女贞子-墨旱莲药对提取物的指纹图谱和化学成分鉴定研究

目的建立女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱以控制其质量,并对提取物中所含有的化学成分进行结构鉴定。方法采用HPLC法,固定相为ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;建立15批不同产地女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱,对其进行相似度评价、聚类分析和正交偏最小二乘方判别分析;采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)联用技术,分别在正、负离子扫描模式下对提取中的化学成分进行检测,基于高分辨质谱一级和二级数据进行结构鉴定。结果由不同产地药材随机组合的15批女贞子-墨旱莲药对提取物的相似度介于0.865~0.992之间,药对指纹图谱中共确定了16个共有峰,指认了其中7个色谱峰;液质联用共检测到55个化合物,采用对照品准确鉴定了7个成分的化学结构,并推测了其它48个化合物的可能化学结构。结论建立的指纹图谱方法简便可靠,重复性好,可用于女贞子-墨旱莲药对提取物的质量控制研究;UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS联用技术可实现对女贞子-墨旱莲药对提取物中化合物的结构鉴定,为其后续研究奠定了基础。

墨旱莲及蟛蜞菊内酯抗骨质疏松研究进展

骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种常见的骨代谢疾病,以骨量减少、骨微观结构改变、易发生骨折为特征的骨质病变。目前,西药治疗OP往往会引起不同程度的不良反应,中药治疗OP具有一定优势和特色。以中医理论“肾主骨生髓”为指导,补肾中药常用于临床治疗OP,效果显著。墨旱莲(Ecliptae Herba)为滋补肝肾的传统中药。新近研究表明,墨旱莲及其主要成分蟛蜞菊内酯具有良好的抗骨质疏松作用。对墨旱莲及蟛蜞菊内酯防治OP的骨形成、骨吸收作用及潜在分子机制进行综述,旨在为墨旱莲及蟛蜞菊内酯的临床应用与开发提供借鉴。

墨旱莲黄酮类提取物对运动大鼠抗疲劳作用的研究

目的:研究大鼠药物干预后的力竭时间、血清生化指标和糖原变化,为墨旱莲黄酮类提取物应用于缓解运动性疲劳、提高运动能力等提供依据。方法:健康雄性大鼠40只,随机分成安静组(Q)、运动组(S)、墨旱莲安静组(EQ)和墨旱莲运动组(ES),每组10只,安静组和运动组正常喂养,墨旱莲安静组和墨旱莲运动组每天按800 mg·kg~(-1)的剂量服用一次,运动组大鼠在跑台上进行6周训练,第6周最后一天给药30 min后,4组大鼠进行强迫性坡度为0°的力竭跑台运动。力竭后麻醉采血,对血清指标、血糖、肌糖原和肝糖原进行测试。数据采用SPSS17.0作方差分析和均数比较。结果:墨旱莲黄酮类提取物能够延长大鼠的力竭时间,墨旱莲黄酮类提取物联合运动锻炼能够有效地抑制由于运动导致的血清指标升高,有效提高血糖、肌糖原和肝糖原水平。结论:墨旱莲黄酮类提取物配合运动可以有效地提高机体的抗自由基、抗氧化能力,提高肝糖原和肌糖原储备量和利用率,降低运动对肝脏和骨骼肌的损伤,提高运动能力。

