应用四唑盐比色法对义齿软衬材料的细胞毒性评价

四唑盐比色法(MTT assay)是通过比色测定细胞数量和活性的新方法.其敏感性与细胞计数法、同位素标记法相似.本文采用该法检测了三种义齿软衬材料(可见光固化、室温固化及热固化义齿软衬材料)对细胞的毒性作用.结果表明,3种材料的50%浓度浸渍液的细胞毒性程度为1～0级,100%浓度浸渍液的细胞毒性程度为2～0级,显示出较低的细胞毒性.

四唑盐比色法评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性

目的评价聚乳酸、聚乙醇酸及其共聚物的细胞毒性。方法采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法MTT比色法,分别检测对聚乳酸、聚乙醇酸细颗粒对小鼠胚胎成纤维细胞相对增殖率的影响,评价其细胞毒性。结果参照美国药典的评价标准,两类医用高分子材料均呈现较高的细胞相对增殖率,其细胞毒性为1级,即无细胞毒性。结论聚乳酸、聚乙醇酸无细胞毒性。

乳酸脱氢酶法和四唑盐比色法对纳米银抗菌凝胶细胞毒性评价的比较研究

目的:采用两种体外细胞毒性方法评价纳米银抗菌凝胶的细胞毒性,旨在评估两种方法在纳米银抗菌凝胶毒性评价中的适宜性及优缺点,为该产品的细胞毒性研究提供技术支持。方法:采用乳酸脱氢酶(LDH)试验和四唑盐比色法(MTT试验)对抗菌凝胶进行细胞毒性评价。结果:MTT试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%系列稀释液细胞相对存活率分别为:1%,2%,1%,27%,89%,96%;LDH试验结果显示抗菌凝胶100%浸提液(0.1g/mL)和70%、60%、50%、40%、20%稀释液的LDH总释放率为:2%,3%,10%,55%,28%,16%。MTT试验的IC50为0.048g/mL,抗菌凝胶IDH试验的LC50为0.051g/mL。结论:两种方法测得的细胞毒性随着试验样品浓度的降低均降低,两者的趋势一致,且其IC50浓度接近,两种方法从不同角度阐明了该产品的毒性,为临床合理用药提供数据支持。

四甲基偶氮唑盐比色法测定原发性肝癌对化疗药物的敏感性

目的:探讨肿瘤药敏试验在肝癌化疗选药中的作用。方法:将12例患者的肝癌组织进行体外培养,以临床常用的9种化疗药物加以干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测化疗药物对癌细胞的抑制率。结果:9种化疗药物对肝癌细胞的抑制率差异有显著性(P<0.01),肝癌对多西他赛高度敏感,对泽菲、顺铂、卡铂、阿霉素、丝裂霉素、5-氟尿嘧啶中度敏感,对羟基喜树碱、健择低度敏感。结论:肿瘤药敏试验对肝癌化疗起重要作用。以MTT法检测相关化疗药物对肝癌细胞的抑制率,优选敏感药物组成化疗方案,可实现个体化治疗,从而提高疗效,减轻不良反应。

裸鼠肾包膜下移植法与四唑盐比色法检测直肠癌对抗癌药物的敏感性

目的 评价SRCA法与MTT比色法测定肿瘤对药物的敏感性试验中的差异 ,探讨引起这种差异的可能原因 ,为临床应用提供理论依据。方法 取新鲜直肠癌标本进行SRCA法及MTT法 ,分为 5 -FU、MMC、MTX组。SRCA法术后第 1、3、5d裸鼠各组分别皮下注射 5 -FU、MMC、MTX ,术后第 6d测定移植肿瘤消退率 ;MTT法各组以相应的药物的血浆峰浓度的 1/10作为试验浓度 ,第 4d测定肿瘤细胞的抑制率。结果 60组肿瘤对化疗药物敏感性结果中 ,符合 2 0对 ,不符合 40对 ,两方法间药物敏感性阳性和阴性结果符合率为 33 3% ,差异有统计学意义。

HSS体外生物学活性测定的MTT比色法优化及改进(英文)

