补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞模型大鼠海马组织Cdk5的调控

目的评价补阳还五汤精简方对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型大鼠海马组织周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,Cdk5)的调控。方法将♂SD大鼠随机分为假手术组、MCAO模型组、补阳还五汤干预组(灌胃3.15 g·kg^(-1))及补阳还五汤精简方干预组(灌胃2.41 g·kg^(-1)),每组按给药后1、3、7、14、28 d再各分5小组。采用免疫组化法、Western blot法和RT-PCR法考察不同时间点各组大鼠海马组织中Cdk5的表达。结果 MCAO模型大鼠海马组织中,脑缺血后1 d即出现Cdk5上调趋势,并随着脑缺血的加剧,Cdk5的表达继续上调,其中mRNA及蛋白水平在7~14 d达最大,28 d则出现下降趋势,与各时间点假手术组比较P<0.01,提示脑缺血损伤将激活Cdk5信号转导途径;补阳还五汤精简方干预后的3、7、14、28 d均能明显降低Cdk5的表达,与各时间点模型组比较P<0.05,且随着干预时间的延长,下调趋势越明显,干预28 d后,Cdk5的表达接近假手术组,提示补阳还五汤精简方可下调Cdk5的异常表达,与补阳还五汤原方比,两方对Cdk5的调控差异无统计学意义(P>0.05)。结论补阳还五汤精简方可能通过调控Cdk5的表达水平对脑缺血海马组织发挥保护作用。

大鼠永久性大脑中动脉阻塞模型的建立

目的建立稳定可靠的线栓法大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)永久性脑缺血模型。方法对Koizumi和ZeaLonga模型构建方法加以改进。40只雄性SD大鼠随机均分为实验组和假手术组,分别进行模型制作和模型缺血的评价,采用2,3,5-氯化三苯四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色来计算大鼠脑梗死体积。结果大鼠MCAO模型制作成功率为95%;神经功能缺失评分1～3级百分率为95%。结论实验所采用的改良术式构建大鼠MCAO模型具有稳定性好、可重复率高、操作简便和手术时间短等优点,为基于大鼠永久性脑缺血模型开展的下游相关实验提供了良好的研究平台。

线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型的体会

线栓法大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型被普遍认为是脑缺血标准动物模型。该模型在制备过程中,易受到多重因素的影响。文章从血管解剖位置、插线的制备、切口位置、插线深度及翼腭动脉结扎等角度,对模型塑造过程中发现的现象与问题进行论述。

线栓法大脑中动脉阻塞模型及神经保护因子研究进展

缺血性脑卒中是脑血管血栓栓塞或血栓形成引起脑血流减少脑组织缺血坏死的病理过程,目前研究脑卒中病理机制及药物研发最常用的动物模型为大脑中动脉阻塞模型。本文就线栓法大脑中动脉阻塞模型及基于脑缺血动物模型的神经保护因子作一综述。

基于大鼠大脑中动脉阻塞模型的DTI研究进展

大鼠脑卒中模型具有诸多优点,其中大脑中动脉阻塞(MCAO)模型以其手术简单、成功率高、不影响脑缺血后脑水肿和颅内压等病生理变化,已广泛应用于局灶性脑缺血的研究。一些基于MCAO模型的神经放射学技术,如扩散张量成像(DTI),能够在活体状态下,评价脑缺血后大脑功能和结构的时间与空间上的改变,这有助于揭示脑卒中后的病生理过程。传统DTI能够评价组织结构完整性和白质连接,而一些DTI新技术,如扩散波谱成像(DSI)、Q-ball成像和扩散峰度成像(DKI)更是提高了这项技术的应用能力。这些基于MCAO模型的MRI研究,可提供良好的手段去发现脑卒中后组织结构与功能长时间的改变,并以此为基础,研究脑缺血的转归和一些药物的疗效。就基于MCAO模型的DTI研究最新进展予以综述。

