基于四甲基联苯胺和吖啶橙间荧光共振能量转移的比率型荧光测定左氧氟沙星

基于3,3’,5,5’(四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)和吖啶橙(AO)之间荧光共振能量转移(FRET),建立了一种快速、低背景干扰、高灵敏度测定盐酸左氧氟沙星(LVF)的新型比率型荧光探针。在pH 5.0 NaAc-HCl缓冲溶液中,在310 nm的光激发下,TMB在350~500 nm处的荧光光谱和AO的吸收光谱重叠。以TMB作为能量供体,AO作为能量受体,构建了FRET体系。根据能量转移理论,该体系的荧光共振能量转移效率为62.5%,供体-受体间距离为2.17 nm,进一步说明TMB和AO之间发生了FRET。当在体系中加入LVF后,TMB将荧光能量转移给LVF,LVF又作为供体将能量转移给AO。LVF在TMB和AO之间起到桥梁作用,LVF将吸收的TMB荧光能量转移给AO,使得TMB荧光强度明显降低,AO的荧光强度则显著增加,从而提高了体系的FRET效率。在最优实验条件下,F546 nm与F402 nm之比与LVF浓度(2~80μmol·L^(-1))之间存在良好的线性关系,线性回归方程为F_(546 nm)/F_(402 nm)=87.916c+3.108,线性相关系数为0.9993,检出限(LOD)为15.7 nmol·L^(-1)。一些常见的阳离子(K^(+),Mg^(2+),Ca^(2+),Cu^(2+),Mn^(2+),Zn^(2+),Co^(2+),Ni^(2+),Cr^(3+)等)、阴离子(F^(-),Br^(-),NO_(3)^(-),IO_(3)^(-),CO_(3)^(2-),SO_(4)^(2-)等)、糖类(葡萄糖,蔗糖和淀粉)、药物(谷胱甘肽,抗坏血酸和异烟肼)和几种氨基酸(甘氨酸,亮氨酸,半胱氨酸等)均不干扰LVF的测定,表明该比率型荧光探针对LVF具有高选择性。该方法用于商用药物制剂中LVF含量的测定,加标回收率在93%~97%之间。该比率型荧光探针在临床研究中对LVF的检测具有较大的应用潜力,为开发一种简便、选择性和灵敏的检测药物制剂中LVF含量的传感器提供了较好的理论依据,同时为提高LVF临床用药的安全性与合理性水平提供了一定的方法。

四甲基联苯胺催化荧光法测定葡萄糖氧化酶活性

基于四甲基联苯胺(TMB)催化荧光法测定葡萄糖氧化酶(GOD)活性。在pH 4.5的乙酸盐缓冲液及37℃水浴条件下,GOD作用下的葡萄糖定量生成H_(2)O_(2),当有Fe^(2+)存在时,H_(2)O_(2)氧化TMB生成具有较强荧光信号的TMB氧化产物(TMBox),TMBox荧光强度与GOD活性有关联。分析过程分3个阶段:创建H_(2)O_(2)标准曲线方程;完成酶催化反应和TMB荧光反应;测定TMBox荧光强度。结果表明,GOD活性检测范围为3.33×10^(-5)~3.33×10(-3)U/mL,检测限(3σ/k)为1.11×10^(-6)U/mL。所建立方法具有操作简单、方法灵敏度高和成本低的优点。利用TMB催化荧光法测定了食品添加剂中GOD的活性,加标回收率在94.60%~102.0%之间。

以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺为底物的伏安酶联免疫分析体系研究

对 3 ,3′,5 ,5′ 四甲基联苯胺 (TMB) H2 O2 辣根过氧化物酶 (HRP)伏安酶联免疫分析体系进行了研究。HRP催化H2 O2 氧化TMB ,其氧化产物在汞电极上可以发生还原反应 ,在B R缓冲溶液中 ,-0 .76V(vs.SCE)处产生较为灵敏的伏安波。将此伏安波应用于测定HRP和HRP的标记物。测定HRP的线性范围为 6.0×1 0 - 1 1 ～ 5 .0× 1 0 - 9g mL ,检测限为 5 .0× 1 0 - 1 1 g mL。

