抗血吸虫药物吡喹酮制剂研究进展

血吸虫病是一种严重影响人们的生产生活及生命安全的疾病,吡喹酮是抗血吸虫病的关键药物之一。本文综述了关于吡喹酮的理化性质、杀虫机制,以及相关常规制剂和新制剂的的研究进展,以期为探索吡喹酮的新剂型的开发与应用提供参考。

吡喹酮通过5-HT2B受体对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨吡喹酮(praziquantel,PZQ)对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株,分为正常对照组、PZQ处理组、5-羟色胺2B(5-HT2B)受体抑制剂组(RS127445组)、5-HT2B受体抑制剂+PZQ处理组(RS127445+PZQ处理组)。采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株中5-HT2B受体mRNA相对表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,western blot法检测Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白表达量。结果Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株5-HT2B受体mRNA相对表达水平正常对照组为1.02±0.09和1.01±0.20,PZQ处理组为1.36±0.16和1.66±0.16,经PZQ处理后5-HT_(2B)受体mRNA相对表达水平均增加(t=3.22、5.07,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株48 h细胞增殖率为(74.00±4.58)%和(77.00±5.29)%,低于正常对照组(t=9.88、7.47,P均<0.01);72 h细胞增殖率为(71.00±6.08)%和(67.33±7.57)%,低于正常对照组(t=7.87、6.00,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=5.48、3.48,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株48 h细胞迁移率为(52.91±3.15)%和(17.28±1.78)%,低于正常对照组(t=7.86、13.46,P均<0.01);72 h细胞迁移率为(58.79±3.25)%和(22.29±5.87)%,低于正常对照组(t=11.65、9.57,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=3.13、6.97,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株72 h细胞凋亡率为(16.13±0.66)%和(20.70±2.85)%,高于正常对照组和RS127445+PZQ处理组(t=27.82、5.65、9.54、4.10,P均<0.01);Bax相对蛋白表达水平分别为1.70±0.18和2.23±0.14,高于正常对照组(t=2.83、7.89,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=9.40、5.25,P均<0.05);Bcl-2相对蛋白表达水平分别为0.52±0.17和0.53±0.02,低于正常对照组(t=3.57、8.39,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=12.09、6.12,P均<0.05)。结论PZQ可通过5-HT2B受体对肝癌细胞的增殖、迁移和凋亡造成影响。

吡喹酮咀嚼片的制备及其质量评价

为制备吡喹酮咀嚼片剂,本试验采用湿法制粒法,以硬度、片重差异、脆碎度、崩解时限为质量评价的指标,通过单因素实验和正交试验优化吡喹酮咀嚼片的最佳处方和工艺,进一步建立紫外分光光度计法进行含量测定。结果显示,最优处方为吡喹酮6 g,乳糖42 g,预胶化淀粉3.6 g,糖精钠1.2 g,15%PVP-70%乙醇适量,硬脂酸镁0.6 g,湿颗粒过14目筛,制得的吡喹酮片剂外观光滑完整、含量均匀,适口性好,符合药典要求,建立的含量测定方法专属性强、精密度好、准确度高。本研究使用的处方合理,工艺可靠,含量测定方法科学。

改善型吡喹酮片临床效果评价

为有效避免因苦味和不良气味造成犬只不愿采食吡喹酮片剂从而导致犬包虫病防控效果的极大降低,本实验采用推荐低剂量组、推荐中剂量组、推荐高剂量组空腹饲喂改善型吡喹酮片剂,进行适口性、安全性试验、有效性试验、驱虫效果评价,结果表明该片剂极大地掩盖了吡喹酮的苦味和不良气味,同时兼具诱食性,有效提高了农牧区犬只对吡喹酮片剂的自主采食率,确保了犬的驱虫密度,从而极大提高了包虫病的防治效果。

吡喹酮联合甘露醇和糖皮质激素治疗脑囊虫病的不良反应分析

观察针对脑囊虫病采用吡喹酮联合甘露醇和糖皮质激素治疗的效果与不良反应情况。方法 纳入我院2019年2月至2022年1月治疗的脑囊虫病患者资料60例展开研究,以给药方法分为2组,30例/组,对照组实施阿苯达唑联合甘露醇和糖皮质激素治疗,观察组实施吡喹酮联合甘露醇和糖皮质激素治疗,比较其综合疗效。结果 观察组患者经治疗后疾病治疗有效率高于对照组,数据差异显著(P<0.05);观察组患者治疗过程中的不良反应发生率低于对照组,数据差异显著,存在统计学意义(P<0.05)。结论 针对闹囊虫病采用吡喹酮联合甘露醇和糖皮质激素治疗的方式可取得显著疗效,其患者在用药过程中不易发生癫痫等相关并发症,治疗安全系数较高,值得应用与推广。

