银屑病患者淋巴细胞与中性粒细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达

目的:了解银屑病患者外周血淋巴细胞与中性粒细胞中CXC型趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达水平及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系.方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测进行期斑块型银屑病患者33例及其中16例患者治疗后外周血淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康人作为正常对照,并将检测结果与PASI进行了相关性分析.结果:斑块型银屑病患者外周血淋巴细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.12±0.81,明显高于健康对照组(0.28±0.28,P<0.01)与治疗后患者(0.57±0.61,P<0.05),并与PASI之间呈明显正相关(r=0.516,P<0.05);而中性粒细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.72±1.68,与健康对照组(1.27±1.17)及同一组患者治疗后(1.27±1.01)相比均无明显差异(P>0.05).结论:CXCR3可能主要通过活化与趋化外周血淋巴细胞而参与了银屑病的发病机制.

趋化因子受体CXCR3对神经病理性疼痛的行为学影响

目的探讨分析趋化因子受体CXCR3在神经病理性疼痛中的表达变化与调控过程中发挥的作用。方法实验组将野生型C57BL/6J雄性成年小鼠构建坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury,CCI)模型,对照组坐骨神经组织仅暴露不结扎,通过Western Blot方法,检测CCI处理后CXCR3的mRNA表达的变化;通过检测机械缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足阈值(TWL),观察实施CXCR3基因敲除小鼠(N组),以及同源野生型C57BL/6J小鼠(C组)在进行CCI后的疼痛行为。归纳分析趋化因子受体CXCR3对神经病理性疼痛调控干预过程所造成的影响作用,并且对比分析相关实验指标。结果在CCI处理后1 d、3 d、7 d,及14 d,C组的机械缩足反射阈值(6.50±0.24)、(5.24±0.22)、(4.85±0.19)、(3.43±0.23)低于N组(14.22±0.52)、(13.75±0.41)、(12.34±0.25)、(11.41±0.25),组间差异有统计学意义(t=42.627、t=57.836、t=75.430、t=74.285,P<0.05)。结论在神经病理性疼痛形成过程中,CXCR3基因表达增加,能加快神经损伤后机械痛感现象的形成过程。

趋化因子受体CXCR3在慢性乙肝患者肝脏组织中的表达

趋化因子是反映炎症活动的新型敏感指标，趋化因子受体是能够特异性结合趋化因子的细胞膜蛋白，通过与相应配体结合对表达该受体的多种淋巴细胞趋化和激活，在机体防御、抗感染等多种炎症性疾病中起重要作用。为了解趋化因子受体CXCR3在慢性乙肝致病过程中的作用，本文选择45例慢性乙肝患者以SP（streptavidin-peroxidase）免疫组化法检测患者肝活检组织中CXCR3蛋白表达水平下。

IFN-γ诱导性T细胞α趋化因子及其受体CXCR3在扁平苔藓皮损中的表达

IFN-γ诱导性T细胞α趋化因子（interferon-γ-inducible T—cell α-chemoattractant。I-TAC）即CXCL11是一种1型趋化因子，可特异性趋化表达趋化因子受体CXCR3的Th1细胞。以Th1浸润为主的皮肤病如扁平苔藓皮损中的基底细胞高表达CXCL11／I—TAC mRNA，而真皮大部分T细胞表达CXCR3。提示CXCL11／I-TAC及其受体CXCR3在该类皮肤病中促进T细胞浸润的募集和维持。我们检测了CXCL11/I-TAC及其受体CXCR3在扁平苔藓皮损中的表达。

雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响

目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖培养基)和12.5、25、50 mg/L TG组(分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基)。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧(ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较,12.5、25、50 mg/L TG组HK-2细胞活力、SOD水平升高,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达降低,且高剂量效果更好(P<0.05)。结论 TG可抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,其机制可能与抑制CXCL10/CXCR3轴有关。

细胞趋化因子受体CXCR3及CCR5在乙型肝炎患者肝组织中的表达

通过测定急性和慢性乙型肝炎患者肝内细胞趋化因子受体(CCR5)和CXCR3水平,结合患者血中乙型肝炎病毒(HBV)含量,探讨趋化因子受体在乙型肝炎发病及其转归中的作用.

