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半定量RT-PCR法检测原代培养脂肪细胞生脂基因mRNA转录表达 被引量:6
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作者 卢建雄 臧荣鑫 +3 位作者 潘和平 杨具田 陈粉粉 杨公社 《中兽医医药杂志》 2005年第6期16-18,共3页
在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次... 在原代培养脂肪细胞生脂机制研究中,为了检测生脂基因ACC l和FAS mRNA表达水平变化,细胞总RNA经反转录合成cDNA,以β-actin为内参照,分别与ACC l和FAS等基因同管扩增。通过探讨和优化PCR体系中引物设计、退火温度、MgC l2浓度和循环次数等参数,以及引物对间的扩增竞争,建立了检测脂肪细胞生脂相关基因mRNA表达的半定量多重RT-PCR体系。结果显示,RT-PCR产物经电泳后,β-actin及生脂基因电泳带清晰,与预期产物大小一致,引物对间无扩增竞争,其扩增效率和特异性与单重RT-PCR体系相同,实验重复性好。因此,该方法和体系可用于快速、灵敏、可靠地检测特异基因mRNA的表达。 展开更多
关键词 原代培养脂肪细胞 生脂基因 半定量RT—PCR
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外用脂肪干细胞培养上清液对二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合的影响 被引量:11
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作者 周炳荣 许阳 +6 位作者 徐妍 王影 朱丰 Felicia Permatasari 吴迪 尹志强 骆丹 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2013年第5期277-280,共4页
目的探讨局部外用脂肪干细胞培养上清液在二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合过程中的作用。方法 9名受试者的双侧前臂内侧分别接受二氧化碳点阵激光治疗。随机选择受试者一侧前臂激光治疗处外敷脂肪干细胞培养上清液,另一侧则外敷DMEM... 目的探讨局部外用脂肪干细胞培养上清液在二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合过程中的作用。方法 9名受试者的双侧前臂内侧分别接受二氧化碳点阵激光治疗。随机选择受试者一侧前臂激光治疗处外敷脂肪干细胞培养上清液,另一侧则外敷DMEM细胞培养基。分别在上述处理后第1,4,7,14,21天检测受试部位经皮水分丢失、皮肤颜色及皮肤弹性。结果经过局部外用脂肪干细胞培养上清液一侧的红斑指数、黑色素指数和经皮水分丢失均显著低于对照侧。而皮肤弹性与对照侧差异无统计学意义。结论局部应用脂肪干细胞培养上清液是促进二氧化碳点阵激光焕肤术后伤口愈合和减少不良影响的一种有效方法。 展开更多
关键词 二氧化碳点阵激光 脂肪干细胞培养上清液 伤口愈合
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脂肪细胞培养研究现状 被引量:2
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作者 宋文华 王贵 王哲 《动物医学进展》 CSCD 2006年第4期46-51,共6页
脂肪细胞培养为研究脂肪代谢紊乱疾病提供了一种有效的途径。基质血管成分系统的研究形成了完整的前脂肪细胞理论,随后脂肪细胞原代培养技术得到了广泛的研究,国外各种家畜的脂肪细胞培养模型得以建立,而国内在脂肪细胞培养方面的研究... 脂肪细胞培养为研究脂肪代谢紊乱疾病提供了一种有效的途径。基质血管成分系统的研究形成了完整的前脂肪细胞理论,随后脂肪细胞原代培养技术得到了广泛的研究,国外各种家畜的脂肪细胞培养模型得以建立,而国内在脂肪细胞培养方面的研究起步较晚,且多集中于人及鼠的脂肪细胞培养。脂肪细胞的传代培养在单一因子对脂肪细胞的功能研究上有一定的优越性,尤其对不宜于在活体采样的人及动物。脂肪细胞培养的另一个研究方向是脂肪细胞与其他组织细胞的联合培养,对研究机体内各种组织细胞间的相互作用提供了良好的基础。 展开更多
关键词 脂肪细胞 脂肪细胞培养 原代培养 传代培养 联合培养
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脂肪来源间充质干细胞条件培养基对小型猪腹腔镜肝损伤氧化应激反应的影响 被引量:1
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作者 焦智慧 张千振 +6 位作者 王月 刘涛 刘博洋 马亚军 刘笑凝 朴晨曦 王洪斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1734-1743,共10页
旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM)对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响,作者选取24头健康小型猪,随机分为4组,每组6只,分别为模型组(IRI)、DMEM对照组(DMEM)... 旨在探究脂肪来源间充质干细胞条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells-conditioned medium,ADSCs-CM)对小型猪肝损伤氧化应激反应的影响,作者选取24头健康小型猪,随机分为4组,每组6只,分别为模型组(IRI)、DMEM对照组(DMEM)、ADSCs-CM治疗组(CM)和ADSCs治疗组(ADSCs)。