高富硒酵母菌的筛选鉴定及其产香气物质成分分析

结合耐硒法和红硒法从安康市平利县富硒土壤和建始县关口葡萄样品中筛选具有高富硒能力的酵母菌,通过形态学观察、生理生化试验和分子生物学技术对菌株进行鉴定,同时对其生长特性进行研究,并利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(HS-SPME-GC-MS)技术对该菌株富硒发酵液中的香气成分进行分析。结果表明,从土壤和葡萄样品中筛选鉴定出一株具有高富硒能力的戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii)G-1,其在含有50 mg/L Na2SeO3的YPD液体培养基中培养36 h后,硒含量为(1.64±0.034)mg/g,生物量为(4.80±0.034)g/L。该菌株可耐受葡萄糖200 g/L、SO2300 mg/L,乙醇体积分数6%。从戴尔有孢圆酵母G-1发酵液中共检出33种挥发性香气物质,包括醇类8种、酯类10种、酸类3种、醛酮类5种、烷烃类3种以及其他类4种。与未加硒发酵液相比,富硒发酵液中增加了17种独特的挥发性化合物(如苯乙醇、9-十六碳烯酸乙酯、壬酸等),丰富了发酵液的花香、酯香和蜡香。

姜黄素联合富硒酵母对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:探讨姜黄素联合富硒酵母对急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将60只C57B6L/J小鼠随机分为空白组、模型组、姜黄素组(33.33 mg·kg^(-1) bw)、富硒酵母组(7.50 mg·kg^(-1) bw)和联合组(姜黄素33.33 mg·kg^(-1) bw+富硒酵母7.50 mg·kg^(-1) bw),每组12只;干预30 d后,一次性灌胃50%乙醇溶液(12 mL·kg^(-1) bw)建立急性酒精性肝损伤模型;观察小鼠体重、摄食、行为变化;检测小鼠肝脏指数与丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和甘油三酯(Triglyceride,TG)水平;油红染色观察小鼠肝脏组织病理学变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠表现出肝脏肿大、肝细胞中脂滴大量堆积病理损伤,肝脏组织MDA和TG水平显著升高(P<0.05);姜黄素联合富硒酵母能显著降低小鼠肝脏中MDA和TG表达,提高GSH水平(P<0.05),减轻小鼠肝脏脂肪沉积。结论:姜黄素联合富硒酵母能够改善急性酒精灌胃诱导的肝脏脂质异常堆积,减轻氧化应激水平,对急性酒精性肝损伤具有良好的保护作用。

富硒酵母菌及其富硒机理研究进展

硒是机体生长发育过程中必需的微量元素之一。与无机硒相比,有机硒安全性高,易被机体吸收且补硒效率高。富硒酵母菌可以将无机硒转化为具有高营养价值的有机硒,是富硒益生菌的主要代表之一。本文综述了硒的分类及其吸收机制,并探讨富硒酵母菌的特性、富硒酵母菌中硒的富集部位、存在形式及其富集机理,以期为培育高富硒特性的酵母菌提供研究思路。

海洋源富硒酵母的分离鉴定及其发酵工艺优化

目的:从海洋样品中分离、筛选及鉴定具有富硒功能的酵母菌,并探究发酵工艺对菌株富硒效果的影响。方法:结合耐硒法和红硒法从海南省东寨港红树林中分离纯化筛选出具有高富硒能力的海洋源微生物,通过形态学、生理生化和分子生物学方法对菌株进行鉴定。采用3,3'-二氨基联苯胺盐酸盐法对菌株的硒含量进行定量测定,最后经单因素实验对菌株的发酵工艺进行优化。结果:从海洋源样品中筛选鉴定出一株安全的具有富硒功能的发酵性拉茜斯酵母Lachancea fermentati HN-10,该酵母在接种量为5%、初始pH为6、发酵温度为22℃、发酵转速为180 r/min、发酵时间为48 h、硒添加量为20μg/mL的最优发酵工艺下生物量可达4.52 g/L,富硒量可达1.57 mg/g,对应的硒转化率可达35.43%。结论:海洋源L.fermentati HN-10具有潜在的富硒食品开发应用前景。

