维生素C和水杨酸复合脂质体的制备

以大豆磷脂为膜材,采用复乳-超声法制备同时含有脂溶性水杨酸和水溶性维生素C的复合脂质体。研究配方中不同成分的质量比、维生素C水溶液的pH、乳化温度、包衣等对脂质体包封率和稳定性的影响。结果表明,在m(大豆磷脂)∶m(胆固醇)∶m(水杨酸)∶m(维生素C)=4∶1∶0.75∶1,维生素C水溶液的pH为5,初乳和复乳化温度分别为25、45℃时制备的复合脂质体中维生素C和水杨酸的包封率分别为48.2%和55.4%;包衣处理使水杨酸/维生素C复合脂质体稳定性提高。

粉防己碱-阿霉素复合脂质体的制备及质量控制评价

目的:制备粉防己碱-阿霉素复合脂质体并对其工艺及质量进行研究与评价,为临床上逆转肿瘤的多药耐药提供新的思路。方法:采用3种不同脂质体制备方法,并以包封率为指标进行处方筛选和工艺优化。结果:确定了硫酸铵梯度法结合pH梯度法制备复合脂质体的最佳处方最佳处方为:药脂比1∶20,磷脂-胆固醇比例3∶1,外水相pH值为7.6,硫酸铵浓度为250mmol/L。以该处方制备的脂质体DOX的平均包封率为90.77%,TET的平均包封率为80.12%。结论:该处方制备的粉防己碱-阿霉素复合脂质体包封率及外观良好,在低温充氮条件下较稳定,为进一步实验奠定了基础。

β-胡萝卜素-薏苡仁油复合脂质体的制备及氧化稳定性研究

以β-胡萝卜素的包封率为响应值,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken响应面法优化β-胡萝卜素-薏苡仁油复合脂质体的制备工艺,采用透射电镜观察样品内部结构及形态,并以β-胡萝卜素脂质体、薏苡仁油脂质体为对照,采用DPPH法评价复合脂质体的氧化稳定性。结果显示:复合脂质体的最佳工艺为:搅拌温度43℃,卵磷脂与胆固醇质量比7∶1,PBS缓冲液体积25 mL,此条件下的β-胡萝卜素包封率(EE)为84.39%,平均粒径为(187.9±7.5)nm,多分散系数(PDI)为0.104±0.09,平均Zeta电位为(-29.33±4.77)mV。透射电镜结果显示:复合脂质体较β-胡萝卜素脂质体分散更加均匀,复合脂质体清除DPPH自由基的能力高于β-胡萝卜素脂质体和薏苡仁油脂质体。

复合脂质体对大鼠肠缺血再灌注保护作用的研究

目的 :探讨人工合成的富含L -精氨酸、亚硒酸钠、牛磺酸的复合脂质体对抗大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制。方法 :Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组 (I/R)、缺血前给药组和再灌时给药组。夹闭大鼠肠系膜上动脉 (SMA) 6 0min造成缺血 ,松夹即为再灌注 ,再灌注 2h后分别测定各组肠组织丙二醛 (MDA)含量、T-SOD活性及Ca2 + -Mg2 + -ATP酶活性 ,并观察各组肠组织超微结构及bcl- 2蛋白的表达情况。结果 :缺血前给药组和再灌时给药组MDA含量均明显低于缺血再灌注组 (P <0 0 1) ,T -SOD和Ca2 + -Mg2 + -ATPase活性均明显高于缺血再灌注组 (P <0 .0 1) ,bcl- 2蛋白在正常组适当表达 ,在缺血再灌注组不表达 ,而缺血前给药组和再灌时给药组均表达强阳性 (P <0 0 1) ,且两用药组间各项指标比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :复合脂质体可能通过抑制脂质过氧化、稳定内环境、诱导bcl-

