益肾方对大鼠肾小管上皮细胞氧化应激的保护作用及其机制研究

目的:探究益肾方对NRK-52E细胞氧化损伤的保护作用。方法:建立H_2O_2诱导NRK-52E氧化损伤模型,分为正常对照组,H_2O_2模型组,益肾方组。流式细胞术测定细胞凋亡率,运用Western-blot技术检测Caspase-3和BCL-2的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,H_2O_2造模组的细胞凋亡率明显增高(P <0. 01);与H_2O_2模型组比较,益肾方组在益肾方浓度100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml时,细胞的凋亡率出现明显的下降(P <0. 05)。与H_2O_2模型组相比,益肾方组在益肾方浓度100μg/ml、200μg/ml时,Caspase-3的蛋白表达明显降低,BCL-2的蛋白表达增加(P <0. 05)。结论:益肾方对NRK-52E细胞氧化损伤的保护机制,可能与其降低细胞凋亡,同时下调Caspase-3和上调BCL-2的蛋白表达有关。

1α,25-二羟基维生素D3对高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞CTGF表达的影响及其机制

目的探讨1α,25-二羟基维生素D3对高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响及其机制。方法将大鼠肾小管上皮细胞NRK52E传代培养。将传代培养后的细胞按是否加入干预剂分为3组:正常对照(A)组(D-葡萄糖6μmol·L^(-1))、高糖(B)组(D-葡萄糖30μmol·L^(-1))和1α,25-二羟基维生素D3干预(C)组(1α,25-二羟基维生素D3 5nmol·L^(-1),预处理1h,再给予D-葡萄糖30μmol·L^(-1))。3组干预后再进行培养。将培养后的3组细胞按培养时间的不同分为3个亚组:Aa 12、24、48h3组,Bb 12、24、48h3组和Cc 12、24、48h3组。采用Real-time PCR检测各组CTGF mRNA的表达水平,采用Western blot检测各组CTGF蛋白、β-catenin蛋白的表达水平。结果与Aa 24h组比较,Bb 24h组CTGF mRNA、CTGF蛋白、β-catenin蛋白表达水平均升高(均P<0.01);与Bb 24h组比较,Cc 24h组CTGF mRNA、CTGF蛋白、β-catenin蛋白表达水平均降低(均P<0.01)。结论在高糖体外培养的大鼠肾小管上皮细胞中1α,25-二羟维生素D3能够显著降低高糖刺激的CTGF表达水平,其机制可能是阻断Wnt/β-catenin信号通路来实现的。

草酸钙晶体对大鼠肾小管上皮细胞骨桥蛋白表达的影响

目的探讨一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)晶体对大鼠肾小管上皮细胞中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达的影响。方法选用SD大鼠的肾皮质原代培养出肾小管上皮细胞并制成爬片,将爬片的肾小管上皮细胞随机分为A、B、C、D、E5组。A组不加COM(11例);B组1 mmol/L浓度COM(17例);C组3 mmol/L浓度COM(18例);D组5 mmol/L浓度COM(18例);E组10 mmol/L浓度COM(17例)。采用免疫组织化学法(SABC)检测各组肾小管上皮细胞中OPN的表达,并进行阳性细胞计数和各组间比较。结果 OPN的表达主要定位于细胞质,呈棕褐色。各组OPN阳性表达率:A组54.5%;B组64.7%;C组77.8%;D组88.9%;E组76.5%。随着COM浓度增加,OPN表达逐渐增强,到5 mmol/L浓度COM时OPN表达最强(P<0.01),而10 mmol/L浓度COM时OPN表达反而下降,接近3 mmol/L浓度COM水平(P>0.05)。结论大鼠肾小管上皮细胞受COM刺激后OPN表达增强,但高浓度COM使OPN表达减弱,提示高浓度COM通过损伤肾小管上皮细胞使OPN表达下降,进而形成结石。