富硒酵母对仔猪生长性能、血清生化指标和肠道形态的影响

文章旨在探究富硒酵母对仔猪生长性能、血清生化指标和肠道形态的影响。试验将600头(8.05±0.23)kg的健康仔猪分为4组,每组10个重复,每个重复15头仔猪,试验为期28 d。试验日粮分别添加0、0.1、0.2和0.4 mg/kg的富硒酵母。结果表明,与对照组相比,补充0.2和0.4 mg/kg的富硒酵母组仔猪FBW显著提高3.44%和4.03%(P<0.05);ADG显著提高8.14%和11.33%(P<0.05);F/G显著降低7.16%和9.66%(P<0.05);此外,富硒酵母对IBW和ADFI均无显著影响(P>0.05)。0.2和0.4 mg/kg的富硒酵母组仔猪血清IgA、IgG和IL-1β含量显著提高(P<0.05);0.4 mg/kg的富硒酵母组仔猪血清IgM含量显著提高(P<0.05);0.2和0.4 mg/kg的富硒酵母组仔猪血清GSH-Px活性及T-AOC能力显著提高(P<0.05);0.2和0.4 mg/kg的富硒酵母组仔猪血清H2O2含量显著降低(P<0.05);此外,富硒酵母对仔猪血清TNF-α和NO含量、SOD活性均无显著影响(P>0.05)。0.2和0.4 mg/kg富硒酵母组仔猪空肠和回肠绒毛高度显著提高(P<0.05);0.2 mg/kg富硒酵母组仔猪十二指肠隐窝深度显著降低(P<0.05);0.2和0.4 mg/kg富硒酵母组仔猪十二指肠和回肠V/C值显著提高(P<0.05);0.2 mg/kg富硒酵母组仔猪空肠V/C值显著提高(P<0.05)。综上所述,综合本试验检测各指标,富硒酵母最适添加量为0.2 mg/kg。

富硒酵母植物甾醇酯软胶囊辅助降血脂功能研究

为研究富硒酵母植物甾醇酯软胶囊辅助降血脂的效果,开展人体试食试验。本研究有效受试者104例,试食组58例,对照组56例。试食组每日服用富硒酵母植物甾醇酯软胶囊,对照组服用安慰剂。连续服用60天,检测相关指标。试食组前后比较,血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇有显著性差异(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇无显著性差异(P>0.05)。试验后,两组受试者甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇组间比较,均有显著性差异(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇组间比较无显善性差异(P>0.05)。试验期间未见与受试品或安慰剂有关的不良反应,并且受试者的安全性检查指标均未见明显变化或异常现象。根据辅助降血脂功能评价方法判定标准,认为富硒酵母植物醇酯软胶囊具有辅助降血脂功能。

富硒酵母功能作用研究进展及法规现状

富硒酵母是利用酵母开发出来的一种有机硒源,在健康支持和人体的各种生理活动中都扮演着至关重要的角色,如预防肿瘤、降三高(高血压、高血脂、高血糖)、提高机体免疫力。目前多国官方已经批准富硒酵母作为特殊医学用途食品硒源。本文将对富硒酵母功能作用研究进展以及在国内外特殊医学用途配方食品中应用的法规现状进行系统的梳理和分析,希望对我国的特医食品发展有一定启示和借鉴意义。

富硒酵母中硒含量测定的不确定度评定

研究了影响富硒酵母经硝酸微波消解后通过电感耦合等离子体质谱仪测定的总硒含量的不确定度来源,并对其进行定量计算和比较分析。确定了影响总硒结果的相对标准不确定度以及扩展不确定度。结果表明:微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定富硒酵母中硒的不确定度来源主要是三个方面,即标准曲线系列溶液的配制及标准曲线的线性拟合、样品硝酸微波消解前处理和仪器测定重复性,其相对标准不确定度分别为0.01175、0.01001、0.009488。当称样量为0.2073 g时,硒含量为2130 mg/kg,k=2(95%置信度),扩展不确定度为80 mg/kg,测量结果可表示为(2130±80)mg/kg。

