塞隆骨与虎骨中矿物质元素的比较

目的 对比分析国家一类动物药塞隆骨和禁用传统中药材虎骨中的 19种矿物质元素的含量。方法 骨骼样品经灰化或消解处理后 ,采用原子吸收光谱法、氢化物原子荧光光谱法、催化极谱法等分析方法测定矿物质元素。结果 两种动物骨骼中元素含量差异显著 ,塞隆骨 11种元素高于虎骨 ,特别是 Cu、Zn、Fe、Mn、Se等生命活动必需微量元素塞隆骨极为显著地高于虎骨 ,而组成骨骼的主要成分 Ca、P则为虎骨高于塞隆骨。矿物质元素在头骨、脊梁骨和腿骨中分布非常不平衡 ,多数元素以头骨中分布最为丰富 ,而 5种常量元素 Ca,P,Na,Mg,K的含量为腿骨 >头骨 >脊梁骨。骨骼中主要成分 Ca和 P的存在形式主要为羟磷灰石 Ca1 0 (PO4 ) 6 (OH) 2 。结论 塞隆骨骨骼中的矿物质元素与虎骨有可比性 ,必需微量元素塞隆骨明显优于虎骨。

二维制备高效液相色谱分离塞隆骨强极性多肽

本实验建立了一种新型的利用高正交性的二维制备型高效液相色谱系统分离强极性动物药多肽的方法。本文以塞隆骨水提取物为研究对象,以亲水性C18AQ制备型高效色谱柱为第一维分离柱,首先在一维分离中将目标混合物分成若干组份;然后以C18MP制备型高效液相色谱柱为第二维色谱分离柱,将第一维分离后得到的组份纯化为单体化合物。本研究最终得到5个塞隆骨单体化合物,化合物纯度均超过98%。经Nano-LCESI-MS/MS鉴定和搜库分析,这些多肽的序列分别为:KTAILVKE、RGAPQDQE、LVGPGAPGR、GFAGD和KPQWHP。此研究方法速度快、效率高且重复性好,可以对类似的研究提供借鉴。

塞隆骨和虎骨的羟脯氨酸含量分析比较

用改良的Woessner第Ⅰ法测定和比较了塞隆骨和虎骨的L 4 羟脯氨酸的含量。结果表明 :原药材中羟脯氨酸含量塞隆骨略低于虎骨 ,但在水煎液干膏部分L 4 羟脯氨酸含量塞隆骨高于虎骨 。

塞隆骨提取物对成骨样细胞增殖及凋亡作用的研究

目的:研究塞隆骨提取物对体外培养成骨样细胞代谢功能的调节作用及对其凋亡的影响。方法:采用超临界萃取法制备塞隆骨的脂、醇、水提物、水煎提取液及骨胶提取物,以大鼠成骨样细胞ROS 17/2.8为细胞模型,添加塞隆骨各提取物至大鼠成骨细胞培养体系中,MTT法测定成骨样细胞的增殖情况,以流式细胞术检测成骨样细胞凋亡比例。结果:1×10-2g.mL-1塞隆骨脂和水提物对大鼠成骨样细胞ROS 17/2.8有显著的促进增殖作用(P<0.01);与空白组相比,各塞隆骨提取物使成骨细胞的亚二倍体峰比例明显减少,琼脂糖凝胶电泳结果表明这些提取物能够降低成骨样细胞的凋亡率,推迟凋亡的发生。结论:塞隆骨通过促进成骨样细胞的增殖,降低成骨样细胞的凋亡率和推迟其凋亡的发生,来发挥健骨的作用。

