梓醇调节Keap1/Nrf2/HO-1信号通路对口腔鳞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探究梓醇调节Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1/核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Keap1/Nrf2/HO-1)信号通路对口腔鳞癌细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养口腔鳞癌细胞Tac8113;CCK-8法筛选梓醇最佳作用水平;将Tac8113细胞分为对照组、梓醇组(24μg/mL)、sh-NC组(转染sh-NC慢病毒质粒)、sh-Keap1组(转染sh-Keap1慢病毒质粒)、梓醇+sh-NC组(转染sh-NC+24μg/mL梓醇)、梓醇+sh-Keap1组(转染sh-Keap1+24μg/mL梓醇);CCK-8法检测细胞增殖;划痕试验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)检测细胞活性氧(ROS)水平;采用试剂盒分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Western Blot分别检测Keap1/Nrf2/HO-1信号通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果与0μg/mL组比较,随着梓醇剂量增加Tac8113细胞存活率显著降低(P<0.05),因此,选择24μg/mL梓醇作为后续实验的干预条件;与对照组比较,梓醇组Tac8113细胞OD450值、划痕愈合率、ROS水平、MDA水平及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Nrf2、HO-1表达显著降低,细胞凋亡率、SOD水平及Keap1、胱天蛋白酶3(caspase3)表达显著升高(P<0.05);Keap1低表达后Tac8113细胞恶性生物学行为程度加重,且逆转了梓醇对Tac8113细胞恶性生物学行为的影响。结论梓醇抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移,诱导细胞凋亡发挥抑癌作用,可能与上调Keap1表达,下调Nrf2和HO-1表达有关。

蒲公英甾醇通过p53通路影响口腔鳞癌细胞增殖与凋亡

目的:分析蒲公英甾醇对口腔鳞癌SCC-9细胞增殖、凋亡的影响,并探究其潜在机制。方法:采用不同浓度蒲公英甾醇处理人口腔鳞癌SCC-9细胞。通过CCK-8实验分析不同浓度蒲公英甾醇对SCC-9细胞增殖的影响;通过蛋白免疫印迹实验检测不同浓度蒲公英甾醇处理后SCC-9细胞中p53蛋白和增殖、凋亡相关蛋白的相对表达量;通过RT-qPCR检测p53 mRNA的表达。结果:相较于对照组,不同浓度蒲公英甾醇显著抑制SCC-9细胞的增殖(P<0.05),抑制作用与蒲公英甾醇的浓度与作用时间成正比;蒲公英甾醇显著促进SCC-9细胞凋亡(P<0.05),并存在剂量效应作用;蒲公英甾醇显著促进SCC-9细胞p53 mRNA的表达以及p53蛋白的表达(P<0.05)。结论:蒲公英甾醇激活p53信号通路,抑制口腔鳞状细胞癌SCC-9细胞增殖,促进SCC-9细胞凋亡。

lncRNA HOTAIR靶向miR-122促进口腔鳞癌细胞的增殖及迁移

目的 探究长链RNA(lncRNA)同源盒基因转录反义(HOTAIR)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移的影响及潜在的分子机制。方法 人舌癌细胞(CAL27)分为正常对照组、NC组(转染pcDNA空白质粒)、HOTAIR组(转染pcDNA-HOTAIR质粒)及HOTAIR+miR-122组(转染pcDNA-HOTAIR质粒+miR-122 mimic)。采用RT-PCR法检测细胞中HOTAIR和miR-122表达水平,采用CCK-8法检测细胞活力,通过划痕实验检测细胞迁移水平,采用双荧光素酶报告基因实验检测HOTAIR对miR-122基因表达的调控作用。结果 CAL27细胞转染pcDNA-HOTAIR质粒后,miR-122水平降低(P <0.05)。与NC组比较,HOTAIR组细胞活力及细胞划痕愈合率显著提高(P<0.05)。与HOTAIR组相比,HOTAIR+miR-122组细胞活力和细胞划痕愈合率明显降低(P <0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明HOTAIR能够抑制miR-122基因表达。结论 过表达HOTAIR能够促进CAL27细胞增殖和迁移,其机制可能与HOTAIR靶向抑制miR-122基因表达有关。

