血清垂体腺苷酸环化酶激活多肽与绝经后骨质疏松症严重性的相关性研究

目的检测绝经后骨质疏松症(PMOP)患者的血清垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)水平,探索其与PMOP严重程度间的相关性,为诊疗提供借鉴。方法纳入某院123例PMOP确诊患者为试验组,以120例绝经后非骨质疏松症患者为对照组。比较2组患者的血清PACAP、骨转换标志物I型胶原氨基端延长肽(PINP)、I型胶原羧基末端肽(CTX-I)水平以及全髋关节、腰椎1~4节和左股骨颈骨密度;对椎体骨折进行分级并测量疼痛程度;测试6 min步行试验及重复坐立试验功能状态;评价血清PACAP水平与其他参数之间的相关性。结果研究组血清PACAP水平、全髋关节、腰椎1~4节和左股骨颈骨密度均低于对照组;椎体骨折患者血清PACAP水平低于非骨折患者,且血清PACAP浓度与Genant分级水平呈负相关(r=-0.54);研究组患者的血清PACAP水平与左股骨颈、全髋关节、腰椎1~4节骨密度、6 min步行试验、重复坐立试验、血清PINP水平均呈正相关(r=0.33~0.39),与NRS评分、血清CTX-1水平呈负相关(r=-0.34、-0.50);以上差异均有统计学意义(P值均<0.01)。结论PMOP患者血清PACAP水平显著低于PMNOP患者,且血清PACAP水平降低与疾病严重程度有关,表明PACAP可能在PMOP进展中起到了保护性作用。

基于垂体腺苷酸环化酶激活多肽在帕金森动物模型中的神经保护作用及机制探索

目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)在帕金森病(PD)动物模型中的神经保护作用及机制。方法SD大鼠设置假手术组(Sham组)、PD组(帕金森造模组)、PD+PACAP_低浓度组(造模+按体重5μg/kg予PACAP鼻腔给药)、PD+PACAP_中浓度组(造模+按体重10μg/kg予PACAP鼻腔给药)、PD+PACAP_高浓度组(造模+按体重20μg/kg予PACAP鼻腔给药) 5组,最终每组纳入10只。四个PD组将脂多糖溶液注射至SD大鼠黑质中建立PD模型,假手术组同法操作但注射生理盐水。通过转棒法检测大鼠行为学表现;ELISA法检测黑质谷氨酸浓度(Glu)和α-突触核蛋白(α-syn)水平,WB法检测黑质α-syn及核因子激活的B细胞的κ-轻链(NF-κB)、核因子κB抑制蛋白α (IκBα)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应法(qPCR)检测大鼠黑质炎症因子肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6IL-6的mRNA表达水平;WB法和免疫荧光法检测核转录因子胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平来观察星形胶质细胞的活化水平,TUNEL法检测黑质神经元的凋亡情况。结果 (1)行为学结果显示,在转棒实验中,与Sham组比较,PD组潜伏期缩短,掉落次数增加(37.20±5.27次/min);与PD组比较,PACAP组潜伏期延长,掉落次数减少(14.50±2.32次/min),PACAP治疗组的潜伏期和掉落次数随着PACAP浓度的增加而潜伏期可以更长,掉落次数可以更少(P<0.001)。(2)星形胶质细胞激活相关指标显示,PD组GFAP表达水平和黑质神经元的凋亡数量较Sham组显著升高;PACAP治疗组上述指标随着PACAP的浓度增加而显著减低(P<0.01)。(3)黑质神经炎症指标显示,与Sham组比较,PD组NF-κB含量及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA显著升高,IκBα含量显著降低;PACAP治疗组NF-κB含量及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA随着PACAP的浓度增加而减低,IκBα含量随着PACAP的浓度增加而升高(P<0.01)。(4) PD疾病特征指标显示,PD组谷氨酸和α-syn含量均较Sham组显著升高,3个PACAP组的上述指标较PD组显著降低;PACAP治疗组的上述指标随着PACAP的浓度增加而递减(P<0.01),以PD+PACAP_高浓度组效果最为明显。结论 PACAP在PD模型中具有神经保护作用,其机制可能为通过抑制星形胶质细胞激活来减轻神经炎症的发生。

