黄瓜未授粉子房离体培养体系影响因素

为筛选出适合黄瓜多种基因型的胚诱导体系,以‘翡翠’‘津优35’‘瑞光2号’‘京丰268’等4种不同基因型的黄瓜为试材,对黄瓜未授粉子房离体培养的影响因素进行研究。结果表明,在不同组合处理中,4种基因型的试材均表现为花前2 d的黄瓜未授粉子房采用MS培养基中添加0.07 mg·L^(-1)噻苯隆(TDZ),35℃热激处理2 d的胚发生率最高,分别为60.8%,20.8%,43.3%,65.0%。不同基因型间胚发生率差异显著,其中,‘京丰268’胚发生率最高,为18.04%,‘瑞光2号’胚发生率最低,为5.23%。35℃热激处理2 d的效果最好,开花前2 d的未授粉子房胚发生率最高。‘翡翠’以0.09 mg·L^(-1) TDZ处理时胚发生率最高,‘瑞光2号’‘津优35’‘京丰268’以0.07 mg·L^(-1) TDZ处理时胚发生率最高。

‘雪球’海棠授粉情况对子房发育的影响

为研究‘雪球’海棠授粉情况对子房的发育影响,本实验将‘雪球’海棠16d幼果授粉与未授粉的子房进行比较,测定它们果柄叶绿素和花青苷含量,以及果实的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)强度。对授粉和未授粉的子房内部胚珠发育情况及外观进行观察测量,发现未授粉的‘雪球’海棠幼果果柄脱落,其子房发育受到抑制,进一步研究发现,未授粉的子房发育状况与活性氧强度及花青苷含量有关。

丝瓜子房培养类胚体发生途径诱导研究

[目的]以丝瓜(Luffa ssp.)品种“徐绿一号”的未授粉子房为试验材料,分析不同因素对类胚体形成的影响。[方法]设置L 16(215)正交试验分析子房发育阶段、4℃预冷处理、35℃黑暗热激处理、TDZ、6-BA、ABA、NAA、2,4-D对丝瓜离体子房培养获得类胚体的影响。[结果]不同因素对子房片的发育过程具有不同的效果,其中采集当天开放的雌花、4℃预冷处理、在MS培养基中添加0.04 mg/L TDZ对子房片的类胚体形成具有促进作用,添加0.04 mg/L 2,4-D对丝瓜子房类胚体形成具有抑制作用,但可以促进子房片生根;另外预冷处理与TDZ、TDZ与雌花采集时间、4℃预冷和ABA的两两交互作用对丝瓜类胚体的形成也具有显著影响。[结论]有效形成丝瓜子房类胚体途径:当天采集子房+4℃预冷处理+0.04 mg/L TDZ。

甜瓜未授粉子房超低温保存方法初探

为延长甜瓜未授粉子房取材时间,克服甜瓜子房取材受生长季节、发育期限制的缺点,以厚皮甜瓜晚熟品种众云18和早熟品种锦绣的子房为试材,对其进行超低温保存和恢复培养研究。结果表明,4℃暗处理的甜瓜子房随着预培养和保护液(PVS2)处理时间的增加,子房的存活率呈先增高后降低的趋势,其中,预培养24 h和PVS2处理30 min时效果最佳,子房存活率均在82%以上;子房经过-196℃超低温保存后,在38、40、42℃卸载液解冻5 min时,子房存活率没有明显差异;超低温保存60 d后的子房,经过恢复培养后,众云18和锦绣子房最高存活率分别达到80.83%、82.43%。采用包埋法和玻璃化法结合的改良超低温保存法可以有效解决甜瓜大孢子培养供体无法持续获得的问题,加速了甜瓜单倍体培育的进程。

基于EDEM花生子房柄切除装置仿真与试验

目前,花生在收获后荚果上所带子房柄主要依靠人工去除,人工去柄效率低、作业成本高,制约了我国花生产业的发展。针对这一问题,设计了一种锯齿刀式花生子房柄装置,建立了带子房柄花生荚果颗粒模型,设计2、4、6、8、10共5种不同的锯齿切柄刀排列方式,并采用EDEM软件对该装置进行切柄过程仿真,确定了8组锯齿圆盘刀排列效果最佳。为获取花生子房柄切除装置最佳工作参数组合,采用二次回归正交旋转组合试验进行设计,建立回归方程进行分析,最终得到最佳参数组合:在锯齿圆盘刀的转速为64.05r/min、筛选栅板的振动频率为4.31Hz、筛选栅板倾角为8.81°时,去柄率≥94.44%,破损率≤0.92%。试验验证该装置对花生荚果具有一定的适应性,可满足各项指标要求。

