目的:克隆1,4-α-葡聚糖分支酶1(GBE1)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学以及差异表达分析。方法:根据家鸡转录组数据,利用PCR扩增GBE1的全长cDNA并进行生物信息学分析。使用qRT-PCR法检测基因在家鸡6个组织中的表达差异。结果:克隆得...目的:克隆1,4-α-葡聚糖分支酶1(GBE1)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学以及差异表达分析。方法:根据家鸡转录组数据,利用PCR扩增GBE1的全长cDNA并进行生物信息学分析。使用qRT-PCR法检测基因在家鸡6个组织中的表达差异。结果:克隆得到全长为2145 bp GBE1基因,开放阅读框(ORF)为2130 bp,编码709个氨基酸。GBE1蛋白相对分子质量为81.993,理论等电点6.25,稳定指数为35.40,平均亲水性值为-0.484,属于稳定酸性亲水蛋白;GBE1蛋白含有67个磷酸化位点,不存在跨膜区域与信号肽序列,主要定位在细胞质、细胞核、线粒体、胞液中;二级结构主要包括α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和延伸链,三级结构表明为单体蛋白;同源性分析表明,家鸡中GBE1蛋白氨基酸序列与珠鸡亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明,GBE1基因在家鸡心、肝、脾、肺、肾、鸡内金6个组织内均有表达,但在肝脏和鸡内金中的表达量显著高于其他脏器。结论:该结果为进一步探讨家鸡GBE1基因的功能及其对葡聚糖分支酶的调控机制积累了必要的研究基础。展开更多
通过线粒体DNA控制区的结构和多态性来研究中国家鸡和红色原鸡的遗传多态性与系统进化。测定14个中国地方鸡种和红色原鸡2个亚种的256个个体线粒体DNA控制区部分序列约560bp,结果表明,A、C、G、T这4种核苷酸的平均比例分别为25.∞%...通过线粒体DNA控制区的结构和多态性来研究中国家鸡和红色原鸡的遗传多态性与系统进化。测定14个中国地方鸡种和红色原鸡2个亚种的256个个体线粒体DNA控制区部分序列约560bp,结果表明,A、C、G、T这4种核苷酸的平均比例分别为25.∞%、37.40%、4.40%和33.20%。共发现44个变异位点,约占分析位点总数的7.86%,没有观测到插入/缺失,颠换和转换之比为0.13;共具有32种单倍型,9种为共享单倍型;16个群体内单倍型多样度从0到0.964,单倍型变异度总体为0.909±0.014,整体的平均核苷酸差异数为7.276,核苷酸多样度为1.851%。群体间核苷酸分歧度(Dxy)在0.747%~3.125%之间变化,核苷酸净遗传距离(Da)为0.015%~2.633%。16个群体表现出较高水平的遗传多态性,群体间表现出显著的遗传分化。群体遗传多态性和亲缘关系分析表明,一些中国家鸡的群体(如固始鸡和仙居鸡)起源于泰国红色原鸡Gallus gallu sgallus亚种,一些中国家鸡的群体(如茶花鸡和藏鸡等)起源于中国红色原鸡Gallus gallus spadiceus亚种,在一些中国地方鸡种还同时具有这2种红色原鸡的遗传贡献;认为中国家鸡起源于泰国或单纯起源于中国的观点都是不全面的。展开更多
文摘目的:克隆1,4-α-葡聚糖分支酶1(GBE1)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学以及差异表达分析。方法:根据家鸡转录组数据,利用PCR扩增GBE1的全长cDNA并进行生物信息学分析。使用qRT-PCR法检测基因在家鸡6个组织中的表达差异。结果:克隆得到全长为2145 bp GBE1基因,开放阅读框(ORF)为2130 bp,编码709个氨基酸。GBE1蛋白相对分子质量为81.993,理论等电点6.25,稳定指数为35.40,平均亲水性值为-0.484,属于稳定酸性亲水蛋白;GBE1蛋白含有67个磷酸化位点,不存在跨膜区域与信号肽序列,主要定位在细胞质、细胞核、线粒体、胞液中;二级结构主要包括α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和延伸链,三级结构表明为单体蛋白;同源性分析表明,家鸡中GBE1蛋白氨基酸序列与珠鸡亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明,GBE1基因在家鸡心、肝、脾、肺、肾、鸡内金6个组织内均有表达,但在肝脏和鸡内金中的表达量显著高于其他脏器。结论:该结果为进一步探讨家鸡GBE1基因的功能及其对葡聚糖分支酶的调控机制积累了必要的研究基础。
文摘通过线粒体DNA控制区的结构和多态性来研究中国家鸡和红色原鸡的遗传多态性与系统进化。测定14个中国地方鸡种和红色原鸡2个亚种的256个个体线粒体DNA控制区部分序列约560bp,结果表明,A、C、G、T这4种核苷酸的平均比例分别为25.∞%、37.40%、4.40%和33.20%。共发现44个变异位点,约占分析位点总数的7.86%,没有观测到插入/缺失,颠换和转换之比为0.13;共具有32种单倍型,9种为共享单倍型;16个群体内单倍型多样度从0到0.964,单倍型变异度总体为0.909±0.014,整体的平均核苷酸差异数为7.276,核苷酸多样度为1.851%。群体间核苷酸分歧度(Dxy)在0.747%~3.125%之间变化,核苷酸净遗传距离(Da)为0.015%~2.633%。16个群体表现出较高水平的遗传多态性,群体间表现出显著的遗传分化。群体遗传多态性和亲缘关系分析表明,一些中国家鸡的群体(如固始鸡和仙居鸡)起源于泰国红色原鸡Gallus gallu sgallus亚种,一些中国家鸡的群体(如茶花鸡和藏鸡等)起源于中国红色原鸡Gallus gallus spadiceus亚种,在一些中国地方鸡种还同时具有这2种红色原鸡的遗传贡献;认为中国家鸡起源于泰国或单纯起源于中国的观点都是不全面的。