P-HPLC法同时测定不同产地不同采收期墨旱莲中6种成分的含量

目的建立同时测定不同产地、不同采收期墨旱莲药材中咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草素、蟛蜞菊内酯6种化学成分的HPLC含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.3%甲酸水溶液,梯度洗脱;检测波长340 nm;流速0.9 mL·min^(-1);柱温30℃。结果咖啡酸线性范围为0.02008~0.20080μg(r=0.9998),平均回收率(n=6)为99.07%;木犀草苷线性范围为0.04084~0.40840μg(r=0.9999),平均回收率(n=6)为99.13%;异绿原酸B线性范围为0.08186~0.81860μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为98.46%;异绿原酸C线性范围为0.07966~0.79660μg(r=0.9995),平均回收率(n=6)为97.84%;木犀草素线性范围为0.08104~0.81040μg(r=1.0000),平均回收率(n=6)为97.89%;蟛蜞菊内酯线性范围为0.40280~4.02800μg(r=0.9992),平均回收率(n=6)为98.18%。不同产地的墨旱莲药材6种成分含量差异较大,江苏宿迁含量最高。结论该方法稳定可靠、准确、重复性好。适合于墨旱莲药材中多种成分的含量测定研究,为墨旱莲药材寻找更佳产地及采收期提供了科学依据。

墨旱莲总皂苷的质量标准研究

目的制定墨旱莲总皂苷的质量标准。方法测定5个不同产地的墨旱莲药材的水分、浸出物的含量;应用HPLC-ELSD法,建立墨旱莲中总皂苷含量的测定方法:对5个产地,共计10个批次药材进行含量测定。精密称取墨旱莲粉末1.0 g,置250 mL圆底烧瓶中,加入20 mL 70%乙醇回流提取2次,每次2 h。合并提取液,回收溶剂,提取物浸膏加甲醇溶解,过滤,定容至一定体积,测定含量。结果各产地药材含水量均符合《中华人民共和国药典》规定;药材醇溶性浸出物平均含量为22.74%,初步将浸出物含量标准定为不低于20%;10批药材墨旱莲总皂苷平均含量为0.56%,制定标准为不低于0.45%。结论2020版《中华人民共和国药典》一部中并没有对墨旱莲总皂苷类成分含量做出明确规定,该研究对墨旱莲总皂苷的质量标准做出补充,为墨旱莲皂苷成分的进一步开发利用奠定基础。

墨旱莲化学成分及药理作用研究进展

墨旱莲Eclipta prostrata L.为菊科植物鳢肠的干燥地上部分,是二至丸、凉血安神片等中成药的重要组成部分之一。近些年,对墨旱莲展开了大量的化学成分和药理作用方面研究,证实了墨旱莲中含有三萜、甾体、黄酮、香豆素、噻吩、酚酸、生物碱等化学成分,该植物及其提取物具有保肝、抗骨质疏松、抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、止血、乌发等药理作用。文章参阅近些年文献以及相关研究深入阐述墨旱莲化学成分以及药理作用,以期为墨旱莲临床应用研究提供理论依据。

基于网络药理学分析生蒲黄-墨旱莲药对治疗糖尿病视网膜病变的作用机制

目的:通过网络药理学研究方法探讨生蒲黄-墨旱莲药对治疗糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)的作用机制。方法:通过中药药理数据库和分析平台(TCMSP)检索药物的活性成分和靶点;在GeneCards、DrugBank和OMIM数据库检索糖尿病视网膜病变相关靶点;利用Venny工具找出疾病与药物的交集靶点;通过Sting数据库对交集靶点进行分析;结果导入Cytoscape 3.9.1软件进行拓扑异构分析;筛选出核心靶点并绘制蛋白质-蛋白质相互作用网络图。将交集靶点录入Metascape进行基因本体论(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,得到潜在作用通路。结果:(1)药物活性成分及靶点:通过TCMSP数据库筛选出生蒲黄-墨旱莲活性成分17个、作用靶点222个。(2)疾病靶点:经GeneCards、DrugBank、OMIM数据库筛选去重后获得相关的疾病靶点4005个,将药物靶点与疾病靶点交集后共获得108个共有靶点。(3)核心靶点:通过Cytoscape 3.9.1软件筛选出核心靶点为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(Akt Serine/Threonine Kinase 1,AKT1)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)A、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)等。(4)KEGG和GO富集分析:GO富集分析确定了1772个条目(P<0.01),KEGG通路富集筛选得到195条信号通路(P<0.01),主要有肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)信号通路、缺氧诱导因子(Hypoxia-inducible Factor,HIF)-1α信号通路、癌症信号通路、糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物(Advanced Glycation End Products,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(AGE Receptor,RAGE)信号通路、VEGF信号通路等。结论:生蒲黄-墨旱莲治疗DR的作用机制可能与抗炎、抗氧化、抑制新生血管生成等作用有关。

