大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。

灰霉病早期胁迫下花椰菜多酚氧化酶活性的高光谱研究

利用高光谱技术实现灰霉病早期胁迫下花椰菜多酚氧化酶(PPO)活性的快速无损检测。为了使预测效果更好,在900~1700 nm光谱范围内采集253个健康花椰菜样本及257个染病花椰菜样本的光谱信息,并使用分光光度计法对样本中多酚氧化酶活性进行测定。对健康及染病花椰菜样本PPO活性均值进行分析,发现健康花椰菜PPO活性均值(10.257 U·g^(-1))小于染病花椰菜PPO活性均值(12.324 U·g^(-1))。利用光谱-理化值共生距离(SPXY)算法对样本进行校正集(健康样本193个,染病样本197个)和预测集(健康样本60个,染病样本60个)的划分,对划分后的样本集进行六种单一预处理(卷积平滑算法SG、去趋势算法DT、中值滤波MF、归一化处理NOR、标准正态变量变换SNV、基线校正Baseline)。利用相关系数(R)和均方根误差(RMSE)作为模型评价指标,发现预处理能够有效提高模型的精度和稳定性,其中健康样本经NOR预处理后的预测集建模效果最好;染病样本经DT预处理后的预测集建模效果最好。采用连续投影算法(SPA)与回归系数法(RC)提取特征波长,建立PPO活性值的偏最小二乘回归(PLSR)、最小二乘支持向量机(LS-SVM)及BP神经网络三种预测模型,探究不同特征波长提取方法对模型精度的影响,比较不同建模方式对花椰菜PPO活性预测的准确度。结果说明提取特征波长可以优化光谱信息,SPA和RC对两种样本提取的波长个数分别为9,12,7和11,其中SPA优化后的光谱数据对健康样本PPO活性预测效果较好,RC优化后的光谱数据对染病样本PPO活性预测效果较好。对比分析模型效果,发现LS-SVM模型对两种样本和其对应的酶活性产生了很好的拟合效果。最终发现,SPA-LS-SVM模型对于健康花椰菜PPO活性预测效果较好,其预测相关系数(Rp)为0.832,预测均方根误差(RMSEP)为1.676;RC-LS-SVM模型对于染病花椰菜PPO活性预测效果较好,其Rp为0.848,RMSEP为1.156。研究结果表明高光谱技术可以实现灰霉病早期胁迫下花椰菜多酚氧化酶活性的测定,为快速检测花椰菜多酚氧化酶活性及便携式仪器开发提供了科学依据。

分子动力学模拟分析超高压对固液两态多酚氧化酶稳定性的影响

以固态晶体(crystal,C-)、液态(liquid,L-)多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)为对象,采用分子动力学模拟的方法,分析其在常温(298.15 K)常压/高压(0.1~400.0 MPa)条件下分子构象的变化。结果表明:固液两态PPO的空间结构均随压力(0.1~400.0 MPa)增大而变的不稳定;与L-PPO相比,C-PPO对压力更敏感,表现出更高的残基波动,溶剂可及表面积和体积减小,蛋白结构更致密;α-螺旋向无规卷曲过渡,导致氢键数量不稳定,螺旋弹性也降低,整体构象差异明显;活性位点Cu^(2+)位置疏远,残基之间距离发生改变、运动出现随机化,干扰底物催化结合。因此,物理状态和压力改变PPO空间结构、残基运动模式和底物结合范围,影响酶稳定性。因此,PPO状态和压力因素对酶变性程度可排序为:固态>液态,物理状态>压力水平。

