谈哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的过去，现在与将来

谈哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存的过去，现在与将来朱士恩（中国农业大学动物科技学院，北京１０００９４）１９７２年Ｗｈｉｔｉｎｇｈａｍ等人利用鼠的胚胎，首次报道了慢速冷冻法。由于其操作过程复杂，１９７７年Ｗｉｌａｄｓｅｎ对其进行了改良，发明了快速冷冻法，但...

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存概况及其常用方法

哺乳动物卵母细胞和胚胎的超低温冷冻保存技术，是胚胎移植、体外受精、转基因和克隆等生物技术不可缺少的部分。Rall和Fahy于1985年首次报道了用玻璃化方法来冷冻保存小鼠胚胎，这种方法不仅大大简化了冷冻过程，而且减少了由于细胞冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤，提高了冷冻效率。

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻技术进展

1972年Whittingham等首先发明了胚胎的慢速冷冻保存法,这项技术一直被广泛应用。直到1985年Rall & Fahy又发明了胚胎的玻璃化冷冻保存技术,该技术的开发,简化了操作程序,大大缩短了操作时间,逐步代替了传统的慢速冷冻法。1986年Scheffen等使用丙三醇和丙二醇各为25％,配制成的GP25玻璃化溶液,虽然化学毒性有所降低,但冷冻后胚胎,特别是囊胚的发育率仍不稳定。为此,Kasai等(1990)利用化学毒性较低的乙二醇为主体抗冻保护剂。

我国率先实现哺乳动物胚胎在太空发育

据2016年4月18日《光明日报》报道，2016年4月6日发射的我国实践十号返回式科学实验卫星把6000余枚小鼠早期胚胎带上了太空。经过数天的太空旅行，实践十号上传来好消息：这些小鼠早期胚胎在太空中顺利完成从2细胞到囊胚的全程发育。

中科院揭示哺乳动物胚胎染色体3D结构重编程规律

据科学网2017年7月15日报道,中科院北京基因组所刘江研究组和上海科技大学黄行许研究组合作,揭示了哺乳动物成熟精子和卵子的染色体3D结构以及在早期胚胎发育过程中染色体结构的重编程过。相关成果发表在国际期刊《细胞》上。哺乳动物配子和早期胚胎的数量非常有限。因此,

哺乳动物胚胎首次成功在太空发育

随着人类探索太空的深入，未来人类能否在太空正常生活、繁衍后代？空间微重力和辐射等特殊环境会不会对生殖造成不良影响？迄今为止，没有人能够明确回答这些问题。

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存

哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存王永胜摘译１前言１９７２年Ｗｈｉｔｉｎｇｈａｍ等首次报道采用慢速冷冻方法（即植冰后持续数小时）冻结小鼠胚胎成功。此方法效果较好，曾被广泛采用。近来对其的改进集中在缩短冻结过程。１９８５年Ｒａｌ和Ｆａｈｙ报道的玻璃化冻结法将冻...

腔振荡驱动哺乳动物早期胚胎模式形成

目的哺乳动物的早期胚胎发育通过多个层次的细胞命运决定从而建立形态发生和器官形成的整体发育蓝图。在哺乳动物胚胎的第二次细胞命运决定过程中,起初外胚层细胞(epiblast,EPI)和原始内胚层细胞(primitive endoderm,Pr E)前体细胞呈现混乱随机分布;最终发育到囊胚晚期,EPI细胞与Pr E细胞在空间位置上完全分离,最终形成了Pr E细胞位于内细胞团(inner cell mass,ICM)表面并将EPI细胞包围在ICM内部的胚胎模式。然而,驱动EPI和Pr E前体细胞定向迁移到其目标位置的具体机制一直是一个悬而未决的问题。方法(1)以小鼠胚胎为研究对象。(2)利用转基因活体胚胎荧光成像技术、显微注射、原子力显微镜等力学生物学检测技术,并且结合力学分析和模拟计算。结果在EPI/Pr E前体细胞的分离过程中,囊胚腔自发产生周期性的收缩-膨胀的震荡,而这种腔震荡导致了ICM组织由类固体转变为类流体的性质,并且产生具有方向性的组织流。由于EPI与Pr E前体细胞的表面机械性能不同,进而导致运动能力较强的Pr E细胞随着腔震荡更快迁移到ICM表面,而EPI细胞则倾向于聚合成较大的细胞团而滞留在ICM的内部区域。结论这种由腔震荡驱动的细胞空间分离过程可以高效又精确地指导生命初期不同谱系细胞的空间分布,从而保证生命体最初发育的鲁棒性。

中国实现哺乳动物胚胎在太空发育

中国科学家利用实践十号卫星进行哺乳动物早期胚胎发育研究，观察太空环境中哺乳动物早期胚胎的发育过程，并探索太空环境对胚胎发育的作用机制。实践十号卫星把6000余枚小鼠早期胚胎带上了太空。若干天后，通过特殊显微镜，成功观测到小鼠胚胎从二细胞在太空中成功发育成囊胚的全过程。

中科院揭示哺乳动物胚胎染色体3D结构重编程规律

中科院北京基因组所刘江团队和上海科技大学黄行许团队合作，揭示了哺乳动物成熟精子和卵子染色体3D结构以及在早期胚胎发育过程中染色体结构的重编程变化,相关成果已于日前发表在《细胞》杂志上。

推荐我国首册《脊椎动物比较胚胎学》

推荐我国首册《脊椎动物比较胚胎学》秦鹏春教授（东北农业大学生物工程系）胚胎学是研究动物的个体发生和发展规律的科学，是生命科学中生物医学方面的重要领域。几十年来，我国老一辈胚胎学家，在不同动物胚胎研究中，做出了突出贡献，发展和创建了某些胚胎学方面的重要...