塞隆骨提取物对体外大鼠成骨样细胞ROS17/2.8的影响

目的研究塞隆骨提取物对体外培养大鼠成骨样细胞ROS17/2.8代谢功能的调节作用,从而在细胞水平上阐述塞隆骨防治骨质疏松的作用机制及药效成分的筛选。方法采用超临界萃取法制备塞隆骨的脂、醇、水提液及水煎提取液,用MTT法测定塞隆骨脂、醇、水提液及水煎液对成骨样细胞的增殖作用;测定碱性磷酸酶(ALP)活性,观察上述提取液对细胞分化的影响。结果10mg/mL塞隆骨脂提液和水提液对大鼠成骨样细胞ROS17/2.8有显著的增殖作用(P<0.01);ALP检测结果显示,10mg/mL脂提液能极显著增强成骨样细胞内ALP活性(P<0.01),1.0、0.1mg/mL能提高ALP活性(P<0.05);10mg/mL水提液能使ALP活性升高(P<0.05)。结论塞隆骨脂和水提取液中分别存在有较高活性的促成骨样细胞增殖、分化的物质,可作为虎骨的替代中药。

塞隆骨抗炎作用的实验研究

通过塞隆骨和虎骨抗炎作用对比研究 ,比较二者抗炎效果的异同 ,探讨在抗炎方面塞隆骨代虎骨使用的可能性。采用大鼠佐剂性关节炎原发和继发病变实验 ,皮肤毛细血管渗透性实验和胸膜炎白细胞游走实验。结果 ,塞隆骨和虎骨对大鼠佐剂性关节炎原发病变和继发性病变 (尾结节 ) 均有明显的预防和治疗作用 ,对大鼠皮肤毛细血管渗透性也有明显的抑制作用 ,而且塞隆骨与虎骨还可明显减少胸膜炎大鼠胸腔内渗出液和白细胞数 ,即具有抑制大鼠胸膜炎白细胞游走的作用 ,实验结果中 ,同剂量的塞隆骨相当于虎骨作用强度 ,无显著性差异。塞隆骨和虎骨对多种抗炎实验模型均有明显作用 ,在抗炎作用方面塞隆骨代替虎骨使用是可行的。

塞隆骨镇痛作用和对脑内单胺类神经递质的影响

目的 :通过塞隆骨和虎骨镇痛作用对比研究 ,比较二者镇痛效果的差异 ,探讨在镇痛方面塞隆骨替代虎骨使用的可能性。方法 :采用小鼠醋酸扭体实验、电击尾致痛实验 ,另外测定了大鼠脑内单胺类神经递质含量。结果 :塞隆骨和虎骨不论对小鼠醋酸扭体还是电击尾致痛 ,均表现出良好的镇痛作用 ,但塞隆骨和虎骨对大鼠脑内单胺类神经递质含量无明显影响。结论 :塞隆骨和虎骨在镇痛方面有类似的药效和作用强度 ,而其镇痛作用机制可能不是通过中枢产生作用的。

塞隆骨对大鼠骨质疏松症治疗作用的研究

目的 :通过塞隆骨对大鼠骨质疏松症作用的研究 ,探讨塞隆骨治疗骨质疏松症的可能性。方法 :给大鼠饲喂低钙饲料 ,饮用去离子水 ,并注射地塞米松引起骨质疏松症 ,再灌胃塞隆骨治疗 5周 ,用骨矿物质含量分析仪测定骨密度 ,同时测定羟脯氨酸、骨灰分和骨钙含量 ,并进行骨组织形态学观察。结果 :塞隆骨和虎骨均可明显增加骨质疏松大鼠骨密度 ,尤其对髂骨密度、腰椎密度增加更明显 ,同时也可明显增加骨灰分和骨钙含量 ,另外对骨组织形态学异常也有明显改善作用 ,但对大鼠体重、血清钙和骨羟脯氨酸含量无明显影响。结论 :塞隆骨对骨质疏松模型大鼠的骨质疏松症状 ,具有较好的治疗作用。

