泥蚶(Tegillarca granosa)个体发育过程中同工酶基因表达与调控的研究

采用不连续垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对泥蚶(TegillarcagranosaLinnaeus)19个发育阶段的ADH、LDH、EST、IDH、ALP、MDH、GDH、POD、ATPase和ME等10种同工酶的基因表达进行检测分析。结果表明,泥蚶在个体发育过程中随着机体分化和生理活动的改变,同工酶基因的表达呈现出显著的时序变化。在10种酶中,LDH和ATPase两种酶的所有酶带及EST、MDH和ME等的部分酶带在各个发育阶段持续表达,其他酶带只出现在发育阶段的某一或某些阶段,并且表现出了与泥蚶营养方式、代谢形式等生理活动的关联性。在泥蚶的个体发育阶段过程中,IDH、MDH、GDH、ME、ALP等5种酶在32细胞期表达的酶带数剧增,因此32细胞期可能是合子基因表达启动的时间;ADH、EST、LDH、MDH、GDH、ME等6种酶在泥蚶的附着变态期酶带大幅减少或产生新酶带,可能与泥蚶附着期运动方式、代谢强度及生活环境的改变有关。

植物转化酶及其基因表达与调控

蔗糖利用依赖于蔗糖的降解.植物转化酶通过降解蔗糖为己糖,不仅为呼吸作用提供底物,而且作为信号分子调节多种基因的表达,同时转化酶基因的表达也受到多种因素的调控.综述了近年来植物转化酶的种类、特性、功能及其基因表达在转录水平和翻译水平调控机制的研究进展.

植物苯丙氨酸解氨酶基因的表达调控与研究展望

苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonia-lyase,PAL,EC4.3.1.5)是催化苯丙烷代谢途径第一步反应的酶,也是这个途径的关键酶,对植物有非常重要的生理意义。根据有关文献综述了植物PAL的分布与定位、酶学性质,总结了生长发育、钝化因子与调节因子、末端产物等内部因素及光、温、机械损伤与生长调节剂等外部因素对PAL的调控作用,得出外部因子是在转录水平上对酶活性实施调控的结论,并运用酶学和分子生物学方面的知识阐述了其调控机理。还着重阐述了PAL酶在果树上的研究现状与进展,并对其今后的研究及在果树上的应用进行了展望。

昆虫细胞色素P450基因的多样性、进化及表达调控

细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenases,P450s)是由多个功能相关的亚铁血红素-硫醇盐蛋白基因组成的一个基因超家族,在各种内源和外源物质的代谢中起着主要作用。目前GenBank中注册的昆虫P450基因序列已超过1000个,其中双翅目占序列总数的74%,鳞翅目占序列总数的16%。而昆虫P450基因序列已克隆的全长序列中大部分属于CYP4和CYP6家族,两个家族成员分别占总数的20%和45%。利用GenBank中现已注册的昆虫P450基因的cDNA全长序列进行比对并绘制进化树,揭示不同种类昆虫P450的亲缘关系。结果显示基于P450基因的昆虫部分目的进化关系与大部分先前依据其他分子数据或形态分类学得到的昆虫系统进化关系基本吻合。现有研究表明,细胞色素P450基因的表达可能受顺式作用元件(cis-acting element)、反式作用因子(trans-acting factor)或两者共同调控,调控可能涉及转录增强的转录机制或mRNA稳定性增加的转录后机制。

大豆异黄酮对糖尿病大鼠心肌钙调控蛋白基因表达的影响

目的:探讨大豆异黄酮对糖尿病大鼠心肌细胞肌浆网钙调控蛋白基因表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照(NC)组、糖尿病对照(DC)组、大豆异黄酮治疗(ST)组和尼尔雌醇治疗(NT)组。后3组腹腔注射链脲佐菌素55 mg/kg制备糖尿病模型。第7周起,NC、DC组予0.5%羧甲基纤维素钠10 m.lkg-1.d-1,ST组予大豆异黄酮120 m l.kg-1.d-1,NT组予尼尔雌醇混悬液每周0.2 mg/kg灌胃2次。第12周末记录离体心室内压曲线并分析。取心室肌组织,应用RT-PCR技术测定钙调控蛋白的基因表达。结果:与NC组比,DC组大鼠左心室收缩压、平均压、室内压最大上升/下降速率降低(P<0.01);与DC组比,ST组、NT组以上指标均增高(P<0.01)。而左心室舒张末压,DC组明显高于NC组(P<0.01);ST组、NT组均低于DC组(P<0.01)。与NC组比,DC组大鼠心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA)、兰尼碱受体2型(RyR2)、1,4,5三磷酸肌醇受体2型(IP3R2)mRNA表达降低,但受磷蛋白(PLB)mRNA表达增高(P<0.01)。与DC组比,ST组、NT组大鼠心肌SERCA、RyR2、IP3R2mRNA表达增高,而PLB mRNA表达降低(P<0.01)。结论:大豆异黄酮可以改善糖尿病大鼠左心室功能,可能与其上调心肌SERCA、RyR2、IP3R2mRNA的表达和下调PLB mRNA的表达有关。