高效液相色谱法测定米尔贝肟吡喹酮咀嚼片中米尔贝肟与吡喹酮的含量

目的:建立米尔贝肟吡喹酮咀嚼片中的米尔贝肟与吡喹酮含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,采用Agilent SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以乙腈:0.05%三氟乙酸水溶液(50:50)为流动相A,以乙腈:0.05%三氟乙酸水溶液(95:5)为流动相B,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为230 nm,进样量为20μL。结果:吡喹酮线性研究浓度范围为0.40~1.20mg/mL范围内线性良好(R2=0.9991),米尔贝肟A3在0.04~0.12mg/mL的范围内线性良好(R2=1),米尔贝肟A4在0.04~0.12mg/mL范围内线性良好(R2=0.9999),准确度吡喹酮三个浓度的回收率分别为101.1%、101.5%和98.3%,RSD值分别为0.1%、0.5%和0.1%,米尔贝肟三个浓度的回收率分别为98.3%、100.1%和99.9%,RSD值分别为0.1%、0.6%和0.2%,准确度回收率良好。结论:本法适用于米尔贝肟吡喹酮咀嚼片中米尔贝肟与吡喹酮的含量的测定,结果准确可靠。

多次吡喹酮治疗血吸虫病的临床效果及安全性观察

目的 探讨多次吡喹酮治疗血吸虫病的效果。方法 回顾性分析都昌县第二人民医院2016年9月—2018年9月收治的80例血吸虫病患者临床资料,按治疗方式的不同分为2组。其中予以常规治疗的40例患者为对照组,在常规治疗基础上联合多次吡喹酮治疗的40例患者为观察组,2组均连续治疗3年。对比2组临床疗效、肝功能、肝纤维化指标、免疫功能、不良反应。结果 观察组治疗总有效率为92.50%,高于对照组的总有效率75.00%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前,2组总胆红素(total bilirubin,TBIL)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transferase,GGT)与透明质酸(hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen typeⅢ,PCⅢ)、Ⅳ胶原(collage typeⅣ,Ⅳ-C)水平以及CD3~+、CD4~+、CD8~+水平相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗3年后,观察组TBIL、AST、ALT、GGT、HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、CD8~+水平低于对照组,CD3~+、CD4~+水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组不良反应发生率相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 多次吡喹酮治疗血吸虫病效果确切,能够改善患者肝功能,逆转肝纤维化,并能够提高机体免疫功能,安全可行,值得临床推行。

左旋吡喹酮与右旋吡喹酮治疗对体内日本血吸虫皮层损害的扫描电镜观察(英文)

感染日本血吸虫３５ｄ的小鼠用左旋吡喹酮（Ｌ－Ｐｒａ）１５０ｍｇ·ｋｇ－１，或右旋吡喹酮（Ｄ－Ｐｒａ）１５０、６００ｍｇ·ｋｇ－１１次灌胃治疗，在给药后的１５ｍｉｎ，１、２、４、８、２４ｈ分别解剖取虫，以扫描电镜观察血吸虫的皮层变化。结果，发现，Ｌ－Ｐｒａ１５０ｍｇ·ｋｇ－１对血吸虫可引起明显和广泛的损害，包括皮层的严重肿胀、融合、糜烂和剥落，并伴有宿主白细胞的粘附；盘状感觉器官亦示有明显的肿胀、变形和破溃。用Ｄ－Ｐｒａ１５０ｍｇ·ｋｇ－１治疗的血吸虫皮层损害轻微。如剂量增至６００ｍｇ·ｋｇ－１，虫的皮层损害与Ｌ－Ｐｒａ１５０ｍｇ·ｋｇ－１引起的相似，但程度较轻。结果认为，吡喹酮的２种旋光对映体对血吸虫的药理作用虽极为相似，但右旋吡喹酮的作用较左旋吡喹酮的为差。

伊维菌素吡喹酮咀嚼片含量测定方法的建立

为了建立伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药含量的方法,采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈∶水的梯度洗脱系统作为流动相,伊维菌素检测波长为245 nm,吡喹酮检测波长为210 nm。在该色谱条件下,溶剂和辅料对伊维菌素和吡喹酮出峰均无干扰,伊维菌素和吡喹酮与相邻杂质峰分离良好。伊维菌素在2～400μg/m L的浓度范围线性关系良好;吡喹酮在1～100μg/m L的浓度范围内线性关系良好。伊维菌素回收率为102.5%,吡喹酮回收率为99.4%。该方法操作简便,准确度高,重复性好,可用于伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药的含量。

