中药复方双黄连剂型研究

双黄连为中药抗菌抗病毒的著名方剂,由金银花、黄芩、连翘3味中药组成,具有清热解毒、轻宣透邪之功效。用于外感风热引起的发热、咳嗽、咽痛,主要有抗菌、抗病毒、增强免疫等作用。双黄连是中国药典收载的中成药,研究的比较深入,近年来被制成很多剂型,有双黄连注射液、双黄连粉针剂、双黄连口服液、颗粒剂、片剂等。现对双黄连剂型研究进展作一综述。

双黄连口服液不同精制工艺对比评价研究

目的基于“溶液环境—化学成分”分析,比较双黄连口服液不同精制方法的适用性。方法以双黄连口服液为试验体系,分别测定黄连口服液原液,微滤液、醇沉液,壳聚糖絮凝液中pH值、电导率、浊度及黏度等物理参数;以HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量。测定蛋白质、鞣质、淀粉及果胶等高分子物质含量;以SPSS 19.0进行不同精制方法的相关性分析。结果综合化学成分与溶液环境物化性质改变,双黄连口服液从“去粗”角度,微滤法最佳,絮凝法最差;但从“取精”角度,微滤法不及醇沉法,絮凝法仍最差。采用不同精制工艺测得的黄芩苷含量与pH、鞣质含量呈正相关;与浊度、电导率呈负相关。结论随着微滤法在中医药领域的应用推广,有望替代传统醇沉法精制双黄连口服液。

双黄连口服液质量一致性评价研究

目的:探索建立双黄连口服液(SHLO)质量一致性评价方法,并对常见市售8个厂家的产品进行质量分级。方法:建立SHLO中6个指标成分的高效液相色谱含量测定方法,从同厂家不同批次、不同厂家角度分析样品含量均一性;用3个质量一致性参数[批内一致性差异(PA)、批间一致性差异(PB)、指纹图谱相似率(PC)]表征不同厂家产品质量一致性水平;运用主成分分析(PCA)模型提取一致性区分因子(P),实现对8个厂家样品质量一致性分级。结果:建立的高效液相色谱含量测定方法简便且方法学验证合格;40批样品中绿原酸、黄芩苷、连翘苷的质量浓度分别为0.66~1.25、12.71~21.89、0.39~0.66 mg·mL^(–1),均符合《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版对该制剂的限度要求,非《中国药典》2020年版指标成分新绿原酸、连翘酯苷A、汉黄芩苷的质量浓度分别为0.75~1.44、0.07~0.94、0.001 3~1.930 0 mg·mL^(–1),且同厂家样品均一性较好、不同厂家样品存在一定差异;8个厂家样品PA为1.2%~7.7%、PB为16.6%~39.1%、PC为99.3%~99.9%,依据P可将8个生产厂家样品分为3类,其中厂家F、R产品的一致性较好。结论:建立了简便的SHLO多成分定量方法,结合3个一致性评价参数和PCA模型可对不同生产厂家样品质量进行区分,数据结果可为各生产厂家质量标准提升提供参考。

双黄连的药理与临床应用

双黄连指由金银花、连翘、黄芩三味中药经提取制成的制剂。有双黄连粉针剂（简称粉针剂）、双黄连注射液（简称水针剂）和双黄连口服液（简称口服液）三种剂型。七十年代初由哈尔滨医科大学二附院制成无菌粉针剂，后又制成水针剂。90年代初又由河南众生制药厂研制成口服液。近年双黄连的药理及临床应用等方面又有新进展，现作一综述。

双黄连挥发油提取工艺优化及其化学成分、抗菌活性研究

目的优化双黄连挥发油提取工艺,并考察其化学成分、抗菌活性。方法在单因素试验基础上采用正交试验优化提取工艺,GC-MS法分析化学成分,微量肉汤法测定抑菌活性。结果最佳条件为浸泡时间1h,料液比1∶6,提取时间4h,挥发油提取率为(0.662±0.010)%。共鉴定出23个化合物,主要为烯、烯醇、烯醚、烯酮,匹配因子大于85.0的有21个,占87.5%,其中水芹烯相对含量最高,为30.02%。挥发油对大肠杆埃希菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为6.25、25、3.13μL/mL。结论该方法提取率高、稳定可行,可为具有抗菌活性的双黄连挥发油制剂工艺升级和临床效果提升提供依据。