大鼠大脑中动脉阻塞模型中Zn^(2+)囊泡的释放

Zn^2＋是基因表达和很多酶活性所必须的微量元素，脑组织中含有丰富的锌（10μg/每克湿重组织），其中有10％存在于谷氨酸能神经元的突触囊泡中。虽然体外实验已经证实Zn^2＋的释放依赖于神经元的兴奋，但对脑缺血过程中Zn^2＋变化的研究不多，缺血过程中是否有Zn^2＋的释放尚不清楚。本实验用脑微量透析方法研究大鼠大脑中动脉闭塞脑缺血模型的Zn^2＋囊泡的释放情况。

大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究

目的通过对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型神经功能缺失评分的计算和脑梗死体积的测量,评价改良的大鼠MCAO再灌注模型,为实验研究提供可重复性好、稳定可靠的动物模型。方法20只SD大鼠随机分为A、B两组,A组用头端烧制成圆球的传统"圆头线栓",B组采用头端用万能胶包裹成梭形膨大的改良"梭头线栓"制作大鼠MCAO模型,阻断大脑中动脉血供3h后将"线栓"拔出,造成再灌注损伤。采用"盲法"分别于再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分;再灌注24h后处死大鼠,脑切片TTC染色,数码相机照相,采用图像分析系统测量脑梗死体积比;根据统计结果评价改良的MCAO再灌注模型,分析MCAO再灌注后神经功能缺失评分与脑梗死体积比之间的关系。结果B组大鼠脑梗死体积比大于A组(P<0.01);B组大鼠脑梗死体积比明显较A组稳定,变异系数(coefficient of variation,CV)分别为CVB=0.12,CVA=1.08);再灌注10min和再灌注24h对大鼠进行神经功能缺失评分,B组评分均高于A组(P<0.05);MCAO再灌注模型大鼠神经功能缺失评分与脑梗死体积比的大小成线性相关关系(r=0.873,P<0.01)。结论采用改良的"梭头线栓"制作MCAO再灌注模型,神经功能缺失评分和脑梗死体积比变异度小、稳定性高,是可靠的制模方法;神经功能缺失评分能反映脑梗死的严重程度,可用作评价药物疗效的指标。

脑络欣通对大脑中动脉阻塞再灌注模型大鼠神经干细胞增殖分化的影响

目的观察脑络欣通对大脑中动脉阻塞再灌注(middle cerebral artery occlusion-reperfusion,MCAO-R)模型大鼠神经干细胞增殖分化的影响。方法采用线栓法复制MCAO-R大鼠模型,将30只健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组和给药组。分别采用神经功能评分和TTC染色鉴定模型大鼠的神经功能缺损和脑缺血面积,采用免疫荧光染色法观察大鼠海马CA1、CA2、CA3、齿状回(dentate gyrus,DG)区巢蛋白(Nestin)和神经丝蛋白-H(hypophosphorylated neurofilament-H,NF-H)表达水平。结果给药组Nestin阳性表达主要发生在DG区,NF-H阳性表达主要发生在CA3区。脑络欣通促进神经干细胞增殖的作用在DG、CA1、CA2、CA3区均十分明显,以DG区尤为突出,促进神经干细胞分化的作用主要表现在CA3、DG、CA2、CA1区。与模型组比较,给药组大鼠海马各区的Nestin、NF-H阳性细胞均明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论脑络欣通具有促进海马区神经干细胞增殖并分化为神经细胞的作用。

蒙成药额日敦-乌日勒对大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO/R)大鼠血清及脑组织IL-6、IL-1β的影响