石蒜碱通过降解SCAP蛋白抑制口腔鳞癌细胞增殖与侵袭的实验研究

目的:探讨天然植物提取物石蒜碱对口腔鳞癌细胞的作用及相关机制。方法:应用平板克隆形成实验和流式细胞术检测石蒜碱对口腔鳞癌细胞体外增殖的作用,采用划痕实验和Transwell实验检测石蒜碱对口腔鳞癌细胞侵袭的作用,应用Western免疫印迹和免疫荧光验证石蒜碱对口腔鳞癌细胞SCAP蛋白的抑制作用。构建裸鼠荷瘤模型检测石蒜碱的体内抗口腔鳞癌效果。采用Graphpad Prism软件包进行统计学分析。结果:平板克隆形成和流式细胞实验显示,石蒜碱对口腔鳞癌细胞的体外增殖具有明显的抑制作用。划痕实验和Transwell结果显示,石蒜碱对口腔鳞癌细胞的体外迁移、侵袭也具有明显的抑制作用。Western免疫印迹和免疫荧光结果显示,石蒜碱能够降解口腔鳞癌细胞的SCAP蛋白,影响癌细胞的胆固醇代谢。动物实验结果进一步表明,石蒜碱在体内也具有良好的抗癌活性,能显著抑制口腔鳞癌细胞的生长,降低癌细胞内SCAP蛋白水平。结论:石蒜碱能够通过降解SCAP蛋白,抑制口腔鳞癌细胞增殖与侵袭,有望成为治疗口腔鳞癌的低毒高效天然植物提取药物。

黄芩苷调节JAK2/STAT3信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:研究黄芩苷通过调节Janus激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡、侵袭的影响。方法:体外培养人OSCC细胞CAL27,分为对照组、低浓度黄芩苷组(100 mg/L)、中浓度黄芩苷组(150 mg/L)、高浓度黄芩苷组(200 mg/L)、高浓度黄芩苷(200 mg/L)+Broussonin E组(20μmol/L JAK2/STAT3激活剂)。然后用集落形成实验检测各组细胞增殖能力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,Transwell法检测各组细胞侵袭能力,ELISA法检测细胞白细胞介素(IL)-18、IL-1β表达水平,Western blot检测各组细胞中磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果:与对照组比较,低浓度黄芩苷组、中浓度黄芩苷组、高浓度黄芩苷组CAL27细胞的集落形成率、细胞侵袭数目、细胞中IL-18、IL-1β表达水平、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、PCNA、MMP-9蛋白表达降低,细胞凋亡率、BAX蛋白表达增加(均P<0.05);中浓度黄芩苷组、高浓度黄芩苷组与低浓度黄芩苷组相比,以及高浓度黄芩苷组与中浓度黄芩苷组比较与上述结果一致(均P<0.05);高浓度黄芩苷+Broussonin E组与高浓度黄芩苷组比较,与上述结果趋势相反(P<0.05)。结论:黄芩苷可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路对口腔鳞癌细胞的增殖、凋亡和侵袭产生影响。