4组均通过腹腔镜技术建立小型猪肝缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)合并部分肝切除的肝损伤模型,IRI组移植生理盐水,DMEM组移植浓缩的基础培养基,CM组移植浓缩的脂肪来源间充质干细胞培养基,ADSCs组移植脂肪间充质干细胞。各组分别于术前、术后1、3、7 d采集血液与肝组织样本,使用肝功能检测试剂盒对血清中总胆红素(T-BIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)进行检测;使用氧化应激检测试剂盒对肝组织中丙二醛(MDA)、髓内过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)进行检测。结果显示:术后1、3 d:模型组和对照组肝功能严重损伤,发生明显氧化应激反应,CM和ADSCs治疗组显著促进肝功能的恢复,且氧化应激相应指标较模型组和对照组表达明显下降。术后7 d,各组基本恢复到术前水平。结果显示:腹腔镜肝缺血再灌注合并肝部分切除损伤可致小型猪发生氧化应激反应,脂肪来源间充质干细胞及其条件培养基均可改善肝损伤后的氧化应激反应。 展开更多
关键词 小型猪 腹腔镜 肝缺血再灌注合并部分肝切除损伤 脂肪间充质干细胞条件培养 氧化应激
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脂肪干细胞条件培养缓解牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导的胰腺氧化应激损伤的研究
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作者 刘博 李美林 +4 位作者 刘旭 梁双赢 牟宝龙 赵雯婷 葛延松 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期798-806,共9页
【目的】探究脂肪干细胞条件培养基(adipose-derived-stem cells conditioned medium,ADSCs-CM)缓解牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导的胰腺氧化应激损伤的保护作用机制。【方法】试验选择1只中华田园犬用来分离培养脂肪干细胞(adipose-derived... 【目的】探究脂肪干细胞条件培养基(adipose-derived-stem cells conditioned medium,ADSCs-CM)缓解牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导的胰腺氧化应激损伤的保护作用机制。【方法】试验选择1只中华田园犬用来分离培养脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)以制备条件培养基(conditioned medium,CM),另选9只中华田园犬随机分为对照组(CON组)、急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型组(AP组)和CM治疗组(CM组),AP组和CM组经胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠(5%0.1 mL/kg)、胰蛋白酶(3500 U/kg)混合溶液,建立犬AP模型,CON组注射等量生理盐水。术后CM组静脉注射ADSCs-CM(0.1 mL/kg),CON组和AP组注射等量生理盐水,24 h后通过B型超声波检查胰腺回声情况和形态,采集胰腺组织样本进行病理组织学检测,采集血液样本进行犬胰腺特异性脂肪酶(cPL)、血气、血常规、生化指标检测,比色法检测血浆及胰腺总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i-NOS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)水平。【结果】B型超声波显示AP组及CM组胰腺回声不均匀,周围脂肪呈高回声。病理组织切片显示AP组胰腺肿胀出血、周围脂肪变性、十二指肠肠壁出血严重,胰腺出现间质水肿,大量炎性细胞浸润,多量细胞坏死崩解,严重出血。CM组胰腺及周围组织变化、细胞肿胀、炎性细胞浸润和出血较AP组轻微;cPL检测均为阳性。与CON组相比,AP组Cl^(-)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLB)、总蛋白(total protein,TP)含量均显著降低(P<0.05),淀粉酶(amylase,AMY)、脂肪酶(lipase,LIPA)、血浆T-NOS、胰腺i-NOS活性以及总胆固醇(total cholesterol,TCHO)、胰腺GSH含量均显著升高(P<0.05);CM组Na^(+)、Cl^(-)、GLB、TP含量均显著降低(P<0.05),AMY、胰腺GPx活性以及胰腺、血浆GSH含量均显著升高(P<0.05)。与AP组相比,CM组总CO_(2)(total CO_(2),TCO_(2))、Na^(+)、Cl^(-)、ALB、TCHO含量以及血浆T-NOS活性均显著降低(P<0.05),胰腺GPx活性、血浆GSH含量均显著升高(P<0.05)。【结论】ADSCs-CM能减轻AP模型犬胰腺损伤程度,其发挥保护作用的机制与血浆中T-NOS活性降低及胰腺GPx和血浆GSH水平增高有着密切关系,本研究可为犬AP的治疗及ADSCs-CM的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 脂肪干细胞条件培养 氧化应激
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NAC通过调控活性氧影响脂肪间充质干细胞增殖和分化 被引量:2
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作者 刘裴裴 丁世杰 +3 位作者 宋文娟 唐长波 李惠侠 唐红 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期4330-4343,共14页
