中药对疲劳大鼠脑内学习记忆相关递质谷氨酸及γ-氨基丁酸受体mRNA表达的影响

目的观察不同方药对运动性疲劳模型大鼠学习记忆相关递质谷氨酸(GLU)及γ-氨基丁酸(GABA)受体mRNA表达水平的调节作用。方法 SD大鼠随机分正常对照组、模型组、疏肝中药组、健脾中药组、补肾中药组。采用大鼠游泳方式建立运动性疲劳动物模型,并应用疏肝方剂四逆散、健脾方剂四君子汤、补肾方剂金匮肾气丸对疲劳大鼠进行干预,通过荧光定时定量PCR实验技术测定各组大鼠海马及纹状体GLU的NMDA受体亚单位NR1/NR2A/NR2B mRNA以及GABA受体GABAARα1 mRNA的表达水平。结果模型组海马部位NR1、NR2A、NR2B mRNA与正常组比较表达下降,GABAARα1 mRNA表达升高。纹状体部位模型组NR1、NR2A mRNA表达升高,NR2B mRNA表达下降,GABAARα1 mRNA表达升高。疏肝中药组对海马及纹状体NR1和NR2A受体mRNA的调节作用最好,健脾中药组对NR2B受体mRNA的调节作用最好,两方都能够调节升高的GABAARα1 mRNA表达水平。补肾中药组对上述受体mRNA的调节作用不明显。结论应用疏肝、健脾方剂四逆散和四君子汤可以很好地调节运动性疲劳模型大鼠脑内学习记忆相关递质GLU和GABA受体mRNA的表达。

能谱CT联合促甲状腺激素受体mRNA对甲状腺乳头状癌诊断意义分析

探讨能谱CT定量联合促甲状腺激素受体(thyroid-stimulating hormone receptor,TSHR)mRNA对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid microcarcinoma,PTMC)的诊断意义分析。方法 收集2017年5月-2021年2月我院经手术及病理证实为甲状腺微小结节的患者105例,其中61例为PTMC,44例为微小结节性甲状腺肿(Micronodular goiter,MNG)。所有患者均行能谱CT及血清TSHR-mRNA检查,在最佳单能量图像上测量病变区碘浓度,计算能谱曲线斜率k值。分析能谱CT定量参数联合血清TSHR-mRNA诊断PTMC的效能。采取曲线下面积(AUC)分析能谱CT定量参数联合血清TSHR-mRNA对PTMC的诊断准确度、特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值。结果 PTMC和MNG两组能谱CT定量参数碘浓度和能谱曲线斜率在平扫、动脉期、静脉期比较差异均有统计学意义(P<0.05)。PTMC组患者血清TSHR-mRNA的平均表达量为(2.81±1.34)ng/ug,MNG组患者血清TSHR-mRNA的平均表达量为(0.96±0.42)ng/ug,且PTMC和MNG两组血清TSHR-mRNA表达量比较差异有统计学意义(t=31.285,P=0.000)。能谱CT定量参数碘浓度和能谱曲线斜率诊断PTMC的ROC曲线下面积AUC分别为0.721、0.754。采用碘浓度和能谱曲线斜率诊断PTMC,两者诊断PTMC的准确度、特异度、敏感度、阳性预测值、阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 能谱CT定量参数或血清TSHR-mRNA表达量均可在一定程度上诊断PTMC,两者联合应用时可更准确的诊断,对于临床治疗方案的选择具有重要意义。

黄精多糖对糖尿病鼠脑组织糖基化终产物受体mRNA表达的影响

目的 :探讨黄精多糖对糖尿病鼠脑组织糖基化终产物受体mRNA(RAGEmRNA )表达的调节作用。方法 :小鼠腹腔注射链脲佐菌素建立动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应法测定各组动物脑组织中RAGEmRNA的表达。结果 :糖尿病模型组脑组织RAGEmRNA的表达增加 ,其RAGE/β-actin值明显高于对照组 (P<0 01)。应用黄精多糖治疗后 ,治疗组脑组织RAGEmR NA表达较模型组降低 ,其RAGE/β-actin值显著低于模型组 (P<0 05)。结论 :黄精多糖能抑制糖尿病鼠脑组织RAGEmRNA的表达 ,对高血糖及糖基化终产物造成的脑组织损伤具有保护作用。

