中蜂囊状幼虫病毒PCR检测技术概述

中蜂囊状幼虫病是由中蜂囊状幼虫病毒引起的一种病毒病,是危害中蜂蜂群的主要病害之一。到目前为止,该病还没有特效药物可以治疗,我国大部分中蜂饲养地区由于该病的发生损失惨重。快速、高效、灵敏度高的检测方法对早期预防该病的发生和传播具有重要意义。本文就中蜂囊状幼虫病的检测技术进行了综述,旨为中蜂囊状幼虫病的检测和防控提供参考。

贵州省中华蜜蜂囊状幼虫病的发病情况与流行规律调查

为了解贵州中华蜜蜂囊状幼虫病的发病情况与流行规律,采用文献查阅、问卷及实地调查、定期监测方法对其发病季节、致病因素、发病率等情况进行分析研究。结果:该病自1974年传入贵州,一年四季均可发生,发病高峰期为2—6月、10月—次年1月,病因与气温、群势、饲养水平、蜂王质量等有关;近5年全省蜂场发病率为60.27%,大部分蜂场蜂群发病率为25%;91.78%的蜂农能通过症状判断蜂群患病,主要采取做好四季管理、及时补饲、密集群势、人工断子、换王、及时消毒等措施进行防控,辅以药物治疗,病害未对贵州蜂场造成重大损失。结论:中华蜜蜂囊状幼虫病在贵州的发病情况较平稳,应注意防范患病蜂群并发或继发其他病害。

腹腔脏器外囊状淋巴管瘤的B超/CT图像表现及诊断(附11例分析)

目的总结腹腔脏器外囊状淋巴管瘤的B超/CT图像表现及诊断方法。方法回顾性分析11例囊性淋巴管瘤患者的临床资料。结果囊性淋巴管瘤患者中,8例为女性,3例为男性;发病年龄3~57岁,中位年龄16岁;病程2 d~4 a;临床表现为腹痛8例,腹部肿物、腹胀、无症状各1例。B超/CT检查:单房型囊状淋巴管瘤3例,多房型囊状淋巴管瘤8例;淋巴管瘤位于一个区域9例,累及腹腔内2个区域1例,累及颈部和腹腔1例;直径3.3 cm×3.4 cm~18.5 cm×5.8 cm;9例呈液性低密度(密度均匀一致),1例为不规则混杂密度灶(可见脂性密度灶,部分病灶内见点状钙化密度影),1例囊实性占位病变。11例患者均行手术治疗并完整剥除淋巴管囊肿,其中10例在囊壁完整有张力情况下剥除,1例行肠系膜囊肿引流+肠系膜肿瘤切除术。11例随访4个月~9 a,均未复发。结论腹腔脏器外囊状淋巴管瘤B超/CT检查提示为囊性、类圆形低密度灶,边界尚清,沿解剖间隙蔓延,增强扫描未见强化,多房者囊壁及间隔菲薄,无血流信号;病理检查为诊断的金标准;手术为首选治疗方案。

胎儿颈部水囊状淋巴管瘤的产前超声诊断

目的:探讨超声诊断在胎儿颈部水囊状淋巴管瘤产前诊断中的应用。方法:对29例超声诊断为胎儿颈部水囊状淋巴管瘤的声像图进行回顾性分析,并与临床、引产后病理结果对照。结果:29例中超声误诊1例,诊断正确率为96.6%。本病的声像图特征为:胎儿颈部的不对称性多房性囊性包块,囊壁薄而光滑,内部呈均质性透声暗区并以网状分隔;包膜可与水肿的胎儿头皮及全身皮肤相连续,形成“太空衣水肿征”;部分伴有胸水、腹水。结论:超声诊断是产前诊断该病的唯一影像学手段,且声像图具有特征性,因而及早行超声检查有利于该病的早期产前诊断。

支气管囊状扩张与非囊状扩张二类型临床分析

支气管扩张目前常用的分类是Reid1950年提出的三种类型，即柱状扩张、囊状扩张和曲张型扩张。几种类型可在同一患者中同时存在，故国内将其分为囊状、柱状、曲张型和混合型4种。其中囊状支气管扩张表现为多发性含气囊腔，大小不一，壁增厚，内外光滑，呈串珠囊样状，

巨大薄壁囊状滤过泡结膜瓣加固术患者的护理26例

目的探讨巨大薄壁囊状滤过泡结膜瓣加固术患者的护理方法。方法对26例抗青光眼术后巨大薄壁囊状滤过泡患者实行结膜瓣加固术,术前对患者进行有针对性的心理护理及术前准备;术后及时做好眼压升高、浅前房等并发症的护理;做好健康宣教,提高患者对薄壁滤过泡的自我保护意识。结果4只眼黄斑水肿消退,14只眼滤过泡渗漏消失,1只眼滤过泡感染控制。结论结膜瓣加固术是治疗抗青光眼术后巨大薄壁囊状滤过泡的有效方法,加强患者术前、术后的心理护理,术后密切观察并处理并发症,加强患者的自我保护意识可提高手术成功率。

