25个奇楠沉香无性系生长与光合生理特征分析

为筛选适合广东惠州地区推广和种植的奇楠沉香(Aquilaria sinensis'Qi Nan')优良无性系,以25个奇楠沉香无性系为研究材料,分析不同无性系间生长性状和光合生理差异及其相关性,并进行聚类分析。结果表明,不同奇楠沉香无性系的保存率、苗高、地径、冠幅和光合生理参数均差异显著;其中,保存率为22.7%~95.0%,苗高为117~210 cm,地径为16.8~34.3 mm。苗高与地径呈极显著正相关,与保存率呈显著正相关。聚类分析将25个无性系分为6类;第1类长势较好,保存率、苗高和地径分别为91.7%~95.0%、192~194 cm和28.1~30.9 mm,包括无性系Diao YW、Ao S和Lan BS;第2类苗高较高(199~210 cm),包括无性系Jin SZ、Qi NYH、Jin SY和Zhi TJ;第3类保存率较高(80.1%~93.7%),包括无性系Jin ShaY、Pu TT、Tu YW、Xiang SYH、Da YP和Hei ZZ;其他类群的保存率、苗高和地径均较低。无性系Diao YW、Ao S和Lan BS在惠州地区生长速度快且保存率高,适宜作为优良无性系进行推广。

奇楠沉香精油挥发性成分分析及其体外抗炎活性研究

本研究基于挥发性成分分析结合细胞炎症模型探究奇楠沉香精油(Qi-Nanessentialoil,QEO)对RAW264.7细胞抗炎活性的影响。采用GC-MS方法,分析QEO挥发性成分;通过DPPH自由基清除率和总抗氧化能力测定,检测QEO的抗氧化活性;利用生物信息学预测QEO与炎症相关的靶点和信号通路;应用荧光探针法检测一氧化氮(NO)和活性氧(ROS)水平;应用ELISA法检测TNF-α、IL-6和IL-1β的含量;应用Western blot检测P-P65、P65、IκB-α和P-IκB-α的表达水平。结果表明:QEO主要挥发性成分为2-(2-苯乙基)-色酮(50.08%)、石竹素(8.45%)、绿叶烷(6.46%)、榄香醇(3.88%)、2-烯丙基-6-甲基苯酚(2.78%)。QEO在浓度为1 mg/mL时对DPPH自由基的清除率为51.98%,其总抗氧化能力在1~10mg/mL浓度范围内随着浓度增大而增大。QEO与炎症的交集靶点有533个,KEGG富集分析显示主要涉及MAPK、NF-κB和PI3K-Akt等信号通路。QEO显著降低NO、ROS、TNF-α、IL-6和IL-1β的产生和表达水平(P<0.001);同时,QEO显著抑制P-P65和P-IκB-α蛋白表达(P<0.001)。以上研究结果表明,QEO可通过减少ROS的产生,抑制NF-κB信号通路的激活,从而显著减少细胞炎症因子的释放,以达到抗炎作用,具有开发成炎症抑制剂的潜力。

奇楠沉香的栽培技术

奇楠沉香是一种价值极高的林木产品,近年来大量天然、野生资源日渐枯竭,加快人工培育迫在眉睫。基于此,简述奇楠沉香的基本性质,并根据实践总结奇楠沉香的苗木繁育、种植方法、抚育管理以及病虫害防控等栽培与管理关键技术,为当地奇楠沉香科学经营管理提供参考。

奇楠沉香中2-(2-苯乙基)色酮的GC-MS分析鉴定

采用乙醚浸提法提取奇楠沉香样品,并应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析测定其中的化学成分及相对含量,鉴定了11个化合物。同时采用柱色谱技术对该乙醚提取物进行分离纯化得到单体化合物1～6,其结构通过核磁共振等波谱技术鉴定为2-(2-苯乙基)色酮类化合物。通过质谱比对,将GC-MS分析中未能鉴定的5个含量较高的成分分别鉴定为化合物2～6。样品中2-(2-苯乙基)色酮类化合物的相对含量达到63.62%,表明奇楠沉香富含2-(2-苯乙基)色酮类化合物。探讨了2-(2-苯乙基)色酮类化合物的质谱裂解规律,有助于采用GC-MS技术对沉香样品中2-(2-苯乙基)色酮类成分进行分析和鉴定,为合理地评价沉香的质量提供了科学依据。

