用于固相放射免疫分析的一类聚合物NHS酯的合成与表征

将NHS(N 羟基琥珀酰亚胺 )酯功能基团引入高分子载体上 ,合成了几种聚合物的NHS酯 .研究了合成单体NHS酯及聚合物NHS酯的合成条件 ,测试了NHS酯及聚合物NHS酯的基本特性 .该聚合物NHS酯可在温和条件下与蛋白反应 ,使蛋白以共价键结合方式固定在聚合物上 。

Leptin固相放射免疫分析法的建立

目的:研究瘦素(Leptin)固相放射免疫分析法的建立。方法:将提取的兔抗人Leptin特异性抗体IgG,包被在活化的塑料试管内壁,建立了简便、快速、高灵敏、特异的固相竞争RIA,测定人血清Leptin。结果:标准曲线范围为(0.5～24)ng/ml;测定69例健康人血清正常值为(3.68±1.46)ng/ml;最小检出值为0.38ng/ml,批内CV%为5.6%,批间CV%为8.8%;回收率为92%。本文所建方法与液相RIA标准曲线具有良好的平行性;使用两种方法平行测定88份血清Leptin浓度(1.00～7.68)ng/ml,经统计学处理两者之间具有良好的直线相关(r=0.987,P<0.001,Y=0.977X)。结论:所建立的Leptin固相放射免疫分析法为科研及临床病人血清Leptin浓度的测定提供了一种新的检测方法。

血清游离甲状腺素(FT_4)双抗固相放射免疫分析方法的建立

利用双抗固化试管建立了检测血清中游离甲状腺素（ＦＴ４）的固相放射免疫分析方法。游离ＦＴ４和１２５Ｉ标记的ＦＴ４类似物竞争与包被管上的固化抗体结合。检测可以在２ｈ内完成。检测范围为０．１２－７５ｐｍｏｌ／Ｌ。批内、批间平均变异系数分别为１．７％－４．４％和３．２％－９．１％。非特异性结合小于１％。该分析与商品ＦＴ４标记抗体ＲＩＡ分析药盒比较，线性回归斜率为１．０８，截距２．３，相关系数为０．８５。该方法操作简便、重复性好，多项分析指标优于常规的放免分析方法，为一种简便、精密和准确的分析方法。

固相放射免疫分析法检测ABO血型

固相放射免疫分析(Solid Phase Radioimmurloflssay，RIA)是一种既具有抗原抗体相结合的特异性好，又具有放射性同位素的灵敏度高的优点的方法。设法在其他学科中已得到某些应用，但在法医生物学领域中尚未见报道。本实验对该法在血液的ABO血型测定的应用作了初步探讨。

睾酮固相放射免疫分析方法的建立

目的建立一种睾酮固相放射免疫分析方法,实现睾酮液相放射免疫分析药盒的固相包被管分离。方法利用本公司专利技术纯化出亲和纯驴抗兔抗体,将其包被于聚苯乙烯试管上,兔抗-睾酮抗体能与驴抗兔抗体结合而被间接包被上,从而制备出睾酮抗体包被管,再采用标准抗原与标记抗原竞争包被在聚苯乙烯试管上定量抗体的技术思路,建立睾酮固相放射免疫分析方法。结果睾酮抗体包被管中亲和纯驴抗兔抗体包被浓度为20μg/m L,兔抗-睾酮抗体包被滴度为1∶5万;本方法的反应条件为37℃温育1h,测量范围为0.1~20 ng/m L,灵敏度为0.02 ng/m L,批内变异为4.37%~6.84%,批间变异为6.31%~9.03%,回收率为93.6%~104.1%,稀释实验测定值与理论值呈线性相关,相关系数为r=0.999;与合格睾酮液相放射免疫分析药盒的相关性方程为Y=1.05X+0.01,相关系数r=0.982;睾酮抗体包被管、125I-睾酮标记物以及睾酮标准品在37℃存放1周稳定性良好。结论本方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。

乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒的研制

以聚苯乙烯小球为固相载体,在小球表面包被一层基因工程制备的乙型肝炎核心抗原(HBcAg),以125I标记的乙型肝炎核心抗体(125I-Anti-HBc)作为标记物,采用固相放射免疫竞争法研制成乙型肝炎核心抗体放射免疫定量试剂盒(Anti-HBc-RIA)。本试剂盒的灵敏度为0.8NCU/mL,批内变异系数<9.9%,批间变异系数<13.8%,回收率为92.6%～109.2%。正常参考值为0～2.0NCU/mL。

应用固相RIA和ELISA测定血浆孕酮浓度监测黄牛产后卵巢机能

应用固相孕酮放射免疫分析法(固相P_4-RIA)和酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定血浆孕酮(P_4)浓度,监测黄牛产后卵巢机能。结果表明,鲁西黄牛产后12.3d前血浆P_4处于基础水平,RIA和ELISA测值分别为0.38±0.12～0.63±0.21和0.17～0.54±0.24ng/mL。其后P_4水平开始上升,母牛出现卵巢活动。代表卵巢活动的P_4曲线可分为4种类型;Ⅰ型,产后10.6±3.9d后,出现3个正常黄体周期;Ⅱ型,产后13.6±4.4d以后首先出现一个8.5d左右的短黄体期,接着出现正常黄体周期;Ⅲ型,产后12.5±3.9d开始出现正常黄体期,接着出现一个短黄体期和一个正常黄体期;Ⅳ型,产后12.5±2.5d后,出现正常黄体期,以后变为短黄体周期。在黄体周期中,最低P_4水平为0.51±0.16(RIA)和0.62±0.21(BLISA)ng/mL,最高P_4水平为5.17±2.15(RIA)和5.09±2.18(ELISA)ng/mL。从方法学上进行比较,固相P_4-RIA和ELISA的测定结果具有很强的相关性 (r=0.9987)。

活产新生儿脐血17α-羟孕酮正常值探讨

血17α-羟孕酮(17α-OHP)测定是诊断和筛查新生儿先天性肾止腺皮质增生症(CAH)的可靠指标。CAH为遗传性分子代谢病。遗传方式AR。故再次妊娠复现率高达25％。临床表现可为女性男性化,男性性早熟,并伴有水电解质紊乱,严重者在幼儿期死亡。如能早期诊断、早期治疗,患儿能正常发育。因此发达国家已将同一新生儿足跟滤纸干血片共用于CAH、甲低和PKU的筛查。本文报告800例活产新生儿脐血17α-OHP固相放射免疫测定结果,以供临床参考。