血垂体腺苷酸环化酶激活肽38表达与冠心病患者经皮冠状动脉介入术后需再次血运重建的相关性研究

目的分析冠心病患者行经皮冠状动脉介入(PCI)术后血垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)-38的表达及与需要再次血运重建的相关性。方法抽取焦作市第二人民医院心内科二区于2016年1月至2017年6月PCI术后因胸痛复查的冠心病患者114例作为研究对象,基于复查结果分为再次血运重建组40例和非再次血运重建组74例,比较两组基线资料、心脏标记物、血流动力学指标和血PACAP-38 mRNA表达。多因素logistic分析再次血运重建的风险和保护因素,ROC曲线计算血PACAP-38 mRNA的预测价值。结果与非再次血运重建组比较,再次血运重建组患者的高敏肌钙蛋白I(hs-cTnI)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和脂蛋白a[Lp(a)]表达显著升高,而射血分数(EF)、每搏输出量(SV)、左室缩短分数(FS)和局部射血分数(REF)显著降低(均为P<0.05)。再次血运重建组患者的PACAP-38 mRNA相对表达显著低于非再次血运重建组(439.85±85.56比625.55±75.21,t=4.896,P=0.0006)。Killip分级越高,冠心病患者PCI术后血PACAP-38 mRNA表达越低(P<0.05)。完全血运重建患者的血PACAP-38 mRNA表达显著低于不完全血运重建患者(357.52±72.31比454.52±86.35,t=3.073,P=0.0106)。Pearson相关性分析显示,再次血运重建患者的PACAP-38 mRNA表达与hs-cTnI、CK、LDH、TG、TC、Lp(a)、纤维蛋白原和N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)呈显著负相关性,而与EF、SV和REF呈显著正相关性(均为P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,hs-cTnI、CK、LDH、冠状动脉病变血管数、Lp(a)、NT-proBNP、左室舒张末内径、吸烟和高血压均是冠心病患者PCI术后需要再次血运重建的独立预测危险因素,而PACAP-38、REF、EF和SV是独立预测保护因素(均为P<0.01)。ROC曲线显示,PACAP-38 mRNA表达对冠心病患者PCI术后再次血运重建和是否完全血运重建具有预测价值。结论冠心病患者PCI术后血PACAP-38 mRNA<443.50时有再次血运重建风险。

正常小鼠离体胰岛功能与垂体腺苷酸环化酶激活肽-38的关系

目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38(pituitaryadenylatecyclaseac-tivatingpolypeptide-38,PACAP-38)对离体正常小鼠胰岛功能的影响。方法:用胶原酶和DNA酶联合消化法分离NMRI小鼠胰岛,RPMI1640组织培养液过夜培养,采用MilliporeMultiscreen系统观察不同浓度PACAP-38对胰岛功能的影响。放免法测定孵育液中胰岛素和胰高血糖素浓度。结果:①离体胰岛胰岛素的分泌依赖于孵育液中葡萄糖的浓度,PACAP-38显著刺激胰岛素的释放,且刺激强度依赖于葡萄糖浓度和自身浓度。当孵育液中葡萄糖浓度为5mmol/L时,PACAP-38在1×10-9mmol/L以上才能显著刺激胰岛素分泌犤(6.12±0.26)fmol/(min·胰岛)犦;而当孵育液中葡萄糖浓度为10mmol/L时,PACAP-38在1×10-11mmol/L就可显著刺激胰岛素分泌犤(22.87±1.35)fmol/(min·胰岛)犦(t=4.2271～7.7944,P<0.01)。②离体胰岛胰高血糖素的分泌明显受到孵育液中葡萄糖的浓度的抑制。在低糖环境(葡萄糖浓度在0和2.5mmol/L时)中,1×10-9mmol/LPACAP-38可显著抑制胰高血糖素的分泌,且其抑制作用呈明显的浓度依赖型(在葡萄糖浓度为0mmol/L时,IC50=1×10-10mmol/L)。而当孵育液中葡萄糖浓度为5和10mmol/L时,1×10-9mmol/LPACAP-38对胰高血糖素分泌的抑制作用消失。

垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻大鼠缺血性脑水肿作用的实验研究

目的 :研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)在缺血性脑水肿中的作用及其可能的受体机制。方法 :采用大鼠四动脉结扎脑缺血模型 ,分别运用干湿重法和酶学法测定脑组织含水量及Na+ 、K+ 含量。结果 :大鼠四动脉结扎脑缺血 30min ,再灌流 1h ,脑组织含水量明显增加 ,Na+ 含量增高 ,而K+ 含量降低。缺血前经测脑室分别给予 1× 10 -9mol、1× 1110 mol及 1× 11-11mol的PACAP均能抑制脑组织含水量、Na+ 含量的增加和K+ 含量的降低。特异性PACAPⅠ型受体拮抗剂PACAP6 38能完全阻断PACAP的上述作用 ,而单纯给予PACAP6 38对脑缺血后脑组织含水量、Na+ 、K+ 含量无显著影响。结论 :外源性PACAP对缺血性脑水肿具有保护作用 ,该作用是由I型受体介导的。

垂体腺苷酸环化酶激活肽对家兔实验性动脉粥样硬化血管重塑的影响

为探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽对家兔动脉粥样硬化血管重塑的影响 ,将 6 0只新西兰雄性家兔随机等分为正常对照组、动脉粥样硬化组和垂体腺苷酸环化酶激活肽组 ,分别于实验的第 4、8和第 12周末随机处死每组家兔各 5～ 8只并取胸主动脉。在上述动脉条的头、中、尾部各截取约 0 .5cm长的组织作石蜡切片 ,苏木素—伊红染色 ,光镜下观察并用图像分析系统测量相关形态学参数。余下的动脉条用苏丹Ⅳ染色 ,作大体形态观察。结果发现 ,随时间延长 ,动脉粥样硬化组斑块面积逐渐增大 ,斑块检出率逐渐增加 (P <0 .0 5 ) ,且斑块多分布于头段 ,而中段、尾段依次减少。管腔面积在早期斑块形成时并无改变 ,晚期则明显缩小 (P <0 .0 5 )。垂体腺苷酸环化酶激活肽组斑块面积、斑块最大厚度均小于同期动脉粥样硬化组 ,而管腔面积则大于动脉粥样硬化组 (P <0 .0 5 )。

垂体腺苷酸环化酶激活多肽38及其衍生物的表达、纯化和活性

目的提高垂体腺苷酸环化酶激活多肽38(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 38,PACAP38)的体内稳定性、延长其生物学活性。方法对PACAP38的氨基酸序列进行改造(命名为PACAP38衍生物cPACAP38),并根据大肠杆菌密码偏爱性设计并合成PACAP38及其衍生物的基因片段;分别将两基因片段克隆至表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经镍离子亲和层析纯化,肠激酶切割获得目的多肽;通过小鼠饮食抑制试验比较两多肽的体内活性;长期给药观察小鼠腹腔糖耐量及小鼠血清甘油三酯、HDL、LDL和胆固醇的变化。结果两种融合蛋白Trx-PACAP38和Trx-cPACAP38的表达量分别占菌体总蛋白的22%和25%,为可溶性表达,纯化后纯度分别为90%和98%;PACAP38及cPACAP38均有抑制小鼠饮食的作用,cPACAP-38的效果优于PACAP38;连续给药10 d后,小鼠腹腔糖耐量、血清甘油三酯、HDL、LDL、胆固醇均无明显变化。结论已成功获得体内活性更稳定的PACAP38衍生物,为PACAP38的基础研究及应用奠定了基础。

垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究

根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 .