富硒酵母的功能及其在动物生产中应用的研究进展

与无机硒相比,有机硒和纳米硒具有毒性小、生物活性高、抗氧化性强等优点。酿酒酵母为主的益生菌酵母可以用作烘焙、酿酒、饲料添加剂等。利用酵母和硒元素所开发的富硒酵母可作为动物的营养强化剂,具有较高的利用率,能够解决动物缺硒的问题,还可以提高动物的免疫功能。因此,富硒酵母是目前较为理想的硒源,可作为替抗产品在动物生产中应用。文章综述了富硒酵母的优势、种类、功能及其在动物生产中应用的研究进展,有望进一步解决动物因缺硒而引发的疾病问题。

富硒酵母姜黄素组合物对小鼠酒精性肝损伤的研究

目的:观察姜黄素、富硒酵母和姜黄素联合富硒酵母组对酒精中毒小鼠的保护作用。方法:将喂养的小鼠均匀分为空白组、模型组、姜黄素组、富硒酵母组和姜黄素联合富硒酵母组,连续灌胃30 d,观察小鼠肝损伤情况并检测甘油三酯(Triglyceride,TG)、丙二醛(Malonaldehyde,MDA)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)等指标。结果:与模型组相比,姜黄素组及姜黄素联合富硒酵母组小鼠肝脏指数下降,且差异具有显著性;各剂量组小鼠肝脏MDA水平明显下降,急性酒精灌胃后,姜黄素组、富硒酵母组及姜黄素联合富硒酵母组小鼠的肝脏TG水平较模型组显著降低,具有显著性差异;各样品组小鼠肝脏病理得分有所下降,脂肪面积占比显著降低,具有显著性差异。结论:姜黄素和富硒酵母对酒精导致的肝损伤具有协同作用,补充姜黄素和富硒酵母能通过对抗氧化应激和脂质过氧化损伤,有效地改善酒精导致的肝损伤。

富硒酵母饲喂生长肥育猪对猪肉品质的影响

随着人们对于食品安全和营养健康的关注程度的提高,猪肉品质成为了消费者非常关注的话题。其中,猪肉富含硒元素,对于人体的健康具有重要意义。富硒饲料是提高畜禽硒含量的有效方法之一,而富硒酵母则是一种理想的富硒饲料,具有较高的生物利用率、安全性和稳定性,可以为猪肉生产提供一种新的营养改良方法。同时,富硒酵母对育肥生猪肉品质产生积极的影响,可以提高猪肉硒含量,改善人体健康水平提供科学依据。

