唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨免疫检查点唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(Siglec-15)在食管鳞癌中的表达及意义。方法免疫组化检测食管鳞癌组织、癌旁正常食管组织中Siglec-15表达情况,并比较分析其与食管鳞癌患者临床病理特征的关系。结果Siglec-15在食管鳞癌组织中表达阳性率为60.0%(48/80),高于癌旁正常食管组织中的23.75%(19/80)(χ^(2)=21.595,P<0.001)。食管鳞癌组织中Siglec-15蛋白表达与患者肿瘤直径、T分期、TNM分期、N分期及分化程度有关(χ^(2)=7.500,P=0.006;χ^(2)=10.342,P=0.001;χ^(2)=22.547,P=0.016;χ^(2)=20.508,P<0.001;χ^(2)=12.586,P=0.002)。结论Siglec-15在食管鳞癌组织中高表达,与患者的疾病进展显著相关。

新型肿瘤免疫抑制靶点唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15的生物信息学预测

目的预测唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(sialic acid binding Ig like lectin-15,SIGLEC-15)的生物学信息。方法应用多种生物信息学工具对SIGLEC-15的理化性质、组织表达特异性、亚细胞定位、空间结构、翻译后修饰位点、蛋白相互作用等进行预测,同时建立SIGLEC-15的系统进化树,并进行分析。结果 SGLEC-15是一种碱性不稳定蛋白,具有亲水性,含有信号肽结构。SGLEC-15具有1个跨膜结构域,主要定位于细胞外(34.80%)、细胞膜(30.40%)、内质网(21.70%)和高尔基体(13.00%),在正常细胞及癌细胞中均有表达。SGLEC-15的高级结构弹性较大,拥有2个N-糖基化位点,1个O-糖基化位点及8个可能的蛋白磷酸化位点。SGLEC-15与TYROBP等4个蛋白具有高置信度的相互作用关系。人类SIGLEC-15与猩猩、白狨猴等灵长类动物SIGLEC-15的同源性最高,在脊椎动物进化过程中相对保守。结论 SIGLEC-15可作为肿瘤免疫抑制的靶点,为进一步肿瘤免疫疗法的研究奠定了基础。

唾液酸-唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素轴在肿瘤发生机制与治疗中的研究进展

唾液酸(sialic acid, Sia)广泛修饰于聚糖、糖蛋白和糖脂等分子末端,保护被修饰细胞免受免疫系统的识别和杀伤。唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin, Siglec)作为Sia的受体多见于免疫细胞表面,肿瘤细胞能够通过异常的糖基化模式经Sia-Siglec轴调控免疫细胞功能,从而维持抑制性肿瘤免疫微环境(tumor immune microenvironment, TIME)。因此,Sia和Siglec可能是潜在的“免疫检查点”,阻断Sia-Siglec轴是肿瘤免疫治疗的潜在方法。本文综述了Sia-Siglec轴的概况、在肿瘤发生中的作用机制及基于阻断Sia-Siglec轴的治疗方法,以期为更深入的Sia-Siglec轴研究提供参考。

血清唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7、半乳凝集素-3联合MELD评分在失代偿期肝硬化患者预后评估中的临床预测价值

目的探讨血清唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(Siglec-7)、半乳凝集素-3(Gal-3)联合终末期肝病模型(MELD)评分对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值。方法选择2017年1月至2020年12月中南大学湘雅医学院附属海口医院消化内科收治的248例失代偿期肝硬化患者为研究对象,对所有患者出院后进行1年时间的随访,并根据患者预后状况分为存活组169例和死亡组79例。采用多因素Logistic回归分析失代偿期肝硬化患者死亡的独立危险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析各指标联合应用对失代偿期肝硬化患者死亡评估的预测价值。结果死亡组红细胞分布宽度(RDW)、中性粒细胞、降钙素原(PCT)、总胆红素(TBiL)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、Siglec-7、Gal-3水平以及MELD评分显著高于存活组(P均<0.05),而血小板、淋巴细胞、前白蛋白(PA)、白蛋白(ALb)水平显著低于存活组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,上消化道出血、肝肾综合征、RDW、TBiL、Siglec-7、Gal-3、MELD评分是失代偿期肝硬化患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。Siglec-7、Gal-3联合MELD评分对失代偿期肝硬化患者死亡预测的ROC曲线下面积(AUC)为0.912,敏感度为0.899、特异度为0.870,高于各指标单独检测。结论上消化道出血、肝肾综合征、RDW、TBiL、Siglec-7、Gal-3、MELD评分是失代偿期肝硬化患者死亡的危险因素,Siglec-7、Gal-3联合MELD评分对失代偿期肝硬化患者死亡的预测价值较高。

唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15促进结直肠癌细胞增殖和迁移并抑制肿瘤组织中CD4+与CD8+T细胞浸润

唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15(sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin-15,Siglec-15)属于Siglecs家族的一员,是一种新型免疫抑制分子。Siglec-15在多种人类肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞中高表达,但Siglec-15在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的生物学功能及其对免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析Siglec-15异常表达对CRC细胞功能及CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润的影响。首先,分析TCGA数据库中结直肠癌与正常组织中Siglec-15 mRNA表达水平,并对52例人CRC与配对癌旁组织进行免疫组织化学染色(IHC),发现Siglec-15在CRC中的表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。CCK8和划痕愈合结果显示,敲低Siglec-15能抑制人CRC细胞SW480增殖(P<0.01)和迁移(P<0.05)。磁珠分选小鼠脾的CD8^(+)T细胞并与小鼠CRC细胞MC38共培养,发现MC38细胞过表达Siglec-15能抑制CD8^(+)T细胞对其的杀伤以及IFN-γ和TNF-α的分泌(P<0.01)。小鼠荷瘤结果表明,过表达Siglec-15可以促进小鼠肿瘤生长(P<0.05)。单样本基因集富集分析、荷瘤小鼠肿瘤组织及人结直肠癌组织IHC分析均表明,Siglec-15高表达时,肿瘤微环境中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润减少(P<0.05)。综上所述,Siglec-15可能通过促进CRC细胞增殖迁移以及抑制CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润促进结直肠癌进展。本文为探究Siglec-15在CRC中的免疫抑制作用提供了一些新的实验依据。

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素的生物学功能及其在抗肿瘤中的作用

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin,Siglec)是一类能够识别唾液酸化聚糖结构的膜蛋白,近年来,随着对Siglec调节肿瘤微环境研究的深入,其已成为抗肿瘤药物研发的重要方向之一。本文系统介绍Siglec家族成员中的Siglec-1、-2、-3、-7、-9、-10、-15通过与其各自配体相互作用而调节固有免疫或适应性免疫的机制及其在抗肿瘤治疗中的应用进展,为肿瘤免疫治疗提供新的思路。

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)在肿瘤免疫中的作用及临床应用研究进展

凝集素是机体负责识别糖分子信号的蛋白,唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)可通过识别含有唾液酸的糖链结构,通过免疫受体酪氨酸抑制基序介导下游信号,调控肿瘤微环境中的固有免疫和适应性免疫应答。据此,近年来通过构建唾液酸糖蛋白介导药物靶向递送,通过抗体抑制Siglecs识别肿瘤表面配体等产生多种靶向唾液酸-Siglecs轴的肿瘤治疗方案。未来可以通过与糖蛋白纳米疗法、抗体疗法和基因疗法结合,利用Siglecs准确定位肿瘤靶点,能够释放机体的抗肿瘤免疫,从而达到有效杀伤肿瘤的目的。

髓系免疫细胞表面唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素介导肿瘤免疫逃逸

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectins, Siglec)是一类经典的免疫球蛋白样凝集素,特异性表达于免疫细胞表面,通过识别含有唾液酸的糖链结构触发免疫耐受性信号通路活化。肿瘤细胞表面发现异常高表达的唾液酸聚糖,其通过与免疫细胞表面的Siglec相结合,影响肿瘤发生和发展。本文围绕髓系免疫细胞表达的唾液酸受体的功能进行阐述,并描述肿瘤细胞如何利用唾液酸-Siglec轴介导肿瘤免疫逃逸的机制,及在临床上靶向该信号轴诱导或抑制免疫耐受的治疗现状。

