蛙源米尔伊丽莎白菌的生物膜形成能力及β内酰胺类和喹诺酮类耐药性分析

研究旨在探讨蛙源米尔伊丽莎白菌(Elizabethingia miricola)的药敏特性,生物膜形成能力及对β-内酰胺类和喹诺酮类药物的耐药机制。通过16S rRNA和rpoB基因序列系统发育分析对分离菌株进行分子鉴定。采用肉汤稀释法、结晶紫微孔板法和卡尔加里生物膜装置分别测定其最小抑菌浓度(MIC)、生物膜形成能力及最低生物膜清除浓度(MBEC)。利用PCR方法分析β-内酰胺耐药基因及喹诺酮类耐药决定区(QRDR)突变,并通过双纸片法检测其超广谱β-内酰胺酶(ESBL)和金属β-内酰胺酶(MBL)的产生。结果显示,从患病蛙类样本中分离到的9株优势菌株均为E.miricola;各菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类及喹诺酮类药物耐药,但对多西环素和氟苯尼考敏感;所有菌株均可形成生物膜,生物膜形成菌的MBEC比对应浮游菌的MIC提高8—>256倍;所有菌株均携带β-内酰胺类耐药相关基因(blaCME、blaGOB和blaB),并产生ESBL及MBL;gyrA基因的QRDR区均检测到了可介导喹诺酮类耐药的非同义突变S83R,gyrB、parC和parE未发现突变。结果表明,蛙源E.miricola呈现多重耐药性,普遍具有生物膜形成能力,β-内酰胺酶的产生及喹酮类药物作用靶点突变与其β-内酰胺及喹诺酮类耐药表型相符。多西环素和氟苯尼考的体外敏感性较高,具有治疗该菌感染的潜力。研究可为E.miricola感染的治疗及耐药机制的深入研究提供参考。

金属有机骨架基固相萃取-高效液相色谱法检测水产品中5种氟喹诺酮类药物残留

采用溶剂热法合成新型金属有机骨架材料UiO-66-NH_(2),建立基于UiO-66-NH_(2)的固相萃取-高效液相色谱同时检测水产品中5种氟喹诺酮类药物残留的方法。样品经体积分数1.0%甲酸-乙腈溶液提取,正己烷脱脂,提取液旋蒸浓缩后,采用pH 8.0的氨水溶液复溶,经装有30 mg UiO-66-NH_(2)的固相萃取柱富集净化,6 mL 20%乙酸-甲醇溶液洗脱,氮吹近干复溶后,利用高效液相色谱-荧光检测器检测。在建立的实验条件下,5种FQs在0.005~0.50 mg/L范围内线性关系良好,决定系数(R^(2))为0.999 9~1.0,回收率为81.4%~104.8%,相对标准偏差为1.29%~4.93%,检出限为0.21~2.05μg/kg。制备的固相萃取柱可重复使用达5次,绿色环保、经济成本低,所建立的方法具有良好的准确度、精密度、重现性及选择性,适用于水产品中多种痕量氟喹诺酮类药残的同时检测。

280例耐多药肺结核患者氟喹诺酮类耐药情况及抗结核药物不良反应

目的 分析耐多药肺结核中的氟喹诺酮类耐药情况及抗结核药物不良反应。方法 收集2020年5月至2022年6月于成都市公共卫生临床医疗中心诊治的280例耐多药肺结核的临床资料,并分析耐多药者的氟喹诺酮类耐药情况及抗结核药物不良反应。结果 1.280例耐多药肺结核病者趋于年轻化,耐药谱以HRSm、HR+氟喹诺酮耐药组合最为常见,Ofx、Lfx和Mfx在复治者中的耐药率40.3%、35.9%和37.9%均高于初治者中的耐药率21.6%、22.9%和24.3%,差异具有统计学差异(χ^(2)=8.303,P=0.004;χ^(2)=4.162,P=0.041;χ^(2)=4.430,P=0.035)。2.耐多药肺结核病中肺外结核发生率以结核性胸膜炎(30.7%)及支气管结核(25.4%)最常见,结核性脑膜炎(2.1%)较罕见。3.耐多药肺结核治疗期间发生药物不良反应前3位为高尿酸血症(55.7%)、肝功能损伤(38.9%)和甲功异常(12.9%),且初治和复治患者在高尿酸血症、肝功能损伤、甲功异常及精神系统方面经比较存在统计学差异(χ^(2)=6.340,P=0.012;χ^(2)=3.977,P=0.046;χ^(2)=6.957,P=0.008;χ^(2)=6.283,P=0.012)。4.280例耐多药者治疗成功率为68.9%,治愈率为59.6%,其中初治组治愈率67.6%,复治组治愈率为56.8%。结论 四川地区耐多药肺结核病形势严峻,发病趋于年轻化,复治者中氟喹诺酮类药物耐药率显著高于初治,在临床治疗中应重视氟喹诺酮类药物的耐药监测;耐多药肺结核抗结核过程中不良反应发生率高,应重视对不良反应发生的监测和处理,以保证患者的治疗效果。