筛选测定HSS体外生物学活性的MTT比色法的最佳实验条件。分析比较不同条件下MTT显色反应的特点 ,确定适用于人肝癌细胞株SMMC772 1的最佳实验条件 ,并采用优化条件检测不同剂量下HSS的体外生物学活性。结果表明SMMC772 1细胞数量与MTT比色法的吸光度成正相关 ,线性良好。正交实验优化条件为 :5× 10 4 cells/ml细胞密度 ,6h后加入HSS ,最适浓度为 10 0 μg/ml,作用 3 6h后加入MTT溶液。MTT用量 5 0 μg ,孵育时间 6h ,DMSO溶解反应产物Formazan ,于5 70nm处测定吸光值。在优化条件下测定HSS体外生物学活性 ,灵敏度明显高于已发表的方法。一定剂量范围内 ,活性随剂量增加而增大 ,超过一定剂量后活性反而下降。应用优化的MTT比色法 ,以SMMC72 2 1细胞株 。

MTT比色法检测人肿瘤细胞辐射敏感性的体外研究

目的探讨MTT比色法在人肿瘤细胞辐射敏感性检测中的价值。方法用1、2、4和8Gy的γ射线照射肝癌细胞(HepG2)、食管癌细胞(EC-9706)和乳腺癌细胞(MCF-7),观察存活分数(SF)和平均致死剂量(D0)。结果γ射线剂量为2、4、8Gy时,HepG2和EC-9706的SF均显著低于MCF-7(P<0·05、<0·01);D0值HepG2(2·36Gy)<EC-9706(2·70Gy)<MCF-7(3·95Gy)。HepG2辐射敏感性最高,MCF-7最低。结论MTT法检测人肿瘤细胞辐射敏感性简便、快捷且准确性较高,对指导临床个体化放疗有重要作用。

MTT比色法的改良及其在LAK细胞活性检测中的应用

目的 :改良四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法 ,并用来检测淋巴因子激化的杀伤细胞 (LAK细胞 )活性。方法 :在MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度测定及效靶细胞不同孵育时间的比较等方面进行研究。结果 :MTT代谢产物甲瓒DMSO溶解后的最佳吸光度为 5 10nm ,效靶细胞最佳孵育时间为 4h。结论 :改良的MTT比色法优于常规的MTT比色法。

羧基荧光素乙酰乙酸与四甲基偶氮唑盐法检测人脐血间充质干细胞刺激脾淋巴细胞增殖作用的比较

目的比较羧基荧光素乙酰乙酸（CFSE）与四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测人脐血间充质干细胞（CB-MSCs）和神经分化的CB-MSCs对大鼠脾淋巴细胞（LCs）刺激作用的敏感程度。方法分别制备刺激细胞和LCs,将刺激细胞分为4组：1.CB-MSCs组;2.Dif-CB-HSCs组：脐血间充质干细胞培养7d后维甲酸（RA）处理4d诱导其神经分化细胞;3.SH-SY5Y组：人源SH-SY5Y细胞（人神经母细胞瘤细胞系）作为阳性对照组;4.Auto-LC组：自体大鼠LCs作为阴性对照组。分别将上述各组刺激细胞与LCs进行混合培养,分别通过酶标仪（MTT法）,流式细胞术（CFSE法）检测LCs增殖情况（n=3）。结果CFSE法和MTT法检测结果均显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组刺激LCs增殖明显弱于阳性对照组（SH-SY5Y细胞组）,但CFSE法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组细胞刺激LCs增殖百分率高于阴性对照Auto-LC组,MTT法检测结果显示,CB-MSCs组和Dif-CB-MSCs组的吸光度（A）值稍低于阴性对照Auto-LC组。结论CFSE法比MTT法能更加客观地...

