女贞子活性成分防治骨质疏松症的分子机制

背景:目前,中医药已被证实在抗骨质疏松方面具有显著作用,女贞子活性成分的抗骨质疏松有效性及作用机制逐渐得到学者们的关注。目的:分析总结女贞子活性成分在体内外发挥抗骨质疏松方面的研究进展。方法:检索中国知网及PubMed数据库收录的相关文献,中文检索词为“骨质疏松症,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,破骨细胞,女贞子,信号通路”;英文检索词为“Osteoporosis,Bone marrow mesenchymal stem cells,Osteoblast,Osteoclast,Ligustri Lucidi Fructus,Signal path”,并根据研究需要确立相应的标准,对所得文献进行筛选,最终纳入82篇文献进行综述。结果与结论:女贞子活性成分在体内外发挥抗骨质疏松作用主要涉及以下几种重要成分:①红景天苷通过抑制骨硬化蛋白(SOST)和Dickkopf相关蛋白1(Dkk1)的表达,激活了Wnt/β-catenin信号通路,该激活过程增强了去卵巢大鼠和原代成骨细胞中磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6(p-LRP6)的表达,同时降低了糖原合酶激酶3β的表达。进一步地,红景天苷促进了细胞核内β-catenin、特异性转录因子2(Runx2)和骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)的表达,从而促进了成骨细胞的骨形成能力。红景天苷可直接作用于成骨细胞,促进骨形成,为骨质疏松症的治疗提供了新的策略。②橄榄苦苷显著提高了SD大鼠的骨密度,并通过降低终末白细胞介素6和碱性磷酸酶浓度来调节骨代谢。体外实验表明,橄榄苦苷促进了成骨细胞的增殖,并上调了骨保护素蛋白和mRNA的表达,同时抑制了核转录因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白和mRNA的表达。这一作用机制与调节骨保护素/RANKL系统的平衡密切相关,展现出能提高骨密度,又能通过调节骨代谢相关因子来维护骨骼健康的优势,但对Ca2+浓度无显著影响,可能限制了其在某些特定骨质疏松类型中的应用。③松果菊苷通过降低磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)的表达、减少蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的磷酸化程度和破骨特殊标记蛋白(c-Fos)的表达,有效抑制了破骨细胞中PI3K/Akt/c-Fos通路的激活。这一抑制作用降低了破骨细胞的增殖和成熟能力,从而有助于减少骨吸收,其优势能直接针对破骨细胞进行干预,为骨质疏松症的治疗提供了新的靶点,但是目前对破骨细胞的具体调控机制尚需深入研究,且其长期效果和安全性需进一步评估。④女贞子活性成分在骨质疏松方面展现出良好的治疗效果,但其作用机制复杂,涉及多个基因、蛋白和信号通路的相互作用,未来需开展大规模的临床试验以验证其有效性和安全性,同时需要进一步探索女贞子活性成分与其他药物的联合应用策略,以期获得更好的治疗效果。

女贞子中主要活性成分红景天苷和特女贞苷的逆转铁过载促进骨形成相互作用研究

目的评价女贞子中主要活性成分红景天苷和特女贞苷的逆转铁过载促进骨形成抗绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)效应,并探讨其相互作用关系。方法建立柠檬酸铁铵诱导的斑马鱼骨质疏松模型,分别评估红景天苷(1、5、25、50、100μmol/L)、特女贞苷(1、5、25、50、100μmol/L)及其两种成分混合溶液(1∶1)对骨矿化的影响;茜素红染色后以骨骼染色面积和累积光密度评价其骨矿化程度,并运用等效线法和等辐射分析法评价红景天苷、特女贞苷抗PMOP的相互作用。结果红景天苷、特女贞苷及其混合溶液均有较好地逆转铁过载所致的骨形成抑制作用,且在1~100μmol/L内呈现显著的浓度依赖性;在等效线法中,经半数有效浓度(EC50)计算得混合组γ>1,表明二者无明显的协同作用;在等辐射分析法中,混合组中相应成分的EC50比值分数总和为1.16,其复合点落在95%可信限内(P>0.05),表明两者呈相加作用关系,且未见明显协同作用。结论红景天苷和特女贞苷均可逆转铁过载诱导的骨形成抑制,且当红景天苷和特女贞苷联合使用时,两者呈相加作用。