目的:探讨额日敦-乌日勒对大脑中动脉阻塞再灌注模型(MCAO/R)大鼠血清及脑内IL-6、IL-1β的影响。方法:选取144只wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组、额日敦-乌日勒低、中、高剂量组共6组。除假手术组外其他组采用改良Zea-longa法,建立MCAO/R模型。手术造模成功后24h开始灌胃给药,治疗组(额日敦-乌日勒125mg/kg、额日敦-乌日勒250mg/kg、额日敦-乌日勒500mg/kg),对照组(血塞通236.25mg/kg)。假手术组、模型组wistar大鼠每日一次灌胃纯净水。分别再灌注1、3、7天给药后行神经功能评分、心脏取血、断头取脑组织。采用ELISA法检测血清、脑组织IL-6、IL-1β的含量进行统计学分析。结果:wistar大鼠再灌注1、3、7天模型组与假手术组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量均明显升高,具有统计学意义(P<0.01)。再灌注1天额日敦-乌日勒各组和血塞通组与模型组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。再灌注3、7天额日敦-乌日勒各组和血塞通组与模型组相比血清、脑组织IL-6、IL-1β含量明显降低,具有统计学意义(P<0.01)。再灌注3、7天额日敦-乌日勒高剂量组与血塞通组相比明显降低,具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:额日敦-乌日勒治疗缺血型脑卒中有一定的疗效,其作用途径可能是通过抑制IL-6、IL-1β的表达而起到神经功能恢复的作用。

改良法大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型的制备与效果评价

目的通过改进大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)/再灌注模型的制备方法,解决模型稳定及延长存活时间问题。方法改良方法:1将10%的水合氯醛浓度降至3.6%;2将胸骨舌骨肌—胸锁乳突肌间隙入路改为胸骨舌骨肌手术入路;3将颈外动脉(ECA)结扎或血管夹闭法改为颈内动脉(ICA)盲插结合夹镊法;4将120 min缺血再灌注并缝合皮肤时间减少至80 min。改良前、后行对照研究。结果建模后改良组中13.6%水合氯醛组比10%组安全范围宽,追加麻醉后死亡率低;2胸骨舌骨肌手术入路组较胸骨舌骨肌—胸锁乳突肌间隙入路组手术视野宽,血管暴露更好,出血量少,手术时间短;3调整角度后,颈内动脉(ICA)盲插结合夹镊法操作简单,较颈外动脉(ECA)结扎或血管夹闭法创伤轻,操作简便省时,且较单一盲插法成功率高;480 min行缺血再灌注(拔除线栓)比120 min者因麻醉苏醒挣扎而产生的二次损伤少。结论改良模型稳定,存活时间延长,能够保证神经干细胞移植方面的研究条件。

激光多普勒血流仪评价活体大鼠大脑中动脉栓塞模型成功的可行性分析

目的:探讨激光多普勒血流仪(LDF)评价活体大鼠脑缺血/再灌注损伤模型制作成功的可行性和可靠性分析。方法:10只体重280-310 g的雄性SD大鼠用传统线栓法制作单侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,神经功能评分,LDF监测插栓前后大鼠脑血流动态变化。于缺血2 h和再灌注24 h断头取脑,TTC染色检测脑片梗死灶体积。结果:基线血流均值为(224.99±75.00)PU,局灶神经功能障碍评分0分。插栓成功MCAO模型,缺血2 h血流均值为(67.23±6.90)PU,与基线血流差值为157.76PU,降幅约为70%(P<0.01),差异显著。拔拴后血流均值为(216.01±7.30)PU,与缺血2 h血流差值为148.78PU(P<0.01),差异显著;与基线血流差值为-8.98PU(P>0.05),无显著差异。再灌注24 h后,局灶神经功能障碍评分10.35分,脑片TTC染色显示梗死及水肿灶。插栓不成功模型LDF监测显示仍有血流通过,降幅少于基线的50%,再灌注24 h后,局灶神经功能障碍评分0分,TTC染色未见梗死灶。结论:LDF对大鼠脑血流的监测是除神经功能评分以外另一种判断活体大鼠MCAO模型制作成功的可靠而实用的方法。