Siglec-15与CD4^(+)、CD8^(+)在肝细胞癌中的表达关系及其临床意义

目的研究在肝细胞癌(hepatocellutar carcinoma,HCC)中唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15(Sialic acid immunoglobulin type lectin 15,Siglec-15)与CD4^(+)、CD8^(+)的表达及相关性,并分析其与临床病理特征及预后的影响。方法通过TCGA数据库分析HCC与正常组织中Siglec-15、CD4^(+)T、CD8^(+)T mRNA的表达水平。收集我院2019年1月至2022年1月行肝癌根治切除术的27例新鲜HCC组织及正常组织标本和56例HCC组织及正常组织石蜡切片标本,qRT-PCR检测Siglec-15和CD4^(+)T、CD8^(+)T mRNA表达水平,IHC检测Siglec-15和CD4^(+)、CD8^(+)蛋白表达水平,并对Siglec-15与CD4^(+)、CD8^(+)蛋白之间的关系及临床病理因素和预后进行分析。结果HCC患者中Siglec-15在HCC组织表达高于正常组织(P<0.05),CD4^(+)、CD8^(+)在HCC组织表达低于正常组织(P<0.05);在HCC组织中,Siglec-15表达与CD4^(+)、CD8^(+)蛋白表达呈负相关(P<0.05)。在HCC组织中,Siglec-15蛋白的表达与患者的TNM分期、肿瘤大小相关(P<0.05),CD4^(+)蛋白的表达与患者的肿瘤大小相关(P<0.05),CD8^(+)蛋白的表达与患者的TNM分期、远处转移相关(P<0.05)。Siglec-15及CD4^(+)的表达与患者的无进展生存期具有相关性(P<0.05)。结论HCC组织中Siglec-15高表达、CD4^(+)、CD8^(+)低表达,且Siglec-15与CD4^(+)、CD8^(+)表达呈负相关。Siglec-15及CD4^(+)的表达高低与HCC患者进展及不良预后相关,可作为预测HCC患者的独立预后因素。

唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9:调节中性粒细胞凋亡的一种新型分子

唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(Siglec)是免疫受体超家族中的主要成员,表达于各类免疫细胞,能够识别特定的唾液酸。中性粒细胞作为重要的天然免疫细胞,参与早期炎症反应的发生、发展,细胞凋亡在调节中性粒细胞数量的过程中发挥着关键作用。本文就Siglec-9在调节中性粒细胞的招募、凋亡,影响其炎症应答,促进细胞自噬以及Siglec-9在中性粒细胞引起临床疾病方面的研究进展作一综述。

唾液酸功能化靶向给药系统:与唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素或选择素受体结合的肿瘤和炎症治疗进展(英文)

靶向给药系统由于能够在特定部位实现药物的靶向释放而受到研究人员的广泛青睐,其中主动靶向给药系统被认为是最有前途的靶向给药系统。然而,用于构建多功能药物载体靶向部分的常用纳米材料存在许多缺点,如生物相容性低、易被单核吞噬细胞系统消除、不易修饰等,限制了其应用。唾液酸是一种天然配体,通常作为糖蛋白或糖脂上聚糖的末端糖存在于细胞表面。作为一种内源性物质,它具有生物安全性高、分子结构均匀清晰、易于化学修饰等特点。唾液酸功能化的纳米颗粒可携带靶向特异性表达其受体(唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素或选择素受体)细胞的药物用以治疗疾病。在这篇综述中,我们介绍了目前发表的关于以唾液酸修饰的纳米粒子为基础并结合“唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素或选择素受体”的靶向给药系统在肿瘤或炎症中治疗作用的文献,并讨论了天然唾液酸配体的化学修饰方法,用以提高对受体的结合亲和力和选择性。