国产绿奇楠沉香的化学成分研究

为了解国产绿‘奇楠’沉香的化学成分,采用色谱和波谱方法从其乙醚和乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物,分别鉴定为顺式-7-羟基菖蒲烯(1),(5R,6R,7S,8R)-2-(苯乙基)-6,7,8-三羟基-5,6,7,8-四氢-5-[2-(2-苯乙基)色酮基-6-氧代]色酮(2), 1-羟基-1,5-二苯基戊-3-酮(3),丁香树脂酚葡萄糖苷(4),(3β)-齐墩果-12-烯-3,23-二醇(5),β-谷甾醇(6)和棕榈酸-α-单甘油酯(7)。化合物1、3～5和7均为首次从沉香中分离得到,其中化合物1表现出非常甜的芳香气味。乙酰胆碱酯酶体外抑制活性测试结果表明,50μmol L^(–1)的化合物1对乙酰胆碱酯酶抑制率为(49.9±1.4)%。

GC-MS分析4种奇楠沉香中致香的倍半萜和2-(2-苯乙基)色酮类成分

采用乙醚浸提法提取了4种奇楠沉香样品(海南产白奇楠、海南产紫奇楠、海南产绿奇楠和越南产绿奇楠),4个样品的得率分别为:20.3%、27.6%、48.0%、40.2%。应用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析测定4个样品乙醚提取物的化学成分及相对含量,从4种奇楠沉香中共鉴定了37个化合物,其中倍半萜类化合物共20个,据报道有香味描述的有7个;2-(2-苯乙基)色酮类化合物11个,在海南产白奇楠、海南产紫奇楠、海南产绿奇楠和越南产绿奇楠乙醚提取物中相对含量分别达到74.55%、95.59%、93.90%、89.57%,其中,化合物2-(2-苯乙基)色酮和化合物2-[2-(4-甲氧基苯)乙基]色酮在这4种奇楠中相对含量之和分别达到了66.47%、82.09%、84.71%、71.98%。结果表明,奇楠沉香乙醚提取物中含少量的多种骨架类型的芳香倍半萜,富含2-(2-苯乙基)色酮类化合物,特别是化合物2-(2-苯乙基)色酮与2-[2-(4-甲氧基苯)乙基]色酮。

越南奇楠沉香组培苗不定根诱导研究

越南奇楠沉香Aquilaria crassna是瑞香科沉香属植物。试验以越南奇楠沉香的组培苗为材料,研究组织培养中影响不定根诱导的因素。结果表明：培养基中的大量元素、微量元素、NAA的浓度变化、固化剂的种类、活性炭的含量对奇楠沉香组培苗的生根率有显著影响,不同无性系对NAA的反应也表现出显著差异。最适生根培养基为1/4MS大量元素＋1/2MS微量元素＋NAA（0.05-0.2 mg/L）,诱导越南奇楠沉香组培苗生根的最佳NAA的浓度随无性系的不同而不同。

基于《中华人民共和国药典》的奇楠种质产沉香的质量分析与评价

目的:分析与评价奇楠种质产沉香的质量。方法:按《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版(一部)沉香药材标准,对奇楠种质产沉香的性状、鉴别、浸出物、含量测定和特征图谱等指标进行全面分析。结果:10批奇楠种质产沉香的显微结构特征、理化显色反应符合《中国药典》2020年版沉香标准规定,性状、薄层色谱、特征图谱不符合规定;醇溶性浸出物质量分数为32.94%~56.69%,但沉香四醇质量分数仅为0.01%~0.02%。结论:10批奇楠种质产沉香的质量不符合《中国药典》2020年版沉香标准的规定。