中风瘀热方对缺血性脑卒中模型大鼠的干预作用及机制

目的研究中风瘀热方对缺血性脑卒中模型大鼠的干预作用及机制。方法将85只大鼠随机分为假手术组(生理盐水,n=15)、模型对照组(生理盐水,n=18)、尼莫地平片组(阳性对照,10.8 mg/kg,n=18)和中风瘀热方高剂量组(20.52 g/kg,n=17)、中风瘀热方低剂量组(5.13 g/kg,n=17)。预防性连续给药7 d(每天1次)后,除假手术组外,其余各组均采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。造模成功后,各组大鼠继续给药3 d。实验期间,观察大鼠一般情况,进行神经功能评分;末次给药后,计算脏器指数,观察大鼠脑梗死面积及脑组织病理形态学变化,检测大鼠脑组织及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平及脑组织中胱天蛋白酶3(caspase-3)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白的平均光密度值。结果造模3 d后,与假手术组比较,模型对照组大鼠神经功能评分,脑指数、脾指数,脑梗死面积占比,脑组织和血清中TNF-α、IL-6水平,脑组织中caspase-3蛋白平均光密度值均显著升高(P<0.05或P<0.01);脑组织出现核固缩、弥散性水肿等病变。与模型对照组比较,各给药组上述指标均有不同程度的改善,其中中风瘀热方高剂量组大鼠脑指数、脾指数,脑梗死面积占比,脑组织和血清中TNF-α水平,脑组织中caspase-3蛋白和p-AKT蛋白的平均光密度值均显著回调(P<0.05或P<0.01)。结论中风瘀热方对MCAO模型大鼠有一定的防治作用;其机制可能是通过减少炎症因子TNF-α、IL-6的分泌,下调缺血侧脑组织中caspase-3蛋白表达,上调缺血侧脑组织中p-AKT蛋白表达,从而达到保护神经元的作用。

电针曲池、足三里穴对缺血性卒中大鼠脑功能的影响

目的:建立缺血性卒中(MCAO)大鼠模型,观察电针曲池、足三里穴对MCAO模型大鼠脑功能的影响。方法:将24只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)和电针组(EA组),记录体重、神经缺损评分(NDS)、脑血流及造模前(B)、造模后(1d)、造模后(10d)的静息态功能磁共振(rs-fMRI),对比观察电针干预对脑缺血大鼠脑功能康复的影响。结果:NDS评分:M组、EA组2h、1d、3d、5d、7d均显著高于S组(P<0.05);M组1d、3d、5d、7d均显著高于EA组(P<0.05)。体重:S组、EA组3d、5d、7d与B、1d相比显著上升(P<0.05);M组7d与1d相比显著上升(P<0.05);M组与S组相比1d时显著下降(P<0.05);M组与S组、EA组相比5d、7d时均显著下降(P<0.05)。血流量、红细胞浓度:S组、EA组2h与B相比显著下降(P<0.05);S组1d与2h相比显著上升(P<0.05);EA组3d与2h相比显著上升(P<0.05);M组1d、3d、5d、7d时与其S组、EA组相比均显著下降(P<0.05)。脑成像中,10d时EA组在健侧小脑、脑干的基于体素的形态学分析(voxel-based morphometry,VBM)显著高于S组(P<0.05)。结论:电针早期干预对脑缺血大鼠的脑功能有影响,可能与建立有效的侧支循环及增强神经元活动有关,从而影响运动相关的脑区,具有促进运动功能康复的潜力。