垂体腺苷酸环化酶激活肽38对急性放射性心肌损伤的防护作用

目的·探索垂体腺苷酸环化酶激活肽38(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 38,PACAP38)对心肌细胞辐照敏感性的影响及对急性放射性心肌损伤的潜在防护作用。方法·采用H9C2大鼠心室肌母细胞和C57BL/6J小鼠应用6 MVX射线在体内外构建放射性心肌损伤的辐照模型。在辐照之前对H9C2细胞和C57BL/6J小鼠进行不同剂量的PACAP38预处理。PACAP38在H9C2细胞中的作用浓度为10-9和10-7mol/L,在辐照前2 h给予。在小鼠中,分别在辐照前2 h、辐照后24及48 h给予10μg PACAP38(0.1μg/μL×100μL)腹腔注射。体内外放射性心肌损伤辐照模型分为对照组、PACAP38单独处理组、辐照(irradiation,IR)组和PACAP38+IR组。体外实验辐照剂量为2、4、8及12 Gy;体内实验辐照剂量为14 Gy,单次辐照。应用CCK-8实验检测细胞活力;通过克隆形成实验检测辐照敏感性变化;利用苏木精-伊红染色评估小鼠单心脏辐照1个月后心肌组织结构的病理改变。结果·PACAP38预处理H9C2心肌细胞组较单独IR组(12 Gy)的细胞活力显著提高,其中10-7mol/L PACAP38+IR组和IR组分别为(98.63±2.70)%和(83.67±0.78)%,差异有统计学意义(P=0.000)。2 Gy时的细胞存活率在10-9和10^(-7)mol/L PACAP38预处理后从0.53增加至0.63和0.70,放射增敏比在10^(-9)和10^(-7)mol/L PACAP38处理组分别为0.95和0.91。通过体内研究发现,PACAP38干预对辐照(14 Gy)后小鼠的心肌组织的病理损伤包括心肌细胞变性、嗜酸性增强、细胞质空泡化、细胞核固缩及心肌纤维扭曲均具有显著的缓解作用。结论·PACAP38干预后可明显降低心肌细胞的辐照敏感性,对急性放射性心肌损伤具有一定的防护作用。

垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻一氧化氮介导的谷氨酸神经毒作用

研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 ( PACAP)是否通过作用于一氧化氮 ( NO)代谢途径 ,减轻谷氨酸的神经毒作用。取新生 SD大鼠海马 ,用 B2 7无血清培养基培养神经元 ;重氮化反应法测定 NO浓度 ,MTT法测定神经元存活率 ,PACAP能减少谷氨酸引起的海马神经元死亡 ;谷氨酸呈剂量依赖性地增加海马神经元培养液中 NO的含量 ,PACAP能不同程度地减少 NO的含量 ;分别给予 2 mmol/L L - Arg,1 0 0μmol/L SNP和 2 0 0 μmol/L SNAP处理后 ,海马神经元存活率明显下降 ,给予不同浓度的 PACAP( 1 0 -9,1 0 -11,1 0 -13mol/L)能增加神经元的存活率。上述结果提示 ,PACAP通过抑制 NO释放及其神经毒作用 ,减轻谷氨酸引起的海马神经元损害。