饲料锌添加水平对凡纳滨对虾免疫抗菌机能和溶菌酶mRNA及Toll受体mRNA表达的影响

在基础饲料中添加不同水平蛋氨酸锌(添加水平分别为0、50、150 mg Zn/kg)并饲喂凡纳滨对虾,养殖14 d后,取样测定对虾鳃组织中Toll受体mRNA和溶菌酶mRNA的表达水平以及肝胰腺、肌肉和血淋巴中超氧化物歧化酶(SOD)和溶菌酶(LSZ)活性,并进行溶藻弧菌人工急性感染试验。结果表明,凡纳滨对虾肝胰腺及肌肉中锌蓄积水平随饲料锌添加量的增加而显著增加(P<0.05),肝胰腺中锌蓄积更明显。添加50 mg Zn/kg组(锌含量为73.25 mgZn/kg饲料)对虾鳃组织中的Toll受体mRNA和溶菌酶mRNA表达量均显著高于未添加锌组和添加150 mg Zn/kg组(P<0.05)。添加50 mg Zn/kg组对虾肌肉、肝胰腺和血淋巴中溶菌酶活性显著高于未添加锌组(P<0.05)。添加50 mg Zn/kg组对虾肝胰腺和血淋巴中的SOD活性也显著高于未添加锌组,但与添加150 mg Zn/kg组无显著差异。而肌肉中SOD活性在添加150 mg Zn/kg组中最高。经溶藻弧菌人工急性感染后,添加50 mg Zn/kg组对虾半致死时间和全致死时间大于未添加锌组和添加150 mg Zn/kg组。本研究表明,相比摄食未添加锌组饲料和添加150 mg Zn/kg组饲料,凡纳滨对虾的免疫抗菌机能在摄取添加50 mg Zn/kg(锌含量为73.25 mg Zn/kg饲料)饲料时得到改善。

应激状态下大鼠胃黏膜组织中内皮素-1A受体mRNA的表达及其意义

应激性溃疡(SU)是危重疾病的常见严重并发症,其发生机制尚不清楚。研究表明内源性缩血管因子内皮素(ET)-1与SU密切相关,而关于其受体表达在SU发生中作用的研究尚少。目的:探讨ET-1A受体(ETAR)mRNA表达在SU发生中的作用和意义。方法:以冷束缚应激(CRS)制备大鼠胃溃疡模型,应激前和应激1 h、3 h、6 h、9 h、12 h后分别采用放射免疫测定、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和斑点杂交等方法,动态检测血浆和胃黏膜组织中的ET-1和胃黏膜组织中的ETAR mRNA水平,同时检测胃黏膜血流量(GMBF)和溃疡指数(UI)等指标的变化情况。结果:与正常对照组相比,各应激组大鼠血浆和胃黏膜组织中的ET-1水平均显著升高(P<0.05),GMBF显著下降(P<0.01),UI显著增加(P<0.01);胃黏膜组织中的ET-1水平与UI呈显著正相关(r=0.98,P<0.01),与GMBF呈显著负相关(r=-0.89,P<0.05),而血浆ET-1水平与GMBF、UI相关性不显著(r=-0.61,0.43,P>0.05)。GMBF与UI呈显著负相关(r=-0.98,P<0.01)。RT-PCR和斑点杂交显示各应激组大鼠胃黏膜组织中ETAR mRNA的表达水平较正常对照组显著升高(P<0.01),并与胃黏膜组织中的ET-1水平和UI呈显著正相关(r=0.93,0.95,P<0.01)。结论:在CRS诱发大鼠急性胃黏膜损伤的过程中,胃黏膜组织可显著增加ET-1的合成分泌和ETAR

仙贞片对糖尿病大鼠肾皮质终末期糖化终产物及其受体mRNA表达的影响

目的观察仙贞片对糖尿病大鼠肾皮质终末期糖化终产物 (advancedglycationendproducts,AGEs)含量及其糖化终产物特异性受体 (AGE specificcellularreceptor,RAGE)信使核糖核酸 (messengerri bonucleicacid ,mRNA)表达的影响 ,探讨其对糖尿病大鼠肾保护的作用机制。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin ,STZ)复制糖尿病持续性高血糖肾损害大鼠模型 ,用荧光测定法和逆转录 -多聚酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR)技术检测模型大鼠肾皮质AGEs含量及RAGEmRNA的表达 ,与氨基胍作对照。结果实验 12周模型大鼠肾皮质AGEs相对含量及RAGEmRNA表达明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,仙贞片及氨基胍治疗组肾皮质AGEs相对含量及RAGEmRNA表达明显低于模型组 (P <0 0 5 ) ,仙贞片与氨基胍组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论仙贞片能减轻糖尿病大鼠肾皮质内AGEs的积聚 ,下调RAGEmRNA的过度表达 ,与氨基胍相近似 ,具有抑制蛋白非酶糖基化的作用 ,可能是其肾保护作用的机制之一。

