细胞色素P450 3A5和多药耐药基因1基因多态性在肾移植患者他克莫司血药浓度监测中的应用

目的 :研究细胞色素P4 5 0 3A5 (CYP3A5 )和多药耐药基因 1 (MDR1 )基因多态性对他克莫司 (FK5 0 6 )血药浓度的影响 ,探讨FK5 0 6在不同个体间吸收、代谢差异的基因背景 ,建立个体化用药的药物代谢遗传学监控体系。 方法 :观察 1 1 8例肾移植术后常规使用FK5 0 6 +霉酚酸酯 +强的松三联免疫抑制治疗的成年患者 ,记录体重 ,FK5 0 6剂量 ,术后第 7天、术后 1个月和术后 3个月的FK5 0 6全血谷浓度等指标。采用PCR 限制性长度多态性的方法检测CYP3A5 1 / 3和MDR1 3435位点C/T多态性 ,比较不同基因型之间FK5 0 6的浓度 /剂量比的差异。 结果 :CYP3A5基因为 1 / 1、 1 / 3和 3/ 3型的患者数分别有 1 2、36和 70例。 1 / 1型和 1 / 3型患者的FK5 0 6浓度 /剂量比明显低于 3/ 3型的患者 (术后第 7天分别为 32 8± 1 7 7,4 1 6± 1 5 8,1 0 2 3± 5 1 2 ;术后 1个月分别为 33 1± 7 5 ,4 6 4± 1 2 9,1 0 3± 4 7 5 ;术后 3个月分别为 35 3± 2 0 9,5 9 0± 2 0 6 ,1 5 0± 85 3;P均 <0 0 0 1 ) , 1 / 1纯合子患者的血药浓度略低于 1 / 3杂合子 ,具有统计学意义 (术后第 7天P >0 0 5 ,术后 1个月和 3个月P <0 0 1 )。动态观察MDR1基因型与FK5 0 6血药浓度之间无明显相关性。 结论 :?

多药耐药基因1 C3435T基因多态性对环孢素A药物动力学影响的Meta分析

背景:多药耐药基因1 C3435T基因多态性影响着P-糖蛋白的功能和表达,从而影响环孢素A血药浓度,产生个体差异。目前多药耐药基因1 C3435T基因多态性对环孢素A药物动力学影响的研究结果不一。目的:基于国内外报道的国内相关研究,系统评价多药耐药基因1 C3435T基因多态性与环孢素A药物动力学的关系。方法:计算机检索Cochrane图书馆、Medline、Plumbed、CNKI、万方等数据库,并辅以文献追溯的方法,收集国内外公开发表的国内相关病例对照、队列研究。检索年限均为从建库至2011-12-31。按纳入、排除标准筛选文献并评价纳入研究的质量后,采用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果与结论:共纳入9篇文献,合计893例患者。Meta分析结果表明,多药耐药基因1 3435CC的环孢素A剂量调整谷浓度显著低于CT基因型(P=0.007)和TT基因型(P=0.0006);亚组分析显示,肾移植后患者多药耐药基因13435CC的环孢素A剂量调整谷浓度显著低于CT基因型(P<0.00001)及TT基因型(P=0.0003);血液系统疾病患者多药耐药基因1 3435CC的环孢素A剂量调整谷浓度显著低于TT基因型(P=0.004)。多药耐药基因1 3435CC的环孢素A剂量调整峰浓度显著低于TT基因型(P=0.005)。提示多药耐药基因1 C3435T基因多态性对环孢素A血药浓度有影响,CC基因型患者血药浓度低于TT基因型。还需要大样本、前瞻性研究来探讨多药耐药基因1 C3435T基因多态性与环孢素A药物动力学的关系。

原花青素通过调节微小RNA-27a与微小RNA-451抑制多药耐药基因1 mRNA的表达

目的：研究原花青素对微小RNA-27a（miR-27a）与微小RNA-451（miR-451）在A2780/T细胞中表达的影响，及其与抑制多药耐药基因1（MDR1） mRNA表达的相关性。方法通过茎环法聚合酶链反应（stem-loop PCR），检测miR-27a与miR-451的表达水平，分别评价0~40μmol/L的原花青素刺激A2780/T细胞0~48 h后细胞内miR-27a与miR-451的表达水平。进一步通过转染miR-27a和miR-451的模拟或抑制片段，分别过表达或沉默相关的微小RNA，采用RT-PCR法评价原花青素对转染后细胞内MDR1 mRNA表达水平的影响。结果原花青素显著抑制了miR-27a与miR-451的表达水平，并且均具有浓度与时间依赖性。原花青素能够显著抑制过表达miR-27a与miR-451而上调的MDR1 mRNA水平，而对通过miR-27a与miR-451的沉默而下调的MDR1 mRNA水平无显著影响。结论原花青素能够通过抑制A2780/T细胞内miR-27a与miR-451的表达，从而抑制MDR1 mRNA的表达。

