基于代谢组学探究反左金丸对“胃寒证”代谢模式的影响

目的采用代谢组学方法研究反左金丸对慢性胃炎“胃寒证”患者体内代谢模式的影响。方法21例患者采用视觉模拟法评价治疗前后的症状分数,收集治疗前后21例健康人的空腹血清,运用UPLC-LTQ/Orbitrap MS技术进行检测,通过多元统计分析方法进行组学研究。结果与治疗前比较,治疗后患者的各症状分数明显改善;慢性胃炎“胃寒证”患者与健康人的血清代谢轮廓明显分离;患者经反左金丸治疗前后的血清代谢轮廓明显分离,且治疗后的代谢轮廓明显趋向健康人;患者与健康人之间筛选出9个差异代谢物,治疗前后筛选出6个差异代谢物;与健康人比较,患者治疗前与能量代谢相关的3-羟基十二烷酸相对含量升高、十八烯酸相对含量降低,与物质代谢相关的3-丙基丙烯醛相对含量升高、丁酮相对含量降低,与神经兴奋性相关的(R)-(+)-2-吡咯烷酮-5-羧酸相对含量降低;与治疗前比较,治疗后患者3-羟基十二烷酸和3-丙基丙烯醛的相对含量降低,十八烯酸、(R)-(+)-2-吡咯烷酮-5-羧酸、丁酮的相对含量升高。结论慢性胃炎“胃寒证”患者与健康人的代谢模式存在差异,“胃寒证”患者较健康人体内的物质和能量代谢减慢、神经兴奋性降低,反左金丸能够改善“胃寒证”患者的症状,并对其代谢模式回归正常具有一定调节作用,其作用环节可能与物质、能量代谢和神经兴奋传导有关。

左金丸及反左金丸对实验性大肠癌不同时期甲基转移酶表达的影响

目的:探讨左金丸及反左金丸对大肠癌发生、发展的干预作用,及在大肠癌不同时期对甲基转移酶表达的影响.方法:在180只大鼠左肩胛骨侧皮下注射1,2-二甲基酰肼(1,2-DMH)25mg/kg,每周1次,连续注射12wk.随机将大鼠分为3组:左金丸组、反左金丸组和对照组.从第1次注射DMH的第2天开始,左金丸组和反左金丸组每天以中药汤剂1.4g/kg灌胃,对照组灌服同等体积的生理盐水,每日1次,连续34wk.分别在第11、21、34周,每组取部分大鼠脱颈处死,通过病理学观察左金丸和反左金丸对大鼠大肠癌发生发展的干预作用,实时荧光定量PCR法检测不同肿瘤发展时期Dnmt1、Dnmt3a及Dnmt3bmRNA的表达.结果:左金丸和反左金丸均能在肿瘤发生的早期显著抑制癌症的进程,左金丸作用优于反左金丸,但后期(34wk),二者的作用不明显.对照组和中药组Dnmt1、Dnmt3a表达没有明显变化.对照组中Dnmt3b的表达明显高于中药组(4.784vs2.613,P<0.01),且随癌变进程的深入,Dnmt3b表达量增高.结论:左金丸和反左金丸均可以有效阻碍早期大肠癌的发生和发展.Dnmt3b参与了组织恶变的过程,其表达的调控可能是中药干预肿瘤进程的机制之一.

左金丸和反左金丸中药药性-证候相关性初步研究

目的:通过研究左金丸和反左金丸对胃热证或胃寒证模型动物的毒性、药效反应,初步探求"药性-证候"其相关性。方法:以辣椒煎液和无水乙醇造成胃热证模型,以冰水和氢氧化钠造成胃寒证模型,将动物随机分为模型组和给药组,通过给予大剂量药物,观察小鼠急性毒性死亡情况和对大鼠胃组织病理形态学的影响。结果:①小鼠急性毒性试验:左金丸两证型组小鼠死亡率均为100%,与模型组比较有极显著性差异(P<0.01)。反左金丸胃热证组小鼠死亡率为70%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),而且其死亡率高于反左金丸胃寒证组(P<0.01);②大鼠胃组织病理形态学:两模型组大鼠胃粘膜上皮有不同程度的出血、变性、水肿甚或凝固性坏死,给药后,左金丸对胃热证模型、反左金丸对胃寒证模型大鼠胃粘膜均有不同程序的保护作用(P<0.05),而且反左金丸对胃寒证模型大鼠胃粘摸的保护作用强于左金丸(P<0.05)。结论:药物的毒性或药效均可能与药物的药性-证候之间存在一定的相关性,正确地运用中药的药性指导临床用药具有重要的意义。