丁酸梭菌与富硒酵母对蛋鸡生产性能及粪便菌群结构的影响

【目的】探究混合饲喂丁酸梭菌(Clostridium butyricum)和富硒酵母对蛋鸡生产性能和粪便菌群结构的影响,为提升蛋鸡生产性能和经济价值提供参考依据。【方法】以海兰褐蛋鸡为试验动物,对照组(CK)饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加丁酸梭菌类和富硒酵母(T1,添加1.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母;T2,添加2.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母;T3,添加3.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母)。预试期7 d,正试期28 d,期间测定蛋鸡的产蛋率、平均日采食量、平均蛋重、料蛋比和死淘率,试验结束时测定蛋形指数、蛋壳厚度、蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位和鸡蛋硒含量,并收集各组蛋鸡粪便,通过生物信息学方法分析其菌群结构。【结果】在生产性能方面,与CK相比,T1的产蛋率显著提高(P<0.05,下同),平均蛋重无显著差异(P>0.05,下同),平均日采食量和料蛋比显著降低,其他各组的平均日采食量和料蛋比略有下降;T1和T3的死淘率有所降低;各组的蛋白高度、哈氏单位和蛋形指数差异不显著;T1和T2的蛋壳厚度和鸡蛋硒含量均显著提高,且均以T1最高。在粪便菌群结构方面,与CK相比,T1和T2的ACE指数和Chao1指数升高,但差异不显著;T1的Shannon指数降低,Simpson指数升高,但差异均不显著。T1粪便的菌群丰富度和多样性均呈上升趋势;在门分类水平,CK的优势菌群为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes),占比分别为74.02%、9.14%和7.03%,试验组的优势菌群均为厚壁菌门和变形菌门,其中,T1的变形菌门占比显著高于CK,厚壁菌门占比与CK差异不显著;在属分类水平,CK和试验组的优势菌群均为乳杆菌属(Lactobacillus),其占比间均无显著差异;T1和T2的梭形杆菌属(Lysinibacillus)占比均显著高于CK,其他属组成的菌属与CK均无显著差异。【结论】在基础日粮中添加丁酸梭菌和富硒酵母能提高蛋鸡的部分生产性能,且有利于促进蛋鸡肠道优良菌群结构形成,以添加1.0 g/kg丁酸梭菌和0.2 mg/kg富硒酵母的饲喂效果最佳。

富硒酵母和人参粉组合物增强免疫力功能的研究

目的:评价富硒酵母和人参粉的组合物增强小鼠免疫力功能。方法:采用3个不同剂量组的富硒酵母和人参粉组合物对小鼠灌胃,分别为人体推荐日摄入量的10倍、20倍、30倍,即0.153 g/kg BW、0.306 g/kg BW、0.459 g/kg BW,检测该组合物对小鼠各项免疫功能的影响。结果:经口给予小鼠不同剂量的受试物30 d,高、中、低3个剂量组对小鼠体重增长及细胞免疫功能无影响;中、高剂量组能显著提升体液免疫和单核-巨噬细胞吞噬功能(P <0.05),高剂量组能提升NK细胞活性(P <0.05)。结论:富硒酵母和人参粉的组合物对小鼠有免疫增强功能。

液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定富硒酵母中硒的形态

建立了富硒酵母中硒酸Se（Ⅵ）、亚硒酸Se（Ⅵ）、硒代蛋氨酸（SeMet）和硒甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys）4种硒形态的高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱（HPLC-HG-AFS）分析方法。样品采用蛋白酶和胰蛋白酶酶解提取,20 mmol/L（NH4）2HPO4为流动相,经PRP-X100阴离子交换色谱柱分离后HG-AFS测定。结果显示,4种硒形态标准曲线的线性关系良好（R^2≥0.9995）,方法检出限为0.5~5.0μg/kg,平均回收率为82.5%~101.2%,日内相对标准偏差≤8.6%,日间相对标准偏差≤14.5%。本方法前处理简单、灵敏度高、设备便宜、运行费用低廉,适用于富硒饲料产品中硒的形态分析。

高生物量富硒酵母的选育及培养条件初步优化

通过筛选、单倍体分离、诱变和原生质体融合 ,从融合子中选育了一株高生物量富硒酵母菌株 (编号为ZFF_2 8) ,其细胞硒总含量分别是原始亲株ZY_6 7和ZY_198的 2 8倍和 2 0倍。通过单因素实验和正交试验设计 ,确定了优化培养条件 :6 %糖浓度的蔗糖糖蜜 ,添加 0 5 % (NH4 ) 2 SO4 、0 1%H3PO4 、6 0 μg mLSe,pH6 0～ 6 5 ,装液量5 0mL 2 5 0mL三角瓶 ,接种量 10 % ,培养时间 2 5h。在优化培养条件下 ,菌株ZFF_2 8的生物量可达 8 2g L ,细胞中硒的含量达 2 0 5 0 μg g ,硒总含量达到了 16 810 μg L ,是培养条件优化前的 1 3倍。细胞硒含量的 91%为有机硒。