热激对甜瓜未授粉子房培养胚珠膨大期内源激素的影响

为探究热激处理对甜瓜未授粉子房培养中胚珠膨大发育与内源激素的影响,以期为揭示胚珠膨大和单倍体培养的机理研究奠定基础。以热激和对照培养不同天数的甜瓜未受粉子房为试材,对胚珠膨大率进行动态监测,并采用UPLC-ESI-MS/MS法测定顺式玉米素核糖核苷(CZR)、赤霉素3(GA3)、反式玉米素(ZT)、吲哚-3-乙酸(IAA)及脱落酸(ABA)含量,并分析了这5种内源激素与胚珠膨大发育的关系。结果表明,与对照25℃室温培养相比,32℃热激处理4 d有利于胚珠的膨大及内源激素的积累,且在胚珠膨大期5种内源激素的变化趋势一致,均为递增。各内源激素间的比例关系处于动态变化中,且在整个膨大期,热激处理下IAA/(ZT+CZR)、IAA/ABA和IAA/GA3均较对照25℃室温培养高;胚珠膨大率与内源激素IAA呈极显著正相关,相关系数达0.818,与ZT、CZR和ABA均呈显著正相关,与(ZT+CZR)/GA3呈显著负相关。

烟草未授粉子房离体培养诱导胚状体的影响因素研究

源于未授粉子房的雌性单倍体在烟草育种利用价值上优于源于花药或小孢子的雄性单倍体,开展烟草未授粉子房的离体培养对烟草单倍体育种具有重要意义。为了建立未授粉子房离体培养技术体系,分别以不同的杂种F1代为试材,采用HW培养基探讨了消毒方法、接种方式、接种密度、无机盐浓度、外源激素配比和琼脂浓度6个关键因素对胚状体诱导的影响。结果表明:花蕾不需剥开花瓣而直接放入0.1%升汞中浸泡8 min,剥开子房壁并横切子房后接种,每个125 mL三角瓶中接种2块子房,培养基中无机盐浓度额外增加60%、附加IAA 0.5 mg/L和6-BA 2 mg/L或者附加KT 2.0 mg/L和2,4-D 0.5 mg/L、琼脂浓度9 g/L有助于对胚状体的诱导。据此进一步完善了烟草未授粉子房离体培养过程中的技术参数。

多子房性状应用于杂种小麦的研究Ⅱ.多子房小麦的杂种优势与利用

利用 3个多子房小麦与 8个普通小麦品种杂交后获得的 2 4个杂种及其相应的亲本材料 ,对多子房小麦的杂种优势与利用进行了研究。结果表明 ,F1 各性状的杂种优势依次为株高 >穗粒数 >单株产量 >千粒重。单株产量有较强的杂种优势 ,1 8个组合超双亲均值 ,平均增产 32 .71 % ;1 2个组合有超标正优势 ,幅度为 3.41～ 42 .84%。多子房小麦杂种优势的主要表现是穗粒数增多 ,其生产应用还应注意加强对多子房小麦其它农艺性状的改良。

商陆科植物的子房结构观察

商陆科植物几种雌蕊类型的发育和结构进行了观察 ,结果表明 ,商陆科植物的心皮发生后 ,首先形成一个开放的心皮 ,开口在心皮的腹侧 ,开口的封闭都是由心皮边缘的表皮细胞及表皮下的几层细胞的分裂和生长完成 .单心皮雌蕊在子房封闭后不留任何痕迹 ,而多心皮雌蕊的心皮封闭后留下明显的封闭线 .封闭线由栅栏组织状组织构成 .栅栏组织状组织一直延伸到珠柄 ,在珠柄基部形成毛刷状结构 .离生心皮的隔在子房的生长过程中生长很少 ,心皮的大部分是分离的 ;合生心皮的隔在心皮的生长过程中与心皮同步生长 ,心皮始终是合生的 .成熟子房的结构基本相同 ,子房壁为薄壁细胞 ,除表皮以外其他细胞均无太大区别 .在子房外侧壁中均匀地分布有 3～ 5个维管束 ,隔中有一个维管束 .