垂体腺苷酸环化酶激活肽基因合成表达和产物纯化与鉴定

为利用基因工程技术获得垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide ,PACAP) ,根据大肠杆菌的密码偏好性 ,设计并人工合成编码 38个氨基酸的PACAP基因 .克隆到表达载体pET 35b(+) ,构建重组质粒pET PACAP ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS+ .实现纤维素结合域 (cellulosebindingdomain ,CBD)与PACAP融合蛋白的表达 ,并在两者之间引入 (凝血 )因子Ⅹa识别位点 (Ile Glu Gly Arg↓ ) .融合蛋白CBD PACAP经纤维素亲和层析纯化后 ,因子Ⅹa酶切释放PACAP .在因子Ⅹa识别位点前引入 7个氨基酸的柔性短肽 (Gly Thr Gly Gly Gly Ser Gly)明显提高了融合蛋白对因子Ⅹa的敏感性 .HPLC进一步纯化得到纯度大于 95 %PACAP多肽 .所得的PACAP多肽的Western印迹鉴定为阳性 ;激光飞行质谱测定分子量结果与理论值相符 .生物活性分析表明 ,所制备的PACAP具有促进胰腺癌细胞株SW 1

垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤脑保护作用的研究

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤(MCAO)模型,缺血前经侧脑室分别给予不同剂量的PACAP,脑缺血2 h/再灌注24 h,测定脑含水量、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果与NS组相比,PACAP各组脑含水量、MDA及NO含量均明显降低,SOD活性有不同程度的提高。结论PACAP对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有明显的脑保护作用,中、高剂量组效果优于低剂量组,其机制可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关。

垂体腺苷酸环化酶激活肽的分布及其生物学功能

垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP),是一种新发现的神经肽,具有多种生物活性。本文主要就PACAP的分子结构和基因组成、组织器官分布及其生物学功能作一综述。

垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸引起的大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度升高的可能机理

目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 38(PACAP 38)稳定海马神经元细胞内钙离子浓度([Ca2 + ]i)作用的可能机理。方法 取新生SD大鼠海马 ,用B2 7无血清培养基培养神经元 ;经Fura 2 /AM标记后 ,共聚焦显微镜下测定 [Ca2 + ]i。结果PACAP 38(10pmol·L- 1)能抑制谷氨酸 (5 0 0 μmol·L- 1)所致海马神经元 [Ca2 + ]i 升高 ,而Rp型硫化环腺苷酸 (2 0 μmol·L- 1)或氯化白屈菜赤碱 (0 .1μmol·L- 1)能阻断PACAP 38的抑制作用。二丁基环腺苷酸 (0 .1～ 10 0 μmol·L- 1)和豆寇酰佛波醇乙酯(0 .0 1～ 10 μmol·L- 1)也能抑制谷氨酸引起的海马神经元 [Ca2 + ]i 升高。结论 PACAP 38减轻谷氨酸引起的海马神经元 [Ca2 + ]i

垂体腺苷酸环化酶激活肽的研究概况

垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)及其受体存在于许多动物的下丘脑和垂体中 ,而且在肾上腺、睾丸、卵巢、肝脏、肾脏、胰腺、松果腺、心脏、脊椎、神经节、呼吸系统和消化系统等组织或系统中也存在 ,其中肾上腺含量最高 .在这些组织或系统中 ,通过Ca2 +、Na+、腺苷酸环化酶或磷酸肌醇等作用通路 ,PACAP发挥神经递质 /调质、或神经营养因子等生物学功能 .

垂体腺苷酸环化酶激活肽对动脉粥样硬化形成过程中脂质过氧化的影响

目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对家兔实验性动脉粥样硬化 (AS)形成过程中脂质过氧化的影响。方法 80只雄性新西兰家兔 ,随机分为 3组 :(1)对照组 (C组 ) :喂饲普通颗粒兔饲料 ;(2 )AS模型组 :每只兔每日喂饲含胆固醇 1 5g的颗粒兔饲料 ;(3)PACAP组 (P组 ) :喂饲与AS组同样的饲料 ,另从耳缘静脉注射PACAP。分别于实验的 0、4、8、12周末记录兔体重 ,同时从兔耳中央动脉取空腹血 ,测定丙二醛 (MDA)含量 :并取若干兔的主动脉标本作苏丹Ⅳ染色 ,测量斑块面积。结果 (1)AS组及P组血清MDA含量均显著高于C组 ;而P组显著低于AS组。 (2 ) 4周末时P组斑块面积显著小于AS组。结论 PACAP具有抗脂质过氧化作用 。

