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Aβ42寡聚体对突触内外谷氨酸受体表达的影响
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作者 陈秋旋 贺娅旎 +3 位作者 刘玉香 冯一 张珂珂 魏伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1025-1032,共8页
目的:通过体内外实验探讨阿尔茨海默病关键发病分子β-淀粉样蛋白42寡聚体(Aβ42Os)作用下离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚基(NR2A、NR2B和NR1)和代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在突触内外的表达分布变化。方法:(1)用不同... 目的:通过体内外实验探讨阿尔茨海默病关键发病分子β-淀粉样蛋白42寡聚体(Aβ42Os)作用下离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚基(NR2A、NR2B和NR1)和代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在突触内外的表达分布变化。方法:(1)用不同浓度的Aβ42Os处理乳小鼠原代神经元,Western blot和免疫荧光染色检测原代神经元中mGluR5和NMDAR的表达和分布情况。(2)在C57BL/6小鼠侧脑室立体定位注射不同浓度的Aβ42Os,Western blot检测海马组织中mGluR5和NMDAR在突触内外的蛋白水平,以及mGluR5下游磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/AKT)信号通路相关蛋白、钙信号下游通路相关蛋白和突触相关蛋白的表达。结果:(1)高浓度Aβ42Os处理原代小鼠神经元增加mGluR5表达(P<0.01),减少NR2A、NR2B和NR1表达(P<0.01);引起mGluR5膜表面聚集,而使NR2A、NR2B和NR1膜表面表达分布减少。(2)高浓度Aβ42Os引起小鼠海马组织中突触mGluR5表达增加(P<0.01),NR2A(P<0.05)和NR2B(P<0.01)表达减少,突触外NR2B表达增加(P<0.01);抑制PI3K表达及AKT和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化,过度激活钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶IIα(CaMKIIα);引起突触后致密蛋白95、亲棘蛋白(spinophilin)、突触小泡蛋白(synaptophysin)和微管相关蛋白2表达减少(P<0.01)。结论:(1)高浓度Aβ42Os引起神经元突触mGluR5过度聚集,NR2A、NR2B和NR1表达减少,而突触外NR2B表达增加。(2)高浓度Aβ42Os抑制PI3K/AKT和ERK信号通路,过度激活CaMKIIα通路,损伤突触结构。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白42寡聚体 代谢型谷氨酸受体5 N-甲基-D-天冬氨酸受体 突触
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β淀粉样蛋白42寡聚体诱导神经元毒性和阿尔茨海默病病理形成
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作者 邓佳君 陶倩 +3 位作者 刘斌 罗衍愈 朱仪 岳峰 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期562-566,共5页
目的探究β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体对神经元毒性的作用及诱导产生类似阿尔茨海默病(AD)病理的机制。方法采用Western blot检测和透射电子显微镜对合成的Aβ_(42)寡聚体进行鉴定。为评估Aβ_(42)寡聚体的影响,使用2,5-二苯基四氮唑溴盐... 目的探究β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体对神经元毒性的作用及诱导产生类似阿尔茨海默病(AD)病理的机制。方法采用Western blot检测和透射电子显微镜对合成的Aβ_(42)寡聚体进行鉴定。为评估Aβ_(42)寡聚体的影响,使用2,5-二苯基四氮唑溴盐检测细胞活性,将10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与人神经母细胞瘤系(SH-SY5Y)细胞共孵育12h和24h,与人胚胎干细胞(hESC)衍生的谷氨酸能神经元共孵育24h、48h和96h,同时设立相应对照组。原位末端标记法检测谷氨酸能神经元凋亡情况;免疫荧光染色法检测AD相关病理Aβ斑块及p-tau病理变化。结果Western blot显示,Aβ_(42)寡聚体样品中观察到单体和小分子量聚集体(<30000)。透射电子显微镜成像显示,Aβ_(42)寡聚体主要呈圆球形颗粒状。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与SH-SY5Y细胞共孵育12h、24h,细胞存活率显著低于其对照组[(70.89±2.54)%vs(100.00±2.02)%,(52.63±3.37)%vs(100.00±2.80)%,P<0.05]。