盐酸多巴酚丁胺注射液细胞毒性研究

目的:比较不同来源盐酸多巴酚丁胺注射液体外细胞毒性的差别,为遴选优质药品、保障用药安全提供科学依据。方法:将不同来源国产盐酸多巴酚丁胺注射液原液以及稀释液,与L929细胞接触培养,通过倒置相差显微镜观察其形态,采用MTT法量化细胞毒性,计算相对增值率和IC50值,进行细胞毒性评价。并将国产盐酸多巴酚丁胺注射液与进口制剂进行比较。结果:8个厂家生产的盐酸多巴酚丁胺注射液原液及进口产品的细胞毒性分级均为4级。不同企业生产的盐酸多巴酚丁胺注射液的IC50值差异较大。盐酸多巴酚丁胺注射液C和F的IC50值较小,说明这两个企业产品的细胞毒性较其他样品大。进口盐酸多巴酚丁胺注射液的IC50值为99.9 mg·L-1,较其他样品高,说明其细胞毒性较其他样品低。进口盐酸多巴酚丁胺注射液中仅添加亚硫酸氢钠一种辅料,国产盐酸多巴酚丁胺注射液中添加的辅料主要为依地酸二钠、亚硫酸氢钠、盐酸半胱氨酸等。按各辅料在国产盐酸多巴酚丁酸注射液中的浓度测其细胞毒性,依地酸二钠、盐酸半胱氨酸和亚硫酸氢钠的细胞毒性分级均为3级。将依地酸二钠的浓度稀释为0.03 mg·ml-1时,其细胞毒性分级为1级,无细胞毒性。将盐酸半胱氨酸稀释到0.11 mg·ml-1时,其细胞毒性分级为1级,基本无细胞毒性。结论:不同厂家生产的盐酸多巴酚丁胺注射液由于生产条件不同、处方不同等原因,这些产品的细胞毒性存在较大的差别。与进口制剂比较,国产制剂中添加的辅料浓度较大,可适当降低其浓度,以减少药物制剂的细胞毒性,从而提高药品的安全性。

一种快速的活菌计数新方法研究

四唑盐（MTT）比色法是一种检测动物细胞活细胞数的方法。通过改变比色反应温度、反应时间和比色波长,建立了一种快速、准确的活菌计数新方法并将其应用于细菌PBW1培养过程中活菌浓度的测定。结果表明,新方法与平板稀释法的测定结果一致,且具有快速、方便等优点。

铜蒸气激光照射下11种光敏剂杀伤强度的比较

目的 检测目前国内常用的和中国科学院化学研究所合成的共 11种光敏剂 ,比较它们对细胞杀伤效应的强弱 ,筛选出适于临床应用的新型光敏剂。方法 将乳腺癌MDAMB 5 4 3细胞接种于 96孔培养板 ,然后加入用RPMI16 4 0培养基配置的不同浓度的不同光敏剂 ,4h后照光 ,2 4h后用四唑盐比色法测定细胞存活率。以血卟啉衍生物 (HpD)作为标准对照。结果 在 5 10 6nm和 5 78 2nm的混合光照射下 ,竹红菌素A(HA)、竹红菌素B(HB)和 5 ,15 二芳基 2 ,3 二羟基卟吩 (DPCOH)比HpD有更强的杀伤效应。血啉甲醚 (HMME)的杀伤效应是HpD的 1 2左右。其他的一些化合物在此波长条件下杀伤效应较差 ,其中一些是因其溶解性不好而不能完全发挥其杀伤效能。

硫化氢对体外大鼠肝星状细胞内Ca^2＋浓度变化及细胞增殖的影响

目的研究硫化氢(H2S)对大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)Ca2+浓度、细胞增殖的影响及其机制。方法活化HSC-T6用含10小牛血清DMEM培养液制备为1×105个肝星状细胞(HSC)悬液。钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后,在不同刺激条件下,利用激光扫描共焦显微镜动态扫描HSC-T6细胞内Ca2+荧光强度(FI)变化,FI表示细胞内Ca2+浓度。四唑盐比色法,观察不同浓度H2S供体——NaSH对HSC-T6细胞增殖的影响。结果低浓度H2S(100μmol/L)明显降低HSC-T6细胞内Ca2+浓度(P<0.05),而细胞增殖增加(增殖率为116);KATP通道阻断剂——格列本脲可阻断H2S的作用。高浓度H2S(1mmol/L)刺激HSC-T6细胞内Ca2+浓度增加,但细胞增殖无明显变化(P>0.05)。结论低浓度H2S通过激活HSC-T6细胞KATP通道降低细胞内Ca2+浓度,可能通过调节细胞氧化应激促进细胞增殖;高浓度H2S刺激HSC-T6细胞内Ca2+浓度增加。提示H2S在肝硬化门脉高压症的发生机制中具有双重作用。