基于mTOR/S6K1通路探究CXCR3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响

目的 探究趋化因子受体(CXCR)3对糖尿病肾病足细胞损伤、凋亡、自噬的影响及其作用机制。方法 将分化成熟的小鼠肾脏足细胞MPC-5分为对照组,模型组,si-NC组和si-CXCR3组,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞24 h、48 h和72 h细胞活力,流式细胞法检测各组细胞凋亡水平,Western印迹检测细胞凋亡关键蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3表达水平,ELISA法检测各组细胞白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8,肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,qPCR及Western印迹检测各组细胞自噬相关蛋白(beclin)1、人自噬相关蛋白(ATG)5及ATG7表达水平,同时检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/蛋白核糖体S6蛋白激酶(mTOR/S6K1)信号通路关键蛋白的蛋白表达水平及其磷酸化修饰水平。结果 与对照组相比,模型组和si-NC组细胞增殖受到显著抑制,并且随着时间增加抑制能力增强,与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞增殖显著提高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞凋亡均显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞凋亡显著降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α释放显著增加(P<0.05);与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α显著降低,但仍高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组和si-NC组细胞自噬相关蛋白Beclin1、ATG5及ATG7表达水平显著降低,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组显著升高(P<0.05);与对照组相比,模型组和si-NC组细胞mTOR、S6K1蛋白表达水平显著升高,其磷酸化修饰也相应增加,而与模型组和si-NC组相比,si-CXCR3组细胞mTOR,S6K1蛋白表达水平显著降低,磷酸化修饰也相应降低(P<0.05)。结论 沉默CXCR3可以提高小鼠肾足组细胞活性,降低细胞凋亡,减少炎症因子释放,对肾足细胞具有保护作用,其机制可能通过增强自噬,调控mTOR/S6K1信号通路活性及磷酸化修饰相关。

I-TAC及其受体CXCR3在胃癌肝转移中的作用及临床意义

目的检测人干扰素诱导T细胞α亚族趋化因子（I-TAC）及CXC趋化因子受体3（CXCR3）在胃腺癌组织中的表达，并初步分析其在胃癌肝转移中的作用及意义。方法选取2013年1月至2016年1月滨州医学院附属中心医院手术切除的新鲜胃癌组织（伴肝转移）标本30例作为研究组，另择同期胃癌（不伴有肝转移）手术标本35例为对照组。采用逆转录聚合酶链反应技术、免疫组织化学技术检测两组标本中I-TAC及CXCR3的表达水平；并进一步分析上述两者的表达水平与常见临床病理参数的关系。结果研究组中I-TAC及CXCR3的mRNA和蛋白质表达水平均较对照组高。I-TAC在研究组中阳性表达率（93.33%）高于对照组中阳性表达率（31.43%），两组差异有统计学意义（P=0.007）。CXCR3在研究组中阳性表达率（83.33%）高于对照组中阳性表达率（45.71%），比较差异亦有统计学意义（P=0.015）。相关性分析表明，CXCR3的表达与胃癌组织分化程度、淋巴结转移等呈正相关。结论伴肝转移胃癌组织中存在I-TAC及其受体CXCR3的特异性激活，提示I-TAC/CXCR3信号传导通路在胃癌肝转移过程中发挥重要作用。