Omi/HtrA2短发夹RNA在大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用及机制

目的探讨Omi/HtrA2短发夹RNA(shRNA)对缺氧/复氧诱导大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的作用及机制。方法细胞分为5组:正常组(常规培养),模型组(缺氧/复氧组)、HK组(转染重组质粒Pgenesil-1/HK)、shRNA1组(转染Pgenesil-1/Omi/HtrA2shRNA1)、shRNA2组(转染Pgenesil-1/Omi/HtrA2shRNA2)。用荧光显微镜观察荧光蛋白的表达,Westernblot检测各组Omi/HtrA2、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3/-9蛋白表达,比色法测定caspase-3/-9的活性。结果在荧光显微镜下,转染组细胞均可见绿色荧光,未转染组未见绿色荧光。与模型组相比,shRNA1组和shRNA2组Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达明显减少(P<0.01)。模型组和HK组、shRNA1组和shRNA2组之间Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达差异无统计学意义。与正常组相比,模型组Omi/HtrA2、caspase-3/-9蛋白表达明显增强(P<0.01)。结论Pgenesil-1/Omi/HtrA2shRNA1和Pgenesil-1/Omi/HtrA2shRNA2能明显减少缺氧/复氧诱导的NRK-52E中Omi/HtrA2蛋白的表达。通过抑制procaspase-9的活化,进而减少了下游procaspase-3的激活,最终减轻了缺氧/复氧诱导的NRK-52E的凋亡程度。

环维黄杨星D对大鼠肾小管上皮细胞增殖的影响

目的:研究环维黄杨星D对大鼠肾小管上皮细胞的毒性影响。方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞,利用噻唑蓝法(MTT)评价环维黄杨星D(CVB-D)对大鼠肾小管上皮细胞增长抑制的IC50,观察不同浓度药物对细胞形态和细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响。结果:CVB-D作用大鼠肾小管上皮细胞48小时后,可明显地抑制细胞增值,其IC50是111.47μmol/L,并且能够导致细胞发生皱缩和空泡化,48小时后细胞上清液中LDH漏出率明显增加。结论:CVB-D在体外对于大鼠肾小管上皮细胞的增殖具有明显的抑制作用。

人脐带间质干细胞来源的外切体对大鼠肾小管上皮细胞缺氧损伤的干预作用

目的:观察体外缺氧损伤的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡情况以及分离纯化人脐带间质干细胞来源的外切体(hucMSCs-exosomes)对其干预作用。方法:将体外培养的NRK-52E细胞随机分为对照组、缺氧损伤模型组和hucMSCs-exosomes(0.5,1.0 mg/ml)预处理组。随后进行细胞计数,蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白(Bcl-2,bax)的表达变化,流式细胞仪检测细胞周期以及凋亡率的变化。结果:与对照组相比,模型组细胞凋亡相关指标均明显升高,细胞计数下降(P<0.01),Bcl-2/bax表达下调(P<0.01),细胞周期S期阻滞以及凋亡细胞比例明显增多。而hucMSCs-exosomes预处理组可明显改善缺氧损伤时的细胞活力,上调Bcl-2/bax的表达,改善细胞周期和凋亡细胞的比例(P均<0.05)。结论:NRK-52E在缺氧损伤时有明显的细胞凋亡,而hucMSCs-exosomes预处理可能通过抗凋亡途径减轻缺氧时细胞的损伤。本实验可为进一步研究hucMSCs-exosomes在组织损伤修复中的生物学功能和相关机制提供实验基础。

脂联素对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨脂联素（adiponectin，ADPN）对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）血管内皮生长因子（vascular endothelialgrowthfactor，VEGF）表达的影响。方法用含不同浓度葡萄糖的DMEM培养基体外培养NRK-52E细胞，随机分6组（每组5个样本，重复5次）：A组，含5．5mmol／L葡萄糖培养基对照组；B组，含5．5mmol／L葡萄糖＋甘露醇19．5mmol／L培养基组；C组，含25mmol／L葡萄糖培养基组；D组，含25mmol／L葡萄糖培养基＋脂联素1mg／L组：E组，含25mmol／L葡萄糖培养基＋脂联素2．5mg／L组；F组，含25mmol／L葡萄糖培养基＋脂联素5mc／L组，培养24h。以逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测VEGF的表达，免疫荧光检测不同浓度干预组VEGF蛋白的表达影响。结果A组细胞VEGFmRNA表达量为（0．367±0．028）；B组为（0．346±0．045），与A组比较无统计学差异（P〉0．05）；C组为（0．692±0．053），显著高于A组（P〈0．01）；D组为（0．562±0．049），低于C组（P〈0．05）。E组为（0．381±0．035），与A组相近，但无统计学差异（P〉0．05）；F组为（0．295±0．031），低于A组（P〈0．01）。不同浓度脂联素各组间比较，有统计学差异（P〈0．05）。免疫荧光检测VEGF表达情况；B组与A组无差异；C组显著高于A组（P〈0．01）；D组低于C组（P〈0．05）。E组与A组相近，但无统计学差异（P〉0．05）；F组低于A组（P〈0．05）。不同浓度脂联素各组间比较有统计学差异（P〈0．05）。结论ADPN能通过减少肾小管上皮细胞VEGF的表达对肾小管间质起保护作用。

糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶的表达及氯沙坦钾的干预作用

糖尿病肾病（DN）是糖尿病的常见并发症和终末期肾病（ESRD）的首要原因。大约有1/3的糖尿病患者发展为DN。DN是肾小球和。肾小管发生病理改变的一种复杂疾病。整合素连接激酶（ILK）是一种丝氨酸，苏氨酸蛋白激酶，在基质沉积、细胞黏附、细胞凋亡、细胞迁移、细胞增生以及肿瘤形成发挥重要作用，

化合物21(C21)抑制晚期糖基化终产物刺激引起的大鼠肾小管上皮细胞的细胞因子分泌

目的研究2型血管紧张素Ⅱ受体(AT2R)激动剂化合物21(C21)对晚期糖基化终产物(AGE)刺激的NRK-52E大鼠近端肾小管上皮细胞分泌的细胞因子的影响及潜在机制。方法培养NRK-52E细胞,分为正常对照组和(25、50、100、200)mg/L AGE-牛血清白蛋白(BSA)刺激组。培养48 h后收集细胞,采用实时定量PCR检测NRK-52E细胞白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达。间接ELISA检测细胞培养上清液中的IL-6、TNF-α蛋白水平。然后先用25 mg/L AGE-BSA刺激NRK-52E细胞48 h后分别给予(0.01、0.05、0.1)mmol/L C21分别处理24 h,采用实时定量PCR检测细胞蛋白激酶C(PKC)、核因子κB p65(NF-κB p65)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达,Western blot法检测细胞中PKC、NF-κB p65、TGF-β1蛋白表达。结果不同剂量的AGE-BSA刺激NRK-52E细胞均可明显增加IL-6、TNF-α的mRNA表达,而以25 mg/L AGE-BSA刺激NRK-52E细胞时,其IL-6、TNF-α的蛋白分泌增加更明显。以25 mg/L AGE-BSA刺激NRK-52E细胞48 h后,(0.01、0.05、0.1)mmol/L C21分别处理24 h,均可显著抑制AGE-BSA所诱导的NRK-52E细胞PKC、NF-κB p65及TGF-β1 mRNA和蛋白的表达。结论AGE-BSA促进NRK-52E细胞IL-6、TNF-α、PKC、NF-κB p65及TGF-β1表达,C21则抑制其作用。

中介素对大鼠肾小管上皮细胞缺氧／复氧模型cAMP／PKA途径的影响

中介素（Intermdin，IMD）是降钙素基因相关肽（CGRP）超家族新成员，在肾脏足高表达，可增加肾血流和尿量，降低肾血管阻力。能通过环磷酸腺苷（cAMP）／蛋白激酶A（PKA）途径减少活性氧族（reactiveoxygen species，ROS）的含量减轻心脏缺血再灌注（Ischemiareperfusion，I／R）损伤。

乙苯对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52e氧化损伤及凋亡的影响

目的探讨乙苯对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52e的氧化损伤及凋亡的影响。方法体外培养的NRK-52e细胞暴露于30、60、90、120μmol／L的乙苯24h后，观察NRK-52e细胞形态和存活情况，用M1Tr法测定NRK-52e细胞的存活率，检测NRK-52e细胞内丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）的含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的酶活力变化，并应用PI荧光活性染色检测乙苯致NRK-52e细胞的凋亡率。结果30μmol／L染毒剂量组与对照组相比，其形态学改变无明显差异，60μmol／L及90μmol／L染毒剂量组细胞轮廓逐渐清晰，细胞折光度增强，细胞逐渐变小变圆，皱缩成球形，部分细胞破裂；120Ixmol／L染毒剂量组细胞大量死亡，悬浮细胞明显增多。与对照组相比，60μmol／L、90μmol／L及120μmol／L剂量组细胞存活率及SOD活力、GSH含量、CAT活力均显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；90μmol／L及120μmol／L剂量组细胞内MDA含量及GSH-Px活力均显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论乙苯可能通过降低NRK-52e细胞内CAT、GSH-Px和SOD的酶活力及GSH含量引起细胞的氧化损伤。

蛋白亲环素D特异性小干扰RNA对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用

目的:探讨蛋白亲环素D(CypD)特异性小干扰RNA对大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:构建CypD特异性小干扰RNA表达质粒RNAi-Ready pSIREN Ppif,用脂质体转染肾小管上皮细胞(NRK),然后采用逆转录聚合酶链反应检测转染后CypD mRNA的表达,采用MTT法检测转染后NRK细胞的增值情况,流式细胞术检测转染后对NRK细胞调亡的影响。结果:转染RNAi-Ready pSIREN-Ppif载体后,NRK细胞增值加速,凋亡被抑制,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论:CypD特异性siRNA表达载体可以下调NRK细胞CypD的表达,促进细胞增值,抑制细胞凋亡。