PTK7在口腔鳞癌中的表达分析及其生物学功能研究

目的探讨PTK7在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平、潜在的生物学功能及其临床意义。方法采用实时荧光PCR(quantitive real-time polymerase chain reaction,qPCR)和Western blot检测PTK7在OSCC细胞系和口腔鳞癌组织标本中的表达情况,利用siRNA干扰技术下调PTK7在HN6和Cal27细胞系中的表达,通过CCK-8实验、平板克隆实验、细胞划痕实验及Transwell实验检测PTK7下调后其对OSCC细胞系增殖、迁移、侵袭的影响;同时采用免疫组织化学染色法检测75例口腔鳞癌组织中PTK7蛋白的表达水平,分析其相关的临床意义。结果qPCR及Western blot结果显示PTK7基因及其编码蛋白在口腔鳞癌细胞系HN6和Cal27中高表达,并在6例新鲜口腔鳞癌标本中的表达高于其配对的癌旁正常组织;下调PTK7的表达可抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭功能;在75例口腔鳞癌组织中,PTK7的表达水平与OSCC患者的发病年龄、吸烟情况、病理分化程度等相关,其差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析发现,高表达PTK7的OSCC患者的预后较差。结论PTK7是口腔鳞癌发生发展过程的潜在癌基因,其表达水平影响OSCC细胞的生物学功能,临床上可根据PTK7表达水平了解口腔鳞癌的特性,PTK7可作为口腔鳞癌预后判定的独立指标。

USP20在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨泛素特异性蛋白酶20(ubiquitin specific protease 20,USP20)在口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及与临床病理指标的关系。方法:筛选癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中OSCC样本及配对癌旁样本,分别进行差异表达分析和配对差异分析。通过免疫组织化学SABC法检测组织芯片OSCC及癌旁和正常组织中USP20的表达水平,分析其与临床病理指标间的相关性。采用GraphPad Prism 9.5.0软件对数据进行统计学分析。结果:TCGA数据显示,USP20在OSCC中的表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。免疫组织化学染色评分显示,USP20在OSCC中的表达显著高于癌旁组织和正常组织(P<0.01);组织芯片临床病理指标分析显示,USP20的染色评分在肿瘤不同分化程度(P<0.05)及原发灶大小(P<0.01)的差异具有统计学意义。Kaplan-Meier分析显示,高表达组与低表达组总体生存时间及5年生存率相比无统计学差异(P>0.05)。结论:USP20可能参与OSCC的发生与进展,与肿瘤分化存在相关性,可加速其生长。

基于单原子铁纳米催化剂的纳米催化疗法对 口腔鳞癌细胞Cal27的作用

目的:制备单原子铁纳米催化剂(single-atom Fe nanocatalysts,SAF NCs),探讨其体外治疗口腔鳞癌的疗效,为口腔鳞癌治疗提供新策略。方法:用隔离与热解结合方法制备SAF NCs,利用透射电镜和球差电镜观察微观形态,X射线衍射图和元素分布能谱分析其结构和成分,溶液层面采用TMB显色实验和电子自旋共振试验检测催化性能,最后通过CCK-8和流式细胞技术、共聚焦显微镜观察体外处理口腔鳞癌Cal27细胞后的活性变化。采用GraphPad Prism 9软件包对数据进行统计学分析。结果:成功合成和表征SAF NCs,在溶液层面显示出优异的催化特性。细胞实验中,SAF NCs显示出良好的生物相容性,在模拟肿瘤微环境特性的条件下,进行体外催化治疗,Cal27细胞活性低至32.08%。结论:初步实验证明,SAF NCs具有良好的生物催化性能,在体外可有效抑制口腔鳞癌细胞增殖,为口腔鳞癌治疗提供了新策略。

circFOXK2靶向miR-4677-3p促进口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨circFOXK2靶向miR-4677-3p对口腔鳞癌(OSCC)细胞恶性行为的影响。方法:RT-qPCR检测circFOXK2和miR-4677-3p在OSCC组织和癌旁组织的表达。分别将si-circFOXK2、si-NC、miR-NC、miR-4677-3p模拟物、pcDNA、pcDNA-circFOXK2、si-circFOXK2+anti-miR-NC、si-circFOXK2+anti-miR-4677-3p转染OSCC细胞HSC3。通过划痕愈合实验、CCK-8法、Transwell实验、集落形成实验检测circFOXK2和miR-4677-3p表达对HSC3细胞恶行行为的影响。circFOXK2和miR-4677-3p的靶向关系通过双荧光素酶法确定。结果:OSCC组织中circFOXK2表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),miR-4677-3p表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。抑制circFOXK2表达后HSC3细胞吸光度(OD)值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数显著降低(P<0.01),miR-4677-3p表达水平显著升高(P<0.01)。过表达miR-4677-3p后HSC3细胞OD值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数显著降低(P<0.01)。miR-4677-3p是circFOXK2的靶基因。下调miR-4677-3p显著减弱抑制circFOXK2表达对HSC3细胞OD值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数的影响(P<0.01)。结论:抑制circFOXK2可通过促进miR-4677-3p表达来抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。

