无载体复合酶固定化技术提取革胡子鲶下脚料中的磷脂酰胆碱

鱼类废弃物中含大量的磷脂酰胆碱,为提高磷脂酰胆碱的回收提取率,本研究设计构建了无载体复合酶固定化技术对革胡子鲶鱼内脏中磷脂酰胆碱的提取。该提取体系包含复合酶和戊二醛,研究对戊二醛的浓度、交联pH、交联温度、该固定化复合酶的重复利用次数、该固定化酶的保存时间进行的探索研究。单因素实验结果表明,提取体系最佳交联浓度为5%、最佳交联温度为30℃、最佳交联pH为6.5;该固定化酶基本可以重复使用3~4次,保存25天以后提取率就比较低了。另外,通过三因素三水平的正交实验得出酶固定化的最佳组合工艺条件,即交联浓度为7%、交联温度为35℃、交联pH为7.5时的提取率最高。该工艺可为鱼类废弃物提取磷脂酰胆碱积累新技术的经验,为其实现工业化提供有力支持。

昆布多糖的复合酶法提取工艺优化及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性

优化复合酶提取昆布多糖的工艺参数,并考察其抑制α-葡萄糖苷酶的能力。以昆布多糖得率为评价指标,通过正交试验确定复合酶配比,采用响应面法评价酶解时间、pH、液料比和温度对昆布多糖得率的影响。采用体外酶抑制实验测定昆布多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果表明,复合酶最佳添加量为纤维素酶100 mg、果胶酶90 mg、木瓜蛋白酶55 mg,最佳酶法提取工艺为酶解时间1.8 h、酶解温度49.4℃、pH6.1、液料比59:1 mL/g,最佳工艺条件下昆布多糖预测得率18.183%,实测多糖得率18.19%±1.04%,其中性糖、酸性糖、蛋白质及硫酸根含量分别52.72%、11.76%、2.66%、19.49%;在1~5 mg/mL范围内其对α-葡萄糖苷酶的抑制作用随浓度增加而升高,最大抑制率为79.04%±3.17%,IC50为1.443 mg/mL。复合酶法提取的昆布多糖得率高,其对α-葡萄糖苷酶具有明显的抑制作用。

复合酶法改性淀粉的研究进展

酶法改性特异性强、反应副产物和副反应少,酶分子可以通过改变淀粉分子的结构或直链淀粉含量、链长、分支数量等,使其物化特性发生改变。淀粉酶种类不同,作用于淀粉分子的作用效果也不同,该文重点综述几种常见的淀粉酶作用于淀粉分子改变其结构、淀粉分子链长或直链淀粉/支链淀粉比值,进而对其结构、理化性质产生的影响,讨论几种淀粉酶复合改性淀粉的作用机理及改性淀粉在工业上的应用,以期为研究复合酶改性淀粉提供理论参考。

黄芪多糖复合酶提取工艺优化及其α-葡萄糖苷酶抑制活性

目的:以黄芪为原料,采用复合酶法(木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶)提取黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS),并分析工艺条件对多糖提取的影响。方法:在正交试验确定复合酶比例的基础上,采用响应面法对复合酶提取APS的提取条件进行优化,得到最优工艺条件,采用pNPG法评价其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果:5 g黄芪药材粉末,最佳复合酶配比为:木瓜蛋白酶88000 U、果胶酶65000 U、纤维素酶6000 U;最佳酶解提取条件为:酶解处理时间、温度、pH和料液比分别为2.82 h、60.34℃、5.11和1:34.46 g/mL,APS的得率最高可达22.79%±0.14%;APS对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)为7.42μg/mL。结论:复合酶提取APS的得率较单酶得率显著提高,APS对α-葡萄糖苷酶表现出较强的抑制作用。