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h、48h和96h,细胞存活率显著低于其对照组(P<0.05)。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育48h、96h,凋亡率显著高于其对照组[(1.44±0.31)%vs(1.00±0.38)%,(1.75±0.64)%vs(1.00±0.31)%,P<0.05]。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h、48h、96h,均产生呈圆形颗粒状的Aβ斑块阳性信号,其对照组均无Aβ斑块阳性信号。10μmol/L的Aβ_(42)寡聚体与谷氨酸能神经元共孵育24h,细胞在Thr231位点处产生tau过度磷酸化,Aβ_(42)寡聚体组平均荧光强度显著高于其对照组(P<0.05)。结论Aβ_(42)寡聚体对SH-SY5Y细胞和谷氨酸能神经元均具有毒性,可以诱导谷氨酸能神经元产生AD样病理。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样β肽类 神经元 细胞凋亡 β淀粉样蛋白(Aβ)42寡聚体
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脑脊液α-突触核蛋白寡聚体与髋关节置换术后认知功能障碍的关系
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作者 李明 彭青梅 +1 位作者 杨思敏 朱敏 《川北医学院学报》 CAS 2024年第6期742-745,共4页
目的:探讨脑脊液中α-突触核蛋白寡聚体(o-α-syn)与老年患者髋关节置换术后认知功能障碍(POCD)的关系。方法:选取择期行髋关节置换术的136例老年患者作为研究对象,患者拟行蛛网膜下隙阻滞,抽取脑脊液2 mL。记录患者手术时长、体质量指... 目的:探讨脑脊液中α-突触核蛋白寡聚体(o-α-syn)与老年患者髋关节置换术后认知功能障碍(POCD)的关系。方法:选取择期行髋关节置换术的136例老年患者作为研究对象,患者拟行蛛网膜下隙阻滞,抽取脑脊液2 mL。记录患者手术时长、体质量指数、年龄、性别、术中出血量等。分别于术前1 d、术后7 d评估认知功能。将术后发生POCD为POCD组,采用1∶1配对,从未发生POCD的患者中选取病例数,为Non-POCD组。采用ELISA法测量两组脑脊液中的总α-突触核蛋白(t-α-syn)、o-α-syn、Aβ40、Aβ42的浓度。结果:发生POCD有17例,POCD发生率为16%。两组患者受教育年限、性别、年龄、BMI、术前MMSE评分、术中失血量和手术时间均无统计学差异。与Non-POCD组比较,POCD组MMSE、DST2、CDT评分降低(P<0.05);与Non-POCD组比较,POCD组t-α-syn、o-α-syn、Aβ40、Aβ42均显著升高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,t-α-syn(OR=1.003,95%CI:1.000~1.006,P<0.05)、o-α-syn (OR=1.245,95%CI:1.020~1.520,P<0.05)、Aβ40(OR=1.001,95%CI:1.000~1.002,P<0.05)、Aβ42(OR=1.024,95%CI:1.006~1.043,P<0.05)均是老年人髋关节置换术后认知功能障碍的危险因素。ROC曲线分析提示,o-α-syn是预测POCD曲线下面积为0.749(P<0.05)。结论:脑脊液中o-α-syn浓度升高是老年髋关节置换患者术后发生认知功能障碍的独立危险因素,是预测POCD的一个良好的指标。 展开更多
关键词 髋关节置换 脑脊液 α-突触核蛋白寡聚体 术后认知功能障碍
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氨溴索对α-突触核蛋白寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5损伤的预防作用观察
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作者 郑淑荣 杨巍巍 +1 位作者 高华 杜婷婷 《山东医药》 CAS 2023年第21期1-4,共4页
目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,... 目的观察氨溴索(AMB)对α-突触核蛋白(α-syn)寡聚体诱导鼠多巴胺能神经元细胞株MES23.5(帕金森病模型细胞)损伤的预防作用。方法将MES23.5细胞分为A、B、C、D组4组,A组细胞加入二甲基亚砜,B组细胞加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体,C组细胞加入终浓度为100μmol/L的AMB,D组细胞先加入终浓度为100μmol/L的AMB预处理12 h后再加入终浓度为5μmol/L的α-syn寡聚体。各组继续培养24 h后,采用ELISA法测算细胞β-葡萄糖脑苷脂酶(GCase)活性和α-syn寡聚体水平,采用MTT法检测细胞增殖能力(以OD_(450)值表示),使用JC-1探针检测线粒体膜电位,采用Western Blotting法检测酪氨酸羟化酶(TH)磷酸化水平。