口腔鳞癌患者外周血指标与临床病理的相关性研究

目的:探讨口腔鳞癌患者外周血凝血及炎症指标与其临床病理特征的相关性。方法:选取医院口腔科收治的100例口腔鳞癌患者的临床资料作为口腔鳞癌组,另选取同期100例健康体检者的体检资料作为健康组,比较两组凝血指标FIB、FDP、D-二聚体及炎症反应指标NLR、PLR、MLR,并分析其与不同临床病理特征的相关性。结果:口腔鳞癌组患者外周血FIB、FDP、D-二聚体、NLR、MLR均高于健康组(P<0.05);与对照组相比,Ⅳ期口腔鳞癌患者和颈部淋巴结转移组外周血FDP、PLR、MLR相对较高(P<0.05);虽然外周血指标与组织学分级差异暂无统计学意义(P>0.05),但FIB、NLR、PLR与肿瘤最大径呈正相关(P<0.05)。结论:口腔鳞癌患者较正常人群凝血功能异常,且凝血指标FIB、FDP、D-二聚体及炎症反应指标NLR、PLR、MLR与其临床分期、颈部淋巴结转移及肿瘤最大径存在一定的相关性。

红景天甙通过NRF2/KEAP1通路对口腔鳞癌细胞生长的影响

目的:探讨红景天甙对口腔鳞癌细胞生长的影响及其机制。方法:以40μg/mL(低剂量组)、60μg/mL(中剂量组)、100μg/mL(高剂量组)红景天甙处理WSU-HN30细胞,等体积培养液处理作为空白对照组。分别通过MTT法、Transwell实验及流式细胞术检测WSU-HN30细胞增殖、迁移及凋亡,通过实时定量PCR(RT-PCR)和Western免疫印迹法检测核因子E2相关因子2(NRF2)和Kelch样ECH相关蛋白1(KEAP1)mRNA和蛋白的表达。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:同一浓度红景天甙作用WSU-HN30细胞48 h后,增殖抑制率显著高于24 h(P<0.05);同一时间,随着红景天甙浓度增加,增殖抑制率显著增加(P<0.05);与空白对照组相比,红景天甙处理后细胞迁移数显著减少,细胞凋亡率显著增加,细胞NRF2和KEAP1 mRNA及蛋白相对表达量显著降低,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:红景天甙可显著抑制口腔鳞癌细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡,其机制与下调NRF2/KEAP1通路表达有关。

改良衰弱评估对行口腔鳞癌皮瓣重建术老年患者术后并发症的预测价值

目的:探讨改良衰弱评估对行口腔鳞癌皮瓣重建术老年患者术后并发症的预测价值。方法:回顾性分析2014年1月—2022年12月在上海交通大学医学院附属第九人民医院接受口腔鳞癌肿瘤切除并行游离皮瓣重建的老年患者(>60岁)的围术期资料。根据改良5项衰弱评估工具(5 modified frailty index,5-mFI),依照是否衰弱分为衰弱组(≥2分)和非衰弱组(<2分),统计术后短期并发症发生率,以明确衰弱是否与其相关。采用R 4.0.5软件包中的logistics回归分析确定与衰弱相关的术后并发症。结果:共纳入1 083例患者,其中376例(34.7%)发生术后并发症。纳入衰弱组235例(21.7%),非衰弱组848例(78.3%)。衰弱组在术后并发症发生率、重症监护室住院天数、术后住院天数方面均显著多于非衰弱组(P<0.05)。在校正性别、年龄、吸烟、饮酒情况等混杂因素后,多因素logistics回归显示,肺部并发症(OR=4.76,95%CI:3.32~6.83,P<0.001)、皮瓣并发症(OR=2.65,95%CI:1.57~4.42,P<0.001)、肾功能损伤(OR=3.31,95%CI:1.13~9.66,P<0.05)等与衰弱显著相关。结论:5-mFI评分与接受口腔鳞癌皮瓣重建手术的老年患者术后并发症显著相关,为临床工作提供了一个方便、简洁的评估工具。

