针刺治疗可卡因成瘾机制中刺激方式的研究概述

可卡因作为一种广泛滥用且高度成瘾的药物,严重影响个人的身心健康,具有一定的社会危害和经济负担。针刺能辅助治疗可卡因成瘾,并且副作用较小,但明确的刺激方式,是阐明针灸治疗疾病各机制的重要因素。本文概述了可卡因成瘾机制中刺激方式存在参数不同、针刺深度不固定、穴位选择有差异、治疗时机前后有别、针刺时间长短不一等问题。为了规范针灸实验的干预措施,建议在今后机制研究中,刺激方式应探索最佳参数,穴位的选择以临床为基础、针刺时机应符合客观性、疗程应考虑针刺效应等。

可卡因滥用现状及防治路径研究

通过阐述可卡因当前国内外滥用形势,从可卡因滥用导致的身心病变及社会秩序崩坏分析可卡因的危害。梳理利益驱使、技术异化及区际不安因素对可卡因市场扩大的影响。从夯实禁毒宣传理论,加强毒品预防教育、加强溯源干预治理,发展替代种植经济、开展禁毒国际合作,增强检测拦截能力等路径开展可卡因的防治工作,具有重要意义。

可卡因、冬泳、彩虹斯克里亚宾的“魔幻世界”

当气温达到零下二十摄氏度时,湖水表面会结冰,而冰面下湖水的温度最低不会低于零摄氏度,所以在零下二十摄氏度的气温下不觉得冷的人,浸泡在湖水里对他而言简直就是温暖--没有冬泳过的人如是说,正如没有听过斯克里亚宾(Scriabin)作品的人总喜欢人云亦云地用“联觉、通感、刺激”这样的字眼与之关联一样,这些词语就如同形容法国红酒“柔软、饱满、充满立体感”一样空洞、抽象。

可卡因滥用所致的心血管系统病理损害

目前通常认为可卡因滥用所致的死亡是由于单次大剂量使用引起的,事实上除了少数是药物过量而引起急性中毒外,多数可卡因引起的死亡和可卡因在血液中的浓度水平并不紧密相关。长期应用可卡因,使机体在分子、细胞和组织水平发生一系列的改变,而这些改变可导致猝死。其中,可卡因导致心血管系统的损害是十分重要的因素。可卡因引起心脏的改变包括冠状动脉硬化、痉挛、动脉夹层,心肌肥大、坏死等病变。本文对近年来此领域的研究进展做一综述。

五指毛桃拮抗毒品可卡因的肝毒性作用及其活性成分研究

目的:研究中药五指毛桃拮抗毒品可卡因的肝脏毒性作用及其活性成分。方法:采用雄性ICR小鼠可卡因中毒模型。将ICR小鼠分别灌胃给予五指毛桃水煎剂,剂量分别相当于生药100,200,300 g.kg-1,皮下注射盐酸可卡因染毒造模,测定血清中丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性,留取动物肝脏组织,观察肝组织病理变化并测定肝组织过氧化氢酶(CAT)活性。通过活性追踪法寻找五指毛桃的活性成分,并用相同方法对得到的化学成分抗可卡因肝毒性作用进行验证。结果:五指毛桃水煎剂能够使可卡因染毒小鼠血清转氨酶及过氧化氢酶含量呈剂量相关性降低,且使肝组织有明显病理改变。补骨脂素作为五指毛桃的主要成分,具有拮抗可卡因肝毒性的作用。结论:五指毛桃可明显保护可卡因造成的肝损伤,补骨脂素是其主要活性成分。