急性脑梗死发生过程中lncRNA TALNEC2的作用与机制

目的分析长链非编码RNA TALNEC2在大脑中动脉阻塞(MCAO)模型和缺氧-葡萄糖剥夺(OGD)模型中的表达情况,并探讨其在急性脑梗死发生过程中的调节机制。方法建立MCAO小鼠模型和OGD细胞模型。采用qRT-PCR检测TALNEC2、miR-19a-3p和c-Jun氨基末端激酶(JNK)的表达。通过神经功能评分和TTC染色观察动物体内神经损伤情况。用Western blot、流式细胞仪和ELISA试验检测细胞凋亡和炎症损伤。通过荧光素酶活性分析miR-19a-3p与TALNEC2或JNK的相互作用。结果在MCAO模型和OGD模型中观察到TALNEC2上调。TALNEC2基因敲低可减轻小鼠MCAO模型的脑梗死、神经损伤、细胞凋亡和炎症损伤。荧光素酶活性分析显示miR-19a-3p与TALNEC2结合。miR-19a-3p过表达抑制了OGD处理的脑微血管内皮细胞(BMEC)的凋亡和炎症反应,TALNEC2的加入减弱了其抑制作用。JNK是miR-19a-3p的靶点,其上调减弱了miR-19a-3p对OGD处理的BMEC细胞的保护作用。此外,TALNEC2通过竞争性地吸附miR-19a-3p促进JNK的表达。结论TALNEC2的敲低通过调节miR-19a-3p/JNK减轻MCAO或OGD诱导的急性脑缺血损伤,为急性脑梗死的治疗提供了一种新的潜在策略。

经颅交流电刺激对缺血性脑卒中大鼠rs-fMRI的影响

目的:建立缺血性脑卒中大鼠右侧大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,观察经颅交流电刺激(transcranial alternating current stimulation,tACS)干预对缺血性脑卒中大鼠行为学及静息态功能性磁共振成像(resting-state functional magnetic resonance imaging,rs-fMRI)的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)和tACS组(T组),记录体重,神经缺损评分(neurological deficit scores,NDS)及造模前(B)、造模后1天(D1)、造模后10天(D10)的rs-fMRI,对比观察tACS干预对MCAO模型大鼠rs-fMRI的影响。结果:NDS评分:M组、T组2h、D1、D3、D5、D7与S组相比显著升高(P<0.05);T组D3、D5、D7与M组相比显著降低(P<0.05)。体重:M组、T组D1与其他各时间相比显著下降;S组D5、D7与其他各时间相比显著上升;S组D3与B、D1相比显著上升(P<0.05);而M组在D1、D3、D5、D7与S组相比均显著下降(P<0.05)。脑成像:D10时,T组在健侧前额叶皮质、患侧前额叶皮质、健侧前扣带皮质的脑区局部一致性(regional homogeneity,ReHo)显著高于S组(P<0.05);T组D10在患侧前额叶皮质、患侧海马的ReHo显著高于D1(P<0.05)。D1时,T组在健侧下丘脑、患侧脑脚间核、健侧嗅球的基于体素的形态学分析(voxel-based morphometry,VBM)显著高于S组(P<0.05);T组D10在患侧海马、上丘脑、纹状体的VBM显著低于D1(P<0.05)。此外,T组D10时灰质体积显著大于S组(P<0.05)。D1时,T组在嗅球的双侧血管小球层、纹状体的低频振荡振幅(amplitude of low-frequency fluctuation,ALFF)显著高于S组(P<0.05);D10时,T组在双侧小脑、纹状体、前额叶皮质、嗅球的ALFF显著高于S组(P<0.05)。结论:tACS早期干预对MCAO大鼠的脑功能有影响,可能与其增强神经元活动及增大灰质体积有关。除了对学习记忆相关脑区,tACS可能还对运动相关脑区有影响从而促进运动功能康复。