一种稳定、灵敏且适用于ELISA的四甲基联苯胺底物

目的评价一种适用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的即用型自制四甲基联苯胺(TMB)底物的特性。方法比较1-Step Turbo TMB底物、A/B两组分混合物底物和自制底物与不同稀释度酶标抗体的反应性及其对包被抗体的检测敏感性,对1-Step Turbo TMB底物和自制底物进行稳定性比较。结果 3种底物的吸光度(A)值均随着酶标抗体稀释度的增大而显著下降;当酶标抗体稀释度相同时,自制底物的A值显著高于另外2种底物(P<0.05);在直接ELISA条件下,自制底物对包被抗体的检测敏感性可达15.63 ng/mL;自制底物37℃贮存60 d后的A值仍高于1-Step Turbo TMB底物37℃贮存5 d的A值。结论该即用型自制TMB底物在检测敏感性及稳定性上优于1-Step Turbo TMB底物。

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺-β-环糊精包合物性质的研究

3,3′,5 ,5′-四甲基联苯胺 ( TMB)是一种联苯胺类色原试剂 ,具有良好的氧化还原性 ,将 TMB包合于β -环糊精腔内 ,由于超分子化合物的形成而使 TMB的反应性有所改变。本文采用紫外 -可见吸收光谱和电化学方法研究了 TMB和β -环糊精形成的包合物的性质。研究表明形成包合物后 ,无论在溶液体系还是在电极表面 ,其氧化还原活性得到明显的加强。

3,3',5,5'-四甲基联苯胺的合成

３，３′，５，５′－四甲基联苯胺的合成ＳＹＮＴＨＥＳＩＳＯＦ３，３′，５，５′┐ＴＥＴＲＡＭＥＴＨＹＬＢＥＮＺＩＤＩＮＥ廖联安郭奇珍（厦门大学化学系，福建３６１００５）ＬＩＡＯＬｉａｎ－Ａｎ，ＧＵＯＱｉ－Ｚｈｅｎ（Ｄｅｐｔ．ｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｘ...

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺紫外分光光度法测定水中NO_2^-

基于 p H=3.6的 HAc- Na Ac介质中 ,3,3′,5 ,5′-四甲基联苯胺 (TMB)与 NO-2 定量反应生成的TMB- TMB亚胺电荷迁移络合物在 370 nm处具有最大吸收峰 ,建立了一种紫外分光光度测定 NO-2 的新方法。方法线性范围为 0— 1.2 mg/L,表观摩尔吸光系数为 4 .6 9× 10 4L·mol-1·cm-1,该法应用于电镀废液和水样中 NO-2 的测定 。