尼罗罗非鱼3种Siglecslike融合蛋白在COS-7细胞中的表达及其结合活性的初步研究

为获得尼罗罗非鱼Siglecs like融合蛋白,开展相关Siglecs like蛋白的功能研究,深入了解罗非鱼与无乳链球菌相互作用机制。本研究利用前期构建的3个含Siglecs like ORF的克隆质粒,PCR扩增获得Siglec-1、Siglec-4b和Siglec-14 like的膜外段序列,插入真核表达载体pc DNA3.1(+)h Ig G1 Fc中,双酶切、测序鉴定后转染COS-7细胞。q PCR、Western-blot对目的蛋白的表达进行检测;亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯化效率。ELISA检测融合蛋白与GBS的结合活性。测序结果显示,成功构建3个融合蛋白真核表达载体pc DNA3.1(+)h Ig G1 Fc-Siglecs like/Ex。检测结果显示,转染细胞中3个Siglecs/Ex-Fc融合蛋白在mRNA和蛋白水平都有高效表达,且过柱后的融合蛋白具有较高纯度;3个融合蛋白与罗非鱼源GBS的结合活性较对照组均有显著差异。研究表明,利用真核表达系统成功制备了具有较高纯度的尼罗罗非鱼3种Siglecs融合蛋白,且均有与GBS的结合活性。

PD-L1和Siglec-15调控卵巢癌细胞恶性生物学行为的机制及其临床意义

目的:探讨卵巢癌组织中PD-L1与唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素15(Siglec-15)的关系及其临床意义以及两者对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:收集2017年1月至2019年12月福建医科大学附属第二医院妇科50例手术切除的卵巢癌组织和配对输卵管组织的石蜡包埋标本,采用免疫组化染色Envision法检测癌组织和输卵管组织中PD-L1和Siglec-15的表达水平,Kaplan-Meier生存曲线和Logistic回归分析PD-L1和Siglec-15表达与患者预后的关系。利用瞬时转染技术在卵巢癌细胞SKOV3中分别转染si-PD-L1和si-NC,用qPCR和WB法检测SKOV3细胞中PD-L1的表达对Siglec-15的影响,用CCK-8及Transwell法验证PD-L1及Siglec-15表达对SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的影响。结果:50例卵巢癌组织中,PD-L1与Siglec-15均呈高表达(50.00%与42.00%)。PD-L1表达与肿瘤病理类型、有无腹水、淋巴结转移、FIGO分期及卵巢癌复发与否具有关联(均P<0.05);Siglec-15表达与卵巢癌患者淋巴结转移及FIGO分期具有关联(均P<0.05)。成功构建PD-L1低表达SKOV3细胞株,降低PD-L1表达可使Siglec-15表达升高。结论:PD-L1和Siglec-15在卵巢癌组织中均有较高的阳性表达率,PD-L1是卵巢癌复发的独立风险因素。PD-L1和Siglec-15两者的表达呈负相关,降低PD-L1表达可使Siglec-15表达水平升高而抑制SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭的能力。

Siglec-7评估干扰素治疗慢性乙型肝炎效果分析

目的分析唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素7(Siglec-7)评估干扰素(PEG-IFN)治疗慢性乙型肝炎(CHB)的效果。方法回顾性分析68例行PEG-IFN治疗的CHB患者(CHB组)临床资料,并以同期62例健康体检者作为对照组。统计CHB组治疗48 w后的HBeAg阴转率和血清转换率、HBV DNA阴转率,比较对照组和CHB组治疗前及治疗48 w后外周血自然杀伤细胞(NK细胞)计数、Siglec-7在NK细胞表面表达情况。CHB组根据临床疗效分为有效组及无效组,比较两组治疗前后NK细胞计数和Siglec-7在NK细胞表面表达情况。结果CHB组治疗后,HBeAg阴转率为41.18%,HBeAg血清转换率为32.35%,HBV DNA阴转率为58.82%;其中显效21例,有效7例,共28例纳入有效组;无效40例,纳入无效组。治疗后,CHB组NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均较治疗前升高(P<0.05),但均低于对照组(P<0.05)。治疗前,有效组NK细胞计数、Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均高于无效组(P<0.05);治疗后,有效组及无效组NK细胞计数.Siglec-7在NK细胞表面阳性表达率均较治疗前升高(P<0.05),且有效组均高于无效组(P<0.05)。结论疗效较好的CHB患者NK细胞计数及Siglec-7阳性表达率在治疗前后均处于较高水平,临床可通过检测该指标预测CHB临床疗效。