喹诺酮类抗菌药的药理作用及临床合理用药分析

对喹诺酮类抗菌药物的药理作用进行分析,同时探讨该类药物的临床合理用药情况。方法 现将研究的主体对象确定为我院药剂科治疗患者,时间背景上,以2023年07月为起始节点,2024年07月为结束节点,选取出采用喹诺酮类抗菌药进行治疗的139例患者作为研究组,在同期治疗患者中选出采用其他抗菌药物进行治疗的139例作为对照组,针对两组药物作用、不良反应、不合理用药情况以及类型等进行对比。结果 比起对照组,研究组患者取得的药物治疗总有效率显示出更高水平,P<0.05;研究组整体的不良反应发生总占比率与对照组比要更低,P<0.05;研究组不合理使用药物占比率比起对照组显示出同质性,P>0.05;而在研究组中,不合理用药类型方面,占比最高为给药途径、年龄以及联用药物不合理;在不合理用药处方中,研究组、对照组不良反应占比分别为73.53%、71.74%,组间比较显示出同质性,P>0.05。结论 在抗菌药物中,喹诺酮类药物的疗效明显强于其他类药物,不良反应相对较少,而多数不良反应都是由不合理用药问题导致,因此,为了确保药物使用的安全性,必须充分了药物的药理作用,为患者制定最安全、有效的用药方案。

好氧堆肥对畜禽粪便氟喹诺酮类抗性基因消减的研究进展

在畜禽养殖业中,氟喹诺酮类抗菌药(fluoroquinolones antibiotics, FQs)的广泛使用导致氟喹诺酮类抗性基因(fluoroquinolones resistance genes, FRGs)在环境中传播,对环境生态造成威胁。目前,好氧堆肥是去除FRGs的有效手段之一。笔者综述了畜禽粪便好氧堆肥中不同因素[FQs、微生物群落、可移动遗传元件(mobile genetic elements, MGEs)、环境因素(温度、pH值、含水量、碳氮比、电导率等)和重金属]对FRGs去除效果的影响,旨在为FRGs的有效控制提供参考。

氟喹诺酮类药物相关肾损害与肾结石形成的关系

泌尿系结石以肾结石为多见,其成因机制复杂尚未明确统一,多以钙性结石为基础形成。肾结石常合并尿路感染、肾积水导致复发率较高,给临床诊治工作带来了困扰。氟喹诺酮类药物是一种常用于控制尿路感染的抗生素。经查阅国内外最新研究发现,氟喹诺酮类药物除了控制尿路感染减少感染性结石的形成外,其本身对肾脏的损害也有可能导致结石的形成。