干细胞模拟发育:细胞元件、胚胎模型与工程方法

近百年来,胚胎发育的理论基础主要源于对模式动物的研究,珍稀哺乳动物的发育研究一直受到种间差异、伦理及技术手段等条件的制约。随着干细胞技术的迅猛发展,研究者们利用干细胞构建体外胚胎模型突破传统发育研究的局限性。目前,胚胎模型是否能够完全模拟真实胚胎的发育过程尚待验证,但这无疑为发育生物学研究带来新的可能性。本文以小鼠和人为主要讨论模型,总结用于构建胚胎模型的干细胞种类,阐释不同干细胞在模拟发育过程中的作用和重要性。文章系统呈现了胚胎在不同发育阶段的关键事件和时空动态过程,全面阐述胚胎模型取得的显著成果,详细探讨如何评估胚胎模型的仿生度,以及生物工程学方法在胚胎模型开发中的关键作用,为胚胎模型的进一步优化和发展提供参考。通过对胚胎模型领域的深入研究,有助于更全面细致地了解胚胎发育过程,并为早期发育研究、疾病研究、药物筛选、生殖医学及毒性评估等领域提供更为精确的理论依据和应用工具,进而为未来生命科学的发展开辟新的途径。

国家重点学科点——东北农业大学动物解剖学、组织学与胚胎学学科

东北农业大学动物解剖学、组织学与胚胎学学科已有47年历史,是我国高等农业院校该学科最有影响的学科点之一。1980年国家批准为博士点。学科带头人为中国畜牧兽医生物技术分会副主任、全国动物解剖学、组织学与胚胎学会名誉理事长、全国发育生物学分会理事、国务院学科评议组兽医组副组长秦鹏春教授和年轻的博士生导师谭景和教授。 主要研究方向:(1)哺乳动物早期胚胎发育;(2)哺乳动物胚胎工程(或称胚胎生物工程);(3)幼畜结构特征;(4)鱼类生物工程。 学科点由动物组织胚胎教研室和动物解剖教研室组成。实验设备先进,拥有740m^2的实验室和价值140余万元的仪器设备。现有教授4名,副教授3名,讲师4名。与国外同行有广泛学术交流。5名教师出国作访问学者回国,目前在国外尚有3名。该学科点还与校内畜牧、兽医学科的其他7个博士点和十几个硕士点有广泛协作,并与国内科研机构中国科学院动物研究所、发育生物学研究所、哈兽研兽医生物技术国家开放实验室等有密切学术联系和合作培养博土生的良好关系。

提高绵羊早期体外胚胎发育效率的研究

哺乳动物胚胎体外发育培养技术是胚胎发育生物学、转基因、动物克隆等研究的重要技术平台。冈此，建立稳定的体外胚胎培养体系和提高胚胎发育效果显得尤为重要。早期胚胎发育阻滞是哺乳动物胚胎体外培养过程中普遍存在的问题，而绵羊胚胎发育阻滞多发生于8～16细胞期。胚胎发育阻滞是由于培养系统的不完善引起的，因此改善培养系统可以提高发育效果。为此，试验开展了发育液更换方法（不换液、半量换液和全换液）、胚胎发育液中是否添加葡萄糖或EDTA对早期胚胎发育效果影响的研究，目的是探索提高绵羊早期胚胎体外发育效率的方法。

增殖性细胞核抗原、C-fos和Bax蛋白在人胚胎舌组织中的表达

目的：探讨增殖性细胞核抗原（PCNA）、C-fos和Bax蛋白在人胚胎舌组织不同发育阶段的分布特征.方法：应用免疫组织化学法检测第2～4个月胎龄段共16份人胚胎舌组织内PCNA、C-fos和Bax蛋白的表达,分析其变化规律.结果：第2个月胚龄时,C-fos蛋白在人胚舌组织内未见明显阳性细胞表达分布,PCNA蛋白在人胚舌上皮组织层部分细胞和舌肌组织和纤维组织内少数细胞呈阳性表达.第3个月胎龄时,PCNA和C-fos蛋白在舌上皮组织细胞阳性表达数量最多,舌肌组织和纤维组织内有部分细胞呈阳性表达.第4个月胎龄舌肌组织和纤维组织内PCNA蛋白阳性表达数量增高,C-fos蛋白阳性表达未见明显变化.Bax蛋白仅在第3个月胎龄时呈弱阳性表达.结论：PCNA、C-fos参与调控人胚胎舌组织细胞的分化发育.

HPLC-FLD方法检测早孕期大鼠胚胎的苯并芘水平

目的:建立一种高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD),检测给药大鼠早孕胚胎组织中苯并芘(BaP)水平,为其临床应用提供实验依据。方法:采用日本岛津高效液相色谱仪和岛津RF-535荧光检测器,检测给药大鼠早孕胚胎组织中BaP的浓度。样品用乙腈提取处理,无需净化。使用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μL),流动相为甲醇/水(95∶5,V/V);流速为1.0 mL/min;荧光检测器的参数设定:激发波长(Ex)为364 nm,发射波长(Em)为427 nm;柱温为室温;进样量为20μL。结果:BaP在0.002~0.5μg/mL范围内呈良好的线性范围,提取标准曲线的回归方程Y=426 174x-316.95,相关系数0.999 9,本方法的样品提取回收率大于95%,日内差实验的精密度相对标准偏差(RSD)为3.38%,日间差实验的精密度RSD为2.80%,稳定性(n=6)RSD为2.58%,实验检测出样品中BaP的浓度范围在0~0.583 7μg/g。结论:本方法操作简便、实验成本低,准确度、敏感度符合要求,样品前处理过程简单、用时少,可用于给药大鼠早孕胚胎组织中BaP的检测和研究。