益肾活血通窍法对老化模型大鼠听皮层PEDF和氧化应激的影响

目的 观察益肾活血通窍方对老化模型大鼠听皮层PEDF、GSH、MDA、ROS表达水平的影响。方法 将45只大鼠随机分成空白组、模型组、中药组各15只。空白组腹腔注射生理盐水,模型组、中药组腹腔注射D-半乳糖。空白组、模型组灌服生理盐水,中药组灌服益肾活血通窍方,连续8周。检测各组大鼠听皮层GSH、MDA、ROS、PEDF表达水平。结果 与空白组相比,模型组听皮层MDA、ROS表达程度增高,PEDF、GSH表达程度降低。与模型组相比,中药组听皮层MDA、ROS表达程度降低,PEDF表达程度增高。结论 益肾活血通窍方通过调控PEDF及氧化应激水平起到保护老化模型大鼠听皮层的作用。

藁本内酯通过抑制铁自噬延缓小鼠听皮层组织衰老

目的探究藁本内酯(ligustilide,LIG)延缓听皮层组织衰老,治疗中枢性老年性聋的机制。方法将40只13月龄C57BL/6J小鼠随机分为LIG低剂量组(L-LIG)、LIG中剂量组(M-LIG)、LIG高剂量组(H-LIG)和衰老组(Age),同品系2月龄小鼠10只作为对照组(Ctrl)。听性脑干反应测试检测给药前后小鼠听阈值;检测血清SOD活力和MOD含量了解氧化应激水平;HE染色观察听皮层病理变化;透射电子显微镜观察铁死亡情况;Western blot法检测听皮层组织NCOA4、GPX4和ACSL4蛋白的表达水平;免疫荧光法观察铁自噬情况;普鲁士蓝染色观察听皮层铁蓄积水平。结果衰老组小鼠听阈值明显升高,并表现出明显的衰老与铁死亡特征。中、高剂量LIG干预降低小鼠听阈值,改善听皮层组织病理损伤,保护神经元线粒体形态结构,减少铁聚集颗粒细胞数量,抑制铁自噬,降低NCOA4、ACSL4蛋白表达,升高GPX4的蛋白表达。结论LIG可以通过抑制铁自噬,减少衰老小鼠听皮层神经元铁死亡,延缓听皮层衰老,提示LIG具有治疗中枢性老年性聋的作用。

白藜芦醇减轻衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤

目的研究沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin1,SIRT1)激动剂白藜芦醇对D-半乳糖诱导的衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分成3组(8只/组):①对照组:小鼠每日皮下注射生理盐水1次,连续6周;②D-半乳糖组:小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,连续6周;③D-半乳糖+白藜芦醇组:小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,饲料中添加白藜芦醇400mg/kg,连续6周。造模结束后,我们利用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)检测各组小鼠听功能,利用免疫印迹检测各组小鼠听皮层SIRT1蛋白水平的表达,利用酶化学法检测H2O2水平和总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,T-SOD)活性,利用免疫组织化学检测DNA氧化损伤标记物8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)的水平,利用透射电镜观察各组小鼠听皮层线粒体超微结构。结果和对照组相比较,D-半乳糖诱导的衰老小鼠90 dB SPL声强下ABR-I波幅值显著降低(P=0.000<0.01),ABR-I波潜伏期显著延长(P=0.004<0.01),听皮层组织中SIRT1蛋白表达显著降低(P=0.000<0.01),H2O2生成显著增加(P=0.000<0.01),T-SOD活性显著降低(P=0.000<0.01),线粒体DNA氧化损伤标记物8-OHdG显著增加(P=0.000<0.01),部分线粒体超微结构呈现空泡化。和D-半乳糖组相比较,D-半乳糖+白藜芦醇组小鼠90 dB SPL声强下ABR-I波幅值显著升高(P=0.012<0.05),ABR-I波潜伏期显著缩短(P=0.002<0.01),听皮层组织中SIRT1蛋白表达显著增加(P=0.000<0.01),H2O2生成显著减少(P=0.000<0.01),T-SOD活性显著增加(P=0.013<0.05),8-OHdG显著降低(P=0.000<0.01),线粒体超微结构基本正常,仅表现为电子密度降低。结论SIRT1激动剂白藜芦醇可有效减轻衰老过程中听皮层线粒体氧化损伤。