肺结核患者氟喹诺酮类耐药影响因素预测模型的构建与验证:基于LASSO-Logistic回归模型

背景利福平耐药/耐多药结核病(RR/MDR-TB)治疗困难,治愈率低,且传染性强,氟喹诺酮类(FQs)作为治疗RR/MDR-TB的核心药物,耐药趋势严峻,对FQs影响因素进行分析有助于提高RR/MDR-TB的治愈率,并控制准广泛耐药(pre-XDR)和广泛耐药结核病的发生。目的分析住院肺结核患者FQs耐药情况及影响因素,构建FQs耐药危险因素的列线图(Nomogram)预测模型并进行验证。方法回顾性选取于2021年1月—2022年2月在贵阳市公共卫生救治中心住院且有药物敏感试验结果的583例肺结核患者为研究对象。根据治疗史将患者分为初治组(296例)和复治组(287例);根据FQs耐药情况将患者分为FQs耐药组(63例)和FQs敏感组(520例)。分析患者对13种抗结核药物总耐药分布情况,比较FQs耐药组与FQs敏感组肺结核患者的基线特征。采用LASSO回归模型筛选特征变量后,行多因素Logistic回归分析FQs耐药的独立危险因素,并构建Nomogram预测模型;采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)、校准曲线对其进行验证。结果583例患者中FQs敏感520例,耐药63例,耐药率为10.81%,仅次于一线抗结核药异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇总耐药率(36.36%、32.76%、21.61%、12.86%)。复治组患者利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、利福平耐药(RR)、耐多药(MDR)、pre-XDR耐药率高于初治组(P<0.05)。FQs耐药组患者其他民族、复治、艾滋病、吸毒史、空洞、咯血、不规则抗结核史、MDR占比高于FQs敏感组(P<0.05)。LASSO回归筛选出6个变量:民族、治疗史、艾滋病、吸毒史、咯血、MDR;多因素Logistic回归分析结果显示,其他民族(OR=2.313,95%CI=1.153~4.640,P=0.018)、复治(OR=1.892,95%CI=1.005~3.560,P=0.048)、咯血(OR=1.941,95%CI=1.087~3.465,P=0.025)、MDR(OR=3.342,95%CI=2.398~7.862,P<0.001)是肺结核患者FQs耐药的独立危险因素;Logistic回归方程Logit(P)=-3.571+0.838×民族+0.638×治疗史+0.663×咯血+1.468×MDR,基于此构建风险Nomogram预测模型,AUC为0.796(95%CI=0.717~0.876),Bootstrap法验证平均绝对误差为0.015,通过Hosmer-Lemeshow拟合优度检验,预测模型有较好的校准能力(χ^(2)=3.426,P=0.489)。结论肺结核患者FQs耐药率较高,其他民族、复治、咯血、MDR是肺结核患者FQs耐药的独立危险因素,构建Nomogram预测模型对于肺结核患者FQs耐药具有较好的预测价值,能够为临床诊断耐药结核病及为RR/MDR-TB制订合理治疗方案提供新思路。

液相色谱-四极杆线形离子阱质谱法快速检测牛奶中磺胺类和喹诺酮类药物残留

为给国产质谱提供检测动物性食品中兽药残留的参考依据,本试验首次基于自主研制液相色谱-四极杆线形离子阱质谱法(LC-Q-LIT),建立了牛奶中磺胺类药物和喹诺酮类药物残留的检测方法。样品前处理采用液液萃取方法,牛奶样品经乙腈提取,正己烷脱脂,取适量提取液,经氮气吹至近干,初始流动相复溶后,进行LC-Q-LIT检测。基质匹配标准曲线按照空白添加的方法进行制备。仪器条件按照色谱峰形及其响应强度进行优化。LC-Q-LIT检测牛奶中磺胺类和喹诺酮类药物的方法学验证指标包括线性范围、检测限和定量限、回收率和精密度。将LC-Q-LIT方法与文献中报道的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法进行对比,并采用LC-Q-LIT方法检测5份实际样品。经优化选择依利特C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)分离目标物;以0.1%甲酸水溶液-甲醇(V/V)为11种磺胺类药物的流动相,0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈(V/V)为9种喹诺酮类药物的流动相进行梯度洗脱;质谱采用正离子电离(ESI+)和选择反应监测模式。结果显示,在牛奶基质中,11种磺胺类药物在5~500μg/L线性范围内呈现良好线性关系(R^(2)≥0.999),检测限、定量限和添加回收率范围分别为1.0~3.0μg/L、2.5~10.0μg/L和77.39%~119.44%,日内精密度为1.21%~6.04%,日间精密度为2.25%~9.45%;9种喹诺酮类药物在10~450μg/L线性范围内呈现良好线性关系(R^(2)≥0.990),检测限、定量限和添加回收率范围分别为5.0~9.0μg/L、10.0~20.0μg/L和81.97%~118.49%,日内精密度为1.64%~10.94%,日间精密度为2.05%~12.69%。LC-Q-LIT方法的回收率与LC-MS/MS方法相近,可达到仪器准确度要求。5份实际样品经LC-Q-LIT检测,未测出磺胺类药物,测得司帕沙星残留量为0.84μg/L。结果表明,LC-Q-LIT方法操作简单、快速、成本低且灵敏度高,定性和定量准确,适用于牛奶中磺胺类和喹诺酮类药物残留的检测分析。

氟喹诺酮类药物免疫分析方法的研究进展

氟喹诺酮类药物具有广谱高效的优点,现已广泛用于预防和治疗动物的各种感染性疾病。然而,氟喹诺酮类药物长期大量的滥用,在食品中的残留超标,导致体内耐药病原菌的产生,引起人类的耐药性问题。因此,建立快速灵敏的氟喹诺酮类药物检测方法具有重要意义。免疫分析法具有高灵敏和低成本的优势,故受到食品安全领域的广泛关注。因此,该文对氟喹诺酮类药物的抗体制备、各种免疫分析方法(包括酶联免疫吸附法、免疫层析法、荧光免疫分析法和免疫传感器)的原理、特点和应用进行总结,并对氟喹诺酮类药物免疫分析方法的发展趋势进行了展望。

喹诺酮类抗菌药选评

概述 喹诺酮类抗菌药是由萘啶酸发展起来的合成抗菌药,它们都具有吡啶酮酸的共同结构,通过抑制DNA旋转酶和拓扑异构酶Ⅳ而产生抗菌作用.这种作用一般对细菌的选择性高,对人相对安全.