多药耐药基因1 C3435T基因多态性对临床相关药物影响的研究进展

多药耐药基因（MDR）1,又名三磷酸腺苷（ATP）结合盒亚家族B成员（ABCB）1是一个较保守的基因家族,是人体正常基因,编码P-糖蛋白（P-gp）。研究发现[1],P-gp为介导药物之间产生相互作用的重要环节,通过影响药物在细胞内外的转运过程,特别是在小肠部位的转运,而影响药物口服生物利用度的改变,从而进一步影响药物的疗效、毒性或产生耐药[2,3]。

人多药耐药基因1(mdr1)的克隆及重组腺病毒制备

目的:构建表达多药耐药基因1(MDR1)的重组腺病毒表达系统。方法:用基因工程技术将多药耐药基因1的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdEasy同源重组,经脂质体转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒。将重组腺病毒Ad5-mdr1感染小鼠单个核细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪进行检测。结果:酶切鉴定及PCR结果证明多药耐药基因重组腺病毒载体构建成功,构建的人多药耐药基因1(mdr1)重组腺病毒载体的效价达到8.3×1011pfu/ml。对小鼠单个核细胞的感染效率可达10%～15%,转染小鼠单个核细胞细胞48h后,可检测到mdr1基因的表达。结论:成功构建了表达多药耐药基因1的重组腺病毒载体,为后续对mdr1的相关研究创造了条件。

难治性癫痫患者脑内HIF-1α与多药耐药基因1表达的相关性及其意义

目的:探讨难治性癫痫患者脑内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与多药耐药基因1(MDR1)的表达情况、相关性及其意义。方法:收集9例难治性癫痫组手术切除脑组织标本及7例对照组脑组织标本,采用免疫组织化学染色方法检测HIF-1α和MDR1的表达情况,并分析HIF-1α与MDR1表达阳性率的相关性。结果:HIF-1α在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率77.8%(7/9)明显高于对照组的14.3%(1/7);MDR1在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率66.7%(6/9)明显高于对照组的14.3%(1/7),比较差异均有统计学意义(P<0.05);难治性癫痫组脑组织中HIF-1α与MDR1的表达呈正相关(r=0.76,P<0.05)。结论:难治性癫痫患者脑内HIF-1α和MDR1表达升高,且两者呈正相关。HIF-1α可能通过调控MDR1基因表达而参与难治性癫痫的形成。

多药耐药基因1与肝癌

目前认为肝癌化疗失败的主要原因与多药耐药有关,而多药耐药基因1(Multi-drugresistance 1 gene,mdr1)编码的P-gp蛋白(Permeability-glycoprotein)被认为可能是参与肿瘤多药耐药的主要因素之一。目前的研究发现,mdr1参与肝癌的多药耐药可能与多种机制有关,而且mdr1还可能与肝癌的血管形成、肝癌细胞的凋亡有关;在逆转肝癌多药耐药的策略中,采用物理、药物、分子生物学方法、细胞因子等抑制或干扰mdr1的表达及P-gp蛋白的功能成为重要的方向。

胃癌多药耐药基因1表达及其与生物学行为的关系

目的了解胃癌多药耐药基因1(mdr1)的表达及其与生物学行为的关系。方法应用现代信息技术,收集有关文献进行综合分析。结果正常和病理胃均可表达mdr1,胃癌的mdr1表达水平最高。胃癌的mdr1表达和胃癌对抗肿瘤药物敏感性及病人的生存期、生存率呈负相关,和组织分化、肿瘤浸润、分期及转移的关系不肯定,和肿瘤发生部位、大小、组织类型、患者年龄、性别之间无相关性。结论胃癌mdr1基因表达和生物学行为相关。

