HPMEC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)大分子物质

目的:建立一种利用HPMEC-ELSD检测注射用益气复脉(冻干)(YQFM)中高分子物质的方法。方法:采用UltrahydrogelTMlinear凝胶色谱柱,以0.02%甲酸水溶液为流动相,流量为0.6 ml/min,柱温为35℃,进样体积为10μl,ELSD(不分离模式,漂移管温度为105℃,压缩空气流量为2.5 L/min,增益值为1)建立大分子物质检测方法,并对10批YQFM进行大分子物质的检测。结果:该方法的专属性强、线性(Y=-0.5236 X+11.582,r=1.0000,线性范围为1027.5~13968 Da)、精密度(A的RSD≤0.7%、t_(R)的RSD≤0.1%)、重复性(A的RSD≤1.1%、t_(R)的RSD≤0.1%)、稳定性(48 h t_(R)的RSD≤0.1%)和方法耐用性良好。10批YQFM中均未检出大分子物质(分子量≥10000 Da)。结论:该方法简便、快捷,可作为YQFM中大分子物质的检测方法,亦可为其他品种的中药注射剂大分子物质检测提供借鉴。

微射流技术对食品大分子物质性质及结构的影响

利用动态高压微射流(dynamic high-pressure microfluidization,DHPM)对纤维多糖(AX)、蛋白质(WP)、淀粉(PS)和果胶(PE)进行均质处理,通过分析处理前后大分子物质的粒径、扫描电镜图、X射线衍射图、紫外吸收光谱、傅里叶红外光谱以及表观黏度,研究DHPM对大分子物质基本性质和结构的影响。结果发现:经DHPM处理后4种大分子物质粒径均减小,平均粒径分别减小了79%、31%、68%、63%,大分子颗粒表面在剪切力作用下受到了不同程度的剪切和破碎,AX和PS的表观黏度增加,WP和PE则减少;X射线衍射、紫外吸收光谱及傅里叶红外光谱结果显示均质前后的特征峰及官能团未发生改变,而吸收峰的强度有不同程度的变化,样品部分吸收峰发生红移,AX、PS、PE的O—H氢键缔合伸缩振动特征吸收峰峰宽增加,WP二级结构α-螺旋消失,β-折叠含量减少,结晶度下降。可以看出,DHPM处理使4种大分子物质的性质及结构产生一定的改变。该研究为食品大分子物质的深度开发与资源利用提供了理论依据。

高效分子排阻色谱法测定涉药品不良反应注射用曲克芦丁中多糖和蛋白类大分子物质

目的采用高效分子排阻色谱(HPSEC)法测定涉药品不良反应(ADR)注射用曲克芦丁中多糖和蛋白类大分子的含量。方法检测器为示差折光检测器,色谱柱为TSKgel G4000PWXL凝胶柱(300 mm×7.8 mm,10μm),流动相为纯化水,流速为0.5 mL/min,柱温为35℃,以不同相对分子质量右旋糖酐标准品为对照,对注射用曲克芦丁中多糖类大分子物质进行筛查;检测器为紫外检测器,色谱柱为TSKgel G2000SWXL凝胶柱(300 mm×7.8 mm,10μm),流动相为乙腈-水-三氟乙酸(45∶55∶0.05,V/V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为214 nm,以生长抑素、胸腺肽α1、人胰岛素、核糖核酸酶A为对照,对注射用曲克芦丁中蛋白类大分子物质进行筛查。结果涉ADR批次及正常批次注射用曲克芦丁中多糖类大分子物质的数据无明显差异;涉ADR批次中蛋白类大分子物质的含量高达正常批次的3倍,且制剂对应厂家的曲克芦丁原料药中蛋白类大分子物质的含量远高于同测第三方厂家曲克芦丁原料药的20倍。结论该研究中注射用曲克芦丁发生ADR的原因为产品中蛋白类大分子物质的含量偏高。