过氧化氢酶、多酚氧化酶及其组合对白芽奇兰速溶茶粉香气品质的影响

本研究采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术和香气活性值(odor activity value,OAV)分析,探究过氧化氢酶、多酚氧化酶及复合酶处理对特色乌龙茶白芽奇兰速溶茶粉香气成分的影响。结果表明,经过氧化氢酶、多酚氧化酶及复合酶处理后,白芽奇兰速溶茶粉的香气成分和含量均发生了显著变化。过氧化氢酶处理组的香气成分含量最高且OAV提高最多,新生成了反式芳樟醇氧化物(呋喃糖)、顺式-己酸-3-己烯基酯和反式-β-法呢烯,且与未经处理的茶样相比反式-2-壬烯醛、β-环柠檬醛、反式-2-癸烯醛和反式香叶基丙酮的OAV均显著增加;多酚氧化酶处理组新生成了顺式-己酸-3-己烯基酯、反式-β-法呢烯、反式-β-紫罗兰酮和β-环氧紫罗兰酮,且反式-2-壬烯醛、芳樟醇和反式-β-紫罗兰酮的OAV显著增加;过氧化氢酶和多酚氧化酶复合处理组的香气成分种类最多,新生成了顺式-3-己烯-1-醇、反,反-2,4-庚二烯醛、顺式-β-罗勒烯、反式-2-辛烯醛、反,反-3,5-辛二烯-2-酮、壬醛、5-乙基-6-甲基-3-庚烯-2-酮、丁酸己酯、戊酸叶醇酯、2-甲基丁酸己酯、顺式-己酸-3-己烯基酯、己酸己酯、反式-β-法呢烯和反式-β-紫罗兰酮,且芳樟醇的OAV显著增加。这些酶处理引起的香气成分变化可能与类胡萝卜素氧化降解、脂质过氧化、萜醇类前体糖苷键断裂等机制相关。本研究发现了过氧化氢酶和多酚氧化酶复合处理对白芽奇兰速溶茶粉香气具有协同增效作用,可为提高速溶茶粉的香气品质提供理论依据。

褐变抑制剂对果蔬多酚氧化酶的影响

果蔬贮藏过程中,褐变问题严重影响其经济价值及营养价值,由多酚氧化酶引起的酶促褐变备受关注,寻找合适的抑制方法是国内外研究的热点。一些化学抑制剂对于酶促褐变具有良好的抑制效果,本文综述了果蔬褐变的机理,抗坏血酸、半胱氨酸、柠檬酸抑制剂的作用原理及具体应用,旨在为解决由酶促褐变引起的果蔬生产加工问题提供参考,促进果蔬品质的提升。

抗褐变抑制剂对果蔬多酚氧化酶的影响

果蔬的褐变问题对农户造成了很大的经济损失。在生产贮藏过程中,由于酶促褐变产生的对果蔬色泽、感官、及营养品质的负面影响大大降低了果蔬市场的经济效益。褐变是果实成熟老化生理衰退和果实品质劣变的特征之一,本质上是根据是否有酶的参与分为酶促褐变和非酶促褐变。

基于黄鲫蛋白肽制备南美白对虾多酚氧化酶复合生物抑制剂的研究

目的 以黄鲫蛋白肽(half-fin anchovy hydrolysate peptides,HAHp)为基料复配抗坏血酸和茶多酚制备南美白对虾多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)复合生物抑制剂(composite biological inhibitor, CBI)。方法 以南美白对虾PPO抑制率为检测指标,分别研究HAHp、抗坏血酸、茶多酚、柠檬酸和乙二胺四乙酸二钠盐(ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt, EDTA-2Na)单独抑制PPO活性,选取HAHp、抗坏血酸和茶多酚进行三因素三水平正交优化实验优化CBI配方组成,通过酶促动力学研究CBI对南美白对虾PPO的抑制模式。结果 HAHp、抗坏血酸、茶多酚、柠檬酸和EDTA-2Na对南美白对虾PPO都有一定的抑制作用,且有一定的剂量依赖性,但单一抑制剂对PPO的抑制作用有限。HAHp与天然抗氧化剂抗坏血酸和茶多酚复配,经(L933)正交实验优化CBI的最佳配方为:0.7%HAHp、0.02%抗坏血酸和0.20%茶多酚。经测定CBI对南美白对虾PPO抑制率达到94.71%±0.46%,酶促动力学结果表明CBI是一种混合型抑制剂,通过降低南美白对虾PPO对底物亲和力实现抑制PPO活力。结论 以HAHp为基料复配抗坏血酸和茶多酚制备的CBI能够有效地抑制南美白对虾PPO活性,有望开发成一种防虾黑变的天然抑制剂,为南美白对虾天然保鲜剂的研究奠定了理论基础。