TNF-α增强多药耐药基因1对骨髓保护的研究

目的:探讨通过采用肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α)预处理靶细胞,增强腺病毒转染小鼠单个核细胞的效率,从而增强多药耐药基因保护骨髓的能力,实现化疗中对骨髓的保护。方法:采用Ad-Easy-1腺病毒载体系统重组表达MDR1的重组腺病毒Ad-MDR1,通过Ad5-MDR1感染不同浓度TNF-α预处理后的小鼠单个核细胞,荧光倒置显微镜结合流式细胞仪监测转染率,RT-PCR及Western blot检测TNF-α干预后MDR1基因在靶细胞中的表达。结果:最适浓度TNF-α预处理后,流式细胞仪检测TNF-α预处理组腺病毒转染率(26.26%)明显高于未处理组(11.96%);RT-PCR和Western blot检测TNF-α预处理组MDR1 mRNA和P-糖蛋白(P-gp)的表达均明显高于未处理组。结论:适合浓度的TNF-α可以明显增强腺病毒对小鼠单个核细胞的转染率,增强多药耐药基因在靶细胞中的表达,实现化疗中对骨髓的有效保护。

山茱萸多糖对难治性癫痫幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b及主穹隆蛋白表达的影响

目的:探讨山茱萸多糖对难治性癫痫(RE)幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b(MDR1b)及主穹隆蛋白(MVP)的影响,并阐明其作用机制。方法:40只幼鼠建立RE模型,随机分为模型组(n=8)、低剂量山茱萸多糖组(n=9)、高剂量山茱萸多糖组(n=10)和阳性对照组(n=10),同时另设假手术组(n=10)。低和高剂量山茱萸多糖组幼鼠分别给予0.14和0.56 g·kg^(-1)山茱萸多糖灌胃,阳性对照组幼鼠给予154 mg·kg^(-1)拉莫三嗪灌胃,对照组和模型组幼鼠给予等量生理盐水灌胃。观察各组幼鼠癫痫行为学变化,HE染色观察各组幼鼠海马组织病理形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组幼鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法分别检测各组幼鼠海马组织中核因子κB(NF-κB)、MDR1b及MVP mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组幼鼠癫痫发作总次数增加(P<0.05),总持续时间延长(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中NF-κB、MDR1b和MVP mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠癫痫发作总次数减少(P<0.05),总持续时间缩短(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中MDR1b、MVP mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。HE染色,假手术组幼鼠海马区细胞形态结构正常;模型组幼鼠海马区细胞排列紊乱,大量细胞呈空泡样变,可见大量核破裂和核固缩;低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠海马区细胞排列较为整齐,细胞轮廓较清晰,可见少量空泡变性、核破裂和核固缩。结论:山茱萸多糖可改善RE幼鼠癫痫发作情况,其机制可能与抑制MDR1b和MVP mRNA和蛋白表达有关。

斑贞1号、川芎嗪和氟尿嘧啶联合对人胃癌细胞多药耐药基因1表达的影响

目的探讨斑贞1号、川芎嗪(TMP)和氟尿嘧啶(5-FU)联合逆转人胃癌细胞系SGC-7901/ADR与多药耐药基因1(MDR1)表达的相关性。方法以SGC-7901/ADR细胞为靶细胞,以不加药组为阴性对照组,氟尿嘧啶组、斑贞1号组、斑贞1号+氟尿嘧啶组、斑贞1号+氟尿嘧啶+川芎嗪(TMP)组为实验组,采用半定量RT-PCR法检测SGC-7901/ADR细胞在不同药物作用下MDR1mRNA的表达情况。结果氟尿嘧啶组与阴性对照组相比,MDR1mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而其他药物组与对照组及组间比较差异有统计学意义(P<0.05),斑贞1号+氟尿嘧啶+TMP组表达量最少。结论斑贞1号、TMP和氟尿嘧啶联合逆转SGC-7901/ADR细胞耐药性可能与MDR1基因相关,为当前胃癌的治疗提供了新的理论依据。