红景天甙调控BDNF/TrkB通路对听觉剥夺模型大鼠听皮层可塑性的影响

目的 探讨红景天甙调控脑源性神经生长因子(BDNF)/受体酪氨酸激酶(Trk)B通路对听觉剥夺模型大鼠听皮层可塑性的影响。方法 肌内注射庆大霉素诱导建立听觉剥夺模型大鼠,随机分为模型组、K252a(BDNF/TrkB通路抑制剂,100μg/kg)组、红景天苷(50 mg/kg)组、红景天苷(50 mg/kg)+K252a(100μg/kg)组,每组12只,另取12只大鼠肌内注射等剂量生理盐水,设为对照组,以药物分组处理后,测定大鼠听性脑干反应(ABR)阈值,评测其听力情况;以扫描电镜观察各组大鼠耳蜗组织病理改变;以苏木素-伊红(HE)染色检测各组大鼠听皮层神经元病理改变;以试剂盒测定听皮层及耳蜗组织活性氧(ROS)水平;以酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清致炎因子白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ水平;以Western印迹法检测大鼠听皮层及耳蜗组织BDNF/TrkB通路蛋白(p-TrkB/TrkB、BDNF)表达。结果 与对照组相比,模型组毛细胞结构改变,大小不一,且排列紊乱,数目缺失,与螺旋神经节细胞周围突结合发生裂隙,同时听皮层神经元萎缩变小,胞质减少,细胞核出现固缩碎裂,且分布杂乱,数目明显减少,听皮层神经元与耳蜗组织均出现明显病理损伤,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平显著升高(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组、红景天苷+K252a组分别相比,红景天苷组听皮层神经元与耳蜗组织病理损伤均减轻,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平均降低(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平均升高(P<0.05);K252a组听皮层神经元与耳蜗组织病理损伤均加重,ABR阈值、ROS水平、血清IL-18、TNF-α及IFN-γ水平均升高(P<0.05),p-TrkB/TrkB、BDNF蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论 红景天苷可清除ROS,减少炎性因子合成释放,抑制炎症,减轻听觉剥夺模型大鼠听皮层神经元与耳蜗组织损伤,改善其听力降低症状,通过激活BDNF/TrkB通路实现。

电针对硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的影响

目的观察电针对硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢的影响并探讨相关机制。方法105只成年豚鼠随机分为对照组、模型组和电针组。对照组每日颈背部皮下注射生理盐水(500 mg·kg^(﹣1)),连续7 d;模型组和电针组注射硫酸卡那霉素(500 mg·kg^(﹣1)),连续7 d,电针组在每次注射结束30 min后予电针翳风及听宫穴;两组根据观察的时间不同,分为第1、第7、第14、第28、第56、第70和第140天7组。应用正电子发射断层显像(positron emission tomography,PET)/X线计算机体层成像(computer tomography,CT)技术观察豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的变化规律,酶化学法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活性。结果与对照组比较,模型组第140天组豚鼠听皮层与小脑标准摄入值(standard uptake value,SUV)最大值的比值的平均比值增大(P<0.05);与模型组相比较,电针组第28和第56天组豚鼠听皮层与小脑SUV最大值的比值的平均比值增大(P<0.05)。与对照组比较,模型组第1、第14和第28天组豚鼠听皮层LDH活性升高(P<0.05),第7、第56、第70、第140天组豚鼠听皮层LDH活性无明显变化(P>0.05);与模型组比较,电针组第1、第14和第28天组豚鼠听皮层LDH活性降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组豚鼠听皮层SDH活性变化差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,电针组第7、第14、第28、第56天组豚鼠听皮层SDH活性升高(P<0.05)。结论硫酸卡那霉素慢性损害后,豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能可发生重塑;电针可能通过减弱LDH活性及增强SDH活性,减少葡萄糖的无氧酵解,增加有氧代谢,提高葡萄糖代谢水平,促进硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层葡萄糖代谢功能的重塑进程。

听觉剥夺后Bcl-2、Bax、Fas在大鼠听皮层的形态学和基因表达变化

目的研究SD大鼠在听觉剥夺后Bcl-2、Bax、Fas在听皮层的表达。方法选择生后3周龄SD大鼠48只,按体重将其分为6组(8只/组):分别为7天、14天、28天手术组和其相对应的对照组。手术组大鼠双侧耳蜗行捣毁术,对照组耳后切口。采用免疫组织化学方法和 Western Blot技术分别检测大鼠听皮层部位Bcl-2、Bax、Fas的变化。结果免疫组化结果显示表达促凋亡基因Bax和Fas对应细胞有所增幅,而抑制凋亡的基因bcl-2却呈现出衰减趋势。Western Blot检测结果显示促凋亡基因蛋白Bax和Fas表达升高,抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论Bcl-2、Bax、Fas基因参与了幼年大鼠发育过程中听皮层神经元凋亡的过程。