富硒酵母的分离鉴定及富硒条件的优化

富硒酵母生产发酵食品是补充硒元素的有效方法,以实验室保存的酵母菌为材料,通过选择培养基平板稀释法,分离纯化得到四株富硒酵母,经形态学和分子生物学鉴定,初步鉴定菌株Z4、Z5、Z7、Z9均为库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。通过对比四株菌的生长曲线及富硒能力,发现Z5菌株生长状况最好,选取接种量、碳源(葡萄糖)和氮源(蛋白胨)添加量作为单一因素,通过单因素试验和正交试验,探究各影响因素对菌株Z5富硒能力的影响。结果表明,Z5菌株的最佳富硒发酵条件为接种量10%,葡萄糖2.4%,蛋白胨1.8%。在此最佳条件下,菌株Z5生物量为9.63 g/L,总硒含量可达到862μg/g。

氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒酵母中的有机硒和无机硒

建立了氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒酵母中硒的分析方法。研究了仪器的工作条件、试剂对硒测定的影响；探讨了消化试剂对样品消化的影响和共存离子的干扰及消除。在优化的工作条件下，硒的检出限为0．078μg／L，相对标准偏差为0．45％，线性范围为0～100μg／L。应用该方法检测了不同富硒酵母中的总硒含量为1．40～3．20mg／g其中，有机硒含量为1．30～2．97mg／g，加标回收率为95．4%～104．3％。

富硒酵母对免疫功能低下小鼠DTH的影响

本文采用环磷酰胺(Cy)诱导免疫功能低下的DTH模型,观察了富硒酵母对DTH的影响.结果发现,Sey(30,60,90mg·kg^(-1)·d^(-1)×6d,ig)对Cy抑制的小鼠DTH有拮抗作用,并能使DTH小鼠低下的脾淋巴细胞ConA增殖反应恢复正常以上;两个较低剂量对Cy所致DTH小鼠免疫器官重量的减轻有抑制作用;两个较高剂量对DTH小鼠低下的脾淋巴细胞LPS增殖反有不同程度的恢复.提示Sey对淋巴细胞的功能有促进作用.

高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸

建立了高效液相色谱法测定富硒酵母中硒代蛋氨酸的分析方法。采用酶解提取法提取富硒酵母样品中的硒代蛋氨酸,丹磺酰氯柱前衍生,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)分离,以10 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(含4%N,N-二甲基甲酰胺,pH=6.55)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,荧光检测(激发波长:320 nm;发射波长:523nm)。硒代蛋氨酸的检出限为(S/N=3)1μg/L,定量限为(S/N=10)5μg/L。在1 mg/L^50 mg/L范围内的线性关系良好(R≥0.999 6)。加标回收率在91.12%~107.83%,方法相对标准偏差<1.2%。本方法具有专属性好,灵敏度高,适用于富硒酵母原料及相关产品中的硒代蛋氨酸的定量测定。

液相色谱-原子荧光光谱联用(HPLC-HG-AFS)技术对饲料及富硒酵母中硒形态的分析

实验采用液相色谱一原子荧光联用技术对饲料及富硒酵母中硒形态进行了分析。优化了色谱分离条件及原子荧光光谱检测参数。在实验条件下，有机硒的色谱分离条件：以C。。色谱柱为分离柱，0．1％乙酸溶液和甲醇作为流动相。硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的最佳分离梯度洗脱条件：在时间梯度为0、3、5、15min时，甲醇洗脱液的浓度梯度为5％、0．5％、15％、5％；原子荧光光谱检测条件：负高压300V；灯电流80mA；原子化器高度8mm；载气流量400ml／min；屏蔽气流量900ml／min；读数时间12．0s；延迟时间1．0s。以此条件对收集的肉鸡饲料样品及富硒酵母进行检测，结果表明在肉鸡饲料中所含的硒均以无机硒形态存在，且90％以上都是以亚硒酸盐的形式存在；富硒酵母中Se（IV）、Se（VI）、Se-Cys以及Se-Met含量分别占样品总硒含量的2．6％、14．6％、31．1％和51．7％，方法平均回收率为70％-86．5％。