不同种源女贞子药用有效成分比较

为探讨女贞子红景天苷、特女贞苷等药用有效成分在种源水平上的遗传变异规律及地理变异规律,以湖南芷江、湖南新宁、四川峨眉山、云南昭阳、云南晋宁等5个种源为材料,比较了不同种源女贞子药用有效成分含量的差异。结果表明:女贞子红景天苷、特女贞苷、木犀草苷、齐墩果酸等4种药用有效成分含量在种源间均存在极显著差异;女贞子红景天苷、特女贞苷、木犀草苷、齐墩果酸的含量在种源水平上能稳定遗传,且受外界环境条件的影响比较小;4种药用有效成分含量之间的相关性均未达到显著水平;以红景天苷、特女贞苷、木犀草苷和齐墩果酸含量为指标,不同种源女贞子药用有效成分含量的综合隶属度排序依次为湖南芷江、云南晋宁、云南昭阳、湖南新宁、四川峨眉山,湖南芷江种源在药用有效成分含量上具有优良表现。

中国东部木犀科一新种--陈氏女贞

描述了采自中国东部木犀科Oleaceae女贞属Ligustrum L.一新种--陈氏女贞L.chenii W.Y.Xie,X.D.Mei et F.Chen,并附有线描图.新种形态与台湾地区特有种阿里山女贞L.pricei Hayata相似,不同之处在于叶片卵形至卵状披针形,先端长渐尖或尾状渐尖,基部楔形至近圆形,上面中脉隆起,连同侧脉密被微柔毛,叶柄长3~5 mm,密被微柔毛;花序梗长0~1.4 cm,花梗长1.5~2 mm,花萼长1.1~1.6 mm,花冠淡黄绿色,外面有时带紫色,稀白色,花药长约4 mm;果实顶端常具宿存花柱,长1~2 mm,喙状.

同时测定复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量

目的:建立高效液相色谱法测定复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量。方法:采用C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-庚烷磺酸钠溶液(0.32 g庚烷磺酸钠,加水800 mL溶解,加三乙胺2 mL,冰醋酸10 mL,加水稀释至1000 mL)(体积比7∶93)为流动相,流速:1.0 mL/min,检测波长:274 nm,柱温为40℃,进样体积10μL。结果:维生素B_(1)在0.4988~99.76μg范围内线性关系良好,回归方程Y=12976x-2190.4(R 2=1);维生素B_(6)在0.4822~96.44μg范围内线性关系良好,回归方程Y=11071x+1567(R 2=1);维生素B_(1)回收率为100.76%(n=9),RSD为0.7%;维生素B_(6)回收率为99.51%(n=9),RSD为0.8%。结论:该方法简便、快速、准确,为复方四维女贞子胶囊中维生素B_(1)和维生素B_(6)的含量测定提供了科学的测定方法。

金森女贞黄叶与绿叶的光合蒸腾特性比较分析

为探究金森女贞黄叶与绿叶光合及蒸腾生理特性差异,以三年生金森女贞(Ligustrum japonicum‘Howardii’)为试验材料,采用LI-6800便携式光合测定系统,测定同一植株上两种不同颜色叶片的净光合速率(A)、气孔导度(Gsw)、蒸腾速率(E)、胞间CO 2浓度(Ci)以及计算气孔限制值(Ls)、水分利用效率(WUE)等参数,分析比较2种颜色叶片对环境因子的适应性。结果表明:金森女贞黄叶和绿叶的A、E、Gsw、Ci日变化均呈现双峰曲线,但峰谷值出现时间差异明显,绿叶有明显的“光合午休”现象,绿叶的光合与蒸腾能力强于黄叶;Gsw日均值黄叶>绿叶,但气孔限制值Ls绿叶>黄叶,说明绿叶受到气孔因子限制作用更强;WUE值绿叶>黄叶,两者差异较为显著;Pearson相关性分析可知,光合有效辐射强度(Qin)对黄叶和绿叶的A、E、Ci以及RH的相关性最强,呈显著性正相关。总体来说,金森女贞绿色叶片已经发育成熟,对外界环境变化的调控机制相对较强,更能够适应夏季的高辐射与高温条件,这也是金森女贞在炎热夏季叶片转为绿色的一个主要原因,同时,研究金森女贞黄叶和绿叶的光合蒸腾特性也为修剪提供理论依据。