可卡因-苯丙胺调控转录肽(CART)对猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的影响

旨在研究可卡因-苯丙胺调控转录肽(Cocaine amphetamine regulated transcript,CART)对促卵泡素(Follicular stimulating hormone,FSH)诱导的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的影响。用Long-term培养方法在不同CART、FSH浓度下对猪卵巢卵泡颗粒细胞培养7d,在显微镜下观察各孔细胞生长情况并采集图像;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定各孔雌激素浓度。细胞培养168h后:(1)在培养液不添加CART时,添加FSH孔中的雌激素浓度与不添加孔相比,显著提高;浓度为25ng.mL-1时,雌激素浓度最高,为(17 295.57±184.03)pg.mL-1;(2)CART对体外培养的无FSH和FSH为5ng.mL-1的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生没有影响;(3)当培养体系FSH浓度分别为25和50ng.mL-1时,随着CART浓度的升高(0.01、0.1、1μmol.L-1),培养液雌激素浓度有下降的趋势,但各组间差异不显著(P>0.05)。但是,当FSH为25ng.mL-1,CART为0.1和1μmol.L-1时,与对照组相比,颗粒细胞雌激素的产生明显受到抑制(P<0.05)。但是,统计分析FSH和CART互作效应并不显著(P>0.05),这一点需进一步试验证明;(4)当培养液添加50ng.mL-1 FSH时,随着CART浓度的升高(0.01、0.1、1μmol.L-1),与对照组相比,雌激素浓度各组差异不显著(P>0.05)。猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生需在FSH诱导下进行;当培养液FSH为25和50ng.mL-1时,CART对FSH诱导的猪卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生有抑制作用,但抑制效果并不显著。由此推断,并不像单胎的牛、羊,CART在猪卵泡发育过程中,可能并非是个主要的局部负调控因子。

可卡因-苯丙胺调控转录肽对绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的影响

研究可卡因-苯丙胺调控转录肽(Cocaine amphetamine regulated transcript,CART)对促卵泡素(Follicular stim-ulating hormone,FSH)诱导的绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素(E2)产生的影响。收集卵巢卵泡颗粒细胞,Long-term培养方法在不同CART、FSH浓度下培养7d,分别在培养48、96、144和168h后,在显微镜下观察各孔细胞生长情况;采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定其雌激素浓度。培养液分别加入不同浓度FSH(5、25和50ng·mL-1),细胞培养168h后,雌激素浓度显著提高。当FSH浓度为5ng·mL-1时,培养液雌激素浓度最高为5 694.5±40.5pg·mL-1;当FSH浓度为5ng·mL-1,随着CART不同浓度的加入(0.01、0.10、1.00μmol.L-1),颗粒细胞雌激素的产生受到不同程度的抑制;在FSH浓度为25、50ng·mL-1水平下加入CART浓度为0.10μmol.L-1时,对FSH诱导的绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素产生的抑制作用明显(P<0.01)。绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生需在FSH诱导下进行;CART对FSH诱导的绵羊卵巢卵泡颗粒细胞雌激素的产生有抑制作用。

LC-MS/MS法测定豚鼠毛发中可卡因及其代谢物苯甲酰爱康宁(英文)

本实验旨在建立豚鼠毛发中可卡因及其代谢物苯甲酰爱康宁的液相色谱-串联质谱分析方法,并考察单次给药后豚鼠毛发中可卡因和苯甲酰爱康宁的质量浓度。毛发洗涤、晾干后剪成1～2 mm小段,取20 mg,加入0.1mol.L-1HCl 1 mL和内标溶液(50 ng.mL-1d3-可卡因和d8-苯甲酰爱康宁)20μL,50℃水浴中酸水解过夜;调pH为中性,用二氯甲烷液液提取,移取有机相于60℃水浴下挥干,用甲醇100μL复溶,进样5μL。目标化合物用Allure PFP丙基柱分离,以甲醇-20 mmol.L-1乙酸铵(0.1%甲酸)(80∶20)为流动相。质谱采用电喷雾电离-正离子模式(ESI+),多反应监测模式(MRM)。动物实验:豚鼠8只分两组,分别以10和0.4 mg·kg-1的剂量腹腔注射盐酸可卡因水溶液一次,在给药后d 7和d 14分色剃取毛发进行检测。结果显示,毛发中可卡因和苯甲酰爱康宁的最低检出限均为1 pg.mg-1,在5～250 pg.mg-1线性良好(r2≥0.999 7)。在给药后d 7收集的豚鼠毛发中同时检测到可卡因和苯甲酰爱康宁;d 14收集的毛发中只检测到可卡因。所建LC-MS/MS法灵敏度高,特异性强,适用于豚鼠毛发中低质量浓度的可卡因和苯甲酰爱康宁的分析。