塞隆骨对骨缺失大鼠的作用研究

目的通过塞隆骨对大鼠骨缺损修复速度和骨质疏松症治疗作用的研究,探讨塞隆骨对骨缺失大鼠的强筋健骨作用。方法人为造成大鼠股骨缺损,观察塞隆骨对创口外观、新生骨厚度、荧光强度及显微改变的影响;另给大鼠饲喂低钙饲料,饮用去离子水,注射地塞米松引起骨质疏松症,观察塞隆骨对骨密度、骨灰分和骨钙含量的影响。结果塞隆骨组骨缺损区域损伤明显好转,新生骨较厚,骨质细胞分化明显,成熟,骨小梁一致,其骨损伤修复作用明显好于对照组;另外塞隆骨可明显增加骨质疏松大鼠骨密度,尤其对髂骨密度、腰椎密度增加更明显,同时可明显增加骨灰分和骨钙含量。结论塞隆骨有明显促进骨损伤大鼠的骨折愈合修复作用和治疗骨质疏松模型大鼠的骨质疏松症状的作用。

塞隆骨活血化瘀作用研究

目的 塞隆骨与阳性对照药尪痹冲剂的活血化瘀作用进行对比观察, 比较二者活血化瘀效果的异同, 探讨塞隆骨在活血化瘀方面使用的可能性。方法 采用动物血液微循环实验及凝血时间测定实验。结果 塞隆骨、尪痹冲剂均能改善大鼠肠系膜微循环, 对大鼠肠系膜A-V吻合处的A-V、平行小A-V及微小A-V均有非常显著的扩张作用, 使血流速度增加,从而表现出活血化瘀的作用。塞隆骨、阳性对照药尪痹冲剂均无延长凝血时间的作用.?结论 塞隆骨具有活血化瘀作用,其活血化瘀的机理主要为其可扩张毛细血管, 增加血液流速。

塞隆骨资源匮乏

高原鼢鼠是草原上的一种害兽,但现在已经被开发出来,成为有望替代虎骨的一种新型中药材。 说塞隆是草原上的一害可一点也不冤枉,他虽然个子小,可挖洞的本事却挺大。他们的杰作常常会使草原上的骑手马失前蹄。据介绍,如果平均一亩地要是有一个这个动物,那么这亩地就给破坏得很厉害,比较严重时。

塞隆骨原动物高原鼢鼠核基因18S rRNA序列测定与分析

目的 :测定仓鼠科动物高原鼢鼠Myospalaxbaileyi的核rDNA基因序列 ,为塞隆骨正品基原检定提供分子依据。方法 :采用PCR直接测序技术测定高原鼢鼠 18SrRNA基因核苷酸序列并作序列特征分析。结果 :高原鼢鼠的 18SrRNA序列长度为 185 1bp。根据排序比较 ,高原鼢鼠与 2种鼠科动物间的DNA序列同源性为 72 .0 4 %～ 72 .18%。结论 :通过基因序列分析 。

青藏高原地区塞隆骨资源的分子鉴定和地理分布

为了提供塞隆骨药材资源地理分布的准确资料,研究对青藏高原地区的鼢鼠物种进行了分子鉴定。基于线粒体细胞色素B(cytb)基因测序结果,提取单倍型序列,并利用最大似然法(ML)和贝叶斯法(BI)构建系统发育树,以此判定每个个体的物种类型。共对35个种群的503个样品进行了测序,得到了1 140 bp长度的cytb基因全序列,从中检测到150个单倍型。其中有20个单倍型属于甘肃鼢鼠,有4个单倍型属于斯氏鼢鼠构成单系群,其余126个单倍型属于高原鼢鼠。在35个种群中,有28个全部为高原鼢鼠,有5个种群全部为甘肃鼢鼠,另有2个种群分别由高原鼢鼠+甘肃鼢鼠(DT2)、高原鼢鼠+斯氏鼢鼠(ZN3)混合而成。结果表明,青海湖周边地区和黄河贵德段上游附近地区可以作为塞隆骨药材的正宗来源地,而利用cytb基因可以准确鉴定鼢鼠物种,从而精确判定塞隆骨正宗药材资源的地理分布。