电针对硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层抑制素和吞蛋白-A1表达的影响

目的探讨硫酸卡那霉素慢性损害后豚鼠听皮层蛋白质组的变化,以及电针对抑制素和吞蛋白-A1表达的影响。方法105只成年健康杂色豚鼠随机分为对照组(7只)、硫酸卡那霉素模型组(49只,模型组)、硫酸卡那霉素+电针组(49只,电针组)。模型组与电针组连续注射硫酸卡那霉素7天,电针组注射半小时后予以电针翳风穴和听宫穴15分钟,连续7天,对照组注射等量生理盐水;模型组与电针组根据药物注射后时间再分为注射后1、7、14、28、56、70、140天组(每组7只)。采用双向电泳技术、质谱鉴定分析筛选并切取21个表达差异明显的蛋白点进行鉴定,蛋白质印迹法检测抑制素与吞蛋白-A1的表达。结果①灰度差异2倍以上的差异表达蛋白质有抑制素、吞蛋白-A1等18种。②与对照组相比,模型组注射后第14、28、56天抑制素表达降低(P<0.05),第1、14天吞蛋白-A1表达增高(P<0.05);与模型组相比,电针组注射后第7、70天抑制素表达增高(P<0.05),第14、28、56天吞蛋白-A1表达降低(P<0.05)。结论抑制素等18种蛋白质可能参与了硫酸卡那霉素致豚鼠听皮层慢性损害的过程,电针听宫穴与翳风穴可能通过调节抑制素、吞蛋白-A1的表达促进听皮层的重塑进程。

水杨酸盐诱发大鼠听皮层中Egr-1基因表达的改变

目的通过观察慢性水杨酸盐诱导的大鼠耳鸣模型听皮层早期生长反应基因-1(early growth re-sponse gene-1,Egr-1)的表达,了解其是否出现皮层中枢可塑性的变化,探讨耳鸣产生的中枢机制。方法将84只8周龄SPF级健康雄性SD大鼠按水杨酸盐的给药时间随机分为7组,分别为:正常对照组、急性注射2小时组、慢性注射3天组、慢性注射7天组、慢性注射14天组、停药后恢复14天组、停药后恢复28天组。在完成急、慢性水杨酸肌肉注射成功建立大鼠耳鸣动物模型后,于上述各时间点将各组大鼠断头处死后迅速分离出听皮层,采用SYBR Green实时荧光定量PCR(real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction,real-time RT-PCR)及Western blot(蛋白质印迹)方法,检测各组大鼠听皮层Egr-1mRNA及其蛋白的表达,比较各组间的差异。结果慢性注射3天组、慢性注射7天组、慢性注射14天组大鼠听皮层的Egr-1mRNA及其蛋白表达水平较正常对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);急性注射2小时组、停药后恢复14天组、停药后恢复28天组大鼠听皮层Egr-1mRNA及其蛋白表达水平与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论长期注射水杨酸盐导致耳鸣的大鼠听皮层中与中枢可塑性密切相关的Egr-1基因表达可逆性下调,表明听皮层神经元发生了可塑性改变,推测听皮层神经元可塑性改变可能参与了耳鸣的形成和发展。

耳鸣模型大鼠听皮层生长相关蛋白-43和细胞骨架活性调节蛋白的表达

目的检测神经元功能可塑性基因生长相关蛋白-43(growth associated protein,GAP-43)和细胞骨架活性调节蛋白(activity regulated cytoskeleton associated protein,ARC)在水杨酸诱导耳鸣大鼠听皮层中的表达,探讨其在耳鸣产生中的作用。方法将24只白色Wistar大鼠随机分为3组:水杨酸钠组(8只)、生理盐水组(8只)和空白对照组(8只)。前两组从条件反射建立前开始于每次条件反射训练前2小时分别腹腔注射10%水杨酸钠溶液(350mg/kg)和同体积生理盐水,至实验结束,空白对照组不做任何处理。通过行为学方法证实水杨酸钠组动物感受到耳鸣后,利用荧光定量PCR检测动物听皮层中GAP-43和ARC的表达。结果水杨酸钠组大鼠听皮层中GAP-43和ARC蛋白阳性神经元的表达(分别为2.17±0.72、4.90±2.13)明显高于生理盐水组(分别为1.05±0.20、1.13±0.42)和空白对照组(分别为0.96±0.97、1.07±0.70)(P<0.01),而生理盐水组和空白对照比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论耳鸣大鼠听皮层中神经元功能可塑性基因GAP-43和ARC蛋白阳性神经元的表达增加,推测它们可能在耳鸣的发生发展中起重要作用。