复方双黄连制剂对单核巨噬细胞(RAW264.7)Fc/C3b受体活性和分泌功能的影响

【目的】探究复方双黄连制剂对巨噬细胞吞噬能力和分泌功能的影响,为复方双黄连的深度开发及畜禽用药的合理选择提供科学依据。【方法】将金银花、黄芩、连翘、穿心莲干燥粉碎后分别制备浸膏,按照比例制备双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘=1∶1∶2)、复方双黄连口服液(金银花∶黄芩∶连翘∶穿心莲=1∶1∶2∶2)及穿心莲口服液,调节pH为7.0,生药浓度为1 g/mL。3种药物作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,采用CCK-8法检测细胞活力,确定3种药物安全浓度,将药物最大安全浓度以二倍稀释法稀释为3个浓度;采用脂多糖(LPS)和氢化考的松琥珀酸钠(HCSS)作用于RAW264.7细胞模拟机体炎症和免疫抑制状态,3种药物作用于这2种状态的细胞和正常细胞,采用YC、EA玫瑰花环法及中性红吞噬法检测巨噬细胞Fc/C3b受体活性和吞噬能力,采用ELISA法检测巨噬细胞分泌能力。【结果】复方双黄连、双黄连、穿心莲的安全浓度分别为0.625~2.5、3.125~12.5和0.625~2.5 mg/mL。不同浓度复方双黄连、双黄连、穿心莲作用于巨噬细胞,细胞吞噬能力均显著高于空白对照组(P<0.05)。复方双黄连可降低LPS巨噬细胞RAW264.7活跃的吞噬能力,增强HCSS巨噬细胞RAW264.7吞噬能力;不同浓度复方双黄连可使活化的巨噬细胞Fc/C3b受体活性下降,低下的Fc/C3b受体活性增强;不同浓度复方双黄连具有促进巨噬细胞分泌一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)及溶菌酶(LZM)的作用,抑制LPS巨噬细胞NO、TNF-α、IFN-γ及白细胞介素-6(IL-6)的分泌。【结论】复方双黄连可通过活化巨噬细胞Fc/C3b受体活性以增强机体免疫力和抗炎能力,同时对已活化的巨噬细胞分泌功能起到抑制作用,以减少由于免疫功能亢进造成的机体损伤。研究结果为中兽药复方双黄连的深度开发提供了参考依据。

双黄连氧气驱动雾化吸入联合NCPAP治疗对MP合并呼吸衰竭患儿的影响

目的探讨采取双黄连氧气驱动雾化吸入联合经鼻持续气道正压通气(NCPAP)治疗儿童重症支原体肺炎(MP)合并呼吸衰竭的效果及对血清瘦蛋白(Leptin)、白细胞介素⁃17(IL⁃17)及白细胞介素⁃33(IL⁃33)水平的影响。方法选取82例患儿并随机分成观察组42例与对照组40例,对照组采取常规吸氧、止咳及NCPAP治疗,观察组则是在对照组的基础上加用双黄连氧气驱动雾化吸入治疗,比较2组治疗效果。结果观察组患儿各症状消退时间明显比对照组短(P<0.05);治疗后2组血氧饱和度(SaO_(2))、血氧分压(PaO_(2))较治疗前提高,二氧化碳分压(PaCO_(2))较治疗前降低,而观察组指标变化幅度较对照组显著(P<0.05);治疗后2组血清Leptin、IL⁃17、IL⁃33均较治疗前降低,观察组各指标显著低于对照组(P<0.05)。结论双黄连氧气驱动雾化吸入联合NCPAP治疗儿童重症MP合并呼吸衰竭,可显著改善患儿血气功能指标,降低血清炎症因子水平,促进患儿症状的改善。