喹诺酮类抗菌药物在新生儿临床应用的若干问题

喹诺酮类抗菌药属化学合成抗菌药，自1962年合成第一个喹诺酮类药物萘啶酸以来，更新很快，1979年合成诺氟沙星，随后又合成一系列含氟的新喹诺酮类药，通称为氟喹诺酮类（fluoroquinolones）。目前第一代、第二代已基本淘汰不用，应用最多的是第三代，如诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、氧氟沙星、环丙沙星、氟罗沙星、二氟沙星等，对革兰阳性和革兰阴性菌、厌氧菌、衣原体、支原体、分支杆菌均有很强的抗菌活性，毒副作用低于第一代和第二代。

利福平耐药结核分枝杆菌对氟喹诺酮类药物表型耐药与其基因突变的一致性研究

目的:研究利福平耐药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones,FQs)耐药基因突变特征与FQs最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)的关系。方法:选取2016—2021年北京市结核病防治机构及定点医院收治的利福平耐药结核病(rifampicin resistant tuberculosis,RR-TB)患者分离培养阳性菌株进行微孔板法药物敏感性检测,总结RR-TB患者菌株对左氧氟沙星(levofloxacin,Lfx)和莫西沙星(moxifloxacin,Mfx)的MIC值;同时进行一代测序。分析FQs耐药相关基因gyrA和gyrB突变特征与FQs MIC之间的关系;以表型药物敏感性试验(phenotypic drug susceptibility testing,pDST)结果为参照标准,评价基因型药物敏感性试验(genotypic drug susceptibility testing,gDST)对FQs耐药的检测效能;探讨RR-MTB对FQs表型耐药与基因型耐药差异的原因。结果:303株RR-TB患者菌株中,FQs pDST耐药率为27.7%(84/303),gyrA基因突变检出率为25.1%(76/303),未检测到gyrB基因突变。以pDST结果为参照标准,gDST检测RR-MTB的FQs耐药性的敏感度和特异度分别为84.5%(71/84;95%CI:74.6.1%~91.2%)和97.7%(214/219;95%CI:94.5%~99.1%)。两种方法结果不一致的菌株有25株,不一致率为8.3%(25/303)。FQs耐药菌株的MIC主要为2μg/ml,最常见的突变位点发生在第94位点(53.9%,41/76),gyrA基因在第88和94位点突变与pDST耐药完全一致,而第90和91位点突变的pDST耐药一致率分别为95.8%(23/24)和3/5。第88位点的突变与Lfx pDST耐药相关,与Mfx pDST高浓度耐药相关;第90位点的突变以丙氨酸转变为缬氨酸为主(92.3%,24/26),该突变发生的Lfx和Mfx最低MIC为临界浓度(1μg/ml和0.25μg/ml)。第94位点天冬氨酸突变为天冬酰胺均为Lfx和Mfx高浓度耐药(1/1),该位点天冬氨酸突变为酪氨酸与Lfx耐药(1/1)相关,与Mfx高浓度耐药相关(1/1)。结论:北京地区RR-MTB的FQs耐药的主要机制是gyrA基因突变,不同gyrA基因突变提示FQs耐药水平存在差异。FQs pDST和gDST检测RR-MTB的结果高度一致,可及早应用gDST检测RR-TB患者的FQs的耐药性,以指导临床制定合理治疗方案。

四黄水蜜外敷预防喹诺酮类药物输液性静脉炎临床研究

目的:观察四黄水蜜外敷预防喹诺酮类药物输液性静脉炎的效果。方法:选取进行静脉输入喹诺酮类药物治疗的112例患者为研究对象,根据随机数字表法分为对照组和试验组各56例。对照组实施输液性静脉炎的常规防护干预,试验组在对照组基础上予四黄水蜜外敷干预。比较2组输液性静脉炎发生率、输液舒适度视觉模拟评分法(VAS)评分及输液护理满意度评分,观察干预期间不良反应发生情况。结果:试验组输液性静脉炎的发生率为3.6%,低于对照组30.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组输注后肢体的活动度评分及总评分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组输液舒适度VAS评分低于对照组(P<0.05),输液护理满意度评分高于对照组(P<0.05)。结论:四黄水蜜外敷可有效预防诺酮类药物输液性静脉炎的发生,提高输液治疗舒适度和护理满意度,且该方法安全性高。