奇楠本草及其历史渊源考证

奇楠特指最高品质的沉香。目前学界缺乏系统历史文献研究,沉香产业的发展受到一定的制约。为了追本溯源,深入研究奇楠的历史渊源,探讨奇楠一词的发展变迁,文中综合系统考证了奇楠沉香本草来源和奇楠的名称来源与历史变迁。经考证发现,奇楠的两种基源植物为海南产白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Spreng.和越南产柯拉斯那沉香A.crassna Pierre ex Lecomte;“奇楠”一词来源于隋唐时期佛教传入的梵文“tagara”(多伽罗香)和“samghārāma”(僧伽蓝摩),到明朝晚期,作供奉用香,奇楠开始特指高品质的沉香,而现代奇楠除了特指高品质沉香外,也指能产奇楠的白木香种苗。笔者认为,在奇楠沉香和种苗品质不一的今天,应制定高品质的奇楠沉香和优质沉香种苗标准,才能推进沉香产业健康有序的发展。

伤害诱导普通白木香与奇楠种质沉香中倍半萜类成分及早期倍半萜合酶基因表达的差异分析

目的:明确伤害诱导普通白木香和奇楠种质所结沉香中倍半萜组分及其早期倍半萜合酶基因表达模式的差异。方法:采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析普通沉香和奇楠沉香中倍半萜组分的差异;对3年生普通白木香和奇楠种质茎干分别进行全断干伤害,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析伤害早期倍半萜合酶基因AsTPS2、AsTPS13、AsTPS14、AsTPS17、AsTPS18、AsTPS20、AsTPS23表达模式的差异。结果:奇楠沉香倍半萜组分显著不同于普通白木香所结沉香,2种沉香中分别检测到16、17个倍半萜成分,其中共有成分12个,且共有成分含量差异较大;两者的倍半萜合酶基因在伤害诱导早期表达模式也不同,伤害诱导24 h内,普通白木香中7个倍半萜合酶基因表达水平均上升,2 h达到最大值后下降,而奇楠种质中AsTPS2、AsTPS13、AsTPS14、AsTPS17和AsTPS23基因表达量在24 h内持续上升,AsTPS20基因表达量在6 h达到最大值,但AsTPS18基因表达量低,在伤害诱导0~24 h变化不明显,显著低于普通白木香种质。结论:普通白木香与奇楠种质所结沉香倍半萜类成分差异明显,且响应伤害诱导的倍半萜合酶基因在0~24 h表达模式显著不同,推测倍半萜合酶基因的差异诱导表达可能是2种种质形成的倍半萜成分差异较大的原因之一。

‘热科2号’栽培奇楠沉香及其叶片的急性毒性研究

随着‘热科2号’栽培奇楠沉香的大量推广,市场上奇楠沉香的产量逐年增加,为了更好地开发利用栽培奇楠新资源,需要对其安全性进行评价。采用小鼠急性经口毒性试验,观察实验动物所产生的毒性反应,评价受试物的毒性作用。栽培奇楠沉香及其叶片的提取物雌雄小鼠经口LD50剂量均大于10.0g/kg,属实际无毒级。试验期间实验动物生长良好,活动、摄食、饮水正常,毛色光泽度好,未见明显中毒症状和死亡。到期处死动物进行大体解剖检查,各脏器未见异常。结果表明‘热科2号’栽培奇楠沉香及其叶片提取物急性毒性分级属于无毒级物质,为栽培奇楠沉香药用和食用的开发利用提供参考。