水稻早熟多子房突变体fon5的遗传分析和基因定位

在水稻中花11的后代中筛选到1例花器官数目突变体,突变体主要表现为多雄蕊、多子房和早开花。遗传分析表明,该突变表型受1对隐性核基因控制。因为对花器官数目突变体曾有报道,如fon1、fon2、fon3和fon4,所以该突变体暂定名为fon5。利用fon5与籼稻品种华粳籼74构建的F2群体对fon5进行基因定位,发现其与第6染色体上的标记RM400和RM412连锁,遗传距离分别为10.5cM和1.6cM。通过在两标记间发展6个新的Indel标记,将该基因定位于116kb区间。

影响黄瓜未授粉子房培养胚发生因素的研究

以不同基因型黄瓜为试材，研究了子房发育时期、热激处理时间、TDZ和AgNO3对黄瓜未授粉子房培养过程中胚发生的影响。结果表明：处于开花前2～3d的子房胚发生率相对较高，达83．8％；在子房培养开始阶段进行35℃处理的胚发生率显著高于对照（0d），其中处理3d的效果最好；添加0．01～0．04mg·L^-1 TDZ的诱导培养基培养的胚发生率为20．0％～72．7％，其中添加0．04mg·L^-1 TDZ的胚发生效果较好；在诱导培养基中添加AgNO3可以提高胚发生率，同时能缩短胚出现的时间并提高胚产量。

多子房性状应用于杂种小麦的研究Ⅰ.多子房性状基因和细胞质效应

利用单体分析和多亲本常规杂交 ,研究了小麦多子房性状基因遗传传递规律和细胞质效应。结果表明 :小麦多子房性状有显、隐性两种基因类别 ,均位于 6B染色体 ;粘果山羊草和偏凸山羊草细胞质对 F1杂合显性多子房性状具有抑制表达作用。多子房小麦对 K、Ven型不育系有着不同程度的育性恢复能力 ,恢复度变幅为 4.82 %～ 48.67%。

桃树子房发育初期蔗糖含量及其相关酶活性的变化

【目的】研究桃树子房发育初期(从现蕾到花萎)蔗糖含量比率及蔗糖代谢相关酶比活力的变化规律。【方法】以‘京玉’和‘久保’两个桃品种为试材,研究桃树子房发育初期子房、韧皮部、叶片与花瓣中蔗糖、淀粉含量及蔗糖代谢关键酶——酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖磷酸合酶(SPS)和蔗糖合酶(SS)比活力的变化。【结果】两品种各部位中蔗糖积累规律较为相似,韧皮部蔗糖含量比率明显高于其它部位;总可溶性糖在韧皮部中的积累量除盛花期(第10D)低于花瓣中含量,其余时期均较其它部位高,但总体呈下降趋势。子房发育初期子房和叶片中淀粉含量不断升高,韧皮部中则呈下降趋势,花瓣中含量先降低后升高。AI、NI比活力变化对糖的积累作用不明显,SS合成方向、SPS比活力变化与蔗糖的积累量变化一致,SS分解方向比活力变化对两品种桃树糖的积累和转化作用较为突出。【结论】韧皮部是桃树子房发育初期碳水化合物主要的代谢"源",子房发育初期蔗糖代谢相关酶时空性表达受到某些相关因子的调控。

小麦花粉管通道及子房注射法转化Anti-TrxS基因

为了获得抗穗发芽转基因小麦材料,以13个小麦品种 品系 为受体材料,用花粉管通道及子房注射法进行了硫氧还蛋白反义基因 Anti-TrxS 的遗传转化.花粉管通道法共转化小花2036朵,收获T0代种子1616粒,结实率为79.4%,将T0代种子大田点播,获T1代苗1424株,出苗率为88.1%.对T1代株系叶片基因组DNA进行PCR检测,31个株系中有16个株系呈阳性反应.子房注射法共转化小花1206朵,收获种子89粒,结实率为7.4%,T1代共出苗41株,出苗率为46.1%,对郑新991T1代株系进行PCR检测,电泳结果呈阳性反应.