左旋吡喹酮,右旋吡喹酮和消旋吡喹酮的体外与？…

目的：测定消旋吡喹酮（Ｐｒａ）、左旋吡喹酮（Ｌ－Ｐｒａ）和右旋吡喹酮（Ｄ－Ｐｒａ）对不同发育期日本血吸虫的作用。

吡喹酮缓释剂防制牛血吸虫病试验

应用吡喹酮缓释剂肌注 (每 m L含吡喹酮 3 5 7mg)与吡喹酮粉剂口服分别对我省大邑、旌阳、芦山等县查出的 84头血吸虫病病牛进行了治疗和观察。吡喹酮缓释剂组 3 4头 ,共分为 4组 , ～ 组 ,分别肌注 1 5 m L/头 (共9头 ) ,2 0 m L/头 (共 8头 ) ,2 5 m L/头 (共 9头 )及 0 .0 5 m L/kg体重。粉剂口服组 1 5头 ,水牛按 2 5 mg/kg体重 ,黄牛按3 0 mg/kg体重 ;对照组 3 5头 ,不用药物治疗。试验结果表明 :缓释剂组可在

吡喹酮粉剂和片剂防治水牛血吸虫病效果比较研究

从1994年到1996年，在江西吴城血吸虫病高度流行区研究了3个自然条件相似的自然村共746头血吸虫病水牛，分析了先后用吡喹酮粉剂和片剂进行全面化疗防治水牛血吸虫病的效果。结果显示，吡喹酮粉剂和片剂对革个水平的治疗效果相同；粉剂因在使用时有诸多不便，不易为群众接受，用于化疗普治效果很差，片剂因克服了粉剂的缺．久，使用方便且无副作用，易为群众所接受，用于防治耕牛血吸虫病的化疗普治，效果显著，可促水牛血吸虫病感染率较原来平均下降43．92％，且原感染率越低，下降趋多。

吡喹酮与左旋吡喹酮治疗华支睾吸虫病的对比观察

1972年吡喹酮问世,很快成为治疗血吸虫病、华支睾吸虫病、肺吸虫病首选药。吡喹酮是左、右旋各半组成的外消旋化合物,重庆医科大学化学教研室拆分合成吡喹酮的中间体而获得左旋吡喹酮和右旋吡喹酮二种光学异构体。左旋吡喹酮治疗血吸虫病疗效优于吡喹酮,而右旋吡喹酮杀血吸虫作用甚微因此,我们用吡喹酮及两种光学异构体进行了大鼠实验治疗以及在现场采用左旋吡喹酮与毗喹酮治疗华支睾吸虫病进行对比观察其疗效,现将结果报告如下。

吡喹酮对日本血吸虫卵的作用机制

吡喹酮(EMBAY 8440,Biltricide)是有效而可取的抗三种人类血吸虫的药物,几位学者研究了它对成虫的作用方式,动物实验证明吡喹酮可使成虫肝移,而未成熟虫体仍停留在门静脉及其周围的血管内。

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅹ日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性的现场调查

目的现场评价日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮的敏感性。方法在云南、江苏、江西、湖南和湖北等5个省的血吸虫病流行区,选择11个村作为调查现场。在血吸虫病非传播季节,采用粪检法(Kato-Katz法和/或尼龙袋集卵孵化法)筛选出病人;以吡喹酮40mg/kg一次顿服对粪检阳性病人实施抗血吸虫治疗;治疗后6周采用相同方法复查粪便;阳性者仍按40mg/kg吡喹酮顿服进行第2次治疗;首次治疗后12周,对所有已治者(包括第2次治疗者)进行再次粪便复查。结果在11个流行村共粪检村民4760人,阳性者584人,其中505人经吡喹酮首次治疗后6周复查粪便,480人转阴,治愈率为95.1%;21例首次治疗后粪检仍然阳性者予以第2次治疗。在首次治疗后12周,对所有已治者(包括第2次治疗者)进行再次粪便复查,未发现粪检阳性者。结论尽管在我国血吸虫病主要流行区采用吡喹酮实施大规模化疗已达10余年,但现场至今尚未发现日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性下降的证据。

洞庭湖区采用吡喹酮化疗降低血吸虫病患病率和传播的效果研究

在洞庭湖区血吸虫病严重流行区,采用选择性群体化疗、选择性群体化疗加易感地带药物灭螺和单纯治疗粪检阳性对象3种对策,3年后居民患病率分别下降为62.9％、59.2％和14.1％。水上流动渔船民采用群体化疗,血吸虫病患病率仅下降41.5％。家畜群体化疗组,感染率下降77.6％,只治粪检阳性组化疗前后感染率无变化。3种对策实际污染指数下降分别为74.7％、84.6％和36.2％。前2种对策虽下降幅度比较大,但都未达到阻断传播的阈值,感染螺密度和哨鼠感染率均维持在较高水平。