【目的】细胞在体外培养过程中易受氧化应激,细胞内活性氧水平升高,影响细胞功能。通过探究N-乙酰-L半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)对猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)活性氧的调控作用,进一步明... 【目的】细胞在体外培养过程中易受氧化应激,细胞内活性氧水平升高,影响细胞功能。通过探究N-乙酰-L半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)对猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)活性氧的调控作用,进一步明确对其增殖和分化的影响,为培养脂肪种子细胞体外大量扩增和提高分化效率提供理论基础和参考依据。【方法】为建立ADSCs体外培养氧化应激模型,在ADSCs增殖过程中加入不同浓度的H_(2)O_(2)(0、25、50、100μmol·L^(-1)),通过细胞计数结果、细胞形态、细胞活力、高通量高内涵活细胞共聚焦成像系统检测细胞内活性氧水平,确定H_(2)O_(2)的添加浓度。为了筛选NAC促进ADSCs增殖的最佳添加浓度,在ADSCs增殖过程中加入不同浓度的NAC(0、1、2、3 mmol·L^(-1)),通过细胞计数结果和细胞形态,确定NAC的适宜添加浓度。通过EdU染色和细胞计数分析不同处理条件下(Control、1 mmol·L^(-1)NAC、50μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)、1 mmol·L^(-1)NAC+50μmol·L^(-1)H_(2)O_(2))的细胞增殖情况,为进一步探究NAC对氧化应激的ADSCs增殖的影响。为探究不同处理条件下ADSCs内活性氧的水平,对不同处理条件下增殖3 d后的ADSCs进行CellRox染色,通过高通量高内涵活细胞共聚焦成像系统检测细胞内活性氧水平,明确ADSCs增殖与细胞内活性氧水平的关系。为探究ADSCs内活性氧水平对其分化的影响,ADSCs在不同处理条件下分化10 d,对其进行油红O染色,Image J分析染色面积评估ADSCs的分化脂质积累量并通过RT-qPCR检测ADSCs分化相关基因的相对表达量。【结果】ADSCs在增殖过程中,与对照组相比较,添加50μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)组的ADSCs呈梭形,细胞内活性氧含量显著升高(P<0.05),氧化应激模型成功建立。与对照组相比,ADSCs在增殖过程中添加50μmol·L^(-1)H_(2)O_(2),ADSCs增殖数目显著降低(P<0.05),但是在ADSCs分化过程中添加50μmol·L^(-1)H_(2)O_(2),ADSCs的脂质积累量显著升高(P<0.05)。ADSCs在增殖过程中,与对照组相比较,添加1 mmol·L^(-1)NAC组的ADSCs呈梭形,细胞内活性氧含量显著降低(P<0.05),ADSCs增殖数目显著升高(P<0.05),但是1 mmol·L^(-1)NAC的添加对ADSCs的脂质积累没有显著影响(P>0.05)。【结论】氧化应激的产生提高ADSCs中活性氧水平,不利于ADSCs体外大量扩增,诱导细胞分化,加速细胞衰老。在ADSCs体外扩增体系中添加1 mmol·L^(-1)NAC可以降低因长期培养、外源刺激等因素带来的氧化应激损伤,对氧化应激的ADSCs具有保护作用,能有效促进细胞的增殖,并且不会影响细胞的分化能力。 展开更多
关键词 NAC ADSCS 活性氧 增殖 分化 培养脂肪
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阿托伐他汀及血管紧张素Ⅱ对人体脂肪组织白细胞介素6及Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物分泌的影响 被引量:3
7
作者 赵水平 王小清 +1 位作者 李全忠 唐汉权 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第1期73-75,共3页
目的 观察不同部位脂肪组织的分泌功能 ,以及血管紧张素Ⅱ和他汀类药物对脂肪组织分泌白细胞介素 6和Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物的影响。方法 检测体外培养的人内脏及腹部皮下脂肪组织在加用阿托伐他汀及血管紧张素Ⅱ作用前后白细胞介... 目的 观察不同部位脂肪组织的分泌功能 ,以及血管紧张素Ⅱ和他汀类药物对脂肪组织分泌白细胞介素 6和Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物的影响。方法 检测体外培养的人内脏及腹部皮下脂肪组织在加用阿托伐他汀及血管紧张素Ⅱ作用前后白细胞介素 6和Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物的分泌水平。结果 内脏脂肪组织分泌白细胞介素 6 (16 5 3± 339pg/ g组织 )高于皮下脂肪组织 (116 3± 733pg/ g组织 ,P <0 .0 1) ,内脏脂肪组织分泌Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物 (10 0± 30ng/ g组织 )也高于皮下脂肪组织 (6 8± 14ng/ g组织 ,P <0 .0 1)。内脏及皮下脂肪组织分泌的白细胞介素 6与体质指数呈正相关 (r分别为 0 .85和 0 .6 9,P <0 .0 1)。内脏及皮下脂肪组织分泌的Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物与体质指数呈正相关 (r分别为 0 .6 3和 0 .71,P <0 .0 1)。血管紧张素Ⅱ使内脏及皮下脂肪分泌白细胞介素 6分别增加 19%和 18% ,使内脏及皮下脂肪分泌Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物分别增加 15 %和 14 % ;阿托伐他汀使内脏及皮下脂肪分泌白细胞介素 6分别减少 2 5 %和 2 1% ,使内脏及皮下脂肪分泌Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物分别减少 17%和 16 %。结论 人体不同部位的脂肪组织分泌炎性细胞因子和纤溶物质存在差异 ,且与肥胖有关。血管紧张? 展开更多