药用植物PAL基因及其功能研究进展

苯丙烷代谢途径是植物主要代谢途径之一,可产生黄酮、酚酸和木质素类等物质,这些物质不仅参与调控植物生长发育和抗逆等生理活动,还被用于预防和治疗疾病,是决定药用植物品质的关键因素之一。苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)负责催化苯丙烷类代谢途径中第一个反应,是该途径的关键酶和限速酶。本文就药用植物中PAL基因的基本特性、表达调控机制等方面的研究进行综述,为进一步阐明药用植物中PAL的功能提供参考。

黄曲霉素合成相关基因表达与环境因素的关系

简单介绍了黄曲霉毒素的发现、分布、危害和范围,详细叙述了黄曲霉毒素生物合成中相关基因的表达与调控,概述了黄曲霉毒素合成中的关键基因、酶和调控因子重要性,分析了影响黄曲霉毒素合成的环境因素。不仅在基础理论上对黄曲霉毒素合成机理进行了深入探讨,而且在应用研究上为减少粮食和食品受到重金属污染和黄曲霉毒素危害提供了新的思路。

木本植物次生维管系统形态建成的基因调控与信号转导研究进展

树木的次生生长决定着木材的产量,具有重要的经济价值。围绕着草本模式植物拟南芥和木本模式植物杨树,对近年来有关维管组织形态建成的信号机制与基因调控的研究进展进行概括,主要内容为:维管组织的功能与形成;维管形成层的细胞类型及基因表达特异性;木质部和韧皮部细胞极性的有关关键基因;维管形成层干细胞的分化机制;维管组织发育中的激素调控网络。重点对比拟南芥和杨树这2种模式物种之间的异同。

表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体的构建、包装和扩增

目的对单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子质料装载降钙素基因相关肽,并进行包装和扩增。方法分别钓取pac基因和γ134.5基因,克隆入pMD18-T载体中。pSV载体经HindⅢ和BamHⅠ双酶切,获得lacZ片段,自身环化形成pUPO-γ134.5-lacZ。合成CGRP基因序列,将此基因替换pUPO-γ134.5-lacZ质粒中的lacZ基因,插入γ134.5基因位点中,即pUPO-Δγ134.5-CGRP。再用单纯疱疹病毒温敏株辅助在BHK细胞中包装、扩增,通过检测lacZ的表达反映扩增子病毒滴度。结果酶切鉴定证实重组子构建成功。重组扩增子质粒的包装、扩增由BHK细胞的形态变化和X-gal原位检测载体lacZ的表达证实。扩增子假型病毒滴度达3.5×105TU/ml。结论本研究构建、包装、扩增的携带降钙素基因相关肽的假型病毒有较高感染性,这种扩增子病毒可作为实验研究的有力工具。

痘苗病毒天坛株N1L基因表达调控序列的克隆与特性分析

本研究以痘苗病毒天坛株(Vaccinia Virus Tian Tan Strain,VTT)为对象,旨在明确N1L基因的表达调控序列。我们克隆了N1L起始密码子ATG上游不同长度的调控序列片段,构建了表达载体,并利用报告基因萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,Fluc)的表达来确定N1L表达调控序列区域。通过PROMO在线预测网站,预测了与调控序列结合的转录因子。结果显示,VTT中N1L基因的表达受到上游调控序列的调控,其中以-404bp起始的片段启动的Fluc表达量最高。PROMO预测表明该区域存在多个转录因子结合位点。本研究为痘苗病毒基因表达特点的研究提供了实验依据,并为N1L基因功能及机制研究奠定了基础。

查尔酮合酶与查尔酮异构酶基因特征及转基因应用

查尔酮合酶和查尔酮异构酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶.底物先是由查尔酮合酶的作用形成袖皮素查尔酮化合物,然后再由查尔酮异构酶异构化成不同的黄酮类化合物.查尔酮合酶和查尔酮异构酶广泛存在于多种植物中,涉及了苯丙氨酸代谢途径中各种具有防御性产物的生物合成,在植物的抗菌机制、抗胁迫、细胞的发育和分化、色素的积累和外源基因的表达等方面起着重要的作用.就查尔酮合酶和查尔酮异构酶的结构特点、编码基因的克隆及序列特征、基因的表达调控以及转基因应用等方面进行了系统的综述,并对其今后进一步的研究提出了适宜的建议.