腹部多发囊状淋巴管瘤

女病人,47岁,五个月前无明显诱因下突然出现右侧腰部胀痛,呈间歇性发作,疼痛无放射,休息后减轻,无发热、恶心、呕吐及腹泻,未予重视和治疗,入院前一天感症状加重,T 36.7℃,P 72次/分,R 21次/分,BP 120/80 mmHg,肝肾功能正常.……

基于TaqMan探针的蜜蜂囊状幼虫病病毒荧光PCR检测方法的建立和应用

为建立快速有效的蜜蜂囊状幼虫病检疫方法,依据TaqMan荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂囊状幼虫病病毒保守序列,设计出一对特异性引物和一条探针,建立了一种快速检测蜜蜂囊状幼虫病病毒的荧光PCR方法。该方法对蜜蜂囊状幼虫病的检测具有较好的特异性,与蜜蜂急性麻痹病病毒、蜜蜂慢性麻痹病病毒、蜜蜂残翼病病毒和黑蜂王台病病毒之间均无交叉反应。检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL阳性质粒,可对低病毒含量的样品进行准确检测。重复性和稳定性试验结果显示,变异系数为1.6%,说明该方法具有较好的重复性和稳定性。应用该方法对蜜蜂及蜂制品进行检测,结果显示所建立的荧光PCR检测方法4h内即可报告检测结果,该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点,适用于蜜蜂及其制品中蜜蜂囊状幼虫病病毒的快速检疫。

中蜂囊状幼虫病毒的纯化、结晶与结构研究

中蜂囊状幼虫病毒的纯化、结晶与结构研究冯建勋卢火斤英张勤奋马泽微张景强黄文忠＊张学峰＊（中山大学昆虫研究所生物防治国家重点实验室，广州５１０２７５）（＊广东省昆虫研究所蜜蜂组，广州５１０２６０）＊国家自然科学基金重点项目资助中蜂囊状幼虫病是中峰生产中...

蜜蜂囊状幼虫病研究进展

蜜蜂囊状幼虫病是由蜜蜂囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)引起的一种病毒病,对蜂群危害极其严重,对我国本土蜂种的中华蜜蜂危害更甚。到目前为止,我国有20多个省发现中华蜜蜂感染此病,病害侵袭极其严重。由于该病无特效药物可以治疗,我国部分省份的部分地区由于囊状幼虫病的大流行已经导致该地区中华蜜蜂饲养数量几乎为零,给当地的蜂业生产带来巨大损失。论文从蜜蜂囊状幼虫病的流行规律、病毒的生物学特性、病害诊断方法和蜜蜂抗性机理四个方面对蜜蜂囊状幼虫病研究进展进行概述,旨在为今后有效防控蜜蜂囊状幼虫病提供参考。

蜜蜂囊状幼虫病病毒的基因型分析

为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型分为东方蜜蜂和西蜂亚型。提示蜜蜂囊状幼虫病病毒总体上按地域分型。

中蜂囊状幼虫病病毒特异性半套式RT-PCR检测方法的建立及应用

基于中蜂囊状幼虫病病毒基因组序列AF469603中的RNA依赖的RNA聚合酶基因,建立该病毒的半套式RT-PCR检测方法。利用建立的方法检测有典型临床症状的病死中蜂幼虫,可扩增到特异的目的片段,序列分析得出,PCR扩增片段与AF469603同源性高于97%,与其他病原无同源性,表明该方法可用于临床诊断和流行病学研究。

中蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)核酸的结构研究(英文)

本文分别应用冷冻电镜与计算机三维重构技术和分子生物学技术对中蜂囊状幼虫病病毒 (CSBV)的核酸的三维结构和核酸一级结构进行测定和分析 。

CT血管造影与3D-DSA对囊状未破裂脑动脉瘤的对比研究

目的评估静脉注入造影剂的CTA与3D-DSA对于诊断颅内动脉瘤准确性的对比评价。方法 13例通过血管造影偶然发现的15个颅内囊性动脉瘤。对于每个患者,我们均进行静脉注射造影剂的CT血管造影和传统的血管造影包括三维旋转数字减影血管造影。在后处理过程中,应用多平面重建技术对于每个动脉瘤的最大直径、瘤颈直径、动脉瘤高度、最大宽度、凸起高度、载瘤动脉直径和载瘤动脉与动脉瘤顶端之间的夹角进行仔细测量。结果 3D-DSA和静脉注射造影剂的CT血管造影都能提供高质量的图像而没有运动伪像。所有参数的测量表明二者对颅内动脉瘤形态的诊断具有极高的相似性(P≤0.001)。结论 CTA是一种可行的、可视的、无创性的诊断囊状脑动脉瘤的手段并且通过评估动脉瘤的大小和几何形态可以提供与传统三维旋转数字减影血管造影术相媲美的可靠的诊断信息。此初步结果提示CTA可能成为脑动脉瘤介入治疗前取代DSA的一个有前途的诊断方法。