茶叶中多酚氧化酶的性质及其在茶叶加工中的作用

本文着眼于茶叶领域多酚氧化酶的研究进展,着重介绍了该酶在茶叶氧化过程中的关键作用。多酚氧化酶是茶叶加工中不可或缺的酶类之一,对茶叶的风味、色泽和营养成分有直接影响。深入了解多酚氧化酶的特性和调控机制,对于优化茶叶加工工艺至关重要。通过科学研究多酚氧化酶的作用机制,我们能够提供更高效的加工方法,从而进一步提升茶叶的品质和市场竞争力。这项研究对茶叶产业的发展、品质提升有着重要意义。

产多酚氧化酶菌株在改善雪茄烟叶品质中的应用研究

为了更好地协调雪茄烟叶中多酚类物质含量和提升烟叶感官质量,通过特异性筛选产多酚氧化酶菌株,将其应用于雪茄烟叶发酵中,测定发酵烟叶挥发性化合物含量和分析烟叶感官质量,探究产多酚氧化酶菌株对雪茄烟叶品质改善的机制。结果表明,共筛选出3株菌株(C1、C2和C3)可降解绿原酸,产多酚氧化酶活性分别为116.67、41.67、141.67 U/mL。产多酚氧化酶的菌株应用于雪茄发酵能够丰富烟叶香韵类型、减轻烟叶杂气、提升烟叶感官质量和提高烟叶工业可用性,其中菌株C2发酵烟叶香气质、香气量、杂气和透发性等指标改善最明显。发酵烟叶中2,6-二甲基吡嗪、2,5-二甲基吡嗪等美拉德反应产物,壬酸乙酯、3-甲基戊酸等脂肪酸降解产物和苯甲醇、苯甲醛、苯乙酸乙酯等芳香族氨基酸降解产物的含量增加。多酚物质降解能够增加美拉德反应前体和芳香族氨基酸前体物质,促进美拉德反应产物和芳香族氨基酸降解产物转化;同时,多酚的氧化降解减少对微生物代谢生长的抑制,使得发酵烟叶中乙酸乙酯积累。综上,产多酚氧化酶菌株能够促进烟叶美拉德反应产物和芳香族氨基酸降解产物含量的增加,较好地改善雪茄烟叶品质。

不同氧浓度气调和解封对片烟多酚氧化酶活性的影响及来源探究

为了研究气调贮存和解封后使用过程中片烟多酚氧化酶(PPO)活性的变化及探究烟草中PPO的活性来源,以5种氧气浓度气调醇化的3种烟草片烟为研究对象,分别在气调醇化的18个月、21个月和26个月时,取样测定气调贮存和解封1~3个月过程中片烟PPO的活性;并通过对片烟表面微生物的灭菌处理,研究片烟气调过程中PPO的来源。结果表明,低氧气调处理对PPO的活性有一定的抑制效果。解封后的2个月内,4种低氧处理组片烟PPO的活性降幅均大于正常氧浓度处理组;且对于三种产地的片烟而言,采用2%~4%的氧气浓度气调处理都能较好地抑制PPO的活性。本研究证明了片烟的PPO活性来源于片烟内部而非片烟表面微生物,2%~4%的低氧气浓度气调处理能有效降低PPO活性,有利于片烟中多酚类物质的保留,为片烟贮藏和解封后的生产和使用提供了一定的理论基础。