正常成人听皮层磁共振动脉自旋标记灌注成像的可重复性研究

目的研究正常成人听皮层磁共振三维动脉自旋标记灌注成像（three dimensional arterial spin labeling,3D ASL）技术的可重复性.方法8例健康成年人在2台同一机型的3.0T磁共振扫描仪上进行了3次全脑3D ASL序列扫描,在1号扫描仪上进行第1次和第3次扫描,在2号扫描仪上进行第2次扫描,三次扫描间隔时间均为10~15天.每次扫描两次3D ASL序列,标记延迟时间（post labeling delay time, PLD）分别选择1.5s和2.5s.对3D结构像进行听皮层结构分割,计算脑血流（cerebral blood flow, CBF）图,并提取听皮层CBF值.对于3次测量结果采用组内相关系数（intraclass correlation coefficient, ICC）及Bland-Altman法进行统计分析.结果听皮层CBF值在51~61 ml/min/100g（PLD=1.5s）和43~54 ml/min/100g之间（PLD=2.5s）.第1次与第2次扫描结果比较,PLD为1.5s时ICC值为0.50,PLD为2.5s时为0.76;第2次与第3次扫描结果比较,PLD为1.5s时ICC值为0.83,PLD为2.5s时为0.89;第1次与第3次扫描结果比较,PLD为1.5s时ICC值为0.85,PLD为2.5s时为0.88.Bland-Altman图显示PLD为2.5s数据的分布范围比PLD为1.5s有明显的缩小.结论3D-ASL序列可以进行听皮层CBF值测量,PLD较长时测量的可重复性较好,可用于听皮层血流灌注的多中心研究.

水杨酸钠引起耳鸣大鼠听皮层突触形态改变的透射电镜观察

目的用透射电镜观察水杨酸钠引起耳鸣大鼠听皮层突触形态的变化。方法成年健康雄性白色Wistar大鼠32只,随机平分为2组。第一组腹腔注射水杨酸钠350mg/kg,第二组腹腔注射等量生理盐水,均在每天上午9点注射,持续30天。两组所处饲养环境(包括环境噪声、12小时昼夜节律、饮食等)完全相同。1月后快速处死,取双侧听皮层组织进行透射电镜观察。结果与对照组相比,水杨酸组突触数量明显增加,许多突触形态由平型变成凹型或U型,突触界面曲率增加,突触面积增大,活性区增加,每一活性区的长度增加,突触间隙明显增宽,突触后膜致密物质厚度增加。U型突触直径平均为(1.7±0.23)μm,平直型突触直径平均为(0.53±0.14)μm,二者比较有显著性差异(P<0.05)。结论水杨酸钠能够引起听皮层突触形态的改变,这种改变与长时程增强现象(Long-term potentiation,LTP)非常相似,有可能是耳鸣与突触可塑性以及与学习记忆相关的有力证据,值得深入研究。

电刺激大马蹄蝠听皮层对下丘神经元听觉敏感性的影响

实验在１２只大马蹄蝠（Ｈｉｐｐｏｓｉｄｅｒｏｕｓ）上进行。用常规电生理学方法研究了电刺激听皮层对下丘２１２个神经元的听反应的影响，结果表明，有３２个（占１５．１０％）神经元的听反应被抑制，１９个（占８．９６％）神经元的听反应被易化。抑制或易化性影响改变了部分下丘听神经元对声刺激强度的编码类型。抑制性影响使下丘听神经元的频率调谐曲线变窄，听空间反应区域缩小，易化性影响与之相反。在神经元的反应中心，抑制或易化的百分比最低，远离反应中心。

猫初级听皮层γ-氨基丁酸能神经元和星形胶质细胞年龄相关变化

目的探讨青年猫和老年猫初级听皮层(AI)的年龄相关变化及可能产生的生理作用。方法Nissl染色示两组猫初级听皮层的分层结构并进行细胞计数;免疫组织化学染色示两组猫γ-氨基丁酸(GABA)能神经元和星形胶质细胞的形态、密度及分布。结果与青年猫相比,老年猫的初级听皮层细胞平均密度无显著的年龄相关变化,GABA_IR细胞的密度显著下降(尤其是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ层),阳性胞体较小,阳性反应明显减弱;老年猫的GFAP_IR细胞密度显著增大,阳性胞体膨大,突起稠密粗大,阳性反应明显增强,其中的Ⅰ层和白质尤为明显。结论GABA能神经元显著的年龄相关性改变可能为老年性听觉功能衰退的神经机制在皮层水平提供了直接的形态学证据;而星形胶质细胞活动增强可能是导致GABA能神经元及GABA递质含量减少的重要原因之一。