双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果

为了评价双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果,分别在SPF鸡感染H9亚型禽流感病毒前和感染后口服双黄连口服液,病毒感染后3、5、7、10 d采集喉头和泄殖腔棉拭子,通过实时荧光定量RT-PCR检测排毒率,并在感染后5、7 d剖检观察组织病变,进行病理组织学观察。结果显示,双黄连口服液可降低H9亚型禽流感病毒感染鸡的排毒率,缩短排毒周期,治疗组和预防治疗组病毒感染后10 d排毒率为0,极显著低于病毒感染组排毒率6/10(60%)(P<0.01);治疗组和预防治疗组SPF鸡在感染后5 d和7 d喉头、气管黏膜、肺脏的组织损伤较小;且与治疗组相比,预防治疗组排毒率更低,喉头、气管、肺脏组织病理损伤更轻微。结果表明,双黄连口服液不仅可降低感染鸡的排毒率,缩短鸡体排毒时间。针对呼吸道病原,双黄连口服液预防治疗效果优于感染后治疗效果。该研究为双黄连口服液更好地应用于临床呼吸道疫病的防控提供了新的策略。

双黄连注射剂中1,5-二咖啡酰奎宁酸致敏家兔后血清中特异性抗体的测定

目的检测双黄连注射剂中1,5-二咖啡酰奎宁酸致敏家兔后血清中特异性抗体效价。方法双黄连注射剂中疑似小分子半抗原物质1,5-二咖啡酰奎宁酸与正常家兔血清体外孵育制备完全抗原,免疫家兔获得特异性抗体。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清的抗体效价。间接竞争ELISA测定血清特异性并绘制抑制曲线。采用兔免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒检测各组家兔抗血清中IgE抗体的含量。结果1,5-二咖啡酰奎宁酸浓度分别为0.25 mg/ml、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml、2.00 mg/ml、4.00 mg/ml时效价[吸光度(A值)]对应的分别为0.364±0.020、0.334±0.010、0.322±0.020、0.332±0.010、0.298±0.020,均高于阴性对照组A值(0.095±0.010)。得到回归方程I=0.1952 lgC+0.2734,R2=0.9958,半数抑制浓度(IC50)=33.494 mg/ml。家兔体内产生了外源性IgE型抗体。结论在本实验条件下双黄连注射剂中疑似半抗原物质1,5-二咖啡酰奎宁酸具有致敏性。

双黄连注射剂中黄芩素致敏家兔后血清中特异性抗体的测定

目的利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测双黄连注射剂中黄芩素致敏家兔后血清中特异性抗体的效价。方法将正常家兔血清与双黄连注射剂中疑似小分子半抗原物质黄芩素在体外一起孵育从而制备所需完全抗原,随后,利用这些完全抗原免疫家兔以期获得特异性抗体。运用ELISA法检测所得抗血清的抗体效价。通过间接竞争ELISA法,进一步测定血清特异性并绘制相关浓度抑制曲线。此外,采用兔免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒检测各组家兔抗血清中相对应的IgE抗体含量。结果与阴性对照组比较黄芩素的抗体效价(OD)值是其2倍,表明其具有潜在的致敏性。通过整理数据,绘制抑制率曲线得到回归方程I=0.138lgC+0.402,R^(2)=0.959,显示出良好的拟合度。半数抑制浓度IC_(50)=5.178 mg·mL^(-1)。此外,本实验结果明显表明外源性IgE型抗体已经在家兔体内产生,从而进一步证实了黄芩素的致敏性。结论在本实验所模拟家兔致敏全过程结果中表明黄芩素具有明显的致敏性。这一发现对于双黄连注射剂的安全使用具有重要的指导意义,也为相关药物的研发和生产提供了有价值的参考。

薄层扫描法测定双黄连制剂中连翘甙的含量

采用薄层扫描法测定双黄连含片及其它双黄连类制剂中连翘甙的含量，并进行了方法学研究。平均加样回收率为９６．９４％，ＲＳＤ为１．４９％。为进一步提高双黄连类中成药的质量提供了一种简便、准确的方法。