奇楠沉香超临界提取物的化学成分研究

目的:研究奇楠沉香超临界提取物的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、薄层色谱及半制备液相色谱等技术对奇楠沉香超临界提取物进行分离纯化,结合谱学手段和文献数据鉴定化合物的结构。体外测定化合物对皮质酮(CORT)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。结果:从奇楠沉香超临界提取物中分离得到17个化合物,分别鉴定为12,15-二酮基-α-芹子烯(1)、15-酮基-桉叶烷-4,11(13)-二烯-12-甲酯(2)、petafolia A (3)、12-羟基-4(5),11(13)-桉叶二烯-15-醛(4)、12,15-二酮基-芹子-4,11-二烯(5)、(7S,8R,10S)-(+)-8,12-二羟基-芹子-4,11-二烯-14-醛(6)、白木香酸(7)、1α-羟基-7βH-荒漠木-9,11-二烯-8-酮(8)、7α-H-9(10)-烯-11,12-环氧-8-氧代荒漠木烷(9)、petafolia B (10)、11-羟基-瓦伦-1(10)-烯-2-酮(11)、白木香醇(12)、2-(2-苯乙基)色酮(13)、奇楠沉香酮A (14)、4′-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮(15)、6-甲氧基-2-[2-(4′-甲氧基苯乙基)]色酮(16)和丁香醛(17)。CORT诱导细胞损伤后的细胞存活率为48.78%,给予受试药物后,不同化合物不同质量浓度下细胞存活率出现不同程度的升高,存活率为50.35%~91.36%。结论:化合物1~17均为首次从奇楠沉香超临界提取物中分离得到,化合物2和4对CORT诱导的PC12细胞损伤的保护活性较强。

奇楠沉香品种及其品质分析

奇楠沉香品种可以根据外观分为多种,传统的奇楠沉香品质是根据色泽、油线、香型和产地4个方面来判断,可以应用现代分析检测进行区分,其中2-(2-苯乙基)色酮是奇楠沉香区别于普通沉香的主要成分。经检测,伍佰艺奇楠一号沉香精油中色酮类70.25%,芳香族5.69%,倍半萜类12.44%。奇楠沉香市场巨大、应用广阔,伍佰艺奇楠一号沉香适应性广,可以在我国推广种植。

不同基因型奇楠沉香试管苗对激素的响应

本研究以5种基因型的奇楠沉香试管苗为试验材料,研究不同基因型及同一基因型不同繁殖材料对不同的6-苄氨基嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BA)和吲哚乙酸(indole butytic acid, IBA)激素浓度配比的反应,筛选出适合每种基因型继代增值的最佳激素浓度组合。结果表明:不同基因型及同一基因型不同繁殖材料的奇楠沉香试管苗对激素的反应存在极显著差异(p <0.01)。5种基因型奇楠沉香有顶芽试管苗的最佳增殖培养基分别为:G1基因型:MS + 6-BA 0.6 mg/L + IBA 0.1 mg/L、G3和G8基因型:MS + 6-BA 0.4 mg/L + IBA 0.1 mg/L、J1和Y1基因型:MS + 6-BA 0.2 mg/L + IBA 0.1 mg/L。G3基因型无顶芽试管苗的最佳增殖培养基为:MS + 6-BA 0.2 mg/L + IBA 0.1 mg/L。

奇楠内生真菌Fusarium sp.HP-2次生代谢产物研究

目的研究奇楠内生真菌Fusariumsp．HP-2次生代谢产物及其生物活性。方法采用多种柱色谱技术对菌株发酵产物进行分离纯化；通过化合物的理化常数和波谱数据分析鉴定化合物的结构；分别采用滤纸片琼脂扩散法、MTT法和Elman比色法，对化合物的体外抗菌活性、细胞毒活性及乙酰胆碱酯酶抑制活性进行测试。结果从奇楠内生真菌Fusariumsp．HP-2发酵产物中分离鉴定了8个化合物，分别为：对羟基苯乙醇（1）、2-羟基．3．对羟基苯基丙酸甲酯（2）、N-（2．苯乙基）乙酰胺（3）、5α，8α-表二氧-（20S，22E，24R）-麦角甾-6，22-二烯-3β-醇（4）、千层塔烯二醇（5）、fusamaphthoquinoneA（6）、（＋）-solaninol（7）和2，3-dihydro-5-hydroxy-8-methoxy-2，4-Dimethylnaphtho[1，2-b]furan-6，9-dione（8）。化合物4和8对人慢性髓原白血病细胞株K-562和人肝癌细胞株BEL-7402有抑制作用，化合物6～8有乙酰胆碱酯酶抑制活性，化合物7和8具有抗青枯雷尔菌（Ralstonia solanacearum）的活性。结论奇楠内生真菌Fusariumsp．HP-2能代谢产生具有多种生物活性的化合物；首次报道萘醌类化合物6和7的乙酰胆碱酯酶抑制活性，以及化合物7与8的抗植物病原菌活性。