老年性聋大鼠听皮层病理变化

目的探讨老年性聋大鼠听皮层病理变化。方法通过甲苯胺蓝染色和免疫组化技术检测并比较正常成年大鼠(对照组,20只)、正常听力老年大鼠(18月龄)(老年组,20只)及以D-半乳糖建造的老年性聋大鼠(实验组,20只)听皮层神经元的形态、数量和兴奋性神经递质乙酰胆碱(Ach)、谷氨酸(Glu)及抑制神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的阳性表达数量。结果实验组大鼠较老年组和对照组大鼠听皮层神经元数量减少(P<0.05),而老年组大鼠与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。实验组大鼠较老年组和对照组的ACh、GABA表达下调(P<0.01),Glu的表达上调(P<0.01)。结论听皮层神经元的减少、神经递质Ach、GABA表达下调和Glu表达上调为老年性聋听皮层病理表现,可能与老年性聋的发病有关。

突发性聋患者急性期听皮层代谢~1H-MRS研究

目的利用氢质子磁共振波谱(hydrogen proton magnetic resonance spectroscopy,1 H-MRS)技术观察突发性聋患者急性期听皮层代谢变化。方法选取单侧突发性聋患者20例(右侧12例,左侧8例)和10例正常志愿者行1 H-MRS检测,测定双侧颞横回N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌酸(Cr)、胆碱(Cho)、谷氨酰胺和谷氨复合物(Glx)的峰下面积并计算NAA/Cr、Cho/Cr、Glx/Cr比值,分析突聋组和对照组之间听皮层代谢的差异。结果突聋组与对照组比较,两侧听皮层NAA/Cr、Cho/Cr比值差异均无统计学意义(P>0.05));突聋组耳聋侧听皮层Glx/Cr比值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但聋耳对侧听皮层Glx/Cr比值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1 H-MRS可以在活体状态下检测听觉中枢组织代谢变化,突聋患者聋耳对侧听皮层存在谷氨酸代谢异常。

脉冲噪声暴露后大鼠听皮层神经颗粒素的表达研究

目的揭示脉冲噪声暴露后不同时期大鼠听皮层神经颗粒素(neurogranin,Ng)表达的变化。方法将50只成年SD大鼠随机分为5组:正常对照组及脉冲噪声暴露后3、7、14、28天组,每组10只。脉冲噪声暴露条件为:平均压力峰值156dB SPL,脉宽为0.25ms,暴露50次,每次间隔6s。于噪声暴露前及噪声暴露后即刻、3、7、14、28天检测各组大鼠ABR反应阈,同时,应用Western blot方法检测各组大鼠听皮层中的Ng的含量。结果与对照组相比,各组大鼠噪声暴露后即刻、3、7、14、28天各频率ABR反应阈均明显提高(P<0.05),噪声暴露后第7天,各频率ABR阈值有所恢复,第14天时趋于稳定;与对照组(0.68±0.08)比较,噪声暴露后第3、7、14天组大鼠听皮层中Ng的含量分别为0.96±0.05、1.11±0.05、0.78±0.04,显著高于对照组,第28天组为0.36±0.03,显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论噪声暴露后,大鼠ABR反应阈明显升高,听皮层Ng的表达呈现一个先上升后降低的过程,提示脉冲噪声刺激对大鼠听觉系统产生了一定持续性的影响,听皮层出现突触可塑性变化。