复合酶制剂对芦花鸡生长性能、屠宰性能及血液生化指标的影响

文章旨在探讨复合酶制剂对芦花鸡生长性能、屠宰性能及血液生化指标的影响。试验将600羽体重相近的42日龄脱温芦花鸡随机分为对照组、复合酶1组和复合酶2组,每组5个重复,每个重复40羽芦花鸡,试验为期78d。结果显示,与对照组相比,芦花鸡42、84和120日龄体重,以及42~120日龄、85~120日龄的ADG、ADFI和F/G均无显著差异(P> 0.05),42~84日龄,复合酶2组的ADG显著高于对照组(P <0.05);复合酶组能提高血液TP、ALB、BUN含量和SOD活性,降低GLU和MDA含量,复合酶2组的TG和TC含量均显著高于对照组(P <0.05),复合酶1组和2组的UA含量分别显著(P <0.05)、极显著(P <0.01)低于对照组;复合酶组屠宰率、全净膛率和半净膛率均有所提高,复合酶组胸肌率和复合酶2组腿肌率均显著高于对照组(P <0.05)。综上所述,重庆山地饲养芦花鸡日粮中添加复合酶制剂可促进芦花鸡生长和蛋白合成,优化脂类代谢,提高鸡体抗氧化能力,提高屠宰性能。

低蛋白日粮添加复合酶对生长猪生长性能、养分利用率及有害气体排放的影响

文章旨在探究低蛋白日粮添加复合酶对生长猪生长性能、养分利用率及有害气体排放的影响。试验将120头平均体重为(48.59±1.27)kg的90日龄杂交生长猪随机分为4组,每组5个重复,每个重复6头。试验为期101 d(其中预饲期8 d,正试期93 d)。试验日粮分别向低蛋白饲粮中添加0、300、600和900 mg/kg的复合酶制剂。结果表明,较对照组,日粮添加600和900 mg/kg复合酶可显著提高生长猪4.8%和6.7%的终末体重(P <0.05);显著提高生长猪8.5%和12.4%的平均日增重;显著提高生长猪3.4%和7.7%的平均日采食量(P <0.05);显著降低生长猪4.8%和6.4%的料重比(P <0.05)。较对照组,日粮添加600和900 mg/kg复合酶显著提高生长猪粗蛋白、氮和能量的表观消化率(P <0.05)。较对照组,日粮添加600和900 mg/kg复合酶显著降低生长猪的粪氮和粪磷排放(P <0.05);日粮添加600和900 mg/kg复合酶显著降低生长猪4~24 h氨气排放;此外,本试验未检测到硫化氢的排放。总之,本试验条件下,复合酶最适添加量为900 mg/kg。

有机酸与精油、单宁酸、复合酶制剂复配对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和肠道健康的影响

【目的】研究有机酸与精油、单宁酸、复合酶制剂复配对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和肠道健康的影响,为其在仔猪中的生产应用提供理论依据。【方法】选用健康、体重相近(6.48 kg±0.68 kg)的25日龄断奶仔猪(杜×长×大)240头,随机分为5个组,每组6个重复,每个重复8头。饲粮处理如下:基础饲粮(CON);CON+5 kg/t有机酸(OA);CON+5 kg/t OA+800 g/t精油(OAEO);CON+5 kg/t OA+500 g/t单宁酸(OATA);CON+5 kg/t OA+500 g/t复合酶(OACE)。预试期3 d,正试期28 d。分别于第1和29天以重复为单位对仔猪空腹称重并统计采食量,计算生长性能;收集饲料样品和粪便样品,测定养分表观消化率;收集血液样品,测定血清抗氧化性能和免疫性能指标;分离胃和各肠段(十二指肠、空肠、回肠和盲肠),测定胃肠道pH;收集空肠黏膜,测定消化酶活性;取空肠和回肠中段,用于肠道形态的测定;收集盲肠内容物,用于短链脂肪酸测定。【结果】(1)与CON和OA组相比,OAEO组断奶仔猪料重比(F/G)显著降低(P<0.05)。(2)与CON组相比,OA和OAEO组仔猪血清超氧化物歧化酶(SOD)活性显著提高(P<0.05),OATA组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05),OA、OAEO、OATA和OACE组血清丙二醛(MDA)含量均显著降低(P<0.05)。(3)与CON和OA组相比,OATA组仔猪血清免疫球蛋白G(IgG)、白介素-2(IL-2)和IL-22含量均显著提高(P<0.05),OAEO、OATA和OACE组血清D-乳酸(D-LA)含量均显著降低(P<0.05)。(4)与CON组相比,OAEO和OACE组仔猪胃、十二指肠和空肠pH均显著降低(P<0.05),OA、OAEO、OATA和OACE组空肠和回肠绒毛高度均显著提高(P<0.05)。与CON和OA组相比,OACE组空肠α-淀粉酶、蔗糖酶和乳糖酶活性均显著提高(P<0.05),OATA和OACE组干物质(DM)、粗灰分(Ash)、粗脂肪(EE)和磷(P)表观消化率均显著提高(P<0.05)。(5)与CON和OA组相比,OAEO组仔猪盲肠乙酸浓度显著提高(P<0.05),OAEO、OATA和OACE组盲肠异丁酸浓度均显著降低(P<0.05)。【结论】有机酸与精油复配在提高断奶仔猪生长性能方面效果较好;与单宁酸复配在提高仔猪抗氧化和免疫性能方面效果较好;与酶制剂复配在改善仔猪消化功能和提高养分表观消化率方面效果较好。