栽培奇楠的显微结构研究

为探究不同栽培奇楠树所结沉香的显微结构特征,收集15份栽培奇楠树所结沉香样品,通过木材切片和显微观察的方法进行解剖学研究,对其三切面的显微结构特征进行观测、描述、统计、对比和分析,并与普通白木香所结沉香进行对比。结果表明,栽培奇楠树所结沉香样品在显微结构方面有共性特征,其树脂均主要分布于内涵韧皮部、木射线及导管中,树脂丰富且有向木纤维扩散的趋势,在千里香中表现明显,而与之相比,普通白木香所结沉香样品中树脂主要集中于导管中且含量较少,二者差异较大,就树脂富集面积与含量而言,栽培奇楠树所结沉香样品明显优于普通白木香所结沉香样品;此外,部分栽培奇楠所结沉香样品内涵韧皮部与髓心中可见大量草酸钙棱晶,晶体作为树木抵御外界伤害的一种方式,推测其有利于奇楠树受到创伤开始结香后结香面积的扩展与树脂含量的增加;对沉香样品部分特征的定量数据进行统计研究,结果表明部分栽培奇楠树所结沉香样品间有较大差别,如金丝油的管孔密度、直径,内涵韧皮部宽度、密度,射线宽度、间距等与其他样品差异较大,聚类分析结果表明,栽培奇楠树所结沉香金丝油与乌身圆叶较为特殊,位于分支树的根部,千里香、张勺子、透顶绿及凹身木聚为一类,其余9个样品绿油王、‘热科2号’、樱桃叶、糖结、紫棋、蓝宝石、西瓜叶、指天椒及油叶子聚为一类。本研究可为栽培奇楠的树种选育、资源利用、检测鉴定和市场规范化提供依据,尽快完善相关研究才能不断推进沉香产业良性发展。

奇楠沉香种质资源评价及优良品系早期生长分析

【目的】奇楠沉香是白木香中的易结香品系,不同品系的奇楠沉香对同一地区的环境适应性不同。为了解26个奇楠沉香品系在广东潮州地区的生长情况,筛选适合当地推广种植的优良品系。【方法】以26个奇楠沉香品系为研究材料,调查种植1年后试验林的生长性状和光合生理特征,分析不同品系间各指标之间的差异及相关性,并进行聚类分析,筛选长势优良的品系。【结果】不同奇楠沉香品系之间的保存率、苗高、地径、冠幅以及气体交换参数均存在显著差异(P <0.05),其中保存率的变化范围为44.4%~92.2%,保存率最高的是Diao YW,最低的是Xiang SYH;苗高的变化范围为103~174 cm,地径的变化范围为18.5~36.1 mm,冠幅的变化范围为43~94 cm,苗高、地径和冠幅最大的都是Jin SY,最小的都是Bo LZ。相关性分析显示地径与苗高呈极显著正相关(P <0.01)、与冠幅呈显著正相关(P <0.05),冠幅与保存率呈极显著正相关(P <0.01)。聚类分析将26个参试品系分为3类,第2类长势最好,保存率和苗高分别在83.3%和144 cm以上,包括Diao YW、Lan BS、Jin SZ、Jin SY和Xiang J;第3类长势最差,保存率和苗高分别低于64%和130 cm,包括Xiang SYH、Xi GY、You YZ、Hong GJY和Bo LZ;第1类长势居中,保存率和苗高介于第2类和第3类之间。【结论】26个奇楠沉香品系中的Diao YW、Lan BS、Jin SZ、Jin SY和Xiang J生长速度快且保存率高,适宜在潮州地区推广种植。