基于肠道菌群探讨粗壮女贞总苷对高脂血症金黄仓鼠的降脂作用机制

目的评价粗壮女贞总苷(total phenylpropanoid glycosides extracted from Ligustrum robustum(Roxb.)Blume,LRTPG)对高脂血症金黄仓鼠的降脂作用并探讨其对肠道菌群的调节作用。方法60只仓鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组、LRTPG-L组、LRTPG-M组、LRTPG-H组。高脂饲料诱导造模成功后连续给药4周,进行血脂和肝脂含量检测,并采集对照组、模型组和LRTPG-H组仓鼠结直肠部位成形粪便进行16S rDNA测序。结果LRTPG对高脂血症仓鼠具有降低血清TG、TC、LDL-C水平和肝脏TG、TC含量的作用。肠道菌群测序结果显示,与模型组比较,LRTPG在门水平降低厚壁菌门相对丰度,增加拟杆菌门和疣微菌门相对丰度(P<0.01);科水平上明显升高克里斯滕森菌科、消化球菌科、疣微菌科相对丰度(P<0.05或P<0.01);属水平上明显升高颤螺菌属、颤杆菌克属、解黄酮菌属和阿克曼氏菌属的相对丰度(P<0.05或P<0.01)。这些菌群的变化均有益于LRTPG降脂作用的发挥。结论LRTPG可能通过改善高脂饮食导致的金黄仓鼠肠道菌群紊乱发挥降脂功效。

3种女贞属植物的扦插繁殖研究

对女贞(Ligustrum lucidum)、小叶女贞(L. quihoui)和金叶女贞(L. vicaryi)的扦插繁殖进行初步研究。结果表明:小叶女贞和金叶女贞的扦插生根率很高,不同处理组合之间差异相对较小;女贞的扦插生根率较低,不同处理组合之间的生根率相差达50%以上;对于女贞的扦插,选择适当的处理组合可显著提高其生根率,应用200 mg/kg NAA溶液浸泡长度为10 cm的女贞插穗20 s,可获得53.33%的生根率;金叶女贞扦插的最佳处理组合为:15 cm长的插穗,200 mg/kg的IBA溶液浸泡20 s;小叶女贞扦插的最佳处理组合为:15 cm长的插穗,200 mg/kg NAA溶液浸泡20 s。

中药女贞子中水溶性成分二种新裂环环烯醚萜甙的分离和鉴定

从木犀科植物女贞（ＬｉｇｕｓｔｒｕｍｌｕｃｉｄｕｍＡｉｔ）干燥成熟果实女贞子中分离得到２个新的裂环环烯醚萜甙类化合物，经光谱及化学分析，鉴定其化学结构，并分别命名为特女贞甙（ｓｐｅｃｎｕｅｚｈｅｎｉｄｅ，Ｉ）和女贞苦甙（ｎｕｅｚｈｅｎｇａｌａｓｉｄｅ，Ｉ）。

女贞子-墨旱莲药对提取物的指纹图谱和化学成分鉴定研究

目的建立女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱以控制其质量,并对提取物中所含有的化学成分进行结构鉴定。方法采用HPLC法,固定相为ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-体积分数为0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;建立15批不同产地女贞子-墨旱莲药对提取物的HPLC指纹图谱,对其进行相似度评价、聚类分析和正交偏最小二乘方判别分析;采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)联用技术,分别在正、负离子扫描模式下对提取中的化学成分进行检测,基于高分辨质谱一级和二级数据进行结构鉴定。结果由不同产地药材随机组合的15批女贞子-墨旱莲药对提取物的相似度介于0.865~0.992之间,药对指纹图谱中共确定了16个共有峰,指认了其中7个色谱峰;液质联用共检测到55个化合物,采用对照品准确鉴定了7个成分的化学结构,并推测了其它48个化合物的可能化学结构。结论建立的指纹图谱方法简便可靠,重复性好,可用于女贞子-墨旱莲药对提取物的质量控制研究;UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS联用技术可实现对女贞子-墨旱莲药对提取物中化合物的结构鉴定,为其后续研究奠定了基础。

金叶女贞龟蜡蚧的防治技术

金叶女贞是木樨科女贞属半常绿灌木,其初生叶金黄色,老叶绿色、有光泽,可与绿色、红色等植物搭配构造色块等,近年来已成为城市园林绿化中广泛应用的彩叶植物。随着金叶女贞在园林绿化中应用面积的增大和种植时间的延长,虫害发生日趋严重,其中龟蜡蚧是金叶女贞植物保护工作重点防治对象。下面介绍金叶女贞龟蜡蚧的防治技术,供园林绿化管理者参考。

女贞子中2种主要裂环环醚萜苷成分的分离鉴定及其抗氧化活性研究

本文以从女贞子药材中自行分离得到的2种主要裂环环烯醚萜苷类成分——女贞苷(nuezhenoside)及女贞苷G13(G13)为研究对象,研究了它们对于DPPH自由基的清除作用。实验结果表明,2种成分均有显著的抗氧化活性,剂量效应之间呈正相关,其中女贞苷G13清除DPPH自由基的作用强于女贞苷,说明裂环环烯醚萜苷类结构对清除自由基具有积极作用。此外,本文的实验结果对于女贞子抗氧化机理的深入研究具有重要的意义。