左金丸与反左金丸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的比较

目的比较左金丸(Zuojin Pill,ZP)和反左金丸(Retro-zuojin Pill,RZP)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法采用MTT比色法观ZP与RZP对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析细胞凋亡率;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化。结果0.1mg/mlZP与RZP分别作用SGC-7901细胞后,均能抑制细胞活性,且与时间呈依赖关系。0.1、0.5和1.0mg/mlRZP作用SGC-7901细胞48h,细胞凋亡率为(5.52±0.54)%、(6.91±2.31)%、(8.50±1.02)%,0.1、0.5和1.0mg/ml的ZP对细胞的凋亡率分别为(11.60±1.24)%、(21.80±0.28)%、(36.40±1.59)%,与对照组(1.69±1.91)%比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。结论左金丸和反左金丸对SGC-7901生长都有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡,同一浓度的ZP和RZP作用SGC-7901相同时间,ZP的作用效果更为明显。

微量量热法研究左金丸与反左金丸对肠道菌群生长代谢的影响

目的从生物热动力学角度研究左金丸、反左金丸对肠道菌群生长代谢的影响,验证其客观差异性,探讨类方研究的新方法。方法采用微量量热法测定小鼠肠道菌群在不同浓度的左金丸、反左金丸作用下的生长代谢热谱曲线,以特征参数生长速率常数(k)、最大发热功率(Pmax)及达峰时间(Tp)、总产热量(Qt)和细菌抑制率(I)为指标,综合评价左金丸与反左金丸的活性差异。结果左金丸与反左金丸作用下的肠道菌群,随着药液浓度的增加,达峰时间Tp均延长;而左金丸与反左金丸对肠道细菌生长速率常数k值的影响却不同,与空白对照组比较,二者作用下的k值均减小,即两者均抑制肠道细菌的生长;由抑制率I可知,左金丸抑菌活性大于反左金丸。结论左金丸与反左金丸的抑菌活性存在客观差异性;微量量热法具有实时、在线、灵敏的特点,可快速、准确地评价类方的活性差异。

左金丸及反左金丸对寒性功能性胃肠疾病模型大鼠脑及胃肠组织c-fos表达的影响

目的:比较研究左金丸与反左金的作用差异。方法:选用SD大鼠将厚朴、枳实、大黄以3∶3∶2比例制成1g/ml水煎剂,隔日灌胃1次,剂量为10g/kg体重,同时隔日喂饲造成寒性功能性胃肠疾病模型。进行肛门直肠内压力测定,比较组间差异并重点考察了左金丸和反左金丸对寒性功能性胃肠疾病模型脑及胃肠组织c-fos阳性表达的影响。结果:反左金丸能明显改善寒性功能性胃肠疾病模型动物的状态,降低直肠内压力变化值,且能显著降低胃寒证模型动物脑及胃肠组织中c-fos的阳性表达,而左金丸的作用不明;吴茱萸能表现出与反左金丸相似的药理作用,而单味黄连的作用不明显。结论:左金丸及反左金丸对寒性功能性胃肠疾病模型的作用差异与方剂药物组成的寒热属性有关。

反左金丸的构想和临床应用

左金丸以黄连六倍于吴茱萸组成,功能清泻肝火,笔者临床反用其意,重用吴茱萸,少佐黄连,以治多种胃肠疾病,颇见良效.以吴茱萸用量反重于黄连,姑为之名曰"反左金丸".

基于小鼠温度趋向行为学表征的左金丸及反左金丸寒热属性

中药四性又称＂四气＂,是指药物寒、热、温、凉四种不同的药性,它反映了药物对人体阴阳盛衰、寒热变化的作用倾向。四性理论作为中医理论体系的重要组成部分,是在前人长期的医疗实践中,对各种药物的性质及其疗效不断深化认识的基础上,结合药物作用于人体的不同表现进行概括和总结而来。

基于整合药理学平台的反左金丸镇痛作用的分子机制研究

借助整合药理学平台（TCMIP）探讨反左金丸镇痛作用的活性成分、作用靶点及作用机制。共预测得到41种活性成分,其中黄连中6种成分,分别为：黄柏内酯、木兰花碱、阿魏酸、柠檬苦素和2种糖苷;吴茱萸中35种成分,分别为：10种喹诺酮类、生物碱类、黄柏内酯、花色苷等成分。其作用机制涉及43个核心靶点及癌症、前列腺癌、非小细胞肺癌、慢性骨髓性白血病和血管内皮生长因子等30条通路。通过这些靶点和通路可预测反左金丸镇痛作用与炎症痛、癌痛相关。