大鼠脑缺血模型致不同类型行为学特点及其与梗死体积关系的研究

目的分析线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)脑缺血模型不同类型的行为学特点,以及行为学表现与脑梗死体积之间的关系。方法成年雄性SD大鼠101只,线栓法制作MCAO脑缺血模型,栓塞100 min后再灌注,术后24 h进行磁共振成像(MR)扫描确定梗死部位及梗死灶体积。根据脑梗死部位不同将大鼠分为:皮质梗死组(CIG,n=51)、皮质下梗死组(SIG,n=24)和无梗死组(NIG,n=26)。采用前肢使用不对称测试、前肢放置测试和神经功能缺损程度(NSS)评分等多种行为学评价方法,评价各组大鼠MCAO术后第2天的神经功能缺失症状。并分析不同行为学特点与梗死体积之间的关系。结果在前肢使用不对称测试中,CIG组、SIG组分别与NIG组有统计学差异(q=3.72、3.28,P<0.05),而CIG组、SIG组之间无统计学意义(q=0.44,P>0.05);在肢体放置测试与NSS评分中,CIG组与SIG组、NIG组之间均有显著的统计学差异(q=10.28、12.02;11.48、11.98,P<0.01),而SIG组与NIG组之间均无统计学差异(q=1.74、0.50,P>0.05)。CIG组、SIG组大鼠的脑梗死体积大小与前肢使用不对称、肢体放置、NSS这3种行为学表现之间均无相关性(CIG组:r=-0.087、0.243、-0.226;SIG组:r=0.279、0.010、0.110,P>0.05)。结论制作大鼠MCAO模型可以出现不同的梗死类型,各种类型的行为学表现特点也不完全一样,出现这种差异可能与梗死灶体积的大小无关,而与梗死类型有关。

额日顿乌日勒对MCAO/R大鼠大脑皮质区BDNF及TrkBmRNA表达水平的影响

目的:通过观察额日顿乌日勒对大鼠脑缺血再灌注损伤后BDNF及其受体TrkBmRNA表达水平的影响,探讨治疗缺血性脑卒中的可能机制。方法:选取40只体重为180~240 g的健康雄性wistar大鼠。随机分为假手术组、模型组、治疗组(额日顿乌日勒组)、对照组(尼莫地平组)。每组10只wistar大鼠,除假手术组外其他组采用改良Zea-longa法,建立MCAO/R模型。手术造模成功后24 h开始灌胃给药,治疗组给予额日敦乌日勒500 mg/kg,对照组给予尼莫地平10 mg/kg。假手术组、模型组wistar夫鼠每31次纯净水灌胃。分别再灌注7 d后行神经功能评分、断头取脑组织。采用Real-time PCR法检测BDNF及TrkB mRNA表达的相对含量。结果:分别再灌注7 d后,与模型组相比,治疗组和对照组显著提高大鼠神经行为功能(P<0.01,P<0.05)。与假手术组相比,模型组、治疗组和对照组BDNF及TrkBmRNA表达均上调;治疗组与对照组相比BDNF及TrkBmRNA表达差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:额日顿乌日勒能显著提高大脑中动脉阻塞再灌注局灶性脑缺血损伤模型大鼠BDNF及其受体TrkBmRNA的表达,从而达到脑缺血损伤修复和保护神经的目的。

藏药诃子提取物对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及其机制研究

目的:探讨藏药诃子提取物对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及其机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和诃子提取物低、中、高剂量组(20、50、100 mg/kg),每组8只。除假手术组外其余各组大鼠均采用改良Longa线栓法复制大脑中动脉阻塞再灌注模型。造模成功2 h后,各给药组大鼠均灌胃相应药物,假手术组和模型组大鼠均灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续7 d。采用流式细胞仪测定各组大鼠外周血内皮祖细胞(EPCs)水平;采用改良Garcia法进行神经功能学评分;采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定各组大鼠脑梗死体积百分比;采用苏木精-伊红染色法观察大鼠脑组织病理学变化;采用Weidner法测定大鼠脑组织梗死区域微血管密度(MVD);采用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织梗死区域血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)、一氧化氮(NO)水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠外周血EPCs水平和神经功能学评分均显著下降(P<0.05或P<0.01);脑组织中可见明显的梗死区域,细胞排列紊乱,部分细胞核固缩、溶解,胞体缩小;脑梗死体积百分比显著提高(P<0.01);脑组织梗死区域MVD显著下降,VEGF、VEGFR2、NO水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,诃子提取物中、高剂量组大鼠外周血EPCs水平和神经功能学评分均显著升高(P<0.05或P<0.01);脑组织梗死区域明显缩小,坏死细胞明显减少;脑梗死体积百分比显著下降(P<0.05);脑组织梗死区域MVD、VEGF、VEGFR2、NO水平均显著升高(P<0.05)。结论:诃子提取物对模型大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,可促进其神经功能恢复和脑微血管形成,并可缩小其脑梗死体积;其机制可能与上调VEGF、VEGFR2、NO的表达有关。