天然抗烟草花叶病毒大分子物质研究进展

天然大分子物质主要包括蛋白、核酸和糖类。本文主要阐述了植物、动物和微生物中天然抗烟草花叶病毒大分子物质的研究与应用现状。关于这些大分子物质的抗病毒机理是多方面的,主要包括抑制病毒的侵染、对植物病毒增殖过程中的干扰和抑制作用、诱导植物的抗病性反应等,并对今后的研究进行了展望。

大分子物质对中药注射剂的安全性影响

目的去除中药注射剂中大分子物质,观察其主要功效是否改变,安全性是否提高,试图为提高中药注射剂的安全性提供技术策略。方法用不同截留分子量的分子筛去除两种上市中药注射剂(清开灵注射液和双黄连注射液)大分子,获得去除大分子的中药注射液和富含大分子的中药注射液,用HPLC检测去大分子中药注射剂的指纹图谱变化;用脂多糖家兔发热模型检测两种去大分子注射液的退热作用;参照药典方法检测富含大分子中药注射剂的一般毒性或过敏毒性。结果经截留分子量10k的分子筛处理后,两种去大分子中药注射液的指纹图谱变化小于5%,退热作用基本不变;而两种富含大分子注射剂具有明显的一般毒性或过敏毒性。结论采用适当截留分子量的分子筛去除中药注射剂大分子物质能在确保疗效无明显变化的前提下提高中药注射剂的安全性。

不同成熟度烟叶烘烤过程中大分子物质代谢动态研究

【目的】为探索烘烤过程中不同成熟度烟叶烘烤过程中生理指标的变化大分子物质代谢动态变化规律,为烤出具有良好香吃味的烤烟提供科学依据。【方法】本研究采用常规生理研究方法检测分析烘烤过程中不同成熟度烟叶的生理指标。【结果】成熟度对烘烤过程中烟叶的大分子物质代谢具有重要影响;成熟度适宜的烟叶烘烤过程中色素降解速度较快且烤后降解较彻底,淀粉水解为水溶性糖较为彻底,淀粉酶活性强,对烟叶香味及吸味品质形成较为有利;过熟烟叶色素含量降解少、烤后含量较低;过熟烟叶淀粉、可溶性糖和蛋白质含量高。烘烤过程中蛋白质含量均呈现增加-减小-增加-减小-增加、氨基酸含量均呈现增加-减小、内肽酶含量均呈现增加-减小-增加-减小的趋势。【结论】成熟度适宜的烟叶烘烤过程中色素降解速度较快且较彻底,淀粉、淀粉酶含量适宜,淀粉水解为水溶性糖较为彻底,蛋白质的含量适宜,利于美拉德反应的完成,对烟叶品质形成具有重要作用。

参芪扶正注射液大分子物质研究

目的:建立参芪扶正注射液大分子物质的检测方法,为评价其安全性提供依据。方法:采用超滤离心法分离参芪扶正注射液样品,采用MALDI-TOF-MS检测大分子物质,同时进行豚鼠全身主动过敏试验,根据大分子物质检测结果及过敏反应情况,分析两者之间的相关性。结果:参芪扶正注射液中间体存在分子量3800～4000 Da的大分子物质(植物蛋白与多糖),这些大分子物质会引起豚鼠过敏反应。经过生产过程的逐步除杂,大分子物质在参芪扶正注射液成品中已完全去除。结论:本研究建立了对参芪扶正注射液样品中大分子物质进行检测的方法,具有简便、实用等优点。

HPGPC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质

目的建立HPGPC-ELSD法检测注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质(杂质)的限量方法。方法采用ELSD为检测器,Ultrahydrogel 250色谱柱(7.8 mm×300 mm),以甲酸-水(1∶5 000)为流动相,建立大分子物质(杂质)的液相测定方法,并对10批注射用益气复脉(冻干)进行了糖苷类大分子物质的检测。结果 10批注射用益气复脉(冻干)中均无糖苷类大分子物质。结论此方法简便、快捷和灵敏,可用于注射用益气复脉(冻干)中糖苷类大分子物质的检查,具有一定的实用意义。

中药注射剂大分子物质是活性成分还是杂质?