关键词 内科学 阿托伐他汀 脂肪组织培养 白细胞介素6 Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物 血管紧张素Ⅱ 酶联免疫吸附测定法
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细胞传代对小型猪脂肪间充质干细胞及分泌因子的影响
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作者 焦智慧 马亚军 +1 位作者 李响 邢明伟 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第21期37-41,125,共6页
为了探索细胞传代对小型猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)的影响,试验采用形态学观察法、CCK8法、Transwell迁移法、ELISA法对P3~P9代ADSCs的形态变化、增殖能力、迁移能力进行研究,并检测了传达次数... 为了探索细胞传代对小型猪脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)的影响,试验采用形态学观察法、CCK8法、Transwell迁移法、ELISA法对P3~P9代ADSCs的形态变化、增殖能力、迁移能力进行研究,并检测了传达次数对脂肪间充质干细胞的条件培养基(adipose-derived mesenchymal stem cells conditioned medium,ADSCs-CM)中血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-1(ANG-1)、血管生成素-2(ANG-2)、碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量的影响。结果表明:随着传代次数的增加,ADSCs形态发生变化,细胞折射率变低,边界逐渐不清晰;不同传代次数的ADSCs生长曲线相似,近似S型,但P3、P5代细胞增殖能力显著高于P9代(P<0.05);且P5代细胞迁移能力与P3、P9代细胞存在极显著差异(P<0.01);P5代细胞分泌VEGF、ANG-1、ANG-2、b-FGF、IL-6能力最强,P6代细胞分泌IL-1β最多。说明细胞传代次数的增加会影响ADSCs的增殖、迁移及分泌能力。 展开更多
关键词 细胞传代 小型猪 脂肪间充质干细胞 脂肪间充质干细胞条件培养 分泌因子
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猪甘油三酯水解酶和激素敏感脂酶基因表达规律的研究 被引量:1
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作者 张立杰 王琦 +1 位作者 张利红 杨公社 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期769-775,共7页
利用半定量RT-PCR法分析比较了甘油三酯水解酶(Triacylglycerol hydrolase,TGH)和激素敏感脂酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)基因在不同猪种、不同发育阶段及不同部位脂肪组织中转录表达的差异,探讨其在猪脂肪组织的表达规律。结果显... 利用半定量RT-PCR法分析比较了甘油三酯水解酶(Triacylglycerol hydrolase,TGH)和激素敏感脂酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)基因在不同猪种、不同发育阶段及不同部位脂肪组织中转录表达的差异,探讨其在猪脂肪组织的表达规律。结果显示,脂肪型个体TGHmRNA表达丰度显著低于瘦肉型和杂交型个体,成年猪较初生仔猪低,皮下、腹膜和内脏脂肪组织中TGH表达量依次递增;其变化规律与HSL相同。此外,对分离培养的原代前体脂肪细胞通过诱导分化和油红O染色区分分化状态,分析TGHmRNA表达的时序变化,发现TGH在前脂肪细胞中不转录表达,诱导分化后开始表达,且在诱导分化第4天表达量最高,分化第10天表达量下降,达到峰值的时间较HSL早。结果表明,TGH的表达与个体肥胖程度、年龄、脂肪组织部位以及脂肪细胞分化程度相关,同时,在脂肪细胞分化过程中,TGH表达峰值早于HSL,提示TGH在脂肪细胞发育过程中可能较早承担基础脂解作用。 展开更多
关键词 脂肪组织 原代培养脂肪细胞 TGH MRNA
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脂肪干细胞条件培养基对不同衰老程度成纤维细胞中波紫外线损伤的修复效应 被引量:3
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作者 王婷 郭澍 +3 位作者 陈鹏 曹政 张双溢 刘学晖 《中华医学美学美容杂志》 2018年第2期79-83,共5页