多药耐药基因1 C3435T和C1236T多态性与癫痫患者苯巴比妥血清药物浓度的关系

目的以中国汉族癫痫儿童为研究对象,探讨多药耐药基因1(MDR1)基因C3435T和C1236T多态性对抗癫痫药苯巴比妥药物浓度的影响。方法符合癫痫诊断标准的癫痫患者90例,服用苯巴比妥,抽取受试者外周静脉血,采用PCR-限制性片段长度多态性方法对服用苯巴比妥癫痫患者进行MDR1基因C3435T和C1236T分型,同时采用荧光偏振免疫法测定苯巴比妥的血清浓度,比较不同基因型间苯巴比妥(PB)血清浓度差异。结果 MDR1基因C3435T多态性中,PB在基因型CT、CC和TT基因型中血清浓度分别为7.02±0.89μg·m L-1,8.12±1.0μg·m L-1,6.32±0.78μg·m L-1;3基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。MDR1基因C1236T多态性中,苯巴比妥在CT、CC和TT基因型血清浓度分别6.72±0.91μg·m L-1,7.13±0.8μg·m L-1,8.2±0.63μg·m L-1;3基因型间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MDR1基因C3435T和C1236T多态性不影响抗癫痫药苯巴比妥药物浓度。

多药耐药基因1和CD_(34)在急性白血病的表达及相关性的临床研究

目的 :初步探讨多药耐药基因 1(mdr1)和 CD34 在急性白血病 (AL)中的表达及二者在多药耐药 (MDR)中的相关性。方法 :对 5 9例初发 AL患者治疗前及完全缓解 (CR)后 ,应用流式细胞仪 (FCM)测定 CD34 表达情况及半定量多聚酶链反应 (RT- PCR)测定 mdr1m RNA水平。结果 :m dr1、CD34 分别在急性髓性白血病 (AML)与急性淋巴细胞性白血病 (AL L)的表达无差异。mdr1+与 CD+ 34 呈正相关。COX回归分析 :AL 患者 CD34 、m dr1过度表达均对疗效有影响 ,而 m dr1表达更具判断预后价值。经 L og rank检验 ,mdr1+组与 mdrl-组、CD+ 34 组与 CD34 -组 CR率有显著性差异。结论 :mdrl和 CD34 均为 CR率低、疗效差、预后不良的重要因素。

内部核糖体进入位点介导多药耐药基因1在人CD34^+细胞中的表达

为了达到双耐药基因共转染以拓宽造血细胞耐药谱的目的 ,初步观察了内部核糖体进入位点 (IRES)介导多药耐药基因 1(MDR1)在人早期造血细胞中的表达效率。由脑心肌炎病毒IRES调控MDR1基因翻译的双耐药基因逆转录病毒载体 pSF DIM和相同启动子调控的MDR1单耐药基因逆转录病毒载体 pSF MDR1,包装后获得的双嗜性包装细胞PA317 pSF DIM和PA317 pSF MDR1病毒滴度分别为 8× 10 4 和 1.3× 10 5cfu ml。用其上清感染人脐血CD34+ 细胞 ,经FCM检测表明基因转导后单基因转导组和双基因转导组P gp表达均有提高 ,分别为2 8.82 %(荧光强度 2 5 .4 9)和 10 .92 %(荧光强度 9.4 8) ,但单基因转导组高于双基因转导组。因此 ,IRES成功地介导了MDR1基因在人早期造血细胞中的表达 ,为后续的试验奠定了一定的基础。但是 ,双基因转导组和单基因转导组MDR1表达差异的原因还需进一步研究。

海人酸致痫大鼠颞叶、海马区多药耐药基因1、P-糖蛋白的表达及相互关系

目的探讨癫痫大鼠颞叶、海马区多药耐药基因1(MDR1)及P-糖蛋白(Pgp)的表达及其相互关系。方法选择健康清洁级雄性SD大鼠50只。采用随机数字表法将大鼠分为观察组和对照组。观察组大鼠海马区注射海人酸(KA)2μl(含KA 1μg),制作颞叶耐药性癫痫(RE)模型(成功22只),对照组同法注射0.9%氯化钠注射液2μl。两组大鼠饲养、观察1个月后,分别取颞叶、海马区组织,采用免疫组化及实时荧光定量PCR法检测MDR1 mRNA和Pgp表达水平,并分析其相互关系。结果观察组颞叶、海马区的MDR1 mRNA、Pgp表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组颞叶、海马区MDR1 mRNA表达水平与Pgp表达水平呈正相关(r=0.55,P<0.05)。结论MDR1、Pgp可能参与RE的发病机制,可为开发相关新的治疗方法或药物提供依据。