5个采收期女贞子中5种成分的动态变化

目的分析5个采收期(8、9、10、11、12月)女贞子Ligustri lucidi Fructus中5种成分的动态变化。方法女贞子乙醇提取液的HPLC分析采用Aglient Zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长224 nm。结果红景天苷、酪醇、木犀草苷、女贞苷和特女贞苷在各自范围内均呈良好的线性关系(r>0.999 0),加样回收率99.56%~100.30%,RSD 0.89%~1.23%。各成分(除酪醇外)含有量均在9月采收的样品中最高,10月次之。结论女贞子的适宜采收期为9月和10月。

两种女贞光合作用季节特性研究

以徐州自然条件下生长的常绿女贞和落叶女贞为材料，在不同季节测定了它们的叶绿素含量、光合速率、呼吸速率、光合作用的最适温度。结果表明，两种女贞各测定的生理指标都有季节特性。在自然条件下，两种女贞的光合速率和呼吸速率皆为夏季最高，冬季最低，与叶绿素含量变化相一致。在冬季常绿女贞的净光合速率接近于零，而落叶女贞的净光合速率为负值，但仍保持较高的呼吸强度。光合作用的最适温度测定结果表明，常绿女贞适应环境温度变化的能力较强，特别在冬季仍能保持较高的光合活力，而落叶女贞适应环境温度变化的能力较差，在冬季光合活力极小，光合温度曲线几乎为一平稳曲线。这种差别和它们各自在冬季落叶与不落叶的特性有关。

多指标正交试验优化女贞子中环烯醚萜苷的提取工艺

目的:优化女贞子中环烯醚萜苷成分的提取工艺。方法:以特女贞苷、橄榄苦苷和女贞苷G13的含量为考察指标,以乙醇体积分数、溶剂倍量、提取时间和提取次数为考察因素,采用正交试验对女贞子中环烯醚萜苷类成分的提取工艺进行优化并进行验证试验。结果:4种因素对女贞子环烯醚萜苷类成分的提取量均有显著影响,并以提取次数的影响最为显著;最优提取工艺为14倍量70%乙醇回流提取3次,每次2.5 h;验证试验结果中环烯醚萜苷总含量平均值为83.58 mg/g(RSD=0.94%,n=3)。结论:优化的提取工艺稳定、合理,可用于女贞子中环烯醚萜苷类成分的提取。

不同蒸、炖工艺的酒女贞子外观性状和主成分比较

为了研究蒸法和炖法对酒女贞子的外观性状及主成分影响的变化规律,探究蒸、炖工艺对酒女贞子的质量影响。按照2020年版《中华人民共和国药典》方法制备蒸、炖酒女贞子样品,结合中式传统色片比较蒸、炖工艺对酒女贞子外观性状的影响,采用高效液相色谱(HPLC)法及药典浸出物测定法测定蒸、炖酒女贞子的主成分及浸出物,比较蒸、炖工艺对酒女贞子的浸出物、特女贞苷及红景天苷含量的影响。结果表明,蒸法和炖法对酒女贞子的外观性状有较大影响,相同的炮制时间炖法酒女贞子颜色为黑色,蒸法颜色为褐色,分别在蒸制10 h、炖制12 h后的饮片性状才能符合2020年版《中华人民共和国药典》标准;蒸法和炖法对酒女贞子浸出物无明显差异;在蒸、炖过程中特女贞苷含量呈降低趋势,在相同时间内蒸法的降低速度快于炖法;红景天苷含量呈上升趋势,相同时间内蒸法的升高速度快于炖法。由此可知,蒸法和炖法对酒女贞子外观性状、内在成分的变化规律影响较大,2种方法的炮制原理虽然相同,但主成分变化率差异较大,结合酒女贞子外观性状及内在成分含量变化,酒女贞子采用蒸法需蒸制10 h以上,采用炖法需炖制12 h以上。