目的探讨脂肪干细胞条件培养基(adipose derived stem cell-conditioned medium,ADSC—CM)修复中波紫外线(ultraviolet irradiation B,UVB)损伤的效应。方法体外培养、获得不同衰老程度的成纤维细胞(humandermal fibroblasts,HDF... 目的探讨脂肪干细胞条件培养基(adipose derived stem cell-conditioned medium,ADSC—CM)修复中波紫外线(ultraviolet irradiation B,UVB)损伤的效应。方法体外培养、获得不同衰老程度的成纤维细胞(humandermal fibroblasts,HDFs),UVB处理HDFs,造成HDFsUVB损伤,采用不同浓度ADSC—CM处理HDFs,于不同时间点取材检测不同组别HDFs的细胞增殖和衰老情况。结果ADSC-CM的浓度及处理时间分别为100%和48h最佳;对于不同衰老程度的HDFs,无论是否经过uVB处理,ADSC-CM均可较普通培养液显著提高细胞的增殖活性。结论内源性因素及外源性因素分别作用及共同作用均可引起HDFs的老化损伤,ADSC—CM可一定程度减弱HDFs的内源性、外源性老化损伤。 展开更多
关键词 脂肪干细胞条件式培养 成纤维细胞 细胞衰老
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A Second Protein Marker of Caveolae:Caveolin-2 被引量:5
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作者 Liu-luan Zhu Ying Cui Yong-sheng Chang Fu-de Fang 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2010年第2期119-124,共6页
Caveolin-2,a protein about 20 kD,is a major component of the inner surface of caveolae,small invaginations of the plasma membrane.Similar with caveolin-1 and caveolin-3,it serves as a protein marker of caveolae.Caveol... Caveolin-2,a protein about 20 kD,is a major component of the inner surface of caveolae,small invaginations of the plasma membrane.Similar with caveolin-1 and caveolin-3,it serves as a protein marker of caveolae.Caveolin-1 and-2 are located next to each other at 7q31.1 on human chromosome,the proteins encoded are co-localized and form a stable hetero-oligomeric complex,distributing similarly in tissue and cultured cells.Caveolin-3 is located on different chromosomes but confirmed to interact with caveolin-2.Caveolin-2 is similar to caveolin-1 in many respects but differs from the latter in functional domains,especially in G-protein binding domain and caveolin scaffolding domain.The mRNAs of both caveolin-1 and caveolin-2 are most abundantly expressed in white adipose tissue and are induced during differentiation of 3T3-L1 cells to adipocytes.Caveolin-2-deficinet mice demonstrate clear pulmonary defects,with little or no change in caveolin-1 expression and caveolae formation,suggesting that caveolin-2 plays a selective role in lung functions.Caveolin-2 is also involved in lipid metabolism and human cancers. 展开更多
关键词 caveolin-2 LUNG lipid metabolism CANCER
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Temperature effects on lipid properties of microalgae Tetraselmis subcordiformis and Nannochloropsis oculata as biofuel resources 被引量:1
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作者 危立坤 黄旭雄 黄征征 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期99-106,共8页