响应面法优化虾青素-植物甾醇亚麻酸酯复合脂质体的制备工艺

虾青素具有多种生理功能,为了改善其水溶性低、稳定性差导致的生物利用率不高等问题,同时,避免胆固醇的负面效应,以大豆磷脂为主要膜材,运用薄膜-超声法构建虾青素-植物甾醇亚麻酸酯复合脂质体。以复合脂质体包封率为考察指标,在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应面法优化制备复合脂质体的工艺条件。结果表明:影响包封率的因素由主到次依次为植物甾醇亚麻酸酯与磷脂质量比、水相与有机相体积比、pH值;复合脂质体的最佳制备工艺条件为植物甾醇亚麻酸酯与磷脂质量比10%(磷脂200 mg)、磷酸盐缓冲液pH 7.4、吐温80用量100 mg、水相与有机相体积比4/1、磷脂与虾青素质量比50/1,在此条件下复合脂质体的包封率为(95.87±0.40)%,与理论值较为接近。优化制备复合脂质体的工艺条件为植物甾醇酯应用于负载脂溶性生物活性物质的脂质体的构建提供了理论依据和新思路。

植物甾醇油酸酯-虾青素复合脂质体的制备工艺优化

为了改善虾青素的水溶性和稳定性,探索植物甾醇酯用于构建负载虾青素脂质体的可行性,以大豆磷脂为主要膜材,采用薄膜-超声法制备植物甾醇油酸酯-虾青素复合脂质体(L-PA)。以包封率为评价指标,通过单因素试验和Box-Behnken响应面试验优化L-PA的制备工艺。结果表明:L-PA制备的最佳工艺条件为植物甾醇油酸酯与大豆磷脂质量比1∶10、磷酸盐缓冲液pH 7.4、超声时间4 min、吐温80与大豆磷脂质量比1∶2、有机相与水相体积比1∶4、虾青素与大豆磷脂质量比1∶50,在此条件下L-PA的包封率为95.24%。因此,植物甾醇油酸酯可用于构建负载虾青素的脂质体。

维生素C/白藜芦醇纳米复合脂质体制备及其抗氧化性研究

本文以具有亲疏水特点的磷脂分子为基质材料,采用薄膜水化法制备了一种同时包载脂溶性白藜芦醇(Res)和水溶性维生素C(VC)的纳米复合脂质体(Lip@Res/VC),并将其用于细胞抗氧化研究。在Lip@Res/VC的制备过程中,以Res和VC的包封率以及脂质体的粒径、多分散指数和电位为指标,考察了Res和VC的最佳投入量。研究结果表明,分别选择Res为4.0 mg和VC为3.5 mg的投入量,制备的Lip@Res/VC的水合粒径为(92.29±5.41)nm,Res和VC的包封率分别为(85.13±5.37)%和(64.73±5.51)%。体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2'-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸二胺盐(ABTS)自由基清除试验结果显示,Lip@Res/VC的抗氧化活性较只包载了Res的单一脂质体Lip@Res或只包载了VC的单一脂质体Lip@VC均显著提高。通过选择正常肝细胞(L02细胞)为模式细胞,研究了Lip@Res/VC的细胞内抗氧化效果,结果显示,Lip@Res/VC具有清除细胞内活性氧(ROS)的能力,对过氧化氢诱导的L02细胞氧化损伤具有保护作用。

葫芦素B-姜黄素复合脂质体制备及质量评价

目的:制备共同载有中药组分葫芦素B与姜黄素的复合脂质体,并对其制剂学性质进行评价。方法:采用薄膜分散-超声法制备葫芦素B-姜黄素复合脂质体;建立HPLC法同时测定样品中葫芦素B与姜黄素的含量,计算包封率、载药量、泄漏率,采用纳米粒度仪测定脂质体粒径。结果:葫芦素B-姜黄素复合脂质体的药物比为2∶1,药脂比为15∶200,包封率分别为75.26%,82.37%,载药量分别为28.94,16.47 mg·g-1,粒径约为157.3 nm,7 d泄漏率较低。结论:该方法适合葫芦素B-姜黄素复合脂质体的制备,所建立同时测定两种组分的方法简便、准确,适合对该复合脂质体的性质进行评价。