猪肥胖基因(ob)部分序列的克隆与多态性分析

猪肥胖基因（ｏｂ）部分序列的克隆与多态性分析戴茹娟１李宁２吴常信１（１．中国农业大学动物科技学院，北京１０００９４）；（２．中国农业大学农业生物技术重点实验室，北京１０００９４）ＰａｒｔｉａｌＣｌｏｎｉｎｇｏｆＰｏｒｃｉｎｅＯｂｅｓｉｔｙＧｅｎｅａｎ...

几丁质酶基因及其应用新进展

几丁质酶能降解真菌和昆虫细胞壁的主要成分几丁质而在生物防御中具有重要的作用。近年来随着重组DNA技术的进一步发展和对几丁质酶基因表达与调控机理研究的进一步深入,将几丁质酶基因导入植物增强其抗真菌能力方面的研究取得了较大进展,促进了几丁质酶的产业化应用。

冠心病的基因诊断与基因治疗(一)

基因的表达与调控是分子心血管病学研究中最激动人心的进展，某些基因的异常表达在冠心病的发生与发展过程中起着极为重要的作用。基因学诊断与基因学治疗代表了一种全新的技术和方法，对解决冠心病的早期诊断、预防及治疗等方面的疑难问题具有无可比拟的潜力。

逆境胁迫下植物LEA蛋白的研究进展

在逆境胁迫条件下,植物体内会产生诱导蛋白,LEA蛋白(Late embryogenesis abundant protein)是其中最常见的一类。本文就逆境胁迫下植物体内LEA蛋白的产生、特性、生理作用和基因的表达调控等作一简要阐述,并对LEA蛋白今后的研究方向及运用前景进行了展望。

苯丙氨酸解氨酶研究进展

苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL,EC4.3.1.5)广泛存在于各种植物和少数微生物中。它是连接生物初级代谢和苯丙烷类代谢、催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶,是苯丙烷类代谢的关键酶和限速酶,也是苯丙烷类代谢途径中研究最多的酶。综述PAL的存在与分布、基本特性、在植物和微生物中的研究现状,重点介绍植物PAL的基因结构、表达特点以及基因表达调控机制,为PAL的深入研究指明了方向。

逆转录病毒载体介导的RNAi抑制乳腺癌细胞BSP基因表达

目的构建抑制人日5P基因表达的RNA干扰逆转录病毒载体，筛选建立稳定抑制BSP表达的MDA-MB-231BO细胞系。方法构建靶向人BSP基因的逆转录病毒重组质粒pSilencer—BSP27、pSilencer—BSP81和pSilencer—BSP100。将其包装成病毒后感染MDA—MB-23180细胞。用RT—PCR和Western印迹检测成功感染细胞（231BO．BSP27、231BO．BSP81、231BO—BSP100细胞）BSP基因的抑制效果。结果双酶切和测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同。RT—PCR和Western印迹结果显示231BO—BSP27、BO—BSP81和231BO—BSP100细胞BSP基因在mRNA水平和蛋白水平抑制效率分别为：70．8％、79．4％和30．1％：69．3％，75．2％和27．8％。结论成功构建抑制人BSP基因表达的RNAi逆转录病毒载体pSilencer．BSP27、pSilencer．BSP81和pSilencer—BSP100。获得高效稳定抑制BSP表达的231BO—BSP27、231BO．BSP81细胞系。

C-反应蛋白基因过表达诱导SD大鼠血压升高的实验研究

目的研究C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)重组质粒过表达诱导SD大鼠发生高血压,继而引起心血管功能障碍和重塑。方法18只SD大鼠随机分为3组,每组6只,分别给予尾静脉注射pcD-NA3·1-CRP重组质粒、pcDNA3·1空质粒及生理盐水。定期检测尾动脉血压,28d后处死动物,并于处死动物前进行心脏血流动力学、血管张力及心血管系统重塑分析。结果实现C-反应蛋白在大鼠体内的过表达。与两个对照组相比较,pcDNA3·1-CRP组血压升高的同时,伴有心脏收缩与舒张功能的显著障碍,胸主动脉舒张功能显著降低,心血管系统重塑。结论炎性因子C-反应蛋白可以引起血压升高。