实验性脑损伤大鼠血浆及肾组织垂体腺苷酸环化酶激活肽水平的变化

目的研究脑损伤大鼠血浆及肾组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量变化及急性肾损害中的作用。方法提高建立大鼠脑损伤模型,用RIA方法测定血浆及肾组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量。结果大鼠脑外伤组血浆垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显高于对照组,而肾组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽含量明显低于对照组。结论脑外伤后的急性肾损害与血浆和肾组织匀浆中PACAP含量变化有关,PACAP在脑外伤后急性肾损害过程中所起作用有待进一步研究。

垂体腺苷酸环化酶激活肽对血管壁细胞成分的作用及其机制的实验研究——PACAP与动脉粥样硬化关系的探讨

以培养的猪主动脉内皮细胞（ＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为主要实验对象，研究了垂体腺苷酸环化酶激活肽（ＰＡＣＡＰ）对正常及高脂环境下培养的ＥＣ、ＳＭＣ形态和功能的影响，并对其作用机制进行了初步探讨。结果显示：ＰＡＣＡＰ可部分对抗高脂因素造成的ＥＣ、ＳＭＣ形态的损伤；能提高ＥＣ抗动脉粥样硬化（ＡＳ）物质的产生；抑制ＳＭＣ的增殖；并具有抗脂质过氧化作用。本研究表明，ＰＡＣＡＰ对ＥＣ、ＳＭＣ具有一定程度的细胞保护作用，因此提示ＰＡＣＡＰ可能具有一定的抗ＡＳ作用。

垂体腺苷酸环化酶激活肽的分布及其生物学功能

垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PituitaryAdenylateCyclaseActivitingPoly peptide ,PACAP) ,是一种新发现的神经肽 ,具有多种生物活性。主要综述PACAP的分子结构和基因组成、组织器官分布及其生物学功能。

垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对局灶性脑缺血-再灌注大鼠的脑保护作用及对核因子κBp65(NF-κBp65)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法取健康雄性SD大鼠72只,采用随机数字法分为假手术组、缺血-再灌注组、PACAP组,每组大鼠24只,每组再分为再灌注12h和24h组,每时间点12只大鼠。采用线栓法建立大脑中动脉缺血模型,于缺血后2h进行再灌注。PACAP组于再灌注30min内,由尾静脉注射(5×10-7)%的PACAP,(5×10-9)g/kg,假手术组和缺血-再灌注组,用等体积(0.1ml/kg)的等渗盐水代替PACAP。再灌注12、24h取脑,光镜下观察脑组织的结构;并采用Western印迹法检测NF-κBp65的表达,免疫组化法检测TNF-α的表达。结果①PACAP组大鼠光镜下脑组织细胞损伤程度与缺血-再灌注组相比明显减轻。②PACAP组再灌注12、24h,TNF-α阳性细胞的表达分别为(20.0±2.5)、(30.7±1.3)个/高倍视野,缺血-再灌注组分别为(40.8±3.7)、(60.7±3.5)个/高倍视野,与假手术组的(2.8±0.8)、(3.0±0.7)个/高倍视野的表达比较,差异均有统计学意义(P<0.01),缺血-再灌注组与PACAP组比较,差异亦有统计学意义(P<0.01)。③再灌注12和24h,PACAP组NF-κBp65表达的灰度值为57±7、49±8,缺血-再灌注组为90±14、74±10,与假手术组的41±17、41±10比较,差异均有统计学意义(P<0.01),缺血-再灌注组与PACAP组比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血-再灌注后TNF-α、NF-κBp65的表达,这可能是其脑保护作用机制之一。