近红外荧光磁性复合载药脂质体的制备及应用

拟建立以近红外荧光磁性复合脂质体(NFMSLs)为模型药物载体、盐酸多柔比星(DOX)为包封药物的药物输送系统,研究了近红外荧光磁性载药复合脂质体(DOX-NFMSLs)的制备、性质及初步应用。采用共沉淀法制备Fe3O4磁流体,CdTe掺杂Se制备近红外量子点CdSeTe,薄膜分散法制备DOX-NFMSLs。用DOX荧光分光光度法测定DOX-NFMSLs的包封率和体外药物释放率;用DOX-NFMSLs与HepG2肝癌细胞共孵育来进行细胞成像和细胞毒性实验。结果表明,近红外CdSeTe量子点粒径约为5nm,闪锌矿结构,发射波长824nm。磷脂与胆固醇质量比为8∶1,药脂比为1∶20的DOX-NFMSLs平均粒径为252.9nm,Zeta电位为-48.6mV,理想释放药物温度为41℃,平均包封率为(74.84±0.89)%。DOX-NFMSLs对HepG2肝癌细胞有一定的抗癌效果。得到了具有良好磁响应、释药温度T=41℃、可近红外成像的载药脂质体。

海星脑苷脂-磷脂复合脂质体抗肿瘤活性作用

目的通过体内、体外实验,研究海星脑苷脂-磷脂复合脂质体的抗肿瘤作用。方法从罗氏海盘车中提取脑苷脂和磷脂,并制备脑苷脂-磷脂复合单室脂质体,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定海星脑苷脂-磷脂复合脂质体对S180细胞生长抑制作用;通过体内实验检测其对S180小鼠实体瘤生长的抑制率、脾脏指数、胸腺指数及体重变化等指标。结果海星脑苷脂-磷脂复合脂质体在体外对S180细胞有明显的抑制作用,其24、487、2 h的半数抑制浓度(IC50)分别为199.89、148.95和126.65μg/mL;体内实验表明,海星脑苷脂-磷脂复合脂质体能明显抑制小鼠S180肉瘤的生长,其抑瘤率为72.6%,同时提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,延缓荷瘤小鼠体重的下降,抑癌效果优于海星脑苷脂和磷脂单独使用。结论海星脑苷脂-磷脂复合脂质体在体内、体外均具有较强的抗肿瘤活性。

载二氢杨梅素三元复合脂质体的构建及其性能研究

采用基于静电吸引力的层层自组装技术,以二氢杨梅素为内核,依次组装阴离子脂质层、阳离子脂质层和羧甲基壳聚糖层,构建三元复合脂质体。结果表明,组装的三元复合脂质体平均粒径为204.8±6.2 nm,电位为-8.1±2.5 mV,具有明显的层状结构,在血浆中具有良好的稳定性,细胞毒性小于阳离子脂质体,同时具有pH敏感性,可在不同介质中选择性释放二氢杨梅素。

新型有机-无机复合脂质体Cerasome的研究及应用进展

目的:综述新型有机-无机复合脂质体Cerasome的研究及应用进展。方法:以"硅质体""Cerasome""Cerasome+脂质体"为关键词查阅1999年1月1日-2013年4月30日中国知网、PubMed数据库,对国内外的相关文献进行检索、分类和整理,介绍Cerasome的性质、制备方法及其应用。结果与结论:Cerasome又称"硅质体",是一种类脂体囊泡,具备脂质体所有的性质,其表面覆盖的无机硅酸盐网络结构使其具有更好的形态稳定性,并同时具有良好的生物相容性和缓释特性;Cerasome的制备方法有乙醇溶胶注入法、超声分散法、薄膜水化超声法;Cerasome作为药物载体时,可根据受体细胞或组织的性质,在其表面连接相应的配体,进一步提高其靶向性。