中药注射剂的有效性得到了临床的广泛认可,但安全性依然是当下面临的主要问题,受到业界和公众的广泛关注,提高内在质量是目前紧迫的产业问题。根据中药注射剂的不良反应特点、现有质量标准和生产流程,本文从技术层面分析得出,大分子物质是导致安全性问题的主要物质基础。随后对大分子杂质的种类、危害、来源进行分析,并较系统地提出去除大分子物质的策略,希望为提高中药注射剂的安全性提供较系统的参考思路。

大鼠脑内大分子物质的引流通路及方法学研究

为探讨脑内大分子物质的引流通路,本研究微量注射示踪剂墨汁到大鼠右侧尾壳核,Ⅰ组动物使用传统的脑内注射方法,Ⅱ组动物采取改良方法防止示踪剂从进针处进入蛛网膜下腔,术后1、3、7、14、21 d处死动物,分别用肉眼、光镜及电镜观察墨汁在脑内、蛛网膜下腔、颈总动脉及颈部淋巴结的分布。结果显示:墨汁在两组动物脑实质内的分布趋势相同,即在白质内沿神经纤维弥漫性分布,7 d后在灰质内选择性地沿血管周围间隙分布,部分碳颗粒被管周细胞和巨噬细胞吞噬;Ⅱ组动物中观察到墨汁从大脑顶部进入蛛网膜下腔后沿其中的血管周围间隙分布并引流到脑的底部和嗅球及筛板区域,在耳蜗、前庭蜗神经和视神经等的脑神经鞘以及颈总动脉壁和颈部淋巴结有碳颗粒沉积;Ⅰ组动物没有这种分布。以上结果表明,大鼠脑实质内的大分子物质在白质和灰质中的引流方式不同;进入脑脊液的大分子物质可由颈部淋巴系统引流;墨汁不是很好的研究脑实质内大分子物质引流的示踪剂。

脑脊液中大分子物质经淋巴途径引流评估方法的建立

目的探讨大鼠脑脊液(CSF)中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法。方法采用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠颈部淋巴引流阻断(CLB)模型,将动物分为非CLB组和CLB组。将125I标记的人血清白蛋白(125I-HSA,CSF示踪剂)注入大鼠左侧脑室,在24h内连续取动脉血样,并检测血浆中CSF示踪剂125I-HSA的浓度。根据药代动力学一室模型的基本原理,绘制浓度-时间曲线,计算出125I-HSA从CSF转运至血浆的浓度-时间曲线下面积(AUC)、血浆中125I-HSA的最大浓度(Cmax)、转运速率常数(Ka)、浓度达峰时间(Tmax)等药代动力学参数,根据两组的差值推算出大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka和Tmax。结果大鼠CSF示踪剂125I-HSA经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka分别为51.97mg·L-1·h-1、2.91mg·L-1、0.64h-1,分别占经蛛网膜绒毛和淋巴引流两条途径清除的AUC、Cmax、Ka的71.53%、44.02%、58.18%。CLB组Tmax(8.36±0.82)h长于非CLB组(3.57±0.54)h。结论成功建立了大鼠CSF中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法,经淋巴途径的引流在大鼠CSF大分子物质清除中具有重要作用。

香荚兰脱分化过程中大分子物质含量的变化

就香荚兰组织培养过程中外植体脱分化的核酸、蛋白质及淀粉含量的动态变化作了比较分析 .研究发现 ,脱分化过程中DNA含量呈相对下降 ,RNA含量上升 ,总核酸含量呈上升趋势 ,蛋白质呈缓慢上升趋势 ;淀粉则呈现一个积累。