表面解吸常压化学电离质谱法直接测定火锅底料中的痕量可卡因

采用表面解吸常压化学电离(SDAPCI)质谱法,在无需样品预处理情况下,直接测定了火锅底料中可卡因的含量.采用取样针取样,单次取样量在纳升级,单个样品测定时间少于0.5min,回收率为92.9%～106.6%;相对标准偏差(RSD)为4.7%～11.6%;可卡因的检出限可达1.5×10-12g/mL.该方法适用于批量火锅底料等食品类样品的快速半定量检测.

可卡因对小鼠脾细胞内ATP酶、LDH和SDH活性的影响

目的考察盐酸可卡因对体外培养小鼠脾细胞内ATP酶、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活性的影响。方法采用小鼠脾细胞体外培养的方法,在脾细胞培养液中加入终质量浓度分别为10、20和100μg/mL的盐酸可卡因,按试剂盒所述条件在7d时检测脾细胞中ATP酶、LDH和SDH活性。结果在离体脾细胞培养液中加入不同剂量的可卡因,培养7d,脾细胞内ATP酶、LDH与SDH活性均明显降低。结论可卡因对脾细胞内ATP酶、LDH和SDH活性有抑制作用。

LC-MS/MS测定尿液中可卡因及其代谢物苯甲酰爱康宁

目的建立尿液中可卡因(cocaine,COC)及其代谢物苯甲酰爱康宁(benzoylecgonine,BZE)的液相色谱-串联质谱分析方法。方法尿液经固相萃取后,用AllurePFP丙基柱分离,以V(甲醇):V(20mmol/L乙酸胺和0.1%甲酸的缓冲溶液)=80∶20为流动相,采用二级质谱多反应监测模式检测COC和BZE。按10mg/kg的剂量对豚鼠腹腔注射可卡因,给药后收集7d尿液。结果尿液中COC和BZE在2.0～100ng/mL质量浓度范围内线性关系良好(r=0.9995),最低检测限(LOD)为0.5ng/mL;回收率大于90%;日内和日间精密度均小于6%;豚鼠尿液中主要检测目标物是BZE,且BZE检测时限也较COC长。结论所建方法灵敏度高,选择性好,适用于尿液中可卡因和苯甲酰爱康宁的检测。

可卡因-苯丙胺调节转录肽激活ERK促进海马神经元合成BDNF

目的:探讨细胞外信号调节激酶(ERK)通路在可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)上调大鼠海马神经元脑源性神经营养因子(BDNF)表达中的作用。方法:取18d的SD大鼠胚胎(E18),分离海马神经元,体外原代培养7d,以不同剂量CART处理细胞,用Western blotting方法分别检测不同处理时点p-ERK表达。再以ERK通路特异性阻断剂PD98059(25μmol/L)预处理细胞,进一步观察CART对p-ERK表达及BDNF合成的影响。结果:同对照组比较,CART处理组海马神经元p-ERK表达明显增高(P<0.01),BDNF合成增加。PD98059能阻断内源性ERK磷酸化、也能阻断CART诱导的ERK磷酸化,同时抑制CRAT引起的BDNF合成。结论:CART通过激活ERK促进海马神经元BDNF的合成,从而发挥神经营养作用。