响应面法优化芡实粉复合酶酶解工艺及多糖抗氧化性研究

为确定复合酶法酶解芡实粉的最佳工艺及芡实多糖的抗氧化活性,以优质产地的芡实粉为原料,通过单因素试验、Box-Behnken试验设计及响应面分析研究复合酶添加量、pH、酶解温度、酶解时间对水解程度(dextrose equivalent,DE值)的影响;并通过测定酶解后芡实多糖对DPPH自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明,复合酶法酶解芡实粉的最佳工艺参数为复合酶(普鲁兰酶∶α-淀粉酶)的质量比5∶6、酶添加量0.3%(以原料质量为基准)、pH 6.5、酶解温度56℃、酶解时间45 min。该条件下生产的芡实粉基料水解度可达20.25%,且酶解后芡实多糖具有一定的抗氧化活性。该研究结果为芡实相关产品的开发利用提供了理论依据及方法基础。

复合酶法提取蒙古口蘑多糖工艺优化及其抗氧化活性研究

采用复合酶法提取蒙古口蘑多糖。以多糖得率为指标,通过正交试验优化复合酶的配方,再通过响应面法优化蒙古口蘑多糖提取工艺,并研究蒙古口蘑多糖的体外抗氧化活性。结果表明:最优复合酶配方为纤维素酶0.02 g、果胶酶0.06 g、木瓜蛋白酶0.10 g,最佳提取工艺为提取时间117 min、提取温度58℃、pH 5.0,在此条件下,多糖得率为6.11%。体外抗氧化试验表明,蒙古口蘑多糖对DPPH自由基和羟基自由基均有较好的清除能力。

复合酶在白羽肉鸡低蛋白日粮中的应用效果研究

试验旨在研究低蛋白日粮中添加复合酶对白羽肉鸡生长性能、血清生化和抗氧化指标、免疫功能和消化器官的影响。将288只1日龄白羽肉鸡随机分为6组,试验期42 d,试验配方设计1~21日龄和22~42日龄两阶段。对照组(CK组)饲喂常规蛋白日粮(两阶段粗蛋白水平分别为21.28%和19.04%);试验组均饲喂低蛋白日粮(两阶段粗蛋白水平较CK组分别降低0.97%和0.94%),试验1、2、3组全程分别添加200 mg/kg复合酶A(T1组)、200 mg/kg复合酶B(T2组)、300 mg/kg复合酶B(T3组),试验4组两阶段分别添加复合酶B 100、300 mg/kg;另设低蛋白日粮组(T0组)。试验结束时进行生长性能、血清生化和抗氧化指标、免疫功能和消化器官发育情况的测定分析。结果表明:T2、T3组21日龄活体重、42日龄活体重和欧洲生产效率指数均较高,T3组1~42日龄料重比低于其他组;CK组和T3组血清中尿素(UREA)含量显著低于T4组(P<0.05),T2组血清谷草转氨酶(AST)活性显著高于T1组外的其他组(P<0.05),T0、T1和T2组血清超氧化物歧化酶(SOD)含量显著低于T4组(P<0.05);T4组IgA、IgG和IgE显著高于T0组(P<0.05)。综上所述,在低蛋白日粮中添加复合酶能够提高白羽肉鸡指标和抗氧化能力,促进免疫器官和消化器官发育,提高免疫力。