裂殖壶菌在不同氧供应条件下油脂及大分子物质迁移规律研究

为研究裂殖壶菌在不同供氧条件下胞内油脂、碳水化合物、蛋白质、多糖和寡糖的迁移规律,将传统方法与傅里叶红外光谱法相结合,研究发酵过程中各物质迁移规律。结果表明:傅里叶红外光谱法是一种可信且快速的检测手段;油脂积累过程中三酰甘油(TAG)、寡糖相对含量均随时间的延长而增加;碳水化合物呈先升高后降低趋势;多糖相对含量在低供氧条件下随时间的延长而增加,高供氧条件下与之相反。此外,高供氧条件下可积累富含95.74%中性脂的油脂;低供氧条件下细胞倾向于积累极性脂、蛋白质并快速富集寡糖成分以应对不良环境。

大分子物质对中药注射剂外观颜色的影响

目的:探究大分子物质对中药注射剂外观颜色的影响。方法:取清开灵、双黄连、丹参和灯盏细辛4种中药注射液,用3、10、30 k超滤管截留制备去大分子注射液和富含大分子注射液,用Tecan酶标仪扫描紫外-可见吸收曲线,分析曲线下面积的变化;用HPLC法检测并分析10 k去大分子液的指纹图谱变化,用冷冻干燥法检测固体物含量。然后用10 k分子筛过滤4种注射液,反复洗涤截留液获得大分子物质。最后用焦性没食子酸和鞣酸模拟中药注射剂变色过程。结果:4种注射液用不同超滤管超滤后,去大分子液的颜色明显变浅,吸收曲线下面积变小,且截留分子量越小,去大分子液的吸收曲线下面积也越小;富含大分子部分的颜色则明显变深,曲线下面积增大;10 k去大分子液的指纹图谱与原液相似,指纹图谱总峰面积变化较小,固体物含量波动在5%以内;焦性没食子酸和鞣酸溶液变色后去除大分子物质,颜色也明显变浅。结论:大分子物质是中药注射剂有色物质的重要来源,去除大分子物质可改善中药注射液外观质量。

山黧豆胚胎发育过程中ODAP和一些大分子物质含量的变化

应用微量分析方法检测了山黧豆胚胎发育过程中ODAP毒素含量和核酸、蛋白质、糖类等大分子物质的含量变化。结果表明:每粒种子的ODAP含量随着胚的发育而增加。每粒种子DNA量随着细胞的迅速分裂而增加,R、蛋白质、淀粉含量随着胚的发育而成倍地增加,当进入心形胚时这些物质的增加更为迅速。如以每克干重中的含量来表示,那么ODAP、DNA及可溶性糖含量则随胚的发育而下降,其它大分子物质含量在胚发育前期升高,进入心形胚时,这些物质达到最高峰;到鱼雷胚时,这些物质含量开始下降,直到胚基本分化完全时,降到最低点;只有酸性蛋白质含量一直保持增长。

红花注射液大分子物质定量检测研究

目的建立红花注射液中大分子物质的含量测定方法。方法采用高效凝胶渗透色谱法,以右旋糖酐D4为对照品,建立了红花注射液中大分子物质的检测方法,并对3批红花注射液样品进行检测。色谱柱为TSK-Gel G4000 PWXL凝胶柱(300 mm×7.8 mm),流动相为10 mmol/L醋酸铵溶液,柱温为40℃,流速为0.6 mL/min,蒸发光散射检测器(氮气流速2.5 L/min,漂移管温度100℃)。结果红花注射液中存在大分子物质,相对分子质量为15 517;对其含量测定发现,该品种大分子物质含量较低。结论该方法稳定、操作简单,可用于红花注射液质量标准提高研究。

辛硫磷对扁藻三种大分子物质合成动态的影响

本文报道有机磷农药——辛硫磷对扁藻的蛋白质与核酸合成动态的影响.结果表明,低浓度的辛硫磷(<0.4mg/L)对藻细胞的生长和分裂有促进作用,并能提高蛋白质和核酸的合成速度;而高浓度的辛硫磷(>0.6mg/L)在抑制藻细胞生长的同时,核酸与蛋白质的合成速度也相应地降低,这说明藻细胞的生长状况与其三种大分子物质——蛋白质、DNA和RNA的合成速度有关.