碳酸酐酶9在口腔鳞癌中的表达及其预后诊断价值

目的分析碳酸酐酶9(CA9)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达与临床病理特征的相关性及其预后诊断价值。方法采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CA9 mRNA在5对新鲜OSCC组织和癌旁组织中的表达。通过免疫组化检测CA9蛋白在86对配对的OSCC组织和癌旁组织中的表达水平,并探讨CA9的表达水平与患者临床病理参数的相关性。通过Kaplan-Meier生存分析法探讨CA9表达水平与OSCC预后的相关性,采用Cox回归分析影响OSCC预后的因素。利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CA9在OSCC组织中的表达及其预后诊断价值。结果CA9在OSCC组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05),与TCGA数据库分析结果一致,且其表达高低与淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05);CA9高表达OSCC患者的总生存期短于CA9低表达组(P<0.05);淋巴结转移、CA9表达水平是影响OSCC患者预后的独立预测因素(P<0.05);CA9可能对OSCC有一定诊断意义(P<0.01)。结论CA9在OSCC中高表达,且与OSCC预后不良有关,对OSCC可能具有一定的诊断价值。

口腔鳞癌患者血清Galectin-3表达水平及临床意义

目的探讨口腔鳞癌(OSCC)患者血清半乳糖凝集素-3(Galectin-3)表达水平及临床意义。方法选取2020年6月至2023年3月南阳市口腔医院收治的80例口腔鳞状细胞癌患者纳入OSCC组,选取同期健康体检者80例纳入对照组。术前采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELSIA)检测Galectin-3水平。分析血清Galectin-3与OSCC患者临床病理参数的相关性,比较OSCC组和对照组血清Galectin-3水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Galectin-3对OSCC的预测价值,采用多因素logistic回归分析探讨OSCC的危险因素。结果OSCC组患者血清Galectin-3水平高于对照组(P<0.05);年龄>60岁、有吸烟史、病理学分化(低分化+中分化)、肿瘤>2 cm、TNM分期(Ⅲ期+Ⅳ期)、发生淋巴结转移的OSCC组患者血清Galectin-3水平高于年龄≤60岁、无吸烟史、病理学分化(高分化)、肿瘤≤2 cm、TNM分期(Ⅰ期+Ⅱ期)、未发生淋巴结转移的OSCC组患者(P<0.05)。ROC曲线显示血清Galectin-3诊断OSCC的价值高。多因素logistic回归分析显示血清Galectin-3高表达为OSCC的危险因素(P<0.05)。结论口腔鳞癌患者血清Galectin-3水平升高,血清Galectin-3水平升高为口腔鳞癌的独立相关因素,有望作为OSCC侵袭转移评估的生物标志物。

牙龈卟啉单胞菌促进口腔鳞癌恶性演进

目的检测口腔鳞癌细胞SCC-25感染牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)后细胞行为和上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关分子表达变化,探讨Pg对口腔鳞癌进展的促进作用。方法Pg感染口腔鳞癌细胞SCC-25检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化,裸鼠皮下荷瘤模型检验该细菌对体内肿瘤生长的作用,免疫组化和Western blot检测EMT相关分子表达,甲硝唑清除Pg后检测上述细胞行为或分子变化。结果Pg感染明显促进了SCC-25细胞体外增殖、迁移、侵袭和体内裸鼠皮下荷瘤生长,并诱导E-cadherin蛋白质分子表达下调、N-cadherin和Vimentin蛋白质分子表达上调,甲硝唑清除Pg能够逆转细胞增殖、迁移、侵袭和EMT相关分子表达。结论Pg诱导口腔鳞癌发生EMT转化,促进了口腔鳞癌恶性进展。