墨旱莲乙酸乙酯总提物对正常小鼠免疫功能的影响

目的 研究墨旱莲乙酸乙酯总提物 (EAEEP)对小鼠免疫功能的影响。方法 以大、中、小 3个剂量给药 ,考察 EAEEP对小鼠免疫脏器系数、碳粒廓清指数、迟发性变态反应、血清溶血素及脾抗体形成细胞等指标的影响。结果 EAEEP可显著降低小鼠的脾指数及碳粒廓清指数 ,抑制迟发性过敏反应 ,降低溶血素水平。EAEEP可显著提高小鼠的胸腺指数 ,对脾细胞抗体形成功能无显著影响。

墨旱莲复方提取物的活性及洗发乳的研制

以墨旱莲复方提取物为主要活性成分,研制了一款中药复方洗发乳。采用紫外分光光度法测定复合提取物中总有效成分含量,通过体外抗氧化试验研究党参复方的抗氧化能力。根据洗发水配制原则,筛选以氨基酸表面活性剂为主的基本配方,并对其进行评价。结果显示,墨旱莲复方提取物中的总多酚含量为29.68%、总黄酮含量69.344%、总皂苷含量为17.468%;抗氧化试验表明墨旱莲复方清除ABTS自由基、DPPH自由基、羟自由基能力在一定范围随着复方提取物浓度的增大而增强;性能评价表明制备的洗发液符合国家标准。表明墨旱莲复方可以用于中药洗发乳的开发。

墨旱莲乙醇提取物动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成的影响

目的选择离体实验中对黑色素合成的关键酶—酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)有激活作用的墨旱莲(旱莲草),研究其动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成及相关基因犤TYR、TYR相关蛋白(TRP-1/2)mRNA犦表达的影响。方法以棕色豚鼠为动物模型,用Schmorl法染色,计数含黑素的细胞;用多巴(DOPA)-氧化酶染色,计算每100个基底细胞中DOPA阳性细胞数。培养的小鼠B16黑素瘤细胞以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、氢氧化钠(NaOH)法和体外氧化DOPA反应方法分别测定细胞的增殖活性、黑素生成量及TYR活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TYR及其TRP-1/2基因的表达。结果墨旱莲乙醇提取物可使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多,使豚鼠表皮内DOPA阳性细胞增多(P<0.05);具有促进小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及TYR活性作用(P<0.05),对细胞TYR基因有上调作用,而对TRP-1/2mRNA的表达无明显作用。结论墨旱莲乙醇提取物具有促进黑素合成及上调酪氨酸酶基因表达的作用,对白癜风色素恢复有较好应用和开发的前景。

墨旱莲化学成分的研究

目的 研究中药墨旱莲的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱和HPLC进行分离 ,根据IR ,MS ,1H NMR ,13 C NMR等光谱技术和水解等方法鉴定化合物的结构。结果 鉴定了 4个化合物 ,分别为刺囊酸 (Ⅰ )、刺囊酸 3 O β D 吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷 (Ⅱ )、豆甾醇 3 O β D 吡喃葡萄糖苷 (Ⅲ )和槲皮素 (Ⅳ )。 结论 Ⅱ为新化合物 ,命名为eclalbasaponinXⅢ。