可溶态和膜结合态双孢蘑菇多酚氧化酶的分离纯化及酶特性分析

为开发一种双孢蘑菇两种不同形态多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)的提取纯化方法,通过温度诱导相分配、分步硫酸铵沉淀盐析、DEAE阴离子交换层析,对双孢蘑菇中的可溶态PPO(soluble PPO,sPPO)和膜结合态PPO(membrane-bound PPO,mPPO)进行分离纯化,并通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和Native-聚丙烯酰氨凝胶电泳及米氏方程对纯化后两种形态PPO的纯度、分子质量及酶促反应动力学进行探究。双孢蘑菇sPPO和mPPO经纯化后对邻苯二酚的比活力分别达到6912.88 U/mg和19092.94 U/mg,相比于粗酶液,酶的比活力分别提高到12.20倍和10.86倍,且纯化后mPPO的比活力显著高于sPPO。酶促反应动力学结果显示,sPPO和mPPO对不同底物的催化活性差异较大,对底物邻苯二酚的催化活性较高,且mPPO比sPPO对底物邻苯二酚的亲和力更强,酶促反应速度更高。sPPO和mPPO对邻苯二酚的最适反应温度均为30℃,最适pH值均为6.8。本研究为双孢蘑菇两种状态PPO的质谱鉴定、酶学特性以及抑制酶促褐变的发生等研究奠定了基础。

马铃薯多酚氧化酶的分离纯化及酶学特性研究

为控制马铃薯在贮藏和加工过程发生的酶促褐变,对马铃薯多酚氧化酶进行分离纯化,并研究其酶学特性。采用缓冲液提取、低温离心得到马铃薯多酚氧化酶(PPO)粗酶液,粗酶液经硫酸铵分级盐析、Sephadex G-25分子凝胶柱层析脱盐处理、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析分离纯化得到马铃薯PPO,进一步对其部分酶学特性进行研究。结果显示:纯化后的马铃薯PPO其比活力为283.0 U·mg^(-1),回收率为16.8%,纯化倍数为18.6倍;该酶最适反应温度为30℃,最适反应pH为6.5;以邻苯二酚为底物时,最适底物浓度为50 mmol·L^(-1)。该酶对焦性没食子酸、间苯二酚的底物亲和性较强,对4-甲基儿茶酚、咖啡酸、没食子酸、对苯二酚、邻苯二酚、绿原酸的底物亲和性较低,对N-BOC-酪胺、愈创木酚亲和性很低。

远红外辐射对山药多酚氧化酶活性及构象的影响

目的:探讨远红外辐射加热对山药多酚氧化酶活性及构象的影响。方法:采用不同的远红外辐射温度对山药进行预处理,研究不同远红外辐射温度对山药多酚氧化酶(PPO)活性、褐变度、总酚含量及PPO构象的影响。结果:当辐射温度为260℃时,处理11 min后PPO酶活仍未钝化,辐射温度高于260℃时,PPO在3~7 min内即可失活;褐变度与总酚含量不随辐射温度的升高和处理时间的增加而规律性变化。经远红外预处理后,随着辐射温度的升高,无规则卷曲和α-螺旋含量有轻微的变化,β-转角减少、β-折叠增加,表明远红外改变了PPO的二级结构。PPO紫外光谱蓝移,荧光光谱红移,表明PPO三级结构发生改变。结论:远红外辐射加热能改变山药中PPO构象并有效钝化PPO活性。