Siglec-15在唑来膦酸特异性γδT细胞的表达及与抗原提呈相关分子表达的关系

目的:探讨唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(Siglec-15)在唑来膦酸(ZOL)特异性γδT细胞的表达及与抗原提呈相关分子表达的关系。方法:流式细胞术检测ZOL刺激前及刺激后4 d、8 d、12 d和16 d,Siglec-15、CD80、CD86和人类白细胞抗原(HLA)-DR在健康对照(HC)和肺癌(LC)患者外周血中的表达及表达水平的相关性。结果:与ZOL刺激前相比,CD80^(+)、CD86^(+)和HLA-DR^(+)γδT细胞水平在HC和LC中均升高(P<0.05);随着ZOL刺激时间延长,Siglec-15在两组γδT细胞中的表达水平均出现先升后降趋势,在刺激后4 d,HC显著高于LC(P<0.05)。LC的Siglec-15^(+)γδT与CD80^(+)γδT细胞比例在刺激前及刺激后的4 d和8 d呈正相关(P<0.05)。结论:Siglec-15在ZOL特异性γδT细胞中的表达水平先升高后降低,表达水平的上调与CD80表达水平的升高有关。

Siglec-15抗体在非小细胞肺癌中的调控机制研究

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-15)作为新发现的一种免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs),其广泛表达于多种肿瘤细胞,并与程序性死亡受体1(programmed cell death 1,PD-1)和程序性死亡受体-配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)的表达互斥,可以作为一个新的ICIs治疗靶点,为PD-1/PD-L1治疗无响应的患者提供另一种治疗选择。本文拟从Siglec-15的特征通路、参与免疫调节机制以及在肿瘤相关的表达等方面的近期研究成果综述。分析研究Siglec-15抗体的临床应用结果,探讨Siglec-15在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中的应用意义以及治疗前景。

Siglec家族与动脉粥样硬化相关性免疫细胞关系的研究进展

动脉粥样硬化(As)是一种慢性炎症性血管疾病,各类免疫细胞的活性在其形成过程中均具有重要的作用。研究证实唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素(Siglec)家族与多种炎症免疫细胞的活性调节关系密切,如Siglec-1,5和7与单核/巨噬细胞活性显著相关,Siglec-2,10参与B淋巴细胞活性调节,Siglec-5,9和14能够调控中性粒细胞活性等,提示Siglec家族可能通过调节免疫细胞活性参与As形成的过程。尽管目前尚缺乏全面的直接证据,但已证实Siglec-1与As病变的形成显著相关,且抑制其表达能够显著减轻病变的程度。为从糖生物学的角度审视As形成中炎症免疫因素的作用机制,并探索防治As的可能新靶点,本文拟对Siglec家族与As相关性免疫细胞关系的研究进展作一综述。