lncRNA MAFG-AS1靶向miR-3180-3p调控口腔鳞癌HSC4细胞增殖和凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MAFG反义RNA1(MAFG-AS1)靶向miR-3180-3p对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时定量PCR检测口腔鳞癌组织和对应正常黏膜中MAFG-AS1和miR-3180-3p表达。以口腔鳞癌细胞HSC4为研究对象,分别构建干扰MAFG-AS1、过表达miR-3180-3p或抑制miR-3180-3p表达的口腔鳞癌细胞株,CCK-8、平板克隆实验、流式细胞术、蛋白印迹法检测细胞活力、克隆形成数、凋亡率及cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9表达。荧光素酶报告实验验证MAFG-AS1和miR-3180-3p的靶向关系。结果:与正常黏膜比较,口腔鳞癌组织MAFG-AS1表达显著升高(P<0.05),miR-3180-3p表达显著降低(P<0.05)。干扰MAFG-AS1或过表达miR-3180-3p均可降低HSC4细胞活力和克隆形成数(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),上调cleaved-caspase 3和cleaved-caspase 9蛋白表达(P<0.05)。miR-3180-3p是MAFG-AS1的直接靶点,MAFG-AS1负调控miR-3180-3p表达。抑制miR-3180-3p可增加HSC4细胞活力和克隆形成数(P<0.05),抑制细胞凋亡(P<0.05),下调cleaved-caspase 3和cleaved-caspase 9蛋白表达(P<0.05),进而削弱干扰MAFG-AS1对HSC4细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(P<0.05)。结论:干扰MAFG-AS1通过上调miR-3180-3p表达抑制口腔鳞癌HSC4细胞增殖,促进细胞凋亡。

LINC00472通过下调miR-155-5p表达抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00472通过靶向微小RNA-765(miR-155-5p)在口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及分子机制。方法:生物信息学预测和双荧光素酶报告基因验证LINC00472与miR-155-5p的关系。采用qRT-PCR检测40例OSCC组织样本及SCC-15细胞系中LINC00472和miR-155-5p表达水平。将SCC-15细胞分为对照组、LINC00472过表达组、miR-155-5p过表达组和LINC00472过表达+miR-155-5p过表达组。用MTT法、划痕实验和Transwell法检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。用qRT-PCR和western blotting检测细胞钙黏附蛋白E(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果:miR-155-5p是LINC00472的直接靶基因。OSCC组织和SCC-15细胞中LINC00472低表达(P<0.01),而miR-155-5p高表达(P<0.01),二者表达呈负相关性(r=-0.766,P<0.01)。与对照组比较,LINC00472过表达组SCC-15细胞的增殖、迁移、侵袭减弱,Vimentin和MMP9表达减少、E-cadherin表达增加(P<0.01);miR-155-5p过表达组SCC-15细胞的增殖、迁移、侵袭能力增强,Vimentin和MMP9表达增加、E-cadherin表达减少(P<0.01)。miR-155-5p过表达可逆转过表达LINC00472对OSCC细胞增殖、迁移和侵袭等的作用。结论:LINC00472抑制OSCC的发生发展,LINC00472/miR-155-5p调控轴的发现可能为OSCC提供潜在的治疗靶点。