Microalgae Tetraselmis subcordiformis and Nannochloropsis oculata were cultured at 15,20,25,30,and 35℃ and their properties as potential biofuel resources were examined.The results indicate that T.subcordiformis and ... Microalgae Tetraselmis subcordiformis and Nannochloropsis oculata were cultured at 15,20,25,30,and 35℃ and their properties as potential biofuel resources were examined.The results indicate that T.subcordiformis and N.oculata grew best at 20℃ and 25℃ and yielded the highest total lipids at 20℃and 30℃,respectively.With increased temperature,neutral lipid and polyunsaturated fatty acids(FAs)decreased while saturated FAs increased,accompanied by increased monounsaturated FAs(MUFAs) in T.subcordiformis and decreased MUFAs in N.oculata;meanwhile,the predicted cetane number of FA methyl esters increased from 45.3 to 47.6 in T.subcordiformis and from 52.3 to 60.3 in N.oculata.Therefore,optimizing culture temperatures is important for improving microalgal biodiesel production. 展开更多
关键词 fatty acids (FAs) lipid class Nannochloropsis oculata temperature Tetraselmis subcordiformis total lipid
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脂肪间充质干细胞条件培养液和二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用 被引量:6
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作者 郑桂纯 黄丽贞 +6 位作者 赵姝灿 黄敏玲 洪鸿荣 张宇煊 王丙云 陈胜锋 陈志胜 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期504-511,共8页
目的探讨脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用效果,并研究两者的作用机制。方法制备ADSC-CM、含2 mmol/L二甲双胍无血清培养基(Met)、ADSC-CM+2 mmol/L二甲双胍(ADSC-CM+Met),添加到衰老皮肤成纤维细胞中,... 目的探讨脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍对衰老皮肤成纤维细胞的作用效果,并研究两者的作用机制。方法制备ADSC-CM、含2 mmol/L二甲双胍无血清培养基(Met)、ADSC-CM+2 mmol/L二甲双胍(ADSC-CM+Met),添加到衰老皮肤成纤维细胞中,在培养72 h后,使用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活力,β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老率,超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞SOD活性以及qPCR检测COL1、ELASTIN、MMP-1、KLOTHO、NF-κB、GSH-PX基因表达量。结果①ADSC-CM组的细胞形态呈长梭形,轮廓清晰,折光性好,其他两组的细胞形态折光性较差;②ADSC-CM、Met、ADSC-CM+Met三组均能提高皮肤成纤维细胞活力,降低SA-β-gal染色率,且ADSC-CM组的作用最好;③三组实验组均能提高COL1基因表达,抑制MMP-1表达,但Met组的ELASTIN基因表达与对照组无差异性,其他两组均显著高于对照组;④KLOTHO基因表达,ADSC-CM和Met组均高于对照组,三组实验组的SOD活性也显著高于对照组,但谷胱甘肽氧化酶GSH-PX基因表达,只有ADSC-CM组显著高于对照组,其他两组显著低于对照组,Met组NF-κB基因表达与对照组差异无显著性,其他两组均显著性降低。结论脂肪间充质干细胞条件培养液、二甲双胍能提高皮肤成纤维细胞活性,延缓其衰老,且两者的作用效果有差异,这可能与作用机制相关,但可以确定的是,两者共同添加会产生拮抗作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞条件培养 二甲双胍 无血清 皮肤成纤维细胞 皮肤衰老
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睾酮对巨噬细胞-脂肪细胞炎症因子生成及葡萄糖摄取的影响及机制 被引量:2
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作者 苏椿淋 陈敏 +2 位作者 张彭南 徐雯 林金芳 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第33期2665-2670,共6页