中药墨旱莲中的三萜皂苷

目的 研究中药墨旱莲EcliptaprostrataL .中的三萜皂苷化合物。方法 应用柱色谱和HPLC法分离纯化 ,通过光谱分析 (IR ,MS ,1 HNMR ,1 3 CNMR ,DEPT ,HMQC和HMBC)鉴定其化学结构。结果 分离并鉴定了 5个三萜皂苷 ,其中 2个新化合物eclalbasaponinsXI(4)和XII(5 )的结构分别为 :3 O [β D 吡喃葡糖 (1→ 2 ) β D 吡喃葡糖 ] 16α 乙氧基 齐墩果酸 2 8 O β D 吡喃葡糖苷 (4)和 3 O [(2 O 硫酰基 β D 吡喃葡糖 ) (1→ 2 ) β D 吡喃葡糖 ] 刺囊酸 2 8 O β D 吡喃葡糖苷 (5 )。 结论 4和 5为新化合物 ,1和 5具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性。

墨旱莲化学成分及药理活性的初步研究

目的：中药墨旱莲植物抗肝炎活性成分的研究。方法：醇提、硅胶柱层板法分离及药理活性筛选。结果：分离得到４个化合物，经光谱学分析鉴定了其中２个化合物，分别为豆甾醇（ｓｔｉｇｍａｓｔｅｒｏｌ，Ⅰ）和α三噻吩（αｔｅｒｔｈｉｅｎｙｌ，Ⅱ）。结论：化合物Ⅱ为首次从该植物中分得，。初步药理实验表明。

反相高效液相色谱法同时测定墨旱莲中的蟛蜞菊内酯和异去甲基蟛蜞菊内酯

建立了同时测定墨旱莲中香豆草醚类成分蟛蜞菊内酯和异去甲基蟛蜞菊内酯含量的高效液相色谱法。采用Kromasil C18柱（250mm×4．6mm，5um），流动相为甲醇-0．5％醋酸水溶液（体积比为55：45），流速为1．0mL／min，检测波长为351nm，柱温为30℃，进样量为20uL。在上述条件下测得的异去甲基蟛蜞菊内酯和蟛蜞菊内酯的质量浓度分别在1．6～32．0mg／L和5．6～112．0mg／L时与色谱峰面积之间的线性关系良好，二者高、中、低浓度条件下的平均加标回收率分别为97．5％～98．2％和99．0％～100．2％。该方法简便、快速、准确，可作为墨旱莲质量控制的一个有效方法。

墨旱莲的化学成分研究

目的研究墨旱莲的化学成分。方法应用溶剂法进行提取,硅胶、Sephadex LH-20等手段反复柱色谱分离、纯化,通过熔点、NMR等手段确定结构。结果从其乙醇提取物的石油醚、醋酸乙酯以及正丁醇萃取部分共得到10个化合物,分别为2,2′,5″,2″-三噻吩-5-羧酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、芹菜素(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、木犀草素(Ⅴ)、蟛蜞菊内酯(Ⅵ)、去甲蟛蜞菊内酯(Ⅶ)、旱莲苷C(Ⅷ)、木犀草苷(Ⅸ)、蒙花苷(Ⅹ)。结论化合物Ⅰ为一新天然产物,Ⅹ为首次从墨旱莲中分离得到。

发根农杆菌RiT-DNA对墨旱莲的遗传转化

目的 建立墨旱莲 Eclipta prostrata的毛状根离体培养系统。方法 分别用发根农杆菌 A4,R16 0 1,ATCC15 8343种菌株感染墨旱莲的子叶外植体 ,获得毛状根 ,并筛选了优质株系 ;测定了毛状根的生长曲线 ;利用高压纸电泳法对毛状根进行 T- DNA转化的检测。结果 首次利用发根农杆菌 A 4,R16 0 1,ATCC15 8343种菌株成功地从墨旱莲中诱导出毛状根 ;经高压纸电泳检测 ,墨旱莲毛状根中含有甘露碱 ,表明 Ri质粒的 T- DNA已整合进毛状根中。