1,3-二苯-1,3-丙二酮对可卡因致小鼠肝毒性及神经毒性的保护作用

目的:探讨1,3-二苯-1,3-丙二酮(DPPD)对可卡因致小鼠急性肝损伤及神经毒性的保护作用。方法:可卡因急性肝损伤模型采用♂C57BL/6N小鼠,DPPD(200,400,800 mg·kg–1/d,ig)预给药4 d,末次给药30 min后,sc可卡因70 mg·kg-1造模,24 h后处死,测定血清ALT,AST,LDH的活性及肝脏MDA含量,观察肝脏病理变化。DPPD抗可卡因神经毒性实验采用♂ICR小鼠,DPPD预给药3 d(给药剂量同前),末次给药30 min后,sc可卡因20mg·kg-1造模,记录小鼠0-180 min的活动次数。结果:可卡因70 mg·kg-1致部分小鼠死亡(5/7),存活小鼠血清ALT,AST,LDH活性及肝脏MDA含量显著升高,肝脏病理损伤明显,而DPPD预给药组无死亡,血清ALT,AST,LDH活性及肝脏MDA含量显著降低,肝脏损伤明显改善,呈剂量-效应关系;DPPD抗可卡因神经毒性研究发现,DPPD预给药组小鼠自主活动量较模型组显著降低。结论:DPPD对可卡因致小鼠急性肝毒性及神经毒性有拮抗作用。

稀土上转换发光纳米探针用于潜指纹中可卡因的检测

结合核酸适配体和稀土掺杂上转换纳米材料的优势,建立了一种潜指纹中外源性物质检测的新方法。Zeta电位、紫外吸收光谱和发光光谱表明核酸适配体成功修饰到上转换颗粒表面而且没有影响颗粒的发光性质。对含有不同量可卡因的指纹进行检测,在指纹中可卡因含量为0.5μg时仍能呈现出较强的发光强度。该方法能够通过潜指纹成像提供光学信号,实现潜指纹中外源性物质的检测,而且适用于不同人和不同基底上指纹的检测,具有简便、检测灵敏度高、适用性广等优点,对身份认证、刑事侦查和医疗诊断有重要意义。

可卡因对后代多巴胺能神经系统的长时影响:剂量依赖性与年龄依赖性研究

目的 通过建立妊娠中晚期暴露于可卡因的小鼠动物模型 ,探讨可卡因对后代多巴胺能神经系统 (dopaminergicnervoussystem ,DAS)的发育是否具有长时程影响 ,同时探讨这种影响是否具有剂量依赖性和年龄依赖性。方法 称量不同剂量可卡因处理组与对照组的后代仔鼠在青春前期、青春期和成年期的体重和脑重 ;运用高效液相色谱结合电化学检测器 (HPLC EC)的技术检测各组各时期后代仔鼠脑内多巴胺 (dopamime,DA)及其代谢产物 3 ,4 双羟苯乙酸 (3 ,4 di hydroxyphenylaceticacid ,DOPAC)、高香草酸 (4 hydroxy 3 menthoxyphenylaceticacid ,HVA)含量差异 ;通过免疫组织化学结合图像分析方法观察黑质区 (substantianigra,SN)酪胺酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)的分布与含量。 结果 在妊娠期中晚期皮下注射中等剂量可卡因的仔鼠在青春前期和青春期生长发育延迟 ,脑内DA及其代谢产物的含量比对照组明显增高 ,SN区TH相对含量增多 ,这些改变在成年期恢复正常 ;低剂量组的仔鼠各项检测指标在各时期与对照组相比无统计学意义 ;高剂量组的妊娠母鼠流产率为 80 % ,新生仔鼠 1 0d内死亡。结论 妊娠期暴露于可卡因对后代DAS的发育和功能具有长时程影响 。