孟鲁司特钠联合双黄连颗粒治疗对下呼吸道感染患儿临床疗效的影响

目的分析孟鲁司特钠联合双黄连颗粒治疗对下呼吸道感染患儿临床疗效的影响。方法选择2021年5月—2022年5月济宁市第三人民医院收治的70例下呼吸道感染患儿作为研究对象,以抽签法分为研究组和对照组,每组35例。研究组采用孟鲁司特钠联合双黄连颗粒治疗,对照组采用双黄连颗粒治疗。比较两组患儿治疗后的血氧饱和度和心率、临床疗效、炎症因子、临床症状缓解时间和不良反应。结果研究组的心率明显低于对照组,血氧饱和度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的C反应蛋白、降钙素原、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的临床疗效明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组的咳嗽、气促、胸闷及体温恢复时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组总不良反应发生率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对下呼吸道感染患儿,采取孟鲁司特钠联合双黄连颗粒治疗,可改善血氧饱和度和心率,加快临床症状缓解时间,提高临床疗效,安全性较高,不会引起严重的不良反应,值得临床采用。

双黄连含片治疗急性咽炎60例

目的 :观察双黄连含片治疗急性咽炎疗效和安全性。方法 :采用随机对照临床试验方法 ,治疗组 60例患者给予双黄连含片每次 2片 ,每日 5次 ,含服 ;对照组 2 0例 ,给予双黄连颗粒每次 1包 ( 5 g) ,每日 3次 ,冲服。疗程均为 7d。结果 :治疗组与对照组的愈显率及有效率分别为 96.7%、90 .0 %和 90 .0 %、80 .0 % ;经统计学处理 ,两组的愈显率有显著性差异 ( P<0 .0 5 ) ,有效率无显著性差异。提示 :在改善咽部症状方面双黄连含片优于双黄连颗粒。

阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童肺炎支原体肺炎的效果分析

目的:分析阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的效果。方法:选取2022年7月—2023年6月联勤保障部队第九九一医院收治的MPP患儿96例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组,各48例。对照组采用阿奇霉素序贯疗法,研究组在对照组基础上联合双黄连口服液治疗。比较两组治疗效果、症状消失时间、炎性因子水平以及不良反应发生情况。结果:研究组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.025)。研究组咳嗽、发热、肺部啰音消失时间均早于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。治疗前,两组白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组IL-6、hs-CRP水平降低,研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童MPP效果理想,可促进症状消退,抑制炎性反应,且未增加不良反应发生风险。

双黄连对对乙酰氨基酚诱导大鼠肝损伤的保护作用

取40只体重相近的雄性SD大鼠,随机分成空白组、模型组、阳性药物组和双黄连处理组,阳性药物组、双黄连处理组分别腹腔注射甘利欣、双黄连,空白组和模型组腹腔注射生理盐水,连续7 d后,用对乙酰氨基酚诱导肝损伤,测定四组大鼠血清中丙氨酸氨基转氨酶、天冬氨酸氨基转氨酶的活性及血清总蛋白的质量浓度,制作肝脏组织切片,分析肝脏结构变化。结果显示:对乙酰氨基酚模型组制作成功,双黄连处理组较模型组大鼠的肝功能指标显著改善,肝组织病理变化明显减轻,表明双黄连对对乙酰氨基酚所致大鼠肝损伤有一定的保护作用。

双黄连口服液与颗粒剂微生物限度检查方法的研究

目的:研究双黄连口服液与颗粒剂的微生物限度检查方法。方法:分别采用常规倾注平皿法、培养基稀释法及薄膜过滤法进行双黄连口服液与颗粒剂的微生物限度检查方法学验证,并测定金黄色葡萄球菌等3种试验菌株的回收率。结果:双黄连口服液与颗粒剂均具有抑菌活性。采用常规倾注平皿法和培养基稀释法,试验菌株回收率低,不符合回收率要求,不能真实反映出供试液受污染的情况。薄膜过滤法试验菌株回收率显著高于培养基稀释法,符合回收率要求。结论:双黄连口服液与颗粒剂进行微生物限度检查应采取薄膜过滤法。

雷尼替丁联合双黄连口服液治疗口腔溃疡的有效性研究

观察双黄连口服液联合雷尼替丁对口腔溃疡的治疗作用。方法 采用雷尼替丁作为对照组50例,并将两组各50例进行比较。结果 观察组患者免疫功能、炎性反应、疼痛程度及临床症状明显减轻,疗效明显高于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率差异不显著(P>0.05)。结论 雷尼替丁联合双黄连口服液在口腔溃疡医治方面疗效确切,且药物安全性较高。