UPLC-TRIPLE QUAD-MS/MS法检测水产品中14种喹诺酮类药物残留研究

试验旨在建立1种超高效液相色谱-三重四级杆串接质谱联用(UPLC-TRIPLE QUAD-MS/MS)技术快速分析水产品中14种喹诺酮类药物(QNs)多残留的方法。使用2%甲酸的乙腈溶液提取两次,QuEChERS法前处理,以甲醇-乙腈溶液和0.2%甲酸溶液为流动相,利用UPLC-TRIPLE QUAD-MS/MS进行检测。结果显示:试验建立的标准曲线相关系数为0.99744~0.99933,方法检出限为0.07~1.18μg/kg,定量限为0.25~3.94μg/kg;平均加标回收率为89.9%~109.4%,相对标准偏差为0.5%~4.5%。对水产品等14种样品进行了抽样筛查,昂刺鱼、鲫鱼和基围虾中检出喹诺酮类药物,鱼丸、虾丸、小龙虾中未检出。研究表明,UPLC-TRIPLE QUAD-MS/MS技术灵敏度高、回收率好、专属性强,适用检测水产品及其加工品中喹诺酮类药物。

超高效液相色谱-串联质谱法测定水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类药物残留

建立了基于超高效液相色谱-串联质谱同时测定水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类药物残留的分析方法。样品经酸化乙腈(含1%甲酸)提取,Oasis PRiME HLB直通式固相萃取柱净化,Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)柱(100.0 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子多反应监测模式进行测定,内标法定量。结果表明,本方法下喹诺酮类、磺胺类化合物线性范围为5~100 ng/mL(相关系数大于0.99),在非规范药品基质中的定量限为1.0 mg/kg,平均回收率为74.2%~90.3%,相对标准偏差(n=6)为2.2%~10.9%。将方法用于分析79个实际样品,结果显示,其中6个非规范药品样品中检出恩诺沙星,最高检出残留量为0.94 mg/kg,1个非规范药品样品中检出磺胺甲噁唑,残留量为1.34 mg/kg。本方法快速、灵敏、准确,适用于水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类药物残留的测定。

牛奶中喹诺酮类药物残留的AlphaLISA检测方法的研究

本文旨在建立一种可检测牛奶中喹诺酮类药物(Quinolones,QNS)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(Amplifiedluminescent proximity homogeneous assay linkedimmune sorbent assay,AlphaLISA)。采用EDC/NHS活泼酯法在诺氟沙星分子连接6-氨基己酸作为间隔臂,制备生物素修饰诺氟沙星半抗原(Biotin-6AS-NOR),并在受体微球上偶联QNS单克隆抗体,Biotin-6AS-NOR可与牛奶样品中的QNS竞争结合喹诺酮抗体;通过优化受体微球的QNS抗体偶联量,Biotin-6AS-NOR及供/受体微球的用量等参数,以及牛奶样品的稀释方案,建立了牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法。采用1:5牛奶样品稀释方案,所建立牛奶中QNS残留的AlphaLISA检测方法的检出限和定量限分别为0.19 ng/mL和0.46 ng/mL,回收率在85.97%~110.11%之间,日内和日间变异系数均小于10%,与诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、达氟沙星和洛美沙星的交叉反应率均高于70%。本研究所建立AlphaLISA检测方法具有灵敏度和准确度高、重复性好等优点,且在整个检测过程中不需要繁琐洗涤操作,具有较高的应用和推广价值。

分子杂交策略设计的喹诺酮类抗菌化合物进展

喹诺酮类化合物是一类广泛用于细菌感染临床治疗的药物,部分药物是特定感染的首选治疗药物。随着抗菌药物的长期使用,具有新型结构的化学合成抗菌药物的研究与开发很有必要。采用分子杂交策略将两种生物活性片段糅合,可得到对靶标活性更高或作用多个靶标的新化合物,提高体内药物对疾病的整体活性,实现“1+1>2”的效果。综述了喹诺酮类抗菌药的作用机制和构效关系,概述了分子杂交策略下得到的新型喹诺酮类抗菌化合物的进展以及对喹诺酮类化合物进行优化的研究进展。