一种多金属氧酸盐对多酚氧化酶的抑制活性评价及在南美白对虾保鲜上的应用

目的:研究新型多酚氧化酶抑制剂对南美白对虾的保鲜效果。方法:通过紫外和红外光谱表征合成的多酚氧化酶抑制剂H_(8)[P_(2)Mo_(17)Ni(OH_(2))O_(61)](P_(2)Mo_(17)Ni),研究其对蘑菇多酚氧化酶(PPO)相对酶活的影响及抑制机制和抑制类型;再测定经P_(2)Mo_(17)Ni处理后的南美白对虾在贮藏过程中的感官评分、色差(L*)值、总色差(ΔE)值、菌落总数、酸碱度(pH)值和总挥发性盐基氮(TVB-N)值的变化情况,评价P_(2)Mo_(17)Ni在南美白对虾保鲜上的作用。结果:P_(2)Mo_(17)Ni对体外蘑菇PPO的活性具有抑制作用,其半抑制浓度(IC_(50))为(0.377±0.004)mmol/L,且对PPO的抑制模式为竞争型可逆抑制,抑制常数K_(I)为0.185 mmol/L。在4℃冷藏条件下,与空白组相比,P_(2)Mo_(17)Ni处理能延缓对虾感官评分的下降和L*值、ΔE值的增加,抑制效果显著;且能显著延缓菌落总数、pH值和TVB-N值的增加,货架期可延长4~5 d。结论:P_(2)Mo_(17)Ni对南美白对虾具有良好的保鲜效果。

响应面法优化美味牛肝菌伞部及柄部多酚氧化酶的提取工艺

分别以美味牛肝菌的伞部和柄部为原料提取多酚氧化酶(PPO)。以伞部和柄部PPO酶活为指标,在单因素试验的基础上,通过响应面试验优化美味牛肝菌伞部和柄部PPO的提取工艺。结果表明:美味牛肝菌伞部PPO的最佳提取工艺为提取温度22℃、液料比2.0∶1(mL/g)、底物浓度1.0 mol/L、pH 7.4,在此条件下伞部PPO酶活为13.111 U;柄部PPO的最佳提取工艺为提取温度60℃、液料比2.2∶1(mL/g)、底物浓度0.5 mol/L、pH 5.9,在此条件下柄部PPO酶活为10.833 U。

芒果果实多酚氧化酶(PPO)基因的克隆与表达分析

多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)是引起水果褐变的关键酶。为了研究芒果果实中PPO基因的功能,本试验采用RACE方法从‘贵妃’芒果果实中克隆得到了1个PPO基因,该基因cDNA序列全长为1930bp,开放阅读框为1782bp,编码593个氨基酸。芒果PPO基因编码的多酚氧化酶属于亲水性蛋白质,分子重量为66.82KD,等电点为6.95,不含跨膜结构和信号肽,为非分泌蛋白,包含Tyrosinase、PP01_DWL和PP01_KFDV保守结构域。芒果PPO蛋白的二级结构无规则卷曲、β-折叠和α-螺旋占比分别为63.58%、22.60%和13.83%,三级结构与模板6els.1.A-致性达70.94%,可能与C2H2 and C2HC zinc fingers superfamily protein(TT1),Multidrug resistance protein,mate family(TT12)和Autoinhibited H(+)-ATPase isoform 10(AHA10)等存在相互作用。聚类分析表明该蛋白与开心果、橄榄、克莱门柚和甜橙等植物的亲缘关系较近。通过qRT-PCR分析,芒果PPO基因主要在‘桂七’果皮中表达量较高,而在‘贵妃’果皮中表达量较低。该基因的克隆及其功能的研究对芒果抗酶促褐变品种的培育以及分子改良具有重大意义。

香叶木素抑制多酚氧化酶的分子机制

采用多种光谱学方法结合计算机模拟手段研究了香叶木素对多酚氧化酶(PPO)的抑制机制。发现香叶木素通过可逆混合方式对PPO活性产生抑制,IC 50值为(302.9±1.82)μmol·L^(-1)。荧光结果显示香叶木素通过静态方式猝灭PPO的内源荧光,二者形成复合物主要依靠疏水相互作用驱动,在测定温度下,其结合常数为104数量级,结合位点数为1。圆二色谱和同步荧光分析表明,香叶木素诱导PPO的α-螺旋含量增加,β-折叠和无规则卷曲含量降低,酶结构紧缩,但对酪氨酸和色氨酸残基周围微环境几乎没有影响。分子对接显示香叶木素进入PPO的疏水空腔,结合于双核铜活性中心附近并与周围的氨基酸残基主要通过氢键、疏水作用力和范德华力相互作用。分子动力学模拟结果表明,香叶木素的加入降低了酶的稳定性和亲水性,增强了酶结构的致密性。因此,香叶木素抑制PPO活性可能归因于香叶木素结合在PPO的活性中心附近,与周围的氨基酸残基相互作用,占据了底物进出活性中心的通道,诱导了PPO二级结构的改变,阻止了底物被催化,从而抑制了PPO的催化活性。本研究为香叶木素作为新型PPO抑制剂的应用提供了理论基础。