槟榔提取物通过上调Max蛋白对口腔鳞癌细胞迁移、侵袭的影响

目的 分析槟榔提取物通过上调MYC关联因子X(Max)蛋白对口腔鳞癌细胞迁移、侵袭的影响。方法 将口腔鳞癌细胞分为对照组、低浓度槟榔提取物(低浓度)组、中浓度槟榔提取物(中浓度)组、高浓度槟榔提取物(高浓度)组,体外培养CAL127人口腔鳞癌细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定Max相对表达量;通过进行划痕实验来检验胃癌细胞株的迁移能力;通过Transwell小室对口腔鳞癌细胞的侵袭个数进行观察;采用Western印迹测定血小板源性生长因子(PDGF)B、磷酸化血小板源性生长因子(p-PDGFR)β、细胞周期蛋白(Cyclin)D1蛋白相对表达量。结果 与低、中浓度组相比,高浓度组Max表达均明显升高,口腔鳞癌细胞迁移能力及侵袭个数均明显降低(P<0.05)。高浓度组口腔鳞癌细胞处于G0/G1期均明显高于对照组、低、中浓度组(P<0.05);高浓度组口腔鳞癌细胞处于S期均明显低于对照组、低、中浓度组(P<0.05);高浓度组口腔鳞癌细胞处于G2/M期明显低于对照组、低、中浓度组(P<0.05)。高浓度组口腔鳞癌细胞增殖率较对照组及低、中浓度组明显降低,凋亡率较对照组、低、中浓度组明显升高(P<0.05)。高浓度组口腔鳞癌细胞PDGFB、p-PDGFRβ、CyclinD1蛋白表达较对照组及低、中浓度组明显降低(P<0.05)。结论 槟榔提取物可能通过上调Max蛋白的表达而显著抑制口腔鳞癌细胞的迁移和侵袭。

BMI1/NF-κB轴重塑TAMs表型促进口腔鳞癌恶性生物学行为

目的:探究口腔鳞癌(OSCC)细胞中BMI1调控肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)表型转化的作用及其机制。方法:分析GEPIA 2.0网站中519例头颈鳞癌组织和44例正常组织中BMI1表达。实时荧光定量PCR、蛋白印迹法检测3例OSCC组织和SCC9、SCC15和CAL27细胞系中BMI1的表达;siRNA技术建立SCC9细胞的BMI1敲除细胞系,CCK-8、划痕实验、Transwell实验探究BMI1/NF-κB轴介导癌细胞恶性生物学行为;收集各组细胞条件培养基,通过OSCC细胞条件培养基与人单核细胞(THP-1)共培养,检测THP-1的募集和巨噬细胞分型相关标志物的表达情况。裸鼠荷瘤实验进一步体内检测BMI1对移植瘤增生的影响。结果:BMI1在OSCC组织以及细胞系中显著高表达;BMI1/NF-κB轴促进了OSCC细胞增殖、迁移和侵袭能力,也促进了THP-1细胞的募集与M2型极化。体内实验进一步证明了敲低BMI1可以抑制OSCC生长。结论:BMI1/NF-κB轴可通过调控TAMs的M2型转化,促进口腔鳞癌的增殖、迁移和侵袭能力。靶向阻断BMI1/NF-κB轴可能为口腔鳞癌治疗提供新靶点和新策略。

环状RNA hsa_circ_0003221靶向miR-139-3p/IGF2BP3轴调控口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的分子机制

目的:探讨环状RNA hsa_circ_0003221(circPTK2)靶向微小RNA(miR)-139-3p/胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)轴调控口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡。方法:qRT-PCR检测组织及细胞中circPTK2、miR-139-3p、IGF2BP3 mRNA表达水平;将CAL-27细胞分为5组:sh circPTK2、sh NC、sh circPTK2+miR-139-3p inhibitor、sh circPTK2+inhibitor NC、空白组。分别检测细胞增殖率、凋亡率及相关蛋白、IGF2BP3的表达,并验证miR-139-3p与circPTK2、IGF2BP3的靶向关系。结果:miR-139-3p表达在OSCC组织及细胞中降低,circPTK2、IGF2BP3 mRNA表达增加(P<0.05);沉默circPTK2可抑制细胞增殖及circPTK2、IGF2BP3 mRNA及蛋白表达,促进细胞凋亡及miR-139-3p表达(P<0.05);miR-139-3p inhibitor逆转了沉默circPTK2对CAL-27细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。miR-139-3p分别与circPTK2、IGF 2BP3存在靶向关系。结论:沉默circPTK2可通过miR-139-3p/IGF2BP3轴调控OSCC细胞增殖、凋亡。