中药降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏瘦素受体mRNA及P-JAK2/P-STAT3的影响

目的:观察降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用及其对血清瘦素、肝组织瘦素受体mRNA、P-JAK2/P-STAT3蛋白含量表达的影响.方法:将60只SD♂大鼠,随机分为空白组(正常饮食)和造模组(高脂饮食).待造模成功后将造模组大鼠随机分为模型对照组、降脂颗粒低、中、高剂量组和东宝甘泰组.治疗4 wk后行肝组织生化和病理学检测,并同时应用ELISA试剂盒检测血清瘦素,RT-PCR法检测肝组织瘦素受体mRNA表达,应用Western blot检测肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的表达.结果:低、中、高剂量组降脂颗粒能明显降低非酒精性脂肪肝大鼠模型肝脂(TG和TC)水平,改善脂肪变性,降低肝脏炎症反应,并能明显降低血清瘦素高水平状态(193.02±23.8ng/ L,163.97±31.38ng/L,147.83±17.59ng/L vs 317.22±39.26ng/L,P<0.01),改善瘦素抵抗,同时增加瘦素受体mRNA的表达(1.87±0.06,2.20±0.04,2.78±0.04 vs 1.50±0.05,P<0.01),增加肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的含量(119.88±2.98,123.45±0.68,124.34±3.42 vs 113.15±1.27,P<0.01;94.15±0.78,100.18±3.33,101.94±2.20 vs 89.06±0.69,P<0.01).结论:降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质和炎症有较好的治疗作用,其可能机制是改善瘦素抵抗,增加肝脏瘦素受体mRNA表达及P-JAK2,P-STAT3蛋白含量.

抗生素所致腹泻大鼠体内Toll样受体mRNA转录水平与肠道菌群、细菌移位关系的研究

目的观察抗生素所致腹泻大鼠体内Toll受体mRNA转录水平、肠菌群构成和细菌移位现象的变化,阐明相互间关系。方法 60只SD大鼠分为A组(盐酸林可霉素组)、B组(盐酸林可霉素加服大肠杆菌组)、C组(盐酸林可霉素加服乳酸杆菌)和D组(对照组)。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)动态测定大鼠肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏和肠黏膜组织中Toll样受体mRNA转录水平;采用细菌培养法动态测定抗生素所致腹泻大鼠肠道双歧杆菌、乳酸杆菌、肠杆菌和肠球菌及肠系膜淋巴结、肝脏和脾脏组织移位细菌量。结果应用抗生素大鼠早期发生腹泻,体内Toll样受体mRNA转录水平受抑制,出现肠道菌群失调和肠细菌移位,肠系膜淋巴结、肠黏膜、肝脏和脾脏组织细菌移位状况不同。乳酸杆菌干预可减轻由抗生素引起的Toll样受体mRNA转录受抑及细菌移位程度;大肠杆菌攻击可上调Toll样受体mRNA转录水平,加剧细菌移位程度。结论抗生素可致大鼠腹泻,抑制体内Toll样受体mRNA表达,导致肠道微生态失调和肠细菌移位。乳酸杆菌可保护天然免疫识别机制,维护肠道微生态平衡和降低细菌移位发生程度。

降脂颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清瘦素及肝脏瘦素受体mRNA的影响

目的观察降脂颗粒对非酒精性脂肪肝模型大鼠血清瘦素及肝脏瘦素受体mRNA的影响。方法高脂饲料制备SD大鼠非酒精性脂肪肝模型,随机分为东宝肝泰组、降脂颗粒低剂量组、降脂颗粒中剂量组、降脂颗粒高剂量组和模型对照组。治疗4周后检测相关指标。结果降脂颗粒能明显降低非酒精性脂肪肝模型大鼠血脂(TG、TC)的水平,降低血清瘦素水平,增加肝脏瘦素受体mRNA的表达。结论降脂颗粒可以改善瘦素抵抗并增加非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏瘦素受体mRNA的表达。

大鼠胰腺促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交

目的 研究大鼠胰腺促性腺激素释放激素 (Gn RH)受体 m RNA的存在及细胞定位 .方法 采用原位杂交组织化学法 .结果 胰脏的外分泌部腺上皮细胞、胰导管上皮细胞及内分泌部胰岛细胞内均可检测到较强的 Gn RH受体m RNA杂交信号 .杂交阳性信号物质均分布在胞质内 ,胞核呈阴性 .结论 大鼠胰脏内、外分泌部均能合成 Gn RH受体 .Gn RH也是一种消化激素 ,它由胰脏自身合成 ,又作用于胰脏 ,可能参与胰脏内。