纳米硫化镉对大鼠肾小管上皮细胞膜的影响

目的研究纳米硫化镉(nCds)对大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞膜的损伤作用。方法将NRK-52E细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、5、10、15、20、30μg/ml nCds的培养基中染毒24 h。检测细胞的增殖活性;采用双嵌入剂乙锭均二聚物(EthD-1)和钙黄绿素(Calcein AM)对细胞进行双染色后,荧光显微镜观察整体细胞膜损伤情况;采用双激光共聚焦显微镜荧光染色观察单个细胞膜损伤情况;透射电子显微镜定位细胞内的nCds。结果与对照组比较,随着nCds染毒浓度的升高,NRK-52E细胞的存活率呈下降趋势,10~30μg/ml nCds染毒组细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。EthD-1/Calcein AM双染色结果显示染毒剂量的升高导致细胞膜破损增加,10μg/ml nCds使细胞膜破损的细胞数明显增多。激光共聚焦结果显示随着nCds的剂量增加,细胞膜的荧光强度降低,细胞膜受损。透射电子显微镜观察到,对照组细胞结构完整,细胞膜平滑;nCds染毒组观察到nCds颗粒在细胞膜外聚集,细胞膜有破损情况出现,nCds颗粒进入到细胞质内。结论 nCds可通过破坏细胞膜的方式进入到细胞质中,从而抑制NRK-52E细胞的生长。

白蛋白对肾小管上皮细胞增殖的影响

目的探讨蛋白尿检在不同时间点对大鼠近端肾小管上皮细胞增值的影响。方法观察组采用体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞(Rat proximal renal tubular epithelial cells,NRK-52E),取生长状态良好,待其接近融合时模拟体内大量蛋白尿环境,给予不同浓度(10、20、30 mg.ml-1)去脂牛血清白蛋白(fat free bovine serum albumin,BSA)刺激,共同孵育6、12、18、24 h;对照组给予同体积无血清培养基共同培养。采用MTT试验检测BSA对体外培养NRK-52E细胞毒作用。结果与对照组比较,白蛋白浓度为10 mg.ml-1时对NRK-52E细胞分别作用6、12、18和24 h后,对细胞增殖程度影响没有差异(P>0.05)。当白蛋白浓度为20 mg.ml-1时,对NRK-52E细胞作用6 h后,细胞增殖程度与对照组比较没有差异(P>0.05),但随着作用时间的延长,细胞增殖低于对照组(P<0.05)。当白蛋白浓度为30 mg.ml-1时,随着作用时间的延长细胞增殖几乎停滞,与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论白蛋白以时间和剂量依赖方式抑制NRK-52E细胞增殖,并可促进肾小管上皮细胞凋亡。

与肾小管上皮转分化相关的miRNA的初步筛选

目的观察miRNA在大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)发生上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)过程中的变化,筛选与肾小管上皮细胞转分化相关的miRNA。方法体外培养NRK-52E,用5 ng/ml转化生长因子-13 1(TGF-13 1)分别作用0、3、6、12、24、48 h,以0 h为空白组(BC组),余为TGF-β1组。倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;real-time PCR法检测细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙蛋白(E-cad)、1型胶原(Col 1)和纤连蛋白(FN)的mRNA表达水平;Western blot法检测细胞内α-SMA的表达水平;ELISA法检测上清液中FN的含量;茎环实时荧光定量PCR法检测6条miRNA在细胞内的表达水平。结果与BC组比较,TGF-β1组部分细胞失去原有的鹅卵石形态,转变成成纤维细胞特有的梭形;细胞内α-SMA、Col I和FN的mRNA表达上调,E-cad的mRNA表达下调,细胞内α-SMA表达量增多,细胞上清液中FN含量升高(均P<0.05);miR-30d、miR-132和miR-21的表达上调,miR-200b、miR-192和miR-10b的表达下调(均P<0.05)。结论 TGF-β1可诱导NRK-52E发生EMT。miR-30d、miR-132、miR-21、miR-200b、miR-192和miR-10b可能参与大鼠肾小管上皮细胞EMT,值得进一步研究。

