“粉玉1号”草莓茎尖组织培养体系及其脱毒效果研究

“粉玉1号”是通过杂交育种方式选育的早熟抗病粉果草莓新品种。从大棚栽培的“粉玉1号”草莓植株上取匍匐茎芽为试料,通过外植体消毒、茎尖剥取、不定芽诱导和生根培养建立了“粉玉1号”茎尖组织培养脱毒技术体系,对茎尖培养苗和大棚栽培植株进行了草莓皱缩病毒(SCV)、草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓镶脉病毒(SVBV)PCR检测。结果表明,“粉玉1号”草莓外植体灭菌方法为75%乙醇处理30 s,再用0.1%升汞溶液处理10 min;匍匐茎芽一般需剥去1片嫩叶和7片幼叶才能剥出茎尖;茎尖初代培养基宜采用MS+0.5 mg/L 6-BA,继代培养基宜采用MS+0.1 mg/L 6-BA,生根培养基宜采用不加植物生长调节剂的1/2 MS。大棚栽培植株样品存在SVBV感染,通过茎尖组培脱除了该病毒,SCV、SMoV和SMYEV在所有样品中均未检出。建立的茎尖脱毒技术体系可为“粉玉1号”草莓工厂化育苗提供参考。

牛尾山药茎尖培养及快繁技术研究

为建立牛尾山药脱毒培养和快繁体系,采用培养技术,筛选茎尖培培养、茎段扩繁和生根培养适宜的培养基,并研究适宜的炼苗条件。结果表明:在MS+0.5 mg·L^(-1)6-BA+1.5 mg·L^(-1)NAA培养基中,茎尖的膨大率和成活率较高;对茎尖的褐变现象抑制效果最佳的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)浓度为0.01%,其褐变率仅为11.67%;培养基MS+1 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)NAA诱导节茎段萌芽的效果较好;在生根培养中,MS+0.5 mg·L^(-1)6BA+1 mg·L^(-1)NAA培养基最合适;混合基质(珍珠岩∶秸秆腐殖物=1∶1)、温度20℃、遮光率75%、相对湿度80%是山药组培苗最适宜的炼苗条件。综上,本研究为牛尾山药脱毒培养和快繁奠定基础,对山药产业可持续发展有重要意义。

有色棉茎尖培养初探

对棕 98 0 1和绿 990 4两个有色棉品种茎尖进行诱导培养 ,结果表明以 5天苗龄的无菌苗进行茎尖培养为宜 ,棕 980 1的茎尖在附加 KT0 .5 +IAA0 .1的 MS培养基存活率高 ,幼苗长势好 ,绿990 4的茎尖在附加 KT0 .5 +IAA0 .5的 MS培养基存活率高 ,幼苗长势好。茎尖培养在各有色棉品种间不存在特异性。

辣椒茎尖离体培养及植株再生

以4个辣椒品种茎尖为外植体,在MS+4mg/LBA+1mg/LIAA+4mg/LAgNO3培养基上诱导不定芽分化,在MS+2mg/LBA+0.1mg/LIAA,MS+0.5mg/LBA+0.1mg/LIAA诱导不定芽茎伸长.结果,平均不定芽诱导率达85%,平均不定芽茎伸长率可达110%,再生植株频率达75%左右.初步实验结果表明:与子叶及下胚轴培养相比,茎尖培养具有成苗率高、基因型不敏感、再生周期短等优势,是解决辣椒组织培养不定芽茎伸长困难,提高再生植株诱导频率的有效途径.

温度处理和茎尖培养结合脱除泡桐丛枝病类菌原体（MLO）

将患有丛枝病的泡桐组培苗进行温度处理，结合茎尖培养用来脱除病原ＭＬＯ。结果表明，在４５℃下，病茎段２４—４８小时内脱水枯死；在４０℃下３周内病苗黄化枯萎；但在３０℃和２５℃处理的茎段萌发新枝条仍表现典型丛枝症状。而在３５℃下处理的茎段，１周后，新生长茎叶外观恢复正常，继续处理至８０天，植株仍能正常生长。组织经ＤＡＰＩ染色后荧光显微镜检查显示出在３５－４０℃下处理的病苗体内ＭＬＯ４周之内的变化和降解情况。分别剪取３５℃下处理２９、３３、５５和８０天的组培苗０．５ｃｍ的茎尖，转入ＭＳ培养基或改良的ＭＳ培养基上，在２５℃下培养，长成的组培苗一直生长正常。荧光显微镜和电镜检察结果均显示病原ＭＬＯ已被脱除。