中华蜜蜂囊状幼虫病病毒CSBV-BJ/2010基因克隆及序列分析

对来自福建、浙江和北京地区的中华蜜蜂囊状幼虫病毒(Chinese Sac Brood Virus,CSBV)进行了PCR鉴定,并对来自北京地区的病毒株CSBV-BJ/2010结构基因片段进行了克隆及系统进化分析。结果表明:RT-PCR方法获得了426bp的cDNA片段;所获得序列与GenBank中CSBV-LN/2009病毒株基因序列相似度达90%;序列系统进化分析表明,不同地理来源蜜蜂囊状幼虫病毒(Sac Brood Virus,SBV)可以分为3类,本实验分离得到的CSBV-BJ/2010序列与Isolate A26non structrual gene进化关系较近,而与其他来自欧洲、亚洲的SBV序列同源性差异较大。推测该病毒可能存在着毒力分化。

重庆中华蜜蜂囊状幼虫病病毒多聚蛋白基因分子特性分析

【目的】分析地处中国南方的重庆地区中华蜜蜂Apis cerana cerana(简称"中蜂")囊状幼虫病病毒(sacbrood virus,SBV)(Ac SBV-S.Chn-CQ)的遗传特性。【方法】采用RT-PCR法对采自重庆23个区县的阳性中蜂幼虫进行SBV多聚蛋白基因扩增、序列测定和序列分析,采用邻接法(neighbor-joining method)基于基因组和基因组片段SB11-SB12构建系统进化树,使用RDP3检测SBV的基因重组。【结果】Ac SBV-S.Chn-CQ与中国南方中蜂SBV(Ac SBV-S.Chn)其他分离株、越南北部东方蜜蜂A.cerana SBV(Ac SBV-N.Vie)、越南北部西方蜜蜂A.mellifera SBV(Am SBV-N.Vie)、韩国东方蜜蜂SBV(Ac SBV-S.Kor)的同源性较高。Ac SBV-S.Chn-CQ在结构蛋白编码区域存在连续51个核苷酸缺失,在非结构蛋白编码区域有3个不连续的核苷酸缺失,与Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor核苷酸缺失相同。Ac SBV-S.Chn-CQ与Ac SBV-S.Chn-FZ,Ac SBV-N.Vie,Am SBV-N.Vie和Ac SBV-S.Kor在亚洲基因型中形成一亚型,亚型内检测到重组事件。【结论】推测Ac SBV-S.Chn-CQ与SBV-N.Vie和Ac SBVS.Kor可能来自一个共同祖先。

蜜蜂囊状幼虫病毒病的Nest-PCR检测

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病,病原为一小正链RNA病毒。如何尽早鉴别蜂群的感染在养蜂业生产上具有重要的意义。本文报道一种利用RNA反转录结合巢式PCR检测鉴定蜜蜂的囊状幼虫病毒病的方法。

中蜂囊状幼虫病病毒部分结构蛋白基因的克隆及序列分析

根据小ＲＮＡ 病毒科（ Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ） 中病毒ＲＮＡ 所具有的结构特征， 采用ｍＲＮＡｃａｐｔｕｒｅ ｋｉｔ 提取纯化中蜂囊状幼虫病病毒（Ｃｈｉｎｅｓｅｓｃａｂｒｏｏｄ ｖｉｒｕｓ ＣＳＢＶ） 的ＲＮＡ， 并以之为ｃＤＮＡ合成的模板． 依据小ＲＮＡ病毒科中的脊髓灰质炎病毒结构蛋白基因序列设计了一对引物ＶＰ５和ＶＰ３ ， 通过ＰＣＲ 扩增获得预期大小约为１ １００ ｂｐ的ＤＮＡ 片段， 将此片段克隆到ｐＧＥＭＴｅａｓｙ载体上并直接测序． 序列分析表明， 该片段为中蜂囊状幼虫病病毒部分结构蛋白基因， 与意蜂幼虫囊状病病毒结构蛋白基因序列的同源性为８６－８ ％ ， 与之对应氨基酸序列的同源性高达９３－４ ％ ．

囊状疣状角化不良瘤

报告1例囊状疣状角化不良瘤。患者男,54岁。左颊部疣状增生物1年余,皮损为0.5cm×0.5cm疣状物,质地较硬。组织病理学检查可见真皮乳头层及网状层上部有一囊腔结构,囊壁为鳞状上皮,局部可见棘层松解及角化不良,囊腔内为角质物,囊壁有放射状排列的基底细胞条索,周围绕有纤维组织。诊断为囊状疣状角化不良瘤。

蜜蜂囊状幼虫病RNA依赖的RNA聚合酶部分基因的克隆和序列分析

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病,病原为一小正链RNA病毒。本试验通过囊状幼虫病的部分基因的克隆及序列分析,发现该序列与广东的囊状幼虫病毒有较高的同源性,但也存在着个别的碱基差异,可能是一种新型的变异囊状幼虫病毒。