不同品种珠芽黄魔芋化学成分及多酚氧化酶研究

为了分析不同品种珠芽黄魔芋的化学成分及多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)特性,对5个珠芽黄魔芋品种的葡甘聚糖、粗纤维、蛋白质、生物碱、重金属元素进行测定,研究了3个珠芽黄魔芋品种的PPO最适温度、pH及其热稳定性。结果表明:5个珠芽黄魔芋品种的葡甘聚糖含量为55.30%~63.90%,粗纤维含量为2.77%~3.47%,蛋白质含量为8.08%~10.50%,生物碱的含量为1.73%~1.89%,锰含量为4.36~12.50 mg/kg,镉含量为0.0154~0.206 mg/kg,砷含量为0~0.0102 mg/kg,存在显著性差异(P<0.05);脂肪含量为0.27~0.35%,无显著性差异(P>0.05)。‘弥勒魔芋’、‘西傣9号’、‘云热1701’的多酚氧化酶最适温度为35℃、40℃、35℃,最适pH为6.0、6.0、5.5,温度达到90℃时珠芽黄魔芋中的多酚氧化酶会在短时间内失活。不同品种珠芽黄魔芋的化学成分及多酚氧化酶存在差异性,本研究可为珠芽黄魔芋品种的筛选、加工提供一定的参考依据。

滇橄榄多酚氧化酶提取工艺优化及抑制剂筛选

以滇橄榄为原料,基于单因素试验结果,采用响应面曲面法对滇橄榄多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)提取工艺进行优化,结果表明:回归模型对响应值拟合良好,得出滇橄榄PPO提取最佳工艺条件为磷酸盐缓冲液pH7.9、浸提时间1.5 h、液料比4.0∶1(mL/g),在该条件下,模型预测滇橄榄PPO酶活力为24.83 U/(g·min)。并在该基础上对滇橄榄PPO抑制剂进行筛选,得出柠檬酸亚锡二钠的抑制作用最强,且浓度为0.6 g/L的柠檬酸亚锡二钠在对滇橄榄PPO作用时间160 min及以上时,PPO活性能够被有效抑制。

佛手山药多酚氧化酶提取及酶促合成茶黄素研究

为探究佛手山药多酚氧化酶(PPO)粗酶液提取及其催化儿茶素合成茶黄素的能力,本研究利用缓冲液浸提法制备佛手山药PPO粗酶液,考察料液比、pH、反应温度等因素对佛手山药PPO酶提取效果的影响。结果表明佛手山药PPO酶最适提取条件为料液比1∶2,pH 5.5,反应温度35℃。以反应底物作为研究对象时,邻苯二酚使得佛手山药PPO酶表现出最大酶活,茶多酚与EC表现相当,而EC优于其他三种儿茶素单体。以佛手山药PPO粗酶液作为催化剂,四种儿茶素单体之间成对组合作为酶促合成茶黄素的底物,通过HPLC法检测佛手山药PPO粗酶液催化儿茶素合成茶黄素的能力,结果表明佛手山药PPO酶能催化合成茶黄素TF1、TF2A、TF2B、TFDG,但四种产物的合成率却相差较大,PPO催化儿茶素合成四种茶黄素的为TF1> TF2B> TF2A> TFDG,TF1的合成率达到30.66%。