草莓茎尖培养快繁体系的研究

以‘红颜’和‘甜查理’的匍匐茎茎尖为试材,诱导出丛生芽后进行增殖培养和生根培养,研究不同激素浓度及组合对茎尖增殖和生根的影响。结果表明,最适宜红颜增殖的培养基为M S+0.8 m g·L-1 6-B A+0.1 m g·L-1N A A;最适宜甜查理增殖的培养基为M S+0.3 m g·L-1 6-B A+0.5 m g·L-1 N A A。最适宜红颜草莓生根的培养基是1/2M S+0.8 m g·L-1I B A;最适宜甜查理草莓生根的培养基是1/2 M S+0.1 m g·L-1 I B A。

甜樱桃茎尖培养及PNRSV的RT-PCR检测

研究了茎尖大小、接种方式、培养基成分、试材基因型对甜樱桃品种茎尖培养的影响。 1年生成熟枝条上茎尖成苗率为 8.3%～ 2 3.7% ,嫩梢上的茎尖成苗率为 2 7.3%～ 37.5 %。利用RT PCR技术对部分甜樱桃试管苗进行了早期病毒鉴定 ,筛选出一些不带李坏死环斑病毒 (PNRSV)的甜樱桃试管苗 ,并证明甜樱桃试管苗微茎尖培养不能有效脱除PNRSV。

慢照射与茎尖培养相结合筛选甘薯同质突变体

甘薯品种玉丰、高系 14号和 Kandaba在生育期内用 6 0 Coγ射线慢照射 ,对照射后的材料进行茎尖组培 ,通过体细胞胚胎发生途径再生出大量植株。将这些再生植株移栽到大田 ,对辐照后代的形态特征和经济特性进行了调查和分析。结果表明 ,辐照后代 M1 V1 和 M1 V2 在顶叶形、叶形、顶叶色、叶脉色、脉基色、薯形及薯肉色、产量、干物率、食味、Brix等性状上发生了广泛的变异 ,并且这些变异是稳定的。获得了一批薯形、薯肉色、高产量、高干率和高

影响早熟油桃茎尖培养增殖效率的因素

以早熟油桃华光、曙光为试材,研究了外源植物生长调节剂种类及浓度组合、培养基种类、暗培养时间等因素对茎尖培养增殖效率和试管苗生根的影响。结果表明:不同浓度的TDZ和KT对华光、曙光油桃增殖效应不同,在G培养基中加入TDZ2.0mg/L和KT1.5mg/L处理效果最好。1/2MS培养基中附加IBA有利于华光、曙光汕桃的生根;华光油桃生根不必经过暗培养;曙光经过6d或9d暗培养能大大提高生根率和有效根数量。

大蒜茎尖脱毒培养及快繁技术研究

以河北省两个名优地方品种安国大蒜和永年大蒜为试材,用Ms,B5作基本培养基,研究了大蒜茎尖繁殖脱毒快繁技术。结果表明,最佳诱导培养基为B5+0.1 mg/L NAA+3 mg/L 6_BA,但是,激素、营养物质的添加数量以及培养时期不同品种间有差异;剥离大蒜茎尖带一定数量的鳞片为好,其不仅可提高脱毒苗成活率,而且有利于扩大茎尖繁殖系数。无毒蒜大田扩繁的播种时间对产量有一定影响,且品种间差异较大。

龙牙百合热处理及茎尖培养技术研究

以组织培养获得的龙牙百合小鳞茎为试验材料 ,研究了热处理方式、茎尖的剥取大小、培养基状态和蔗糖含量对小鳞茎生长膨大的影响。结果表明 ,热处理方式以白天 4 0～ 4 2℃、夜晚 35℃ ,处理 6 0d较好 ;茎尖剥取大小为 0 .2～ 0 .3mm时的成活率高 ;有利于提高分化率的最佳培养基为 :MS +1.0mg/LNAA +2 .5mg/L 2 ,4 -D ,小鳞茎膨大增重的最佳培养基为 :MS +1.0mg/LBA +0 .2mg/LNAA +0 .5mg/L 2 ,4 -D +8%蔗糖 ,培养方式为液体振荡培养。

大蒜茎尖脱毒技术及组织培养研究

采用山西栽培的５个地方名蒜茎尖离体培养，获得了无病毒蒜种。结果表明，茎尖大小为０．２～０．５ｍｍ，不定芽增殖培养基以Ｂ５或ＭＳ．附加１～２ｍｇ／Ｌ细胞分裂素和０．０１～０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ，效果最佳。根系诱导在原培养基中加入０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ，出根率可达９０％以上。成苗后于１２月份移栽到节能日光温室，成活率达９０％以上。经对脱毒苗形态观察和染色体检测，没有发生异常变化，植株生长健壮，遗传性稳定，产量高。

葡萄组织培养快速繁殖及微茎尖培养研究

通过对葡萄组织培养快速繁殖和微茎尖培养的接种、继代繁殖、生根及移栽等关键技术的研究,筛选出适于多种品种生长的广潜培养基.采用价格便宜的化学试剂等代用品配制培养基,使其成本降低46.3%至58.2%.其茎段培养方法已应用于繁殖珍贵的葡萄品种苗木,微茎尖培养将为培育无病毒苗提供技术准备.