塞隆骨形态鉴别研究

塞隆骨是青藏高原特有的仓鼠科动物高原鼢鼠Myospalax baileyi的干燥全架骨骼,国家食品药品监督管理局一类新药材。在药材检验工作中,缺少高原鼢鼠骨骼形态学研究,难以鉴定塞隆骨。为更好执行并完善塞隆骨质量标准,该文使用啮齿动物学,中国鼢鼠研究文献及药材鉴定学对塞隆骨生药及各部分粉末显微形态特征进行研究,同时对其详细观察、记述并用标号标出特征部位,应用研究结果能够更有效鉴别塞隆骨药材。

塞隆骨替代豹骨后再造丸毒理学研究

目的研究塞隆骨替代豹骨后再造丸急性毒性及长期毒性。方法应用最大耐受量(MTD)测定法,对塞隆骨替代豹骨后再造丸进行小鼠急性毒性实验;大鼠长期毒性实验采用连续26周灌胃给药,分别于13周和26周每组处死10只和20只动物,其余动物停药进行恢复期观察4周,观察大鼠饮食、活动、体重、进食量、外观体征等情况,并进行血液、生化、病理学等检查。结果急性毒性实验未见动物死亡,MTD为20 g/kg,相当于人临床剂量(0.128 g/kg)的156倍;长期毒性实验动物未出现严重中毒表现,各脏器无病理性变化。结论长期大剂量服用塞隆骨替代豹骨后再造丸未见明显毒性。

再造丸塞隆骨替代豹骨后抗脑缺血效应机制的研究

目的:观察塞隆骨替代豹骨后再造丸抗脑缺血的效应机制,为替代合理性提供药理学实验数据支持。方法:采用小鼠断头急性脑缺血实验和小鼠双侧颈总动脉结扎法造模,观察塞隆骨替代豹骨后再造丸(以下简称再造丸替代后)对小鼠急性脑缺血的影响。采用大鼠线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)脑缺血模型,观察再造丸替代后对大脑梗塞面积、神经功能评分以及对丙二醛(MAD),超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)的影响。采用"胶原蛋白-Adr"诱发小鼠体内血栓形成模型观察偏瘫形成率和死亡率;采用急性血瘀模型大鼠管观察血液流变学及血小板聚集率,评价再造丸替代后的活血化瘀作用。结果:再造丸替代后可增加小鼠断头后急性脑缺血的呼吸次数和呼吸持续时间,与再造丸组比较无显著性差异;可显著延长双侧颈总动脉结扎法小鼠急性脑缺血的存活时间,与再造丸组比较无显著性差异。可显著减小MCAO大鼠梗塞面积;降低缺血后4,24 h模型大鼠神经功能行为学评分;各给药组均可显著降低模型大鼠血清MDA含量;低剂量组可提高MCAO模型大鼠血清SOD活力;各剂量组均可显著升高大鼠血清NO水平,且优于再造丸组。可减少尾静脉注射"胶原蛋白-Adr"形成体内血栓所致小鼠5 min内的死亡率,提高15 min内的偏瘫恢复率。可降低血瘀模型大鼠全血血流变切变率降低ADP诱导的血小板聚集率。结论:再造丸替代后对脑缺血有保护作用,保护机制可能与其调节抗氧化能力及改善血流变学有关。

塞隆骨抗炎作用(Ⅱ)

目的 :通过塞隆骨抗炎作用研究 ,观察塞隆骨抗炎作用 ;方法 :采用蛋清和甲醛炎症模型 ,采用冷冻法观察抗寒冷作用 ;结果 :塞隆骨对大鼠蛋清性关节炎有明显的预防作用 ,对大鼠甲醛性关节炎有明显治疗作用 ,且呈量效关系 ,与同剂量虎骨作用强度相当 ;塞隆骨还能显著延长小鼠在低温环境中的存活时间 ;其最大耐受量大于 2 40g生药 kg;结论 :塞隆骨抗炎作用明显 ,这也是其治疗风湿、类风湿性关节炎的作用基础 ,同时可提高小鼠抗冷冻能力 。