女贞子中2种主要裂环环烯醚萜苷类成分的含量考察

目的：建立分析女贞子中主要裂环环烯醚萜苷类成分女贞苷（nuezhenoside）及女贞苷G13（G13）的HPLC定量分析方法，并考察了不同采集时间及不同产地女贞子样品中上述2种成分的含量。方法：以国产YMG-C18（4．6mm×250mm，10μm）为色谱柱，流动相为乙腈-水，梯度洗脱（乙腈：0min，20％；15min，25％），流速为1mL·min^-1，检测波长240nm，室温（25℃）。结果：女贞苷和女贞苷G13分别在0．341～34．1μg，0．331—33．1μg与峰面积线性良好；平均回收率分别为97．5％，RSD1．4％（n=3）和98．1％，RSD1．8％（n=3）。不同地区女贞子药材中女贞苷和女贞苷G13的含量差别较大，可能与不同品种来源及加工炮制方法等因素有关；实验数据表明，采集期在11月初至中旬上述2种成分的含量最高。结论：所建立的HPLC梯度洗脱法可用于同时测定女贞子药材中主要裂环环烯醚萜苷类成分女贞苷及女贞苷G13的含量，可作为女贞子中水溶性指标性成分的检测方法，为全面控制女贞子药材内在质量提供参考。

女贞子中4种成分在大鼠血浆中的药动学行为

目的研究女贞子Ligustrum Lucidum Ait.中4种成分在大鼠血浆中的药动学行为。方法大鼠灌胃给药(0.6 mmol/kg)后,于0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、10 h采血。UPLC-MS/MS法测定4种成分血药浓度,DAS 2.0软件绘制血药浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果特女贞苷、油女贞苷、女贞苷G13、红景天苷Cmax分别为(1 030.2±125.8)、(920.2±98.9)、(582.3±44.6)、(13 635.2±1 217.5)ng/m L,Tmax分别为(0.6±0.2)、(0.6±0.2)、(0.5±0.1)、(0.6±0.3)h,t1/2分别为(3.2±0.6)、(4.3±0.4)、(4.2±1.1)、(6.2±3.2)h,AUC0-∞分别为(2 370.7±152.5)、(2 343.8±148.2)、(1 917.5±136.6)、(23 483.6±2 014.3)ng/(m L·h),其血药浓度-时间曲线均符合二室模型。结论与女贞子中特女贞苷、油女贞苷、女贞苷G13比较,红景天苷生物利用度更高,更有利于机体吸收。

黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺优化

目的优化黑豆与黄酒共制女贞子炮制工艺。方法在单因素试验基础上,以蒸制时间、蒸制次数、烘制温度为影响因素,外观性状,红景天苷、特女贞苷、女贞苷G13、醇溶性浸出物含量,DPPH、ABTS自由基清除率的总评“归一值”(OD值)为评价指标,星点设计-响应面法优化炮制工艺。结果最优工艺为蒸制时间70 min,蒸制次数7次,烘制温度90℃,OD值为0.8415。结论该方法简便可靠,稳定可行,可用于黑豆黄酒共制女贞子。

基于HPLC指纹图谱结合多元统计分析九制女贞子炮制过程中成分变化

目的建立3个不同批次九制女贞子样品的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱及多成分含量测定方法,结合化学模式识别分析评价九制女贞子的质量差异。方法采用HPLC法建立不同批次九制女贞子的指纹图谱并进行5种成分的含量测定,通过相似度分析、主成分分析(PCA)和最小偏二乘法-判别分析(PLS-DA)评价不同批次九制女贞子质量差异,找寻炮制过程中成分含量的动态变化情况。结果建立了九制女贞子的HPLC指纹图谱,标定了26个共有峰,指认了其中5个成分,分别是羟基酪醇(峰9)、红景天苷(峰10)、特女贞苷(峰19)、女贞苷G13(峰24)、Oleonuezhenide(峰25),含量变化明显。方法学考察结果显示,各成分的线性关系良好(r≥0.990),平均回收率为99.90%~103.19%。27批样品的指纹图谱与对照指纹图谱相似度均>0.953。PCA结果提取了4个主成分,PLS-DA能将3批不同批次九制女贞子明显区分,并根据变量重要性投影值(VIP)>1的原则筛选出了7个主要差异成分,并指认了Oleonuezhenide、女贞苷G13、特女贞苷这3个是与九制女贞子相关性较强的化学成分。不同批次之间九制女贞子质量差异较大。结论建立的九制女贞子HPLC指纹图谱方法简便,与模式识别方法相结合可为九制女贞子药材质量评价提供参考,炮制过程中含量呈现动态变化,羟基酪醇整体呈现不变趋势,红景天苷整体呈现增加趋势、特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide整体呈现减少趋势,在炮制过程中,特女贞苷、女贞苷G13、Oleonuezhenide发生了转化,但具体转化机制有待后续研究发现,九制女贞子的指纹图谱结合化学模式识别方法,不仅为九制女贞子质量提供参考也可继续深入探讨九制女贞子潜在的质量标志物。