一个催化氧化四甲基联苯胺荧光测定超痕量铁的新方法

铁是一种必需的微量元素,它在生命过程中起着重要的作用,但是摄入过多的三价铁会使机体的载氧能力下降,引起不稳定血红蛋白病以及高铁血红蛋白症等疾病。无论是从人类健康还是环境保护角度出发,探究简便、快速、灵敏度高和选择性好的检测Fe(Ⅲ)的分析新方法很有意义。荧光分析是一种优异的分子光谱分析方法,具有灵敏度高、选择性强、操作简单等特点,在重金属离子的检测方面也取得了较好的进展,目前利用荧光法测定Fe^3+也有报道,但有的灵敏度不高,有的选择性不好,有的试剂毒性较大。报道了一种简单、快速、灵敏检测Fe(Ⅲ)的四甲基联苯胺(TMB)荧光分析新方法。在pH4.5 Tris-HCl缓冲液及35℃水浴条件下,H2O2氧化无毒易得的四甲基联苯胺(TMB)这一反应较慢;当有痕量Fe(Ⅲ)存在时,它催化过氧化氢(H2O2)氧化TMB生成具有较强荧光活性的TMB氧化产物(TMBox),用激发波长280nm激发,TMBox在405nm处有一个较强的荧光峰,且在一定的范围内,随着Fe(Ⅲ)浓度的增大,其荧光强度线性增强。采用单变量变换法优化了荧光分析条件,选择Tris-HCl缓冲溶液的pH为4.5,其浓度为3.3×10^-4mol·L^-1,TMB浓度为3.0×10^-5mol·L^-1,H2O2浓度为6.0×10^-6mol·L^-1,在35℃条件下反应35min。在选定条件下,Fe^3+浓度在0.027~400nmol·L^-1范围内,随着Fe^3+浓度的增大,体系在405nm处的荧光信号线性增强,其线性方程为ΔF405nm=2.31c+5.0,线性相关系数R2为0.985,其检出限为0.008nmol·L^-1。考察了共存物质对测定200nmol·L^-1 Fe(Ⅲ)的影响。结果表明,当相对误差在±10%之内,20μmol·L^-1的HCO3^-,K^+,SO4^2-,NH4^+,Mn^2+,Na^+,Cu^2+,Al^3+,Zn^2+,F^-,Mg^2+,Ba^2+,Ca^2+,Co^2+,NO3^-,NO2^-,10μmol·L^-1的CO3^2-,Cr^6+,2μmol·L^-1的Hg2+,BSA不干扰测定。表明该法具有较好的选择性。据此,建立了一个简单、快速、灵敏高、选择性高的测定Fe(Ⅲ)的荧光分析新方法。按以下步骤制备了乳制品的样品溶液,准确吸取1.4mL乳制品加入600μL乙酸(V/V=3%),于10000r·min^-1下离心3min,然后吸取离心上清液1mL加入48μL 2.5mol·L^-1 NaOH定容至2mL,于10000r·min^-1下离心3min,最后吸取1mL上清液稀释至5mL得到样品溶液。然后采用该催化荧光分析新方法测定了牛奶样品中Fe(Ⅲ)含量,结果令人满意,其相对标准偏差为0.29%~0.41%,回收率为94.6%~108.0%。

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺-H_2O_2-HRP分光光度法测定HRP的研究

研究了3,3′,5,5′四甲基联苯胺(3,3′,5,5′tetramethylbenzidine,TMB)H2O2辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)分光光度法测定HRP的方法和酶催化反应机理。在辣根过氧化物酶的催化作用下,H2O2氧化3,3′,5,5′四甲基联苯胺生成有色偶氮化合物,以分光光度计在λmax=380nm处测其吸光度值可以间接测定HRP的含量。此法用于测定游离的HRP,线性范围为4×10-12～4×10-9g/mL,检出限为4×10-12g/mL,与同类方法相比灵敏度提高了2个数量级。

3,3’,5,5’-四甲基联苯胺现场测定游离余氯的质控与应用

用3,3',5,5'-四甲基联苯胺替代邻联甲苯胺测定游离余氯,测定控制的条件也发生了一些变化.如何在现场测定时控制这些条件,既方便又能保证测定结果的准确性,是我们进行这次比对实验的目的.本实验按照<生活饮用水卫生规范>(下称规范)、GB 5750-85<生活饮用水卫生标准检验方法>(下称标准)的要求,对两种方法进行比对,寻找结果一致性的应用质控点,方便现场测定的应用和控制.

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺在铂网栅光透电极上的薄层光谱电化学

采用薄层循环伏安法、薄层恒电位电解吸收光谱法、薄层单电位阶跃计时吸收法、薄层双电位阶跃计时吸收法等技术对3, 3′, 5, 5′-四甲基联苯胺(TMB)在B R缓冲溶液中于铂网栅光透电极上的电氧化性质进行了研究。TMB在pH=2 .0至pH<4 .0的B R缓冲溶液中为1步2电子电氧化过程,生成产物醌二亚胺,循环伏安图上表现为1对良好的氧化还原峰;在pH=4 0至pH<7. 0时为分步的2个单电子氧化过程,TMB首先被氧化为中间产物TMB自由基,然后自由基再被氧化为醌二亚胺,在循环伏安图上出现2对氧化还原峰;在pH>7 .0时为1步电氧化过程,产物为偶氮化合物,循环伏安图上为1对良好的氧化还原峰。测得了TMB的克式量电位E0′,电子转移数n。

