1细胞,miR-182-5p mRNA表达水平均低于GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组circFOXM1 mRNA表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组和circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1过表达组,低于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平低于circFOXM1过表达组,高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低组miR-182-5p mRNA表达水平高于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,SMAD7 mRNA及SMAD7蛋白表达水平均低于circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,均低于circFOXM1过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂组MKN-45细胞侵袭数、迁移率均高于circFOXM1敲低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1敲低小鼠组MKN-45细胞增殖率低于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,肿瘤体积及肿瘤质量均小于对照小鼠组及circFOXM1敲低+miR-182-5p抑制剂小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。circFOXM1过表达小鼠组MKN-45细胞增殖率高于对照小鼠组、肿瘤体积及肿瘤质量均大于对照小鼠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。野生miR-182-5p+circFOXM1过表达组相对荧光素酶活性低于野生miR-182-5p+空载组(P<0.05)。野生SMAD7+miR-182-5p mimic组相对荧光素酶活性低于野生SMAD7+miR-182-5p mimic阴性对照组(P<0.05)。结论敲低circFOXM1可经上调miR-182-5p而抑制表达SMAD7,从而抑制胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及其体内肿瘤生长,可作为胃癌的新型标志物。