新型免疫检查点SIGLEC9在宫颈癌中的表达及临床相关性分析

目的:探讨新型免疫检查点SIGLEC9及SIGLEC9^(+)T细胞在宫颈癌中的表达情况及SIGLEC9与临床相关性分析。方法:前瞻性收集2022年5月至2023年10月,于新疆医科大学第一附属医院行手术治疗或病理活检的宫颈癌患者的宫颈组织石蜡标本132例作为宫颈癌组,选取同期收治的良性子宫肌瘤行子宫全切患者的正常宫颈组织石蜡标本58例作为正常对照组;同时收集行手术治疗或病理活检的宫颈癌患者的外周血108例为宫颈癌组,选取同期健康人群的外周血86例为正常对照组。使用生物信息学技术和免疫组织化学染色、流式细胞术及双重免疫荧光染色检测SIGLEC9及SIGLEC9^(+)T细胞在宫颈癌中的表达情况,并与临床指标进行相关性分析。结果:免疫组织化学染色及双重免疫荧光染色结果显示SIGLEC9及SIGLEC9^(+)T细胞在宫颈癌组织中高表达(P<0.05);流式细胞术结果显示SIGLEC9^(+)CD4^(+)T和SIGLEC9^(+)CD8^(+)T细胞在宫颈癌外周血中表达增高(P<0.05)。SIGLEC9高表达与肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移、HPV感染情况相关(P<0.05)。结论:新型免疫检查点SIGLEC9在宫颈癌组织中高表达,且在宫颈癌组织中SIGLEC9^(+)T细胞浸润较多。SIGLEC9为宫颈癌的免疫逃逸机制提供新的研究方向,并为宫颈癌的免疫治疗提供新的治疗靶点。

基于M2型巨噬细胞来源的Siglec15对食管鳞癌细胞恶性生物学行为影响的生物信息学分析及实验验证

目的:采用生物信息学方法分析M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-TAMs)来源唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(Siglec15)促进食管鳞状细胞癌(ESCC)恶性生物学行为的作用,并通过细胞实验对其进行验证。方法:应用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库分析Siglec15在泛癌和癌旁正常组织中的表达差异及免疫浸润情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测M2-TAMs和ESCC EC109及KYSE150细胞中Siglec15 mRNA表达水平。在M2-TAMs与ESCC细胞非接触性共培养基础上,分别设置EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组(转染si-NC序列)和EC109/KYSE150+si-Siglec15组(分别转染si-Siglec15#1和si-Siglec15#2序列),采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:生物信息学分析,与癌旁正常组织比较,食管癌、结肠癌和头颈部鳞状细胞癌等泛癌组织中Siglec15 mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),且食管癌组织中Siglec15 mRNA表达水平与巨噬细胞浸润呈明显正相关关系(P<0.05);与EC109细胞和KYSE150细胞比较,M2-TAMs中Siglec15 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。EC109/KYSE150组、EC109/KYSE150+si-NC组和EC109/KYSE150+si-Siglec15组细胞增殖率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与EC109/KYSE150组比较,24和48 h时EC109/KYSE150+si-NC组细胞划痕愈合率升高(P<0.01),迁移和侵袭细胞数增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.01);与EC109/KYSE150+si-NC组比较,EC109/KYSE150+si-Siglec15#1组和EC109/KYSE150+si-Siglec15#2组细胞划痕愈合率降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数减少(P<0.05),细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:M2-TAMs来源Siglec15可能是促进ESCC细胞迁移和侵袭的关键因子。

Siglec-9对TNF-α诱导的关节软骨细胞TLR4/NF-κB通路及凋亡的影响

目的探讨唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素9(Siglec-9)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的关节软骨细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路及凋亡的影响。方法体外培养人关节软骨细胞,分为对照组、TNF-α组(20 ng/ml TNF-α)、低浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+2 ng/ml Siglec-9)、中浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+10 ng/ml Siglec-9)和高浓度Siglec-9组(20 ng/ml TNF-α+50 ng/ml Siglec-9),MTT法检测软骨细胞活性,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡情况,酶联免疫(ELISA)法检测软骨细胞上清液中白介素(IL)-1β、IL-6和IL-8水平,蛋白印迹(WB)法检测软骨细胞中TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65、核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)、p-IκB-α蛋白表达情况。结果与对照组相比,TNF-α组软骨细胞存活率显著降低(P<0.05),凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著升高(P<0.05);与TNF-α组相比,低、中、高浓度Siglec-9组软骨细胞存活率显著升高(P<0.05),凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著降低(P<0.05);随着Siglec-9处理浓度的升高,软骨细胞存活率显著升高,凋亡率、细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-8水平及细胞中TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκB-α/IκB-α蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论Siglec-9对TNF-α诱导的关节软骨细胞TLR4/NF-κB通路激活及凋亡具有抑制作用。