复合磷脂脂质体的研究进展

脂质体是药剂学中的一类常规释药系统,可以用作难溶性药物的给药剂型,提高其生物利用度。但以往的普通脂质体存在包封率低、不稳定、长期贮存时药物易产生泄漏等问题,导致脂质体制剂产品研发受到一定限制。近年来,一种新型脂质体——复合磷脂脂质体开发出来。同传统脂质体相比,复合磷脂脂质体具有包封率和载药量较高、稳定性较好、长期贮存时药物不产生泄漏等优点,具有较好应用前景。本文主要介绍了复合磷脂脂质体的组成、结构、制备方法、作用特点以及近年在药剂学中的应用进展。

磁性紫杉醇-四氧化三铁-载药脂质体复合体微粒磁靶向脑内分布的实验研究

目的探讨磁性紫杉醇-四氧化三铁-载药脂质体复合体微粒在磁场作用下在脑内的定向分布趋向。方法用壳聚糖、胆固醇、纳米级四氧化三铁、紫杉醇制成载药复合体微粒,通过体外透射电子显微镜和磁力计观察其形态和磁感应性。经尾静脉注入实验大鼠体内,头部一侧外加永磁磁场1 h。取大脑皮质,行普鲁士蓝染色,观察铁磁微粒在脑内的分布情况;高效液相色谱分析测定脑组织内紫杉醇含量。结果磁性紫杉醇-四氧化三铁-载药脂质体复合体微粒系统粒径15 nm左右,在外加磁场作用下可以定向积聚于靶区。普鲁士蓝染色显示实验组动物脑毛细血管外周和脑组织细胞内有铁微粒进入;高效液相色谱分析显示磁场靶区脑组织内紫杉醇浓度是对照组的5倍以上。结论磁性紫杉醇-四氧化三铁-载药脂质体复合体微粒是一种较理想的药物载体,具有良好的超顺磁响应性,在外加磁场驱动下可通过血-脑屏障定向分布于脑组织细胞间质并进入细胞内,显著提高靶区化学治疗药物浓度,提高抗肿瘤效应。

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体HPLC指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱法建立马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的HPLC指纹图谱,并考察制剂工艺稳定性,为其质量控制提供新方法。方法以LicrospherC18(4.6 mm×300 mm,5μm)柱为色谱柱,流动相为乙腈(A)-水∶0.2%乙酸∶0.2%三乙胺(B),梯度洗脱,检测波长为254 nm;采用指纹图谱相似度软件进行数据分析。结果确定了马钱子总生物碱复合磷脂脂质体8个共有峰,通过方法学考察,精密度、稳定性、重现性试验RSD均小于3%,10批马钱子复合磷脂脂质体相似度均高于0.95。结论马钱子总生物碱复合磷脂脂质体制剂工艺稳定,指纹图谱技术适用于马钱子总生物碱复合磷脂脂质体的质量评价。

反义寡核苷酸脂质体复合物性质对细胞摄入行为的影响

目的 研究影响反义寡核苷酸脂质体复合物的性质和细胞摄取的因素。方法 逆相蒸发法制备 3种不同的空白脂质体 ,与反义寡核苷酸混合得到复合物 ,显微镜观察其形态 ,琼脂糖电泳分析载药量 ,流式细胞仪测定阳性细胞百分率和平均荧光强度。结果 高电荷密度的脂质体和低离子强度介质可使复合物发生凝聚 ,载药量和细胞摄入量依赖于空白脂质体和药物的比例以及脂质体膜表面的电荷密度。结论 阳离子脂质体可以提高载药量和细胞的摄入 ,其程度与复合物比例。