低蛋白饲粮添加复合酶对白羽肉鸡生长性能和氮代谢的影响

试验旨在研究低蛋白饲粮中添加复合酶对白羽肉鸡生长性能、血清生化指标、消化酶活性、养分表观代谢率和氮代谢的影响。试验选取288只1日龄白羽肉鸡随机分为6组,每组6个重复,每个重复8只。试验期42 d。试验配方设计1~21、22~42 d两阶段,对照组(T1组)饲喂基础饲粮(粗蛋白含量21.28%、20.09%),T2组为低蛋白饲粮组(粗蛋白含量20.24%、19.08%),T3和T4组在低蛋白饲粮中分别添加100、200 mg/kg复合酶A,T5和T6组在低蛋白饲粮中分别添加100、200 mg/kg复合酶B。结果显示:在22~42、1~42 d,T2组、T5组和T6组料重比低于T1组(P>0.05);42 d时,T4组十二指肠胰蛋白酶活性显著高于其他组(P<0.05),T6组干物质表观代谢率显著高于T1组、T3组和T4组(P<0.05),粗蛋白表观代谢率显著高于T1组和T4组(P<0.05),氮排放率显著低于T1组和T4组(P<0.05)。研究表明,复合酶可改善低蛋白饲粮对白羽肉鸡生长后期生长性能和消化酶活性的影响,提高了粗蛋白表观代谢率,减少氮排放,且T6组添加效果较好。

复合酶法提取槐花多糖的工艺优化及其抗氧化活性

目的:采用复合酶法提取槐花多糖,对提取工艺进行优化,并评价其体外抗氧化活性。方法:通过单因素实验考察复合酶添加量、pH、复合酶比例和酶解时间对得率的影响,在单因素实验基础上,采用响应面法确定槐花多糖的最佳提取参数,并以V_(C)为对照,通过测定槐花多糖对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率及总还原力,考察所提取的槐花多糖的抗氧化活性。结果:复合酶法提取槐花多糖的最佳提取参数为:复合酶添加量23.8 mg/g,pH4.8,果胶酶与纤维素酶比例0.912:1,该工艺下槐花多糖得率为10.71%,所提取的槐花多糖对DPPH·和ABTS^(+)·均表现出较好的清除能力,当槐花多糖溶液浓度为2.8 mg/mL时,对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率分别达到同浓度下V_(C)的94.19%和99.79%,总还原力达到V_(C)的75.99%。结论:采用复合酶法能够有效提取槐花多糖,提高其抗氧化活性,为槐花多糖功能食品的开发提供了理论参考。

复合酶改性玉米皮可溶性膳食纤维的工艺优化及理化特性分析

为探究玉米皮可溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber,SDF)最佳提取工艺及功能特性。本研究以玉米加工副产物玉米皮为原料,采用复合酶法改性提取玉米皮可溶性膳食纤维,通过单因素实验和响应面优化确定最佳工艺参数并对其理化性质进行了研究。结果表明,当纤维素酶添加量为1.5%、木聚糖酶添加量为1%、酶解温度为55℃、酶解时间为150 min时,玉米皮SDF得率达到的最高值为16.64%±0.21%,其溶解度为87.63%±0.43%,持水力为2.87±0.16 g/g,持油力为2.30±0.12 g/g,葡萄糖吸附力为5.32±0.12 mmol/g,体外模拟胃环境(pH2.0)、肠环境(pH7.0)下胆固醇吸附性分别为11.74±0.15、42.93±0.08 mg/g,胆酸钠吸附性分别为15.43±0.17、50.67±0.10 mg/g。研究结果可为玉米皮可溶性膳食纤维的开发利用提供理论参考。