益骨胶囊含药血清对大鼠成骨细胞雌激素受体mRNA及其蛋白表达的影响

目的从mRNA及蛋白水平研究益骨胶囊含药血清对成骨细胞雌激素受体(ER)表达的影响,从雌激素调控途径探讨益骨胶囊防治骨质疏松症的机理。方法分离、培养新生大鼠成骨细胞,传代后分为3组,即含药血清组、空白血清对照组、DMEM对照组。采用RT- PCR法检测ERα和ERβ的mRNA相对表达量,采用放射性配基结合分析检测ER的亲和力(以平衡解离常数KD表示)和受体数量(以RT表示)。结果益骨胶囊含药血清组和两对照组比较,ERβmRNA的相对表达量增加,差异有显著性(P <0 .0 5 ) ;ERαmRNA表达差异无显著性(P >0. 0 5 ) ;益骨胶囊含药血清组和两对照组比较KD值差异无显著性(P >0 . 0 5 ) ,但RT有提高,差异有显著性(P <0. 0 1)。结论益骨胶囊含药血清能上调成骨细胞ERβmRNA表达,能增加雌激素受体数量。通过雌激素调控途径防治骨质疏松症可能是益骨胶囊的药理机制之一。

半硫丸对“甲减”模型大鼠海马T_3核受体mRNA表达的影响

目的:研究甲状腺机能减退大鼠海马组织T3 核受体mRNA的变化规律及半硫丸对其的影响,探讨半硫丸对甲减的作用机理。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组和造模组,造模大鼠每日腹腔注射PTU诱发甲状腺机能减退动物模型后,分为模型组、甲状腺素片组、半硫丸组,治疗组分别予相应药物治疗 30d。采用RT PCR法测定大鼠脑海马组织T3NRα1mRNA和T3NRβ1mRNA的表达水平。结果:甲减大鼠海马组织T3NRα1mRNA和T3NRβ1mRNA的表达水平明显下降,与正常组比较有显著性差异 (P<0.01)。两种药物均可明显增强甲减大鼠海马组织T3NRα1mRNA和T3NRβ1mRNA的表达,与模型组比较均具有显著性差异,治疗组之间无明显差异。结论:半硫丸可通过上调甲减大鼠海马T3核受体mRNA表达水平,增加T3核受体数目,改善甲减造成的脑神经损伤。

递增负荷运动及恢复过程中大鼠雌激素受体mRNA表达的变化及其意义

目的:观察持续9周递增负荷运动的不同训练周期及恢复过程大鼠HPO轴各环节ER mRNA水平的变化,探讨持续运动应激致动情周期紊乱ER水平变化的机制。方法:对不同训练周期及恢复过程的大鼠,采用RT-PCR检测下丘脑、垂体、卵巢、子宫各环节ER mRNA的表达,采用液相平衡竞争放射免疫分析法检测其血清雌二醇水平。结果:训练7周结束时,垂体及下丘脑ER mRNA表达及血清E2水平均显著降低,卵巢及子宫ER mRNA表达则显著增加;HPO轴各环节ER mRNA表达的变化持续至恢复2期,血清E2水平持续至恢复3期基本复原。结论:递增负荷运动大鼠HPO轴各环节ER mRNA表达对运动负荷的反应不尽相同,ER mRNA表达的变化与血清E2水平密切相关,其表达水平的非同一性可能是运动性月经失调病理过程的重要一环。

雌激素受体、雌激素受体mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的 研究雌激素受体 (ER)、雌激素受体mRNA在胃癌中的表达 ,以探讨其与胃癌生物学特性的相关性。方法 采用免疫组化和原位杂交技术 ,观察ER、ERmRNA在胃癌组织的表达。结果 ①ER阳性率男性为 33.33% ,女性为 46.67% ;ERmRNA阳性率男性为 73.33% ,女性为 86.67% ;②ER阳性以低分化腺癌、印戒细胞癌多见 ;ERmRNA阳性在管状腺癌、低分化腺癌、印戒细胞癌均可见 ;③ER阳性与局部淋巴结转移、生长方式有关 ;④ERmRNA较ER有更高的阳性表达。结论 ERmRNA表达与胃癌生物学特性密切相关 ,可用于胃癌预后判定 。