目的探讨睾酮对333-L1脂肪细胞-RAW264.7巨噬细胞间接共培养下,分别对脂肪细胞、巨噬细胞炎症因子白细胞介素(IL)-6、巨噬细胞趋化因子(MCP)-1生成的影响、脂肪细胞胰岛素敏感性、巨噬细胞表型的影响及分子机制。方法333-L1前脂... 目的探讨睾酮对333-L1脂肪细胞-RAW264.7巨噬细胞间接共培养下,分别对脂肪细胞、巨噬细胞炎症因子白细胞介素(IL)-6、巨噬细胞趋化因子(MCP)-1生成的影响、脂肪细胞胰岛素敏感性、巨噬细胞表型的影响及分子机制。方法333-L1前脂肪细胞在双层细胞培养板(Transwell)细胞下室诱导成熟后,与细胞上室的RAW264.7巨噬细胞共培养,用10μmol/L睾酮处理24h,酶联免疫吸附测定(Elisa)检测培养液中IL-6、MCP-1的浓度,蛋白质印迹杂交(Western blot)检测核因子κB-p65(NF-κBp65)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)磷酸化的改变、CD16/32、CD206的表达。[3H]-2-脱氧葡萄糖掺入法测脂肪细胞的葡萄糖摄取率。结果睾酮能促进对333-L1-脂肪细胞与RAW264.7巨噬细胞间接共培养体系中炎症因子(IL-6,MCP-1)的生成,促进ERK1/2、NF-κBp65的活化,抑制脂肪细胞的葡萄糖摄取;睾酮能促进巨噬细胞向促炎性M1型巨噬细胞的分化。睾酮的上述作用可以完全被NF-κBp65的抑制剂吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)逆转,可部分被ERK1/2的抑制剂PD98059逆转(70%~90%)。结论NF-κB、ERK1/2可能是睾酮促333-L1脂肪细胞.RAW264.7巨噬细胞间接共培养体系炎症因子生成、胰岛素抵抗、巨噬细胞向M,型分化的重要分子蛋白。 展开更多
关键词 睾酮 脂肪细胞-巨噬细胞共培养 炎症因子 胰岛素抵抗
原文传递
In situ evaluation of cell cultivation on dynamically changed poly(ε-caprolactone) film caused by enzymatic degradation
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作者 ZHANG Yu JIANG Ni GAN ZhiHua 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2011年第2期369-374,共6页
In situ evaluation of cell cultivation on degrading poly(ε-caprolactone) (PCL) films was studied.New culture surroundings were constructed for cell growth by using PCL films as substrates and adding Pseudomonas cepac... In situ evaluation of cell cultivation on degrading poly(ε-caprolactone) (PCL) films was studied.New culture surroundings were constructed for cell growth by using PCL films as substrates and adding Pseudomonas cepacia lipase to accelerate biodegradation of PCL films.MTT experiments for 10 h indicated the low cytotoxicity of lipase solution with concentration up to 0.2 mg/mL for MG-63 cells growth on PCL films.With the optimized lipase concentration and degradation time,we studied cell growth behavior on dynamically changed PCL films by adding lipase to the culture surroundings.MTT,fluorescence microscopy and scanning electron microscopy (SEM) were used to evaluate cell viability,proliferation and morphologies.It was found that cell viability and proliferation were not affected by the added lipase solution negatively.In contrast,cells cultured on degrading PCL films showed good growth behavior with clear fusiform shape and pseudopods.Importantly,the enzymatic degradation of PCL films with cells attachment showed distinctive morphology compared to the degradation in lipase solution without cells.The simultaneous cell growth and PCL film degradation were well discussed in this work,which may better understand the interaction between cell growth and polymer degradation. 展开更多
关键词 poly(ε-caprolactone) film enzymatic degradation cell growth surface morphology
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