雷公藤甲素对RA患者T-bet/GATA3及CXCL10/CXCR3表达的影响

[目的]考察雷公藤甲素(TP)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet/GATA3和趋化因子(CXCL)10及CXCL受体3(CXCR3)表达的影响。[方法]使用L929细胞考察TP的细胞毒性,确定实验药物浓度。CCK-8法检测TP对RA患者PBMC细胞增殖活性的影响,流式细胞仪分析TP对PBMC中Th细胞亚群比例及CXCR3受体表达调节,Luminex技术检测RA患者PBMC分泌干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-17/IL-17A、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-6、IL-10及CXCL10的表达水平。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法分析T-bet、GATA3、CXCL10及CXCR3的mRNA表达水平。[结果]当TP浓度<25 nmol/L,培养时间为48 h时,TP对L929没有显著的细胞毒性(P>0.05)。在此浓度范围内,当TP浓度为5 nmol/L时即表现出对PBMC细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05)。Th、Th1细胞亚群比例以及CXCR3受体表达均受到TP抑制(P<0.05),但对Th2细胞亚群比例没有显著调节作用(P>0.05)。抗炎因子IL-4、IL-10,促炎因子IFN-γ、IL-6、TNF-α、IL-17/IL-17A,以及CXCL10表达均显著降低(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,仅CXCL10表达显著降低,T-bet、GATA3以及CXCR3表达无显著变化(P>0.05)。[结论]TP对Th1细胞增殖及其相关细胞因子具有抑制作用,并且能显著降低CXCL10及CXCR3的表达,但未观察到对T-bet、GATA3表达的调节作用。

葛根素对糖尿病大鼠肾组织中CXCL10/CXCR3表达影响的实验研究

目的:观察葛根素对糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)大鼠肾组织病理形态、肾组织中趋化因子CXCL10以及受体CXCR3表达的影响,探讨葛根素延缓DM大鼠肾组织损伤的机理。方法:采用链脲佐菌素制备DM大鼠模型,将造模成功后的大鼠随机分为DM组(n = 11)、DM组+葛根素干预组(下文简称葛根素组) (n = 11),并设置正常对照组(n = 7)。每2周测定一次各组大鼠空腹血糖、体重。4周后处死大鼠并取大鼠肾脏,对肾脏进行相关处理后,在光镜和电镜下观察大鼠肾组织病理改变,通过RT-PCR检测肾组织CXCL10/CXCR3mRNA的表达水平。结果:在电镜下显示:相较于DM组,葛根素组大鼠肾组织结构破坏程度明显减轻。RT-PCR结果显示:相较于DM组,葛根素组大鼠肾组织中趋化因子受体CXCR3的表达水平明显降低(p 0.05)。结论:葛根素可能通过降低肾组织中CXCR3的表达水平减轻肾组织的炎症反应,延缓DM大鼠肾组织的损伤。

CXCR3在急性白血病患者外周血淋巴细胞的表达及其意义

目的探讨急性白血病(AL)患者外周血T淋巴细胞趋化因子受体CXCR3表达及其临床意义。方法采用流式细胞术结合直接免疫荧光法检测133例AL以及33例对照组外周血T淋巴细胞CXCR3表达。结果 AL患者外周血T淋巴细胞表面趋化因子受体CXCR3的表达阳性率明显高于对照组,分别为(28.24±18.14)%和(12.19±3.89)%(P<0.05)。在各型AL中,以B-ALL的表达率最高(40.14±17.56)%,而T-ALL型为(14.06±8.29)%,仅略高于正常对照(P>0.05);AL髓外浸润患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达为(34.54±19.87)%,明显高于非髓外浸润患者(20.44±12.15)%(P<0.01)。但AL患者外周血T淋巴细胞CXCR3的表达与白细胞总数、幼稚细胞百分率及CD3阳性率表达无关。结论 AL外周血T淋巴细胞CXCR3的表达可能与白血病的迁移、浸润密切相关。

CXCR3在肾细胞癌中的表达及其临床意义

趋化因子及其受体是近年来肿瘤相关研究的热点之一,研究表明趋化因子可能在包括穿入血管、锚定、穿出血管、免疫逃逸、增殖并血管生成等过程中发挥重要作用[1]。趋化因子受体3（CXCR3）及其配体已被证实在多种肿瘤的发生发展、转移过程中有重要作用[2-4]。CXCR3高表达的恶性肿瘤细胞可能通过迁徙至表达其配体的特异性靶器官,从而导致肿瘤发生转移。