脑缺血边缘系统细胞凋亡及机制研究

目的 :研究急性脑缺血边缘系统bcl- 2家族及白介素 - 1β转化酶 (ICE)基因的同期转录变化特征及其与细胞凋亡的关系 ,并探讨牛磺酸对其影响和可能机制。方法 :制做MCAO模型 ,在立体定向仪引导下行侧脑室给药 ,监测空白对照组、生理盐水干预组和牛磺酸干预组的脑梗塞容积、颞皮质、海马和下丘脑的凋亡细胞数、bcl- 2基因阳性转录细胞数和ICE基因阳性转录细胞数的动态变化。结果 :正常脑组织颞皮质、海马和下丘脑 3部位的bcl- 2基因均有密集转录。空白对照组和生理盐水干预组各部位于再灌注 2 4h ,bcl- 2基因转录开始下降 ,急剧下降期位于MCAO后 2 4h～ 4 8h。牛磺酸干预组于再灌注 2 4h开始下降 ,并于以后各时相继续缓慢下降而始终未达低谷。牛磺酸干预组各时相的bcl- 2基因阳性转录细胞数显著高于其它两组 (P <0 .0 5 )。ICE基因的同期转录水平几乎与bcl- 2基因转录水平呈反向变化。结论 :脑缺血及再灌注时bcl- 2基因转录受抑制 ,而白介素 - 1β转化酶基因转录上调 ,牛磺酸有显著减轻这些基因转录、细胞凋亡和缩小脑梗塞容积的作用。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后p-JNK、Bcl-2的表达及米诺环素的保护作用

目的研究米诺环素对局灶性脑缺血再灌注后脑组织中c-Jun氨基末端激酶p-JNK,Bcl-2表达的影响,探讨米诺环素对缺血再灌注后神经元的作用及可能机制。方法参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO),72只雄性Wistar大鼠被随机分成假手术组、缺血再灌组(IR组)和MC干预组。每组大鼠再随机分成4组:分别在再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h处死。HE染色观察脑组织形态病理学变化,免疫组化法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间p-JNK、Bcl-2蛋白表达的水平。结果①HE染色发现米诺环素干预组在再灌注各个时间点的梗死灶与缺血组比较均减小,呈点状分布并且神经元损伤也明显减轻。②缺血再灌注时缺血侧皮层可见p-JNK阳性表达,于缺血再灌注后6 h开始出现并随着时间的延长p-JNK表达逐渐升高,持续增高至再灌注48 h(P<0.01);MC干预组的p-JNK阳性表达在各时间点均明显减(P<0.01)。③与假手术组比较Bcl-2表达在缺血再灌注组明显升高,并随再灌注时间不同,其阳性表达率亦不同,于缺血1 h再灌注12 h时阳性表达达高峰(P<0.01),随灌注时间延长表达逐渐减少;MC干预组Bcl-2阳性表达在各时间点明显增加(P<0.01)。结论p-JNK和Bcl-2参与大鼠脑缺血再灌注时缺血性细胞损伤(包括细胞凋亡)的发生;米诺环素可能通过抑制p-JNK,上调Bcl-2的表达,减轻缺血再灌注对大鼠大脑皮层神经细胞的损伤。