艾灸对多因素致慢性疲劳大鼠海马5-HT1A受体mRNA表达干预的实验研究

目的:观察艾灸方法治疗慢性疲劳综合征模型大鼠的效果,并从对大鼠单胺类神经递质含量的影响探讨其机理。方法:通过联合捆绑束缚、昼夜颠倒、疲劳游泳、空瓶刺激等方式建立慢性疲劳综合征模型,设立正常对照组、模型组和艾灸组,艾灸组每日予艾灸治疗,其余两组只作常规抓取捆绑,治疗28天。分别采用行为学指标检测大鼠慢性疲劳指征,并检测大鼠海马组织5-羟色胺含量及其受体1A亚型mRNA表达的情况。结果:艾灸组在行为学各项指标观察成绩都明显好于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),而5-羟色胺含量以其受体mRNA的表达都比模型组有明显地提高(P<0.05)。结论:艾灸可以有效地改善模型大鼠慢性疲劳症状,并且很可能是通过提高海马中5-羟色胺含量的途径来达到治疗效果。

血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA在胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型的表达及复方861的干预作用

研究胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型血管紧张素Ⅱ 1型 (AT1)受体mRNA表达以及复方 86 1的治疗作用。给雌性Wistar大鼠进行胆管内逆行性注入硬化剂加胆管结扎导致胆管阻塞 ,制备胆管阻塞性肝纤维化模型。术后随机分为模型组和复方 86 1治疗组 (9g/kg)。并设假手术组作为正常对照组。治疗组于术后 7天开始给予复方 86 1灌胃 ,共 4 9天。以RT -PCR法观察肝纤维化模型肝组织AT1受体mRNA表达水平及复方 86 1的干预作用。胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型组AT1受体mRNA为 1 0 38± 0 0 6 4 ,明显高于正常对照组 (0 6 88± 0 0 5 7,P <0 0 1) ;复方86 1组的AT1受体mRNA为 0 70 5± 0 14 2 ,明显低于模型对照组 (P <0 0 1)。胆管阻塞性大鼠肝纤维化模型AT1受体mRNA明显增高 ,提示AT1受体可能参与肝纤维化形成 ,而复方 86 1可使它表达减少。

复方灵芝降糖胶囊对2型糖尿病大鼠骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达的影响

目的:观察复方灵芝降糖胶囊对2型糖尿病大鼠骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达的影响。方法:给予实验动物STZ,破坏一部分胰岛β细胞功能,同时饲以高脂肪饲料造成外周组织对胰岛素不敏感,两者结合诱导出接近人类2型糖尿病的动物模型,并给予不同剂量治疗4周。处死后分别测定骨骼肌、脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达。结果:复方灵芝降糖胶囊对骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因的表达均有提升。结论:复方灵芝降糖胶囊治疗2型糖尿病可能与其提高骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。

电针足三里对吗啡戒断大鼠μ受体mRNA表达的影响

目的探讨电针改善吗啡戒断症状的作用机制。方法建立自然吗啡戒断大鼠模型,运用RT-PCR方法测定脑组织μ受体mRNA的表达,观察电针足三里对吗啡戒断大鼠体重及μ受体mRNA表达的影响。结果电针组大鼠体重比戒断组增加明显(P<0.05),戒断组和电针组比正常组脑组织中μ受体mRNA表达降低,治疗后电针组比戒断组脑组织中μ受体mRNA表达明显增加。结论电针足三里具有提高吗啡戒断大鼠体重、改善大鼠吗啡戒断症状的作用。电针调节吗啡戒断大鼠海马、下丘脑μ受体mRNA的表达,可能是电针改善大鼠吗啡戒断症状的作用机制之一。

不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同,年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组,每组10头。按照中国奶牛饲养标准(2000),低能组饲喂减少20%日粮(能量摄入80%组),对照组饲喂标准日粮(能量摄入100%组),高能组饲喂增加20%日粮(能量摄入120%组),试验从产前14天开始至产后28天结束,产后各组奶牛均饲喂标准日粮。采用半定量RTPCR方法检测了不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体(InsR)mRNA丰度的影响。结果表明:各组脂肪InsRmRNA相对表达量从产前14天至产后28天均呈现先升高后降低的趋势,产后14天达到最大值,且产后高于产前;低能组产前InsRmRNA相对表达量低于高能组和正常组,产后1天至产后28天高于高能组和正常组,产后14天显著高于高能组(P<0.01)。可见,干乳期低能饲喂奶牛,产后脂肪InsRmRNA表达增加,提示产前适当降低能量摄入水平,有利于胰岛素抑制泌乳初期脂肪动员作用的发挥。