CXC趋化因子受体3的单克隆抗体抑制体外培养的MCF-7细胞和HepG2细胞的增殖及迁移

目的研究CXC趋化因子受体3(CXCR3)单克隆抗体(mAb)对MCF-7人乳腺癌细胞和HepG2人肝癌细胞体外增殖及迁移的影响。方法诱生腹水法制备CXCR3 m Ab;流式细胞术筛选高表达CXCR3的MCF-7细胞和HepG2细胞;MTT法检测CXCR3 mAb对MCF-7细胞和HepG2细胞增殖及干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)对MCF-7细胞和HepG2细胞促增殖的影响;TranswellTM法研究CXCR3 mAb对MCF-7细胞和HepG2细胞迁移及I-TAC对MCF-7细胞和HepG2细胞促迁移的影响。结果 MCF-7细胞和HepG2细胞CXCR3的阳性表达率分别为83.5%和96.2%;50μg/m L CXCR3 m Ab能够显著的抑制MCF-7细胞和HepG2细胞的增殖并抑制I-TAC对MCF-7细胞和HepG2细胞的促增殖作用;50μg/m L CXCR3 m Ab可抑制MCF-7细胞和HepG2细胞的迁移,并抑制I-TAC对MCF-7细胞和HepG2细胞促迁移作用。结论 CXCR3 mAb能够显著地抑制高表达CXCR3的肿瘤细胞的增殖及迁移。

CXCR3的2种亚型在泌尿系肿瘤中的研究进展

趋化因子受体3（CXCR3）是一种与谷氨酸-亮氨酸-精氨酸（ELR-阴性CXC趋化因子）结合的G蛋白偶联受体,其与免疫反应、血管生长、损伤修复关系密切,许多肿瘤中CXCR3表达增高,如乳腺癌[1]、结肠癌[2]和肾癌[3]。到目前为止,已经有3种CXCR3的亚型（CXCR3-A、CXCR3-B、CXCR3-alt）被确认。

CXC趋化因子受体3变体及其配体在肿瘤微环境中作用的研究进展

恶性肿瘤是严重威胁人类生命的疾病之一,近年来免疫治疗已经成为肿瘤治疗的焦点,解决免疫治疗只对部分患者有效的问题迫在眉睫。在肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中趋化因子介导细胞的定向移动,同时具有多种调节功能,既可以作用于免疫细胞,也可直接作用于肿瘤细胞,发挥了复杂的生物学作用。CXC趋化因子受体3(CXC chemokine receptor 3,CXCR3)通过与其同源CXC趋化因子配体9(CXC chemokine ligand 9,CXCL9)/10/11结合,不仅参与了肿瘤发生、侵袭并促进肿瘤相关血管的形成,同时也介导了免疫细胞向肿瘤组织中浸润,为无免疫反应性或免疫反应性差的"冷肿瘤"转变为免疫反应性的"热肿瘤"提供了新的思路,并且可能成为治疗的新靶点。这种抗肿瘤和促肿瘤的双重作用,似乎与CXCR3变体(CXCR3-A、CXCR3-B)发挥相反的作用密切相关。本文就近年来CXCR3变体CXCR3-A、CXCR3-B及其配体CXCL9/10/11在TME中作用的研究进展展开综述。

雷公藤多苷对变应性接触性皮炎患者干扰素诱导蛋白10及其受体表达的影响

目的观察雷公藤多苷对变应性接触性皮炎患者(Allergic contact dermatitis,ACD)体外培养外周血淋巴细胞干扰素诱导蛋白10(IP-10)及其受体CXCR3表达的影响,进一步探讨雷公藤多苷治疗变应性接触性皮炎的机理。方法用逆转录PCR(RT-PCR)及流式细胞术,检测不同浓度雷公藤多苷溶液体外培养48 h后的ACD患者外周血淋巴细胞中IP-10/CXCR3的表达。结果雷公藤多苷高、中、低3个浓度组体外培养的ACD患者外周血淋巴细胞中IP-10 mRNA表达明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);3个浓度组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。雷公藤多苷3个浓度组体外培养的ACD患者外周血淋巴细胞表面CXCR3分子的表达低于对照组,只有高浓度组与之比较差异有统计学意义(P<0.01);高与低浓度组间比较差异有统计学意义(P<0.05),其余组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论雷公藤多苷可以抑制体外培养ACD患者外周血淋巴细胞中IP-10 m RNA及其受体CXCR3的表达,从而抑制或减轻炎症的产生,或许是雷公藤治疗ACD机理之一。