可卡因-苯丙胺调节转录肽对脑缺血-再灌注损伤小鼠脑保护机制的研究

目的探讨可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)对缺血-再灌注小鼠脑梗死体积、脑组织8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OHdG)及3-硝基酪氨酸(3-NT)水平的影响。方法选用10～12周龄的健康雄性昆明小鼠264只,随机分为缺血-再灌注组、CART组、等渗盐水组(各72只)及假手术组(48只)。建立大脑中动脉闭塞(MCAO)2 h,再灌注12、24、48及72 h模型(每时间点6只)。CART组于再灌注前经尾静脉注射CART55-102(0.5μg/kg,浓度12nmol/L;每24h重复给药1次),等渗盐水组给予同体积等渗盐水作对照。采用酶联免疫吸附实验双抗体夹心法测定脑组织中的8-OHdG和3-NT含量。结果①CART组再灌注后各时间点脑梗死体积均小于缺血-再灌注组和等渗盐水组,其中24、48和72 h差异均有统计学意义(P<0.01)。②与假手术组比较,缺血-再灌注组、CART组及等渗盐水组在再灌注后各时间点脑组织中8-OHdG和3-NT含量均升高。③与缺血-再灌注组、等渗盐水组比较,CART组再灌注后各时间点脑组织中的8-OHdG和3-NT含量均有所下调。其中8-OHdG仅在12 h差异有统计学意义(P<0.05),3-NT在24、48及72 h时间点差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CART对小鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用可能与下调8-OHdG及3-NT水平,抑制氧化应激有关。

微波萃取-气相色谱法测定血液中的可卡因及其代谢物爱冈宁甲基酯

建立了血液中可卡因(cocaine,COC)及其代谢物爱冈宁甲基酯(ecgonine methyl ester ,EME)的气相色谱-质谱(CG-MS)和气相色谱-氢火焰离子化检测(GC-FID)方法。该方法采用微波萃取提取血液中的COC和EME,优化并确定了最佳提取条件:以氯仿-异丙醇(体积比为9:1)混合溶液为提取溶剂,用0.05mol/LNa2CO3-NaH-CO3缓冲溶液调节样品溶液的pH至10.0,在40℃下微波萃取6min;采用GC-MS对萃取液中的COC和EME进行定性,采用GC-FID进行定量检测。COC和EME的平均回收率分别为79.91%～99.85%,相对标准偏差(RSD)均小于3.10%,检出限(S/N=3)分别为60mg/L和40mg/L。该方法无需衍生化,快速、准确、灵敏,可同时检测血液中的COC和EME。

可卡因对不同年龄段大鼠心肌细胞caspase-3活性的影响

目的 :探讨可卡因对不同年龄段大鼠心肌细胞caspase - 3活性的影响。方法 :健康 3周龄、6周龄和12周龄雄性SD大鼠各 16只 ,随机分为实验组和对照组 ,每组 8只 ,实验组每日皮下注射可卡因 ( 15mg/kg体重 ) 2 8d复制吸毒动物模型。采用DNA片段和流式细胞术 (FCM)分析心肌细胞凋亡状况 ,caspase - 3活性。同时称量大鼠体重 (BW)、心脏重量 (HW) ,计算心脏重量指数 (HW/BW ,mg/g)。结果 :①与同年龄段比较 ,可卡因诱导 2 8d后 ,3周龄和 6周龄大鼠心脏重量增加 (P <0 0 5 ) ;各年龄段实验组大鼠心脏重量指数均显著增加 ( 3周龄组 3 0 9± 0 2 9vs 3 5 3± 0 2 6 ,6周龄组 2 73± 0 30vs 3 2 9± 0 2 1,12周龄组 2 79± 0 2 0vs 3 0 7± 0 16 ,均P <0 0 1) ;②实验组鼠心肌均出现细胞凋亡梯带 ;③FCM分析显示 ,实验组 3周龄 ( 30 6 2± 4 6 9vs 5 1 13± 7 82 )、6周龄 ( 35 91± 4 17vs 4 6 5 6± 4 2 9)和 12周龄 ( 37 4 1± 4 83vs 4 3 92± 4 16 )大鼠心肌细胞caspase - 3活性均明显高于对照组 ,其中 3周龄实验组caspase- 3活性更为明显 (均P <0 0 1)。结论 :可卡因诱导 2 8d可致大鼠心脏重量指数和心肌细胞凋亡增加 ;caspase - 3活性增加可能是可卡因诱导大鼠心肌细胞凋亡的重要途径?