大曲复合酶系对小麦协同降解作用研究

为研究大曲复合酶系对天然底物小麦的降解作用,采用异源表达法和亲和层析法纯化来自浓香型白酒大曲的内切淀粉酶(NFAmy13B、NFAmy13A)、内切葡聚糖酶(NFEg16A)和来自Thermoanaerobacterium bryantii mel9T的木聚糖酶(TbXyn10A)及木糖苷酶(TbXyl39A、TbXyl52A)。以小麦粉碎物为底物,研究不同酶及配比对小麦降解的影响,并通过对羟基苯甲酸(p HBAH)法测定还原糖含量评估降解效果。结果表明,NFAmy13B是典型的液化淀粉酶,可高效降解长链淀粉,其4 h降解小麦粉碎物得到的还原糖含量为5.12 mmol/L。NFAmy13A是典型糖化性淀粉酶,可高效将短链淀粉降解为麦芽糖,NFAmy13A和NFEg16A可以提高NFAmy13B的降解效率,复配水解效率为NFAmy13B的2.6倍。木聚糖酶和木糖苷酶与NFAmy13B、NFAmy13A、NFEg16复配可进一步提高小麦降解效率,复配水解效率为NFAmy13B的2.9倍。该研究证实大曲复合酶系对小麦粉碎物存在协同降解作用。

混料设计优化酶法制备中长链甘三酯复合酶配比

以癸酸插入率为指标,采用混料设计对酶法合成中长链甘三酯(MLCT)的3种Sn-1,3位特异性脂肪酶(Lipozyme RM IM、Lipozyme TL IM和NS40086)配比进行优化,并对MLCT产物的脂肪酸组成及复合酶的稳定性进行分析。结果表明:3种酶对MLCT产物癸酸插入率的影响依次为NS40086>Lipozyme RM IM>Lipozyme TL IM,Lipozyme RM IM、Lipozyme TL IM和NS40086的最佳质量比为0.323∶0.122∶0.555,在此条件下MLCT产物的癸酸插入率为46.87%±0.24%,Sn-2位油酸含量为73.13%,Sn-1,3位癸酸含量为62.60%,制得的复合酶具有良好的稳定性。

复合酶解南美白对虾虾头制备ACE抑制肽的工艺优化

以南美白对虾虾头为原料,利用复合酶解法制备血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制肽。在传统酶解法基础上,对酶解效率较高的蛋白酶进行筛选和复配,结合双酶复合酶解法水解虾头蛋白。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单因素和响应面试验对制备工艺进行优化,确定复合蛋白酶组合方式及配比等工艺参数。得到虾头蛋白源ACE抑制肽的最佳酶解条件为料液比1∶7(g/mL)、酶添加量400 U/g、初始pH7.5、酶解温度50℃、复合酶(胰蛋白酶∶风味蛋白酶)配比2.29∶1(U/U)、酶解时间2.17 h,在此条件下虾头蛋白水解度达71.48%,ACE抑制率达83.57%,酶解效率与优化前的单酶水解相比提高35.05%。结果表明南美白对虾虾头经胰蛋白酶和风味蛋白酶酶解后具有较高的ACE抑制活性。