3,3’,5,5’-四甲基联苯胺吸光光度法测定水中NO_2^--N

提出用3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)吸光光度法测定水中NO_2^--N.在HOAc-NaOAc缓冲液(pH3.6)中,TMB与NO_2^-反应生成蓝色的TMB-TMB亚胺传荷络合物.其最大吸收波长为650nm,表观摩尔吸光系数为2.59×10~4,NO_2^--N在0～0.5μg·ml^(-1)范围内服从比耳定律.运用此法测定了环境水样并进行了加标回收试验,结果满意.

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺比色法测定饮用水中余氯

针对采用GB/T 5750.11—2006生活饮用水标准检验方法中的3,3′,5,5′-四甲基联苯胺目视比色法检测余氯时出现的问题,探讨了四甲基联苯胺配制的介质浓度及配制方法,以及pH值、温度、显色时间、显色剂用量等因素对测定过程的影响,改进了生活饮用水中余氯的测定方法。

潜血手印四甲基联苯胺显现法的改进

对四甲基联苯胺显现潜血手印在实际工作中遇到的不足进行了优化,结合案例,运用比较的方法说明优化前后显现效果的不同。

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺与钼磷酸纳米晶分子杂化材料的合成与表征(英文)

以3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)与Keggin结构钼磷酸H3PMo12O40杂化,合成得到新型分子杂化材料,经元素分析及IRI、CP、XRD等手段表征,确定其分子结构为(TMB)3PMo12O40,TEM显示该分子杂化材料颗粒直径在40nm^60nm,分布均匀,属球形颗粒纳米晶,UV-vis和ESR谱证明(TMB)3PMo12O40分子杂化材料为电荷转移型超分子化合物,并具有显著的光敏性和电催化活性。

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺-H_2O_2-HRP差分脉冲伏安法测定HRP及其标记物的研究

目的:研究3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(3,3′,5,5′-tetramethyl benzidine,TMB)-H2O2-辣根过氧化酶(horseradish peroxidase,HRP)体系中HRP及其标记物含量的电化学检测方法,并探讨了反应机制。方法:HRP催化H2O2氧化TMB生成偶氮化合物,在磷酸盐缓冲液中用差分脉冲伏安法检测到0,1V左右产生灵敏的电流峰,据此可检测HRP含量。结果:测定HRP线性范围为1.1×10-13g/ml至5.0×10-11g/mL,检测限为8.7×10-13g/ml。结论:建立了一种简单、低成本的检测HRP及其标记物的方法。

3,3′,5,5′-四甲基联苯胺分光光度法测定水中的微量二氧化氯

提出了 3,3′,5 ,5′-四甲基联苯胺 (TMB)分光光度法测定二氧化氯的新方法 ,在 p H≤ 2的盐酸介质中 ,最大吸收波长为 4 5 0 nm,表观摩尔吸光系数为 1.0 4× 10 5L· mol-1· cm-1,线性范围 0 .0 1— 0 .6mg· L-1。该方法用于自来水中微量二氧化氯的测定 ,结果令人满意。

3,3',5,5'-四甲基联苯胺比色法测定总氯方法研究

针对3,3',5,5'-四甲基联苯胺目视比色法测定水中的总氯存在样品显色后溶液的颜色与永久性余氯标准色列不一致,以及高浓度样品检测结果准确性差的问题,从提高水浴温度、增加显色剂用量和延长反应时间等三个方面进行改善。结果表明,水浴温度由原来的30℃提高到60℃以及显色时间由原来的10 min延长至6 h,均可有效减少样品显色后与永久性余氯标准色列之间存在的色差,可以提高样品检测结果的准确性。但是,延长反应时间会造成检测时间过长,不易于操作。

3,5,3’,5’-四甲基联苯胺的合成

国内未见3,5,3’,5’-四甲基联苯胺的合成报道,作者首次在实验室合成成功,并由实验证明可用于神经组织的酶标结合物的研究。