Cx3cr1抗体玻璃体腔注射对视网膜缺血-再灌注损伤大鼠视网膜神经元的保护作用及机制

背景视网膜小胶质细胞在视网膜缺血－再灌注损伤（IRI）损伤过程中被活化，对视网膜神经节细胞（RGCs）发生损伤作用，cx3cr1表达的上调则是小胶质细胞活化的重要因素，因此阻断cx3cr1的表达从而抑制小胶质细胞活化可成为视网膜IRI过程中神经元保护的治疗靶点。 目的探讨抑制cx3cr1表达对小胶质细胞活化的影响及其对RGCs的保护作用。 方法将90只SD大鼠按照随机数字表法分为4个组，其中正常对照组（15只）未给予任何干预，单纯cx3cr1抗体注射组（30只）于正常大鼠玻璃体腔注射0.2 μg/μl的cx3cr1抗体1 μl，模型对照组大鼠通过生理盐水前房灌注法制备IRI模型（15只），而模型cx3cr1抗体注射组（30只）于大鼠制备IRI后即刻以同样的方法和剂量注射cx3cr1抗体，右眼为实验眼。于造模后48 h制备视网膜切片，透射电子显微镜下观察各组大鼠视网膜组织中RGCs的形态变化和细胞凋亡情况；采用常规组织病理学方法检测各组大鼠视网膜组织的形态变化，同时计数视网膜中RGCs数目；采用免疫组织化学法检测大鼠视网膜组织中小胶质细胞中CD68的表达，评估各组大鼠视网膜中小胶质细胞的活化状况；采用实时定量PCR法检测cx3cr1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）mRNA在大鼠视网膜组织中的相对表达量。 结果正常对照组和单纯cx3cr1抗体注射组大鼠RGCs细胞核呈圆形或椭圆形，细胞器丰富，光感受器细胞外节膜盘排列整齐，内节线粒体丰富，但模型对照组大鼠视网膜RGCs形态不规则，光感受器细胞外节膜盘断裂，RGCs层可见小胶质细胞，模型cx3cr1抗体注射组大鼠视网膜组织中也可见到光感受器细胞外节膜盘断裂和RGCs减少。正常对照组、单纯cx3cr1抗体注射组、模型对照组和模型cx3cr1抗体注射组大鼠RGCs数目分别为（38.100±3.929）、（37.200±5.266）、（26.700±2.584）和（31.700±2.946）个/视野，其中模型对照组大鼠RGCs数目明显少于正常对照组、单纯cx3cr1抗体注射组和模型cx3cr1抗体注射组，差异均有统计学意义（t＝7.492、6.125、－4.607，均P〈0.01）；免疫组织化学法检测表明模型对照组大鼠视网膜中CD68的表达量（A值）明显高于正常对照组、单纯cx3cr1抗体注射组和模型cx3cr1抗体注射组，差异均有统计学意义（t＝－3.397，P＝0.008；t＝－6.207，P＝0.000；t＝3.494，P＝0.007）；模型对照组视网膜中cx3cr1 mRNA、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA相对表达量均明显高于正常对照组、单纯cx3cr1抗体注射组和模型cx3cr1抗体注射组，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。正常对照组与单纯cx3cr1抗体注射组间上述检测指标的差异均无统计学意义（均P〉0.05）。 结论IRI模型大鼠玻璃体腔注射cx3cr1抗体中和cx3cr1的表达可抑制视网膜小胶质细胞的活化并减少视网膜中炎性因子的释放，减少RGCs凋亡，从而对IRI模型鼠的RGCs起保护作用。玻璃体腔注射cx3cr1抗体是安全可行的。

镍接触性皮炎皮损趋化因子及其受体的研究

探讨趋化因子及其受体在镍接触性皮炎发病中的作用。留取镍接触性皮炎患者直接接触部位皮损和部分患者非直接接触部位皮损进行趋化因子受体CXCR3和CCR4免疫组化染色，同时采用RT-PCR分析HaCaT细胞经硫酸镍刺激后γ干扰素诱导蛋白．10（IP-10）、干扰素诱导T细胞趋化因子α（I—TAC）、胸腺活化调节的趋化因子（TARC）和巨噬细胞来源趋化因子（MDC）在mRNA水平的表达情况。