栽培奇楠沉香精油中致香成分的GC-MS分析

采用水蒸气蒸馏法提取奇楠沉香精油,其得率为0.30%。通过气相色谱-质谱联用方法分析测定奇楠沉香精油中的化学成分,并通过峰面积归一法确定各化学成分的相对含量。同时对13种香气特征成分进行了描述,主要为倍半萜类化合物。本研究从奇楠沉香精油中分离鉴定出35个化合物,占精油总相对含量的92.19%,主要由倍半萜类(31个)、2-(2-苯乙基)色酮类(1个)以及芳香性化合物(3个)组成,其中倍半萜类化合物含量最高,达到总相对含量的90.28%。奇楠沉香精油中含有的倍半萜类成分主要有艾里莫芬烷型、愈创木烷型、桉烷型、沉香螺旋烷型、沉香呋喃型和杜松烷型6种类型,相对含量分别为41.84%、18.42%、12.30%、1.97%、1.88%和0.50%。

两种不同结香时间的栽培奇楠沉香化学成分研究

为了解不同结香时间对奇楠沉香品质的影响,利用气相色谱—质谱联用方法(GC-MS)分析了结香时间分别为12个和18个月的奇楠沉香样品的乙醚提取物成分及其相对含量。采用冷浸超声法用乙醚提取奇楠沉香样品,两份样品的浸膏得率分别为32.40%(12个月)和37.20%(18个月)。利用GC-MS分析其化学成分,并通过峰面积归一化法确定各化学成分的相对含量再进行对比,共检测出20种不同的化学成分。其中,结香时间为12个月的样品中共检测出19种化学成分,占总相对含量的97.29%;结香时间为18个月的样品中共检测出14种化学成分,占总相对含量的99.53%。其化学成分结构类型主要有2-(2-苯乙基)色酮类化合物和倍半萜类化合物,且以2-(2-苯乙基)色酮类化合物为主,其相对含量分别为86.66%(12个月)和92.22%(18个月);倍半萜类成分虽然相对含量较低,分别为10.07%(12个月)和7.31%(18个月),但结构类型较丰富,发现有桉烷型、艾里莫芬烷型、愈创木烷型、沉香螺旋烷型和β-檀香烷型。

奇楠沉香与普通沉香分泌物特性及抑菌活性比较

【目的】比较奇楠沉香与普通沉香分泌物分布及其主要化学成分种类和相对含量差异,分析2种沉香燃香烟气抑菌效果,为奇楠沉香的品质评价与合理利用提供科学依据。【方法】以10批次奇楠沉香和9批次刀砍法普通沉香为研究对象,采用显微切片法比较2种沉香分泌物分布,应用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)分析2种沉香分泌物主要化学成分差异,利用顶空-固相微萃取-气相色谱质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)探究2种沉香线香燃烧后的烟气成分,并基于空气消毒效果鉴定试验评价燃香烟气成分对空气中自然菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌的抑菌活性。【结果】奇楠沉香与普通沉香分泌物主要分布在内含韧皮部和木射线薄壁细胞,奇楠沉香中2种结构的组织比量大于普通沉香。奇楠沉香分泌物含量明显高于普通沉香,2种沉香分泌物主要化学成分存在显著差异。奇楠沉香分泌物中倍半萜类化合物相对含量低于普通沉香,色酮类化合物相对含量大于普通沉香。奇楠沉香分泌物中色酮类化合物以2-(2-苯乙基)色酮和2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮为主,二者相对含量之和达77.3%,普通沉香仅1.5%。奇楠沉香与普通沉香线香燃烧后的烟气成分包括芳香族化合物、倍半萜类化合物以及色酮类化合物,与分泌物主要化学成分相比,烟气成分含有大量芳香族化合物,主要来源于分泌物中的芳香族化合物、分泌物裂解产物和木材裂解产物。2种沉香燃香烟气均对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌具有较强抑菌活性,杀灭率达99%以上,但奇楠沉香燃香烟气对空气中自然菌的抑制效果略优于普通沉香。【结论】奇楠沉香与普通沉香分泌物特性存在显著差异,二者由不同化学类型白木香结香产生,奇楠沉香具有丰富的2-(2-苯乙基)色酮和2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]色酮,由其制备的线香燃烧后烟气抑菌效果略优于普通沉香。