多药耐药基因1甲基化与多药耐药及逆转的研究进展

近年来，新的化疗药物应用于肿瘤的临床治疗，大大提高了化疗疗效。然而，对大多数的肿瘤患者来说，化疗仍然是一种姑息的治疗方法。肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生的多药耐药性（MDR）严重地影响了化疗的有效率。其中对于由多药耐药基因1（mdrl）基因编码的P-糖蛋白（P-gp）介导的MDR研究最早也较多。mdrl基因的过表达是肿瘤预后的不良因素之一，它参与了大多数肿瘤的耐药机制。

多药耐药基因1C3435T多态性对汉族儿童外周血单个核细胞mRNA表达的影响

目的探讨多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)C3435T多态性与健康汉族儿童外周血单个核细胞中mRNA表达的关系。方法以130例(男性83例,女性47例)无亲缘关系的中国健康汉族儿童为研究对象,采用PCR-RFLP技术检测其MDR1基因C3435T位点的基因型,实时荧光定量PCR法检测其外周血单个核细胞中MDR1mRNA表达水平。结果 130例儿童中,51例为CC型,63例为CT型,16例为TT型,基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);CC、CT、TT各基因型组间外周血单个核细胞MDR1 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论汉族儿童中MDR1基因C3435T多态性对外周血单个核细胞中mRNA表达无显著性影响。汉族儿童C3435T位点多态性不能作为推测MDR1表达水平的依据。

多药耐药基因1和谷胱苷肽-S-转移酶-π在骨软组织肉瘤患者表达及其与化疗耐药关系

目的探讨骨软组织肉瘤组织中多药耐药基因(MDR)1和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-π与化疗耐药的关系。方法使用免疫荧光法和流式细胞术分别检测MDR1、GST-π的表达;采用甲基偶氮唑盐法检测肿瘤组织对阿奇霉素(ADM)、顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(FU)、丝裂霉素(MCC)、长春新碱(VCR)及甲氨蝶呤(MTX)的敏感性。结果软骨肉瘤组织对于ADM,DDP,5-FU,MMC,VCR,MTX的敏感率分别为53.2%,77.2%,51.4%,51%,34.6%,48.1%。瘤体的P-gp与GST-π的相对荧光强度分别为1.55和2.48。P-gp的表达同ADM耐药性,GST-π的表达同ADM,DDP,MMC耐药性均呈显著正相关性(P<0.05)。MDR1同GST-π的表达同患者基本资料无显著相关性。术前,化疗患者GST-π于升高,术前升高的患者术后复发显著高于术前表达较低的患者。结论骨软组织肉瘤患者MDR1、GST-π表达对化疗的敏感性有个体差异,化疗可导致GST-π升高,GST-π高表达与骨软组织肉瘤耐药有直接关系,且影响预后。

表遗传修饰对多药耐药基因1调控的研究进展

多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)的耐药机制与药物的泵出有关。过去的十年里,在有关耐药基因的调控方面已经做了大量的研究。MDR1基因表达受许多因素的影响。最近研究证实,表遗传修饰在调控MDR1基因表达中起重要作用。表遗传通过对DNA的甲基化和组蛋白脱乙酰化的修饰来调节MDR1基因的表达。应用化学物质可以逆转MDR1基因依赖性多药耐药,提高化疗敏感性,这将为癌症治疗提供新策略。

酪氨酸激酶受体、多药耐药基因1蛋白和增殖细胞核抗原在小鼠心脏不同部位的表达

目的研究小鼠心脏固有心房、心耳、左心室、右心室和室间隔酪氨酸激酶受体(c-Kit)、多药耐药基因1蛋白(MDR1)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达有无差异,为小鼠心肌干细胞(CSCs)的分离、培养提供实验依据。方法取体重为38~40 g的6只BALB/C小鼠心脏,常规石蜡切片,采用免疫组织化学SABC法检测c-Kit、MDR1、PCNA的表达。结果小鼠的固有心房、心耳、左心室、右心室和室间隔的c-Kit表达由高低依次为左心室、心耳、室间隔、固有心房和右心室(P<0.01),MDR1表达的由高低依次为心耳、右心室、左心室、固有心房和室间隔(P<0.05);PCNA在固有心房、室间隔与左心室三者间、心耳与右心室之间的表达差异无统计学意义(P>0.05),固有心房、左心室和室间隔的表达较高、心耳与右心室较低(P<0.05)。结论小鼠心脏不同部位均存在c-Kit、MDR1和PCNA阳性细胞,c-Kit、MDR1、PCNA的表达均有差异,三者在不同部位的表达变化规律不明显。