丹参总酚酸复合磷脂脂质体制备工艺研究

目的采用复合磷脂脂质体技术以氢化大豆磷脂(HSPC)和大豆磷脂(SPC)为膜材制备丹参总酚酸复合磷脂脂质体,并研究其最佳制备工艺。方法采用逆向蒸发法制备复合磷脂脂质体,测定其粒径与粒径分布,以脂质体的成型性与包封率等为评价指标,研究丹参总酚酸脂质体的制备工艺。结果磷脂与胆固醇质量比为3∶1、有机相与水相体积比为4∶1、药脂比为1∶15、磷脂质量浓度为12.5 mg·mL^(-1)时得到的丹参酚酸B与丹参总酚酸的平均包封率分别为60.08%和69.45%,其中载药量以丹参总酚酸计达2.92%。结论该复合磷脂脂质体制备方法准确可靠,工艺合理稳定。

阳离子脂质体-DNA复合物与脂质-鱼精蛋白-DNA复合物体外细胞转染率比较

采用薄膜-挤压法制备空白阳离子脂质体后,再分别制得阳离子脂质体-DNA复合物和脂质-聚阳离子-DNA复合物(Lipid-polycation-DNA lipopolyplexes,LPD);用凝胶阻滞实验,确定阳离子脂质体与质粒DNA的配比;用透射电镜观察阳离子脂质体-DNA复合物和LPD的形态,用激光粒度仪测定它们的粒径和zeta电位;用酶标仪测定它们对张氏(Chang)肝细胞、HepG2肝癌细胞的转染率。结果表明阳离子脂质体-DNA复合物和LPD的形态均近似于球体,但LPD的粒径明显较小;LPD对张氏(Chang)肝细胞和HepG2肝癌细胞的转染率均高于阳离子脂质体-DNA复合物。LPD是基因治疗的临床应用中一种更具前景的载体系统。

体外实验观察微泡-阳离子纳米脂质体复合物促进HGF基因转染

目的通过生物素-亲和素的特异结合,制备一种高效载肝细胞生长因子(HGF)基因的脂质微泡(LMB)-阳离子纳米脂质体复合物(LMB-CNLP),观察转染情况,探讨其对对数生长期的肝星状细胞株HSC-T6活性的影响。方法将HSC-T6细胞分为载HGF基因的LMB组、LMB-CNLP组和对照组(单纯质粒),超声辐照各组进行HGF转染。以荧光显微镜及流式细胞仪观测转染情况,ELISA试剂盒检测HGF蛋白表达情况,流式细胞仪检测HSC-T6细胞凋亡。结果 LMB-CNLP组HGF基因的转染率为41.29%,明显高于其他2组。转染后的细胞能持续表达HGF,且随着HGF蛋白增多,HSC-T6细胞凋亡率增高。结论超声辐照LMB-CNLP复合物能提高HGF基因在体外培养的HSC-T6细胞中的转染情况,促进HSC-T6凋亡,为基因治疗肝纤维化提供实验依据。

HPLC-ELSD法同时测定复合磷脂脂质体中SPC、HSPC、胆固醇含量的方法及其应用

目的:考察同时检测复合磷脂脂质体中大豆卵磷脂(SPC)、氢化大豆磷脂(HSPC)、胆固醇含量的方法。方法:利用HPLC-ELSD法测定脂质体中各组分的含量:C18色谱柱,流动相:A:4 mM乙酸铵缓冲液(pH=4.0),B:4 mM乙酸铵甲醇溶液;梯度洗脱:10%A^90%B 10 min,100%B 40 min,10%A^90%B 5 min,ELSD检测器。结果:精密度及回收率实验表明,HSPC、SPC、胆固醇的RSD值分别为1.9%、2.0%、1.5%,回收率分别为98.6%、99.3%、98.5%,由此可知本方法精密度、回收率高,符合样品检测要求。用本方法考察复合磷脂脂质体在制备过程中各组分含量的变化可知,脂质体各组分比例变化不显著,说明复合磷脂脂质体在蒸发成膜、探头超声和高压均质挤出的工艺下稳定;同时考察不同储存温度下脂质体中各组分含量的变化,可知样品于4℃条件储存各组分比例变化不明显。结论:所建立的检测方法可快速、高效、准确、同时测定脂质体中SPC、HSPC、胆固醇的含量,适用于脂质体制备工艺的验证与产品质量的检查。