可卡因-苯丙胺调节转录肽对缺血-再灌注模型小鼠皮质突触可塑性的影响

目的观察可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)对缺血-再灌注(I/R)小鼠皮质突触可塑性的影响。方法选用10~12周龄的健康雄性清洁级昆明小鼠288只,按照随机数字表法完全随机分为I/R组(81只)、I/R+CART组(81只)和假手术组(63只)、假手术+CART组(63只)。建立大脑中动脉阻塞(MCAO)2h再灌注模型。I/R+CART组于再灌注前经尾静脉注射CART(0.5μg,200μl),假手术+CART组予以等剂量CART;每24小时重复给药1次。在实现再灌注后不同时间点(24h、72h和7d)采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色检测I/R组和I/R+CART组脑梗死体积;采用透射电镜观察各组不同时间点突触超微结构变化,并对突触形态学参数进行定量分析;采用Western Blot法观察再灌注72h皮质梗死周围区突触后致密物95(PSD-95)蛋白表达水平。结果(1)与假手术组比较,I/R组小鼠造模后24、72h和7d皮质切片中突触数量明显减少[3.37±0.38)个/μm^2比(7.04±0.55)个/μm^2,(2.89±0.22)个/μm^2比(6.89±0.04)个/μm^2,(3.25±0.18)个/μm^2比(6.78±0.42)个/μm^2;均P<0.05],PSD密度明显下降[24.4±2.8)nm比(47.3±6.1)nm,(23.8±3.7)nm比(46.5±7.5)nm,(24.6±2.2)nm比(48.1±5.1)nm:均P<0.05],突触间隙宽度增大[25.2±2.1)nm比(21.5±1.6)nm、(25.2±1.4)nm比(21.3±1.0)nm,(23.7±2.6)nm比(21.6±1.6)nm;均P<0.05];再灌注后72h时间点PSD-95蛋白表达水平下降(P<0.05);(2)与I/R组比较,I/R+CART组小鼠I/R后24、72h和7d脑梗死体积缩小[分别为(29.0±1.9)%比(36.3±1.4)%,(38.1±1.4)%比(47.6±2.7)%,(36.0±2.8)%比(42.5±2.0)%;均P<0.05];再灌注后72h时间点突触数量[4.32±0.35)个/μm^2]明显增多(P<0.05),PSD-95蛋白表达水平增加(P<0.05);再灌注后24、72 h和7d各时间点PSD密度[分别为(33.8±3.4)、(34.2±4.6)、(38.2±4.0)nm]增厚(均P<0.05);而各时间点突触间隙宽度差异无统计学意义(均P>0.05)。结论CART可缩小I/R小鼠脑梗死体积,改善缺血损伤后小鼠脑皮质神经细胞突触可塑性。

多巴胺受体在可卡因诱导的MAPK通路激活和c-fos基因表达中的作用

目的:探讨多巴胺受体对可卡因诱导的MAPK通路及c-fos基因表达的调控作用。方法:应用多巴胺受体基因敲除小鼠模型,采用Western blotting检测可卡因作用后2h,MAPK家族成员ERK,JNK和p38蛋白激酶的磷酸化活化,及早期反应基因c-fos的基因表达。结果:可卡因急性作用下,D1多巴胺受体促进CPu区ERK激酶的激活和c-fos基因的诱导表达,D3多巴胺受体抑制CPu区ERK激酶的激活和c-fos基因的诱导表达。而p38和JNK没有被可卡因激活。ERK激酶的特异性抑制剂SL327可以阻断可卡因对c-fos基因的激活。结论:D1和D3多巴胺受体对ERK激酶的激活和c-fos基因的诱导表达起相反的调节作用,并且c-fos基因的诱导表达依赖于ERK信号通路。