花果山墨旱莲多糖的提取及体外抗氧化活性比较

在单因素试验的基础上,通过正交试验优化从连云港花果山墨旱莲中提取多糖的工艺条件,并且对墨旱莲多糖(polysaccharides of Eclipata Alba,PEA)与墨旱莲黄酮类化合物(flavonoids of Eclipata Alba,FEA)的抗氧化活性进行比较。结果表明:PEA的最适宜提取工艺条件为料液比1:15、提取温度90℃、提取时间1h、提取3次;用Sevag法去除PEA中蛋白质、核酸等杂质,并用紫外光谱、红外光谱对其进行表征;最后,利用Fenton反应和邻苯三酚自氧化反应比较PEA、FEA对羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O-2.)的清除能力,结果表明PEA、FE A对两种自由基都具有良好的清除能力,而且对.O H的清除能力大于对O-2.的清除能力。当质量浓度大于0.085mg/mL时,FEA的抗氧化活性强于PEA。

墨旱莲药材的高效液相指纹图谱及聚类分析

目的建立墨旱莲药材的指纹图谱研究方法并进行聚类分析。方法色谱柱:Betasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:体积分数为1%的磷酸水溶液和体积分数为1%的磷酸乙腈溶液,采用梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:330 nm;柱温:30℃。结果精密度与重复性试验中各共有峰的相对峰面积RSD小于5.0%,根据聚类分析结果,可将墨旱莲药材分为合格品和非合格品2类,合格品产地为浙江、江西、广东、武汉、江苏(苏州)、江苏(南京)、湖南、辽宁、河北、山西、北京、上海、安徽、海南,非合格品产地为河南、吉林、福建、山东、陕西(西安)。结论该指纹图谱研究及聚类分析方法可用于控制墨旱莲药材质量。

中药墨旱莲扶正固本和保肝作用的研究

目的评价中药墨旱莲的扶正固本和保肝作用。方法60只昆明小鼠随机分为对照组,墨旱莲高、低剂量组,环磷酰胺模型组,环磷酰胺(CY)模型的墨旱莲高、低剂量组,每组10只。以8 g.kg-1.d-1和4 g.kg-1.d-1剂量的墨旱莲灌胃给药7 d,给药第4天腹腔注射0.05 g/kg剂量的CY建立免疫低下模型,观察墨旱莲提取物对正常小鼠和CY诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数、脾脏指数、碳粒廓清指数的影响;取BALB/c小鼠2只观察墨旱莲提取物对淋巴细胞增殖作用和ConA诱导小鼠淋巴细胞转化增殖作用的影响,评价墨旱莲扶正固本作用。70只昆明小鼠随机分为对照组,墨旱莲高、低剂量组,CCl4模型组,联苯双酯(DDB)阳性对照组,CCl4模型的墨旱莲高、低剂量组,每组10只小鼠。以20 g.kg-1.d-1和10 g.kg-1.d-1剂量的墨旱莲灌胃给药7 d,末次给药后2 h腹腔注射10 mL/kg剂量的CCl4建立肝损伤模型,观察墨旱莲提取物对正常小鼠和CCl4诱导的肝损伤小鼠血清ALT、MDA、TP、T-Bil值的影响;取SD大鼠1只,观察墨旱莲提取物对大鼠原代肝细胞活力的影响,评价墨旱莲的保肝作用。结果墨旱莲提取物能上调正常小鼠和CY诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数和碳粒廓清指数;能促进小鼠淋巴细胞增殖以及ConA诱导的T淋巴细胞转化增殖;能降低肝损伤小鼠的血清ALT、MDA值;能增强原代培养肝细胞的活力。结论中药墨旱莲具有扶正固本作用和保肝作用。

墨旱莲叶水提取物止血活性初探

[目的]探讨墨旱莲叶水提取物的止血和促凝血活性,为中草药在止血方面的应用提供依据。[方法]将不同剂量的墨旱莲提取物溶液与抗凝兔血混合,测定凝血时间。[结果]墨旱莲叶提取物为0.5%的最适浓度时具有最强促凝血活性,凝血时间为16 s,凝血时间缩短率为99.6%。[结论]墨旱莲叶水提取物有显著的止血和促凝血活性,具有较高的开发利用价值。