不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响

目的:观察不同强度恒磁场对大鼠主动脉内皮细胞增殖的影响。方法:将体外培养3代的大鼠主动脉内皮细胞分为对照组及不同强度(0.5,1.0,5.0,10.0,100.0,500.0Gs)磁场组。磁场作用时间为48h,用四唑盐比色法测定细胞增殖。结果:与对照组相比,0.5,1.0,5.0Gs磁场组细胞增殖显著高于对照组(分别为0.301±0.023,0.308±0.042,0.294±0.025和0.230±0.026;t=11.20,8.65,7.92;P<0.05);10.0Gs磁场组细胞增殖与对照组相比无明显差异(0.228±0.034和0.230±0.026;t=0.26;P>0.05);100.0Gs和500.0Gs磁场组细胞增殖显著低于对照组(分别为0.173±0.022,0.166±0.015和0.230±0.026;t=9.17,11.68;P<0.05)。结论:0.5～5.0Gs的恒磁场可以促进大鼠主动脉内皮细胞的增殖,而100.0Gs以上恒磁场可抑制内皮细胞增殖。

ADAM28反义核酸对人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶的影响

目的:研究ADAM28反义核酸(AS-ODN)对人牙囊细胞(HDFCs)增殖和碱性磷酸酶(AKPase)活性的影响。方法:采用细胞培养、基因转染、四唑盐(MTT)比色法和酶动力学方法,检测ADAM28反义核酸对牙囊细胞增殖、分化和影响碱性磷酸酶活性的可能机制。实验数据采用单因素方差分析的q检验(SNK)进行统计学分析。结果:ADAM28反义核酸成功转染人牙囊细胞,MTT和AKPase活性检测显示:ADAM28AS-ODN组细胞增殖和AKPase活性均显著低于S-ODN组和空白对照组,其中MTT检测的组间P值分别为0.0002、0.0001,P均<0.01;AKPase检测的组间P值分别为0.0007、0.0003,P均<0.01,即ADAM28反义核酸可显著抑制HDFCs的增殖和AKPase的活性。结论:ADAM28可能通过参与Notch信号途径来促进牙囊细胞的增殖和分化。

牙科氧化锆氧化铝陶瓷复合材料的生物相容性

背景:口腔的生理环境十分复杂,口腔修复体材料长期接触弱酸性体液,处在物理、化学、生物、机械等因素的复杂影响之中。因此,对口腔材料进行生物相容性的评价是进入临床实验前的重点研究内容,也是保证临床安全的重要技术指标。目的:初步评价氧化锆氧化铝陶瓷复合材料的生物相容性。方法:实验分6组:氧化锆氧化铝(1∶1)100%浸提液组、氧化锆氧化铝(1∶1)50%浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)100%浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)50%浸提液组,以及体积分数0.64%苯酚的阳性对照组和100%新鲜培养液的阴性对照组。根据GB-T16886 15-2003医疗器械生物学评价标准和要求进行急性溶血实验、体外细胞毒实验,分别测试以上6组浸提液对兔血细胞、L-929小鼠成纤维细胞的影响。结果与结论:各浓度实验组吸光度值与阴性对照组间均差异无显著性意义(P>0.05),所有实验组的细胞毒性评级均为0-1级;氧化锆氧化铝(1∶1)100%浸提液组、氧化锆氧化铝(4∶1)100%浸提液组溶血率分别为1.27%,2.4%,小于公认的5%的安全标准。结果表明,氧化锆氧化铝(1∶1),(4∶1)陶瓷复合材料急性溶血实验阴性,体外细胞毒实验阴性,均具有良好的细胞相容性和血液相容性。

栀子的化学成分及抗白血病活性研究

目的阐明栀子Gardenia jasminoidesEllis中抗急性淋巴细胞白血病的活性成分。方法用色谱方法分离栀子中化学成分,用波谱技术(IR,ESI-MS,1H-NMR,13C-NMR)进行结构鉴定,用四唑盐(MTT)比色法测定化合物对白血病细胞(HL-60-人早幼粒细胞白血病、REH-人急性淋巴细胞白血病、Raji-淋巴瘤)增殖的影响。结果分离鉴定了8个化合物:β-谷甾醇(1),5-羟基-7,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮(2),熊果酸(3),D-甘露醇(4),栀子苷(5),去乙酰车叶草甙酸甲酯(6),京尼平-1-β-龙胆苷(7),鸡矢藤次苷甲酯(8)。化合物3对3种白血病细胞增殖均表现出了一定的抑制作用,其中对REH细胞系抑制活性最强,IC50为7.5μg/mL。结论化合物3具有抗急性淋巴细胞白血病的作用。