(R)-吡喹酮的合成和结构鉴定

标题化合物是抗血吸虫一线药物吡喹酮的活性异构体,对其进行手性合成具有重要意义。优化了关键中间体吡喹酮胺的拆分条件,与(+)-二对甲苯酰-D-酒石酸成盐,经重结晶、游离两步,拆分得到对映体﹥99%的(R)-吡喹酮胺。(R)-吡喹酮胺与环己基甲酸缩合得到标题化合物,其绝对构型采用基于含时密度泛函的电子圆二色谱理论计算与实验结合的方法验证,使用手性色谱分析确定其光学纯度。该方法反应条件温和、操作简单、产品收率高、化学纯度和光学纯度高,具有工业应用前景。

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究Ⅱ 曼氏血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株虫卵和毛蚴对吡喹酮的反应性

目的 比较曼氏血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株虫卵和毛蚴对吡喹酮的反应性 ,旨在运用敏感株与抗性株反应性间的差异 ,建立简单快速吡喹酮敏感性检测方法。方法 将各株虫卵分别孵育于 5× 10 -6、10 -6、5× 10 -7mol/ L和 10 -7mol/ L吡喹酮溶液中 2 4h,后移至清水孵化 ,比较虫卵的孵化率。将各株毛蚴分别暴露于 10 -3 、10 -4 、10 -5、5× 10 -6、10 -6、5× 10 -7mol/ L和 10 -7mol/ L吡喹酮溶液中 ,0、1、5 min后观察比较毛蚴的运动及形态学变化。结果 经 10 -6mol/ L 和 5× 10 -7mol/L吡喹酮孵育 2 4h后 ,敏感株血吸虫虫卵的孵化率分别为 4.2 %和 3 0 .7% ,抗性株分别为 2 4.2 %和61.2 %。当毛蚴暴露于 5× 10 -6mol/ L吡喹酮中 ,敏感株 10 0 %毛蚴体中部立刻收缩变形 ,而抗性株仅见 13 .4%毛蚴变形 ;当暴露于 10 -6mol/ L 吡喹酮 0、1、5 min后 ,敏感株毛蚴的变形率分别为3 5 .5 %、63 .9%、91.2 % ;抗性株分别为 0、7.6%、14 .3 %。结论 曼氏血吸虫吡喹酮抗性株和敏感株虫卵与毛蚴阶段对吡喹酮的体外反应性的差异均非常显著。提示 ,将毛蚴移入 10 -6mol/ L吡喹酮溶液中 1min,镜下观察其变形率 ,作为曼氏血吸虫对吡喹酮敏感性的检测方法 。

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究Ⅳ曼氏血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株成虫对吡喹酮的体外反应性

目的 体外比较曼氏血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株成虫阶段对吡喹酮的反应性。方法 将各虫株成熟成虫分别培养于含吡喹酮分别为 3.2× 10 - 4、8× 10 - 4、1.6× 10 - 3m ol/ L的 MEM培养液中 ,37℃孵育 15、30、4 5、6 0、75 min后 ,分别在解剖镜下观察虫体的存活状况并计算存活率。结果 当孵育于含吡喹酮 3.2× 10 - 4m ol/ L的 MEM中 75 m in,敏感株与抗性株雌虫均能存活 ;但敏感株与抗性株雄虫的存活率仅为 11.5 % - 16 .0 %和 32 .7% - 36 .5 %。孵育于含吡喹酮 8× 10 - 4m ol/L 的 MEM中 15 min,抗性株雄虫与雌虫存活率为 4 8.3% - 5 0 .0 %和 5 7.9% - 6 3.6 % ;敏感株雄虫与雌虫的存活率为 2 2 .4 % - 2 5 .9%和 38.5 % - 4 8.3% ;75 min后 ,抗性株雄虫的存活率为 13.3%- 17.3% ,敏感株雄虫的存活率则为 0。孵育于含吡喹酮 1.6× 10 - 3m ol/ L 的 MEM中 15 min,抗性株雄虫与雌虫的存活率为 11.1% - 19.6 %和 2 7.5 % - 2 9.9% ;敏感株雄虫与雌虫的存活率均为 0。结论 将曼氏血吸虫吡喹酮抗性株和敏感株成虫孵育于含一定浓度吡喹酮的 MEM中不同时间后 ,抗性株的存活率高于敏感株 ;