大鼠初级听皮层神经元对声刺激反应的膜电位特征

目的探讨大鼠初级听皮层单个神经元对声刺激反应的膜电位特征。方法运用在体细胞内微电极记录技术观察麻醉大鼠初级听皮层单个神经元对声音刺激的细胞内反应,分析声音引发的各种兴奋性和抑制性反应的成分及其膜电位特征。结果在大鼠初级听皮层共记录到64个神经元,声音刺激引起其中33个神经元产生兴奋性听觉反应,24个产生抑制性反应,2个产生"on-off"双相听觉反应,其余5个神经元对声音刺激反应不明显。根据声音诱发的兴奋性突触后电位(EPSP)/抑制性突触后电位(IPSP)以及动作电位(AP)的特点,兴奋性听觉反应可分为4型:长时程EPSP型、短时程EPSP型、规律放电型、阈下EPSP型;抑制性听觉反应也可分为4型:AP-IPSP型、EPSP-IPSP型、IPSP型、AP-超极化型。声音诱发的IPSP的潜伏期(46.3±20.5)m s和上升相时程(10.1±4.4)m s显著长于EPSP[分别为(15.1±4.7)、(6.1±3.5)m s,P<0.05,P<0.01]。且"on-off"双相听觉反应的放电间隔与声音时长高度一致。结论大鼠初级听皮层神经元对相同自然声刺激可以产生多种类型的反应,且各型反应的成分和膜电位特征各异,这可能是初级听皮层神经元功能多样性的基础。

噪声暴露对大鼠ABR反应阈及听皮层谷氨酸脱羧酶67表达的影响

目的研究噪声暴露对大鼠听性脑干反应（auditory brainstem response，ABR）及听皮层谷氨酸脱羧酶67（glutamic acid decarboxylase-67，GAD67）表达的影响。方法将21只健康雌性SD大鼠随机分为噪声暴露后0、7、14天组，每组7只，每组再随机分为对照组（3只）和暴露组（4只）；将暴露组大鼠暴露于频率4kHz以上、100dBSPL白噪声2小时建立噪声性听觉损伤的动物模型，对照组大鼠不作任何处理；分别于噪声暴露前及暴露后0天（O．5～2小时）、第7天、第14天时检测各组大鼠的ABR反应阈；取噪声暴露后0天（2～4小时）、第7天、第14天各组大鼠的听皮层切片，用免疫组织化学的方法标记各组听皮层中GAD67阳性神经元数量。结果①在噪声暴露后0．5～2小时暴露组大鼠的ABR反应阈明显高于对照组（P〈0．05），14天时基本恢复正常；②在噪声暴露后2～4小时暴露组大鼠听皮层GAD67阳性神经元数量（78．76±16．11个／mm^2）明显多于对照组（38．43±9．27个／mm^2）（P〈0．05），第7天和第14天时暴露组GAIN7阳性神经元数量（32．22±8．61个／mm^2和29．55±11．61个／mm^2）明显低于对照组（43．58±12．87个／mm^2和43．14±12．44个／mm^2）（均P〈0．05）。结论噪声暴露使大鼠ABR反应阈发生了暂时性阈移，听皮层GAD67阳性神经元数量在噪声暴露后先增多后减少，可能与噪声性聋发病机制有关。

GABA能回路在听皮层神经元频率调谐中的作用

为了解神经抑制在听中枢神经元频率调谐过程中的作用,本研究采用多管玻璃微电极胞外记录单单位反应的方法观察了去r-氨基丁酸能抑制后大棕蝠(Eptesicusfuscus)听皮层神经元频率调谐特性的变化,结果显示:(1)97.9%的神经元频率调谐曲线扩宽,Qn值下降(p<0.0001);(2)绝大部分神经元的最小阈值下降(p<0.0001);(3)兴奋性调谐曲线面积增加(p<0.0001).该结果提供了GABA能回路参与蝙蝠听皮层神经元频率调谐的直接证据.

听觉剥夺大鼠听皮层BDNF和TrkB的表达变化

目的通过建立听觉剥夺(auditory deprivation,AD)的动物模型,探讨脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和其功能性受体酪氨酸激酶B(tropomyosin receptor kinase B,TrkB)与听皮层可塑性的关系。方法 48只SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组24只,采用耳后切口暴露听泡并打开,实验组行双侧耳蜗损毁术建立大鼠AD模型,对照组不损毁耳蜗。于术后2w分别检测两组动物ABR反应阈,并应用实时荧光定量PCR技术和免疫组织化学方法,于术后2、4、6、8w测定两组大鼠听皮层BDNF和TrkB基因mRNA和蛋白表达水平。结果术后2w,实验组动物双耳ABR反应阈明显高于对照组(P<0.05);听觉剥夺后,听皮层BDNF与TrkB有相同的表达变化趋势,除术后6w外,实验组第2、8wBDNF与TrkB基因mRNA和蛋白表达量低于对照组(P<0.05),而第4w二者的表达量高于对照组(P<0.05)。结论 BDNF通过与功能性受体TrkB结合,参与听皮层神经元可塑性的调节,可能对神经元的损害具有代偿性修复作用。