芋茎尖离体培养和快速繁殖

对芋优良品种莱阳毛羊头进行茎尖培养和快速繁殖。试验表明，外植体表面灭菌的最佳方案是乙醇→新洁尔灭→剥幼叶→升汞。在较软的培养基中，茎尖大于0．6mm，成活率为90％以上。不定芽分化的最适培养基为MS＋BA1（mg／L以下单位相同）＋NAA0．2＋Spm20，其分化率为100％。不定芽在MS＋BA2＋NAA0．1＋Spm50的培养基中，可实现继代繁殖和诱导生根一步完成，月增殖系数达7．3，生根率88．3％。芋试管苗移栽于沙壤土基中，成活率为90％以上，且生长健壮，根系发达。

茶树茎段培养胚性状态的调控及其分化

为探讨茶树茎段培养中胚性状态的调控及其分化机理 ,以种子苗和成龄茶树嫩梢为材料 ,研究了培养基、培养时间对茎分化及分化状态保持的影响 .结果表明 ,茶树茎分化需要 2个月以上的诱导培养过程 .茎段产生分化后 ,在不同组分的培养基上交叉培养 ,维持分化能力的时间比在单一培养基上的长 .具有少量母体组织的不定芽苗在其基部分化了体细胞胚、不定芽 ,并在其叶上分化了体细胞胚 .不定芽苗在初代培养中 ,其切口处易诱导出非胚性愈伤组织 ,切除非胚性愈伤组织后 。

甘蔗茎尖培养中减轻酚害

甘蔗茎尖组织预先在无菌水中浸泡30min后,再接种到附加6-BA2.0mg.L-1、NAA0.1mg.L-1的MS培养基中,可减轻外植体的褐变;茎尖诱导培养基中直接附加适量的活性炭(AC,以0.02%为宜,最高不超过0.05%),减轻茎尖组织酚害的效果最理想。另外,在培养基中附加抗氧化剂(如:聚乙烯吡咯烷酮,PVP),或根据外植体的褐变情况及时转移到新鲜的培养基中,均能减轻甘蔗茎尖组织的酚害。

叶原基形态对甘薯茎尖脱毒培养的影响

以带有甘薯羽状斑驳病毒（SPFMV）的渝薯2号，从其块根萌芽上剥取2叶原基形态分别处于突起态、半闭合态和闭合态0．22～0．35mm大小的茎尖为外植体，培养于附加BAP与IAA，BAP与NAA不同激素体积质量分数组合的MS培养基上进行成苗培养，对应再生株系用硝酸纤维素膜酶联免疫吸附检测法（NCMELISA）进行病毒检测．结果表明：茎尖培养最佳的激素体积质量分数组合为0．8～1．4mg／L BAP＋0．01mg／LNAA，有利于茎尖基部发生少量的愈伤组织，芽粗壮且成苗快．成苗率因外植体而不同，闭合态和半闭合态较高，分别达92．9％和88．9％，而突起态成苗率仅为46．7％．脱毒效果也与外植体相关，最佳效果是叶原基突起态，其次是半闭合态和闭合态，分别获得100％，83．9％和71．9％的脱毒植株．

草莓茎尖培养快繁体系研究

以草莓“丰香”品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以不同大小茎尖接种到不同配方的茎尖诱导培养基中,观察草莓茎尖在各种培养基上的生长情况。实验结果表明草莓茎尖的成活率与剥取的茎尖大小有关,与培养基配方有关。在相同的培养基上,剥取茎尖越大,成活率越高。同样以0.5mm大小茎尖,在培养基MS+BA0.5mg/L上的成活率最高,达到66.7%;转接到各增殖培养基上后生长良好,并在MS+BA0.5mg/L培养基上增殖系数最高,为6.05;再生芽转接到生根培养基1/2MS上,培养20d左右,生根率达100%,平均生根6.13条/株。生根苗在全蛭石的基质上驯化,成活率高达98.33%。