反左金丸水提物对人胃癌细胞SGC-7901凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的:观察反左金丸水提物(water extracts of Retro-zuojin Pill,WERZP)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长的抑制和凋亡诱导效果,及其对bcl-2和bax表达的影响。方法:采用MTT比色法观察不同浓度的WERZP对SGC-7901的生长抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化以及Western blot方法检测WERZP对人胃癌细胞SGC-7901中bcl-2、bax蛋白表达的影响。结果:WERZP作用SGC-7901细胞24 h后,细胞存活率显著降低(P<0.05),且与时间、剂量呈依赖关系。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析,0.1,0.5,1,5和10 mg.mL-1WERZP作用SGC-7901细胞24 h,细胞凋亡率分别为(4.02±1.33),(36.10±0.23),(55.91±0.95),(56.50±1.55)和(60.27±3.58)%,其中(0.5~10)mg.mL-1组与对照组(2.66±1.33)%比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Hochest染色结果显示细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡...

半夏泻心汤合左金丸治疗反流性食管炎48例

目的:观察半夏泻心汤合左金丸治疗反流性食管炎的疗效。方法:将92例患者随机分为2组,治疗组48例以半夏泻心汤合左金丸为基础方治疗,结合病症加味。对照组口服吗丁啉和雷尼替丁。结果:治疗组总有效率(91.6%)与对照组(84%)比较,差异显著(P<0.05)。结论:半夏泻心汤合左金丸加味对反流性食管炎有较好疗效。

黄连、吴茱萸药对的研究进展

药对即为对药，是中药配伍的最小单位，遵循中药配伍的“七情合和”理论，经历代医家精练提析所得，已经成为相对固定的组合形式。其中黄连、吴茱萸药对就是其具体应用之一，早在朱丹溪《丹溪心法·火六》中，以黄连与吴茱萸6：1的配伍比例——左金丸方已有记载。后世得左金丸方之启发，调整2味药配伍比例，分别得到主治暑气证、寒痢证和胃寒证的甘露散（2：1）、茱萸丸（1：1）和反左金丸（1：6）。以上4方均由黄连和吴茱萸2味药组成，仅在配伍比例上略有变化，却能产生完全不同的药效作用，且有良好的治疗效果，堪称我国中药宝库的经典名方。近年来，研究者对黄连、吴茱萸这一经典药对的化学成分、药理作用以及临床应用方面进行广泛的研究，取得了一定的进展，本文即综述如下。

大鼠胃寒证模型造模方法探索

将大鼠分为空白组、模型组、反左金丸组后,模型组及反左金丸组以冰水灌胃3周,之后予冰水灌胃联合凉水泡浴2周,诱导大鼠胃寒模型形成,反左金丸组每日予反左金丸汤剂灌胃,持续5周。第6周,每组抽取12只大鼠麻醉处死后取胃,部分胃体固定后石蜡包埋并切片,进行组织学检查,部分胃组织进行酶联免疫吸附实验,观察IL-2的浓度。剩余存活大鼠用于观察模型持续时间。造模后,大鼠出现明显胃炎病变,大鼠体征和药物反证结果均符合胃寒模型指标,病理检测等结果证明以冰水灌胃结合凉水泡浴的方法可建立大鼠胃寒模型。

实验性大肠癌模型的建立及中药的干预作用

目的:用两种不同方法建立大肠癌实验动物模型,在肿瘤发生发展过程中,研究左金丸与反左金丸这两种寒热相反的药物对肿瘤进程的干预作用,寻找研究中药防治大肠癌恰当的实验动物模型。方法:人工条件下培养人大肠癌HT29细胞,建立BALB/C裸鼠荷瘤大肠癌模型;用不同浓度的DMH(1,2-二甲基酰肼)诱导W istar大鼠大肠癌模型。在模型建立过程中,用左金丸和反左金丸进行干预,取瘤体组织进行组织病理学评价,观察中药对模型病程发展的干预作用。结果:用BALB/C裸鼠荷瘤大肠癌模型难以观察到肿瘤发生过程中药的干预作用;在高浓度的DMH(35mg/kg)诱导下也不能显著地观察到两对中药对癌症发生过程的干预作用;但在较低浓度下(25mg/kg),左金丸在肿瘤发生的早期具有良好的阻碍大肠恶变的作用,反左金丸的作用次之。结论:观察药物对肿瘤早期的干预作用,致癌剂的浓度不宜太大,DMH 25mg/kg是研究左金丸和反左金丸对早期大肠癌干预作用模型建立较适宜的致癌剂浓度。