磷酸三(2,3-二氯丙基)酯暴露诱发NRK-52E细胞纤维化的体外研究

自2004年禁止使用五溴联苯醚混合物阻燃剂以来,有机磷阻燃剂(organophosphorus flame retardants,OPFR)作为替代品开始被广泛生产和使用,因而成为当今阻燃剂研究的热点。目前,有机磷阻燃剂在水体环境及生物体中已有较高的检出率,而其对生物体及生态环境的潜在毒性效应还知之甚少。本研究利用磷酸三(2,3-二氯丙基)酯(tri(2,3-dichloropropyl)phosphate,TDCPP)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的毒性暴露实验,探讨TDCPP潜在的肾脏毒性。结果表明:一定剂量的TDCPP对NRK-52E的细胞活性有抑制作用,能诱导细胞内活性氧自由基(reactive oxide species,ROS)生成量增加,并触发上皮-间充质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及胞外基质沉积因子如波形蛋白(vimentin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、胞外基质成分纤连蛋白-1(fibronectin-1,FN-1)等基因mRNA表达的显著上调以及上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)等基因mRNA表达的显著下调。上述研究结果表明,TDCPP可促进NRK-52E细胞发生上皮间充质转化及纤维化。本研究为进一步综合评估TDCPP的生物和环境毒理效应提供了基础实验数据。

骨髓源性间充质干细胞通过抑制Galectin-3/Akt/mTOR信号通路改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化

目的:探索无血清骨髓源性间充质干细胞(MSCs)条件培养基,在拮抗TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)纤维化的过程中,是否经galectin-3基因调控自噬而发挥抗纤维化作用.方法:无菌条件下从年轻SD大鼠股骨和胫骨骨髓中提取骨髓MSCs进行原代培养,收集P3代细胞的无血清培养基离心过滤,制备MSCs条件培养上清(SF-MSCs-CM)备用.用含10%FBS的低糖DMEM培养正常的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),并将其分为5组:正常组,TGF-β1组,TGF-β1+SF-MSCs-CM干预组,TGF-β1+SF-DMEM(无血清低糖DMEM)干预组以及SF-MSCs-CM组.用人重组TGF-β1(15ng/mL)处理NRK-52E细胞72h,建立纤维化模型,建模后的干预分别用SF-MSCs-CM和SF-DMEM处理24h,SF-MSCs-CM组仅加SF-MSCs-CM处理24 h.利用慢病毒载体转染NRK-52E细胞,建立galectin-3敲低(Gal-3 KD)和galectin-3过表达(Gal-3 OE)工具细胞,分组及处理同前.采用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测纤维化及自噬相关指标.结果:TGF-β1明显上调NRK-52E中α-SMA、FN、galectin-3的表达,以及P-PI3K/PI3K、P-Akt/Akt、P-mTOR/mTOR、LC3B-Ⅱ/Ⅰ的比值,显著下调P62的表达.SF-MSCs-CM显著增加LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达,而降低上述其他指标的表达.无论是Gal-3 KD NRK-52E还是Gal-3 OE NRK-52E,SF-MSCs-CM干预组也表现出类似的趋势,而SF-MSCs-CM对Gal-3 KD NRK-52E的抗纤和增强自噬较Gal-3 OE NRK-52E更为明显.结论:SF-MSCs-CM可能通过抑制galectin-3/Akt/mTOR信号通路增强自噬,从而改善TGF-β1诱导的纤维化.galectin-3可能是一个具有潜在价值的抗纤靶点.

益肾化瘀方含药血清对NRK52E细胞转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响

目的:观察益肾化瘀方含药血清对TGF-β1诱导的体外培养的肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化过程中p-Smad2/3、Smad7表达的影响。方法:将体外培养的NRK52E细胞随机分为6组:正常对照组,TGF-β1刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,缬沙坦含药血清组,培养48h后取出。观察各组细胞形态变化,采用免疫细胞化学法检测NRK52E细胞p-Smad2/3、Smad7的表达。结果:NRK52E细胞经TGF-β1刺激后,失去原有的铺路石样形态,拉长增大呈梭形,而与益肾化瘀方含药血清共同作用后,细胞形态有所修复,细胞梭形改变减轻;免疫组化显示与正常对照组比较,TGF-β1刺激组细胞p-Smad2/3核表达明显增强(P<0.01),Smad7表达却减弱(P<0.01)。而各药物干预组与单纯TGF-β1刺激组相比,p-Smad2/3的表达随药物浓度增加呈下降趋势(P<0.01),而Smad7表达的阳性率明显增强(P<0.01)。其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组的表达无显著差异。结论:益肾化瘀方含药血清通过抑制Smad2/3的磷酸化,上调Smad7表达,显示出对TGF-β1刺激的NRK52E细胞转分化过程的阻抑作用,并与剂量呈正相关。