复合酶酶解法制备中华草龟皮胶原蛋白肽的工艺优化

该研究探讨了不同种类蛋白酶对中华草龟皮胶原蛋白酶解液的水解度和DPPH自由基清除率的影响,并进一步研究了复合蛋白酶对胶原蛋白的酶解效果。此外,通过正交试验优化了复合酶酶解条件。结果表明,由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1∶1组成的复合酶对龟皮胶原蛋白进行酶解,可显著提高酶解液的水解度和DPPH自由基的清除率(P<0.05);优化的复合酶酶解工艺为复合酶添加量5000 U/g、酶解pH值7.5、酶解温度50℃、酶解时间3 h,在该酶解工艺条件下,水解度达(51.19±2.45)%,DPPH自由基清除率达(51.78±2.21)%。影响复合酶酶解效果的主次顺序为酶添加量>酶解pH值>酶解时间>酶解温度。

复合酶辅助超声波提取刺梨总黄酮的工艺优化及其抗氧化活性研究

试验以刺梨为原料,在单因素试验基础上,采用响应面法优化复合酶辅助超声波提取刺梨总黄酮的工艺,并对其抗氧化活性进行研究。结果显示,最优提取工艺为液料比25 mL/g、提取温度60℃、超声时间50 min、复合酶(m_(纤维素酶)∶m_(果胶酶)=1∶1)添加量2.5%。在此条件下,刺梨总黄酮提取得率12.56%,与理论预测值12.86%相近。刺梨总黄酮对2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS^(+))自由基与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的IC_(50)值分别为412、586 mg/L。研究表明,刺梨总黄酮具有一定的抗氧化性,可作为天然抗氧化剂。

刺五加多糖的复合酶提取工艺及其对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究

为了优化刺五加多糖的复合酶提取工艺,以刺五加多糖得率作为指标,采用正交实验确定复合酶添加量,并基于响应面法对复合酶提取刺五加多糖的工艺进行优化。通过刺五加多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制情况考察其降糖活性。结果显示复合酶(木瓜蛋白酶240 mg、果胶酶170 mg、纤维素酶160 mg)提取刺五加多糖的最佳工艺条件为酶解时间2.1 h、酶解pH 6.0、料液比1∶53 g/mL、酶解温度49℃。在此工艺下刺五加多糖得率为14.21%±0.09%,与预测值14.259%接近。提取条件各因素之间的主次顺序为料液比>酶解温度>酶解时间>酶解pH。体外活性实验表明,在0.1~0.5 mg/mL范围内,刺五加多糖对α-葡萄糖苷酶抑制率随着浓度的增大呈上升趋势,最大可达到65.83%±0.08%,IC_(50)为0.177 mg/mL,接近于阿卡波糖。由此可知复合酶提取刺五加多糖工艺稳定、可靠,刺五加多糖对α-葡萄糖苷酶具有一定抑制作用。

α-淀粉酶及其复合酶体系对淀粉酶解性能研究

研究了单一α-淀粉酶体系及α-淀粉酶与β-淀粉酶、普鲁兰酶、糖化酶组成的二元、三元、四元复合酶体系,对3种造纸常用变性淀粉(氧化淀粉、酶解淀粉、阳离子淀粉)的酶解性能,探究不同α-淀粉酶用量对淀粉分解率和DE值的影响。结果表明,在单一α-淀粉酶体系中,淀粉分解率达到90%时,阳离子淀粉酶解所需α-淀粉酶用量约为其他2种淀粉的4倍;酶解淀粉加入柠檬酸抑制Zn2+后,其淀粉分解率最大可提高37.4%;二元复合酶体系中,α-淀粉酶/β-淀粉酶对阳离子淀粉的分解率比α-淀粉酶/糖化酶及α-淀粉酶/普鲁兰酶分别高5.3%和8.7%;三元复合酶体系中,α-淀粉酶/糖化酶/β-淀粉酶对阳离子淀粉的分解率比α-淀粉酶/糖化酶/普鲁兰酶高1.2%。在将α-淀粉酶/糖化酶/β-淀粉酶/普鲁兰酶的四元复合酶体系应用于阳离子淀粉、酶解淀粉、氧化淀粉的酶解反应时,达到淀粉分解率80%所需α-淀粉酶用量分别为单一α-淀粉酶体系的56%、38%和17%。