一个水稻双子房突变体的表型鉴定和遗传分析

在籼稻保持系C2与绵香5B的杂交后代中发现了一个植株显著矮化的双子房突变体。该突变体花器官主要表现为:雄蕊数目减少,雌蕊增加,双子房,多柱头,胚囊畸形,有雄蕊雌蕊化现象。由于其高度不育,突变性状采用杂合体保存,经5代连续自交,均表现稳定遗传特性。同时,杂合株系呈典型的3∶1分离比例,表明该突变性状由单隐性基因控制,并将该突变体暂时命名为TOR。

供体植株栽培季节和栽培方式对黄瓜未受精子房离体培养的影响

研究了供体植株栽培季节和栽培方式对黄瓜未受精子房离体培养的影响,结果表明,单倍体胚胎发生率和植株再生率在温度相对较高的6月下旬、7月上旬以及9月份明显高于其他季节;生长发育前期的供体植株单倍体再生率相对较高且稳定;随着供体植株逐渐衰老,其未受精子房培养的污染率不断上升;种植于塑料大棚内的供体材料比种植在露地中的供体材料具有更高的单倍体胚胎发生率和成苗率。

板栗果实生长与子房主要营养物质积累的关系研究

采用通径分析法研究了板栗果实生长与子房主要营养物质积累的关系。结果表明 ,正常栗总苞和坚果直径增长呈“双S”曲线 ,空苞栗总苞直径在花后 6 5d(7月下旬 )以前与正常栗没有明显差异 ,从花后 6 5d起一直比正常栗低 ;空苞栗坚果直径在花后 2 5d(6月中旬 )即开始比正常栗低 ,花后 45d(7月上旬 )后其增长停滞。空苞栗子房主要营养物质含量在花后 45d(7月上旬 )后开始下降或继续处于下降状态 ,而此时正常栗子房中主要营养物质呈上升趋势或稳定在高水平上 ,反映了幼胚发育期 (7月上旬至 8月上旬 )空苞栗子房营养供应严重不足 ,且空苞栗幼胚发育期子房中还原糖、淀粉、蛋白质、氨基酸和P、K素含量与正常栗差异较明显。正常栗总苞直径增长伴随着子房淀粉含量的显著积累和P素的消耗 (以淀粉积累的作用更大 ) ,而子房B素的消耗过程对总苞直径增长有加速作用 ;坚果直径的增长过程主要决定于子房淀粉的显著积累和蛋白质的消耗 (以淀粉积累的作用更大 ) ,而子房还原糖的积累和K素消耗对坚果直径增长具有加速作用 (以还原糖积累的作用更大 )。

子房注射法将Bt基因导入超甜玉米

用子房注射法将Bt基因导入超甜玉米品种粤甜3号,获得了1株整合有Bt基因的转基因植株,定名为ZT11,以发芽成苗的植株计算,基因转化效率达9.09%。经PCR和Southernblot分析,证明抗虫基因已经整合在超甜玉米基因组中,并且为单拷贝。T1代植株PCR检测结果表明,Bt基因能够在转基因后代中稳定遗传,基因分离符合1∶1的孟德尔遗传分离规律。

玉米基因转化的离体子房注射及其转基因植株的鉴定

用微量注射法对玉米 (ZeamaysL .)进行基因转化已获得成功 ,但这种方法是在田间进行的 ,污染较大 ,操作时劳动强度大 ,转化率低 ,而且受气温影响 ,气温下降则种子不能成熟。采用离体注射培养法 ,取下授粉 2 4h后的玉米雌穗 ,剥去苞叶 ,在超净工作台进行微量注射 ,然后切成小块放在培养瓶中 ,在光照培养箱内培养 ,3～ 4周可直接获得种子。这种方法克服了非离体培养的缺点 ,提高了转化效率。种子萌发后进行植株抗性筛选和分子检测 ,得到了具抗性的、PCR和Southern杂交结果均为阳性的转基因植株。

大百合子房的离体培养

以大百合的子房为外植体，研究了小鳞茎诱导及植株再生的方法。结果表明：BA和KT是影响大百合子房分化途径的关键因素，其浓度分别为0．1-1．0mg／L、2．0-4．0mg／L和高于4．0mg／L时，外植体分别分化为愈伤组织、芽和叶。外植体分化的基本培养基以N6、B5为佳。愈伤组织诱导小鳞茎的最佳培养基为MS＋0．1-0．5mg／LNAA＋2．5mg／LBA＋2．5mg／LKT＋10％蔗糖＋0．7％琼脂。在1／2MS＋3％蔗糖＋0．7％琼脂＋1％活性炭的生根培养基上，生根率为100％。炼苗一周后移栽，长势良好。