结果B组细胞GCase活性均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞GCase活性均高于其余三组(P均<0.05)。B组细胞中α-syn寡聚体水平均高于其余三组(P均<0.05),C组细胞中α-syn寡聚体水平均低于其余三组(P均<0.05)。与A组相比,B组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05),D组细胞培养72 h的OD_(450)值降低(P<0.05);与B组相比,C、D组细胞培养24、48、72 h的OD_(450)值均升高(P均<0.05);与C组相比,D组细胞培养24、72 h的OD_(450)值均降低(P均<0.05)。B组细胞线粒体膜电位均低于其余三组(P均<0.05),D组细胞线粒体膜电位均低于A、C组(P均<0.05)。B组细胞TH磷酸化水平均低于其余三组(P均<0.05),C组细胞TH磷酸化水平均高于其余三组(P均<0.05)。结论AMB可通过升高GCase活性、降低α-syn寡聚体水平,恢复MES23.5细胞增殖能力、线粒体膜电位、TH磷酸化水平,对α-syn寡聚体诱导的细胞损伤起预防作用。 展开更多
关键词 帕金森病 氨溴索 β-葡萄糖脑苷脂酶 α-突触核蛋白寡聚体 鼠多巴胺能神经元细胞株
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阿尔茨海默病β淀粉样蛋白沉积斑块和寡聚体致病假说及其面临的挑战 被引量:1
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作者 苏梓南 李凯 张根发 《中华老年多器官疾病杂志》 2023年第2期157-160,共4页
阿尔茨海默病作为当下发病率较高、影响范围广泛、致病机制复杂的神经退行性疾病之一,在近40年内一直是学术界重点研究的对象。关于阿尔茨海默病关键蛋白β淀粉样蛋白及其前体蛋白(APP),则先后形成了沉积斑块致病假说和寡聚体致病假说... 阿尔茨海默病作为当下发病率较高、影响范围广泛、致病机制复杂的神经退行性疾病之一,在近40年内一直是学术界重点研究的对象。关于阿尔茨海默病关键蛋白β淀粉样蛋白及其前体蛋白(APP),则先后形成了沉积斑块致病假说和寡聚体致病假说。然而近年来随着研究技术的发展,β淀粉样蛋白沉积斑块和β淀粉样蛋白寡聚体之间的关联性的发现,使得两种致病假说的相关性提升。本文综述了近年来国际学术界对于β淀粉样蛋白及其前体蛋白致病机制的研究结果,对两种假说进行了分析,并对未来阿尔茨海默病致病机制相关研究可能出现的新方向、新热点提出展望。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 沉积斑块 寡聚体
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Aβ寡聚体与阿尔茨海默病研究进展 被引量:1
6
作者 王国庆(综述) 曹云鹏(审校) 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2023年第7期579-583,共5页
阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种以记忆损害为主要表现渐进性发展的神经退行性疾病,随着老龄化社会发展发病率呈上升趋势,带来巨大的社会经济负担。近年来的研究使AD经典发病机制淀粉样蛋白级联假说受到了挑战,Aβ寡聚... 阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种以记忆损害为主要表现渐进性发展的神经退行性疾病,随着老龄化社会发展发病率呈上升趋势,带来巨大的社会经济负担。近年来的研究使AD经典发病机制淀粉样蛋白级联假说受到了挑战,Aβ寡聚体(Aβoligomers,AβOs)的毒性作用得到了一致性的认可,可能是AD发病的触发因素。关于Aβ寡聚体具体来源、结构和致病机制的认识还不充分,可能不同类型寡聚体致病毒性不一致,作用机制有差别。本文综述了对Aβ寡聚体的新近认知,以及它们的结构特点和致病作用,以求更好的理解Aβ寡聚体和AD的关系,为之后的研究提供可能的方向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样蛋白 寡聚体 神经毒性 单克隆抗体
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基于支持向量机的蛋白质同源寡聚体分类研究 被引量:15
7
作者 张绍武 潘泉 +1 位作者 陈润生 张洪才 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期879-883,共5页
基于支持向量机和贝叶斯方法 ,从蛋白质一级序列出发对蛋白质同源二聚体、同源三聚体、同源四聚体、同源六聚体进行分类研究 ,结果表明 :基于支持向量机 ,采用“一对多”和“一对一”策略 ,其分类总精度分别为 77 3 6%和 93 43 % ,分... 基于支持向量机和贝叶斯方法 ,从蛋白质一级序列出发对蛋白质同源二聚体、同源三聚体、同源四聚体、同源六聚体进行分类研究 ,结果表明 :基于支持向量机 ,采用“一对多”和“一对一”策略 ,其分类总精度分别为 77 3 6%和 93 43 % ,分别比基于贝叶斯协方差判别法的分类总精度 50 64%提高 2 6 72和 42 79个百分点 .从而说明支持向量机可用于蛋白质同源寡聚体分类 ,且是一种非常有效的方法 .对于多类蛋白质同源寡聚体分类 ,基于相同的机器学习方法 (如支持向量机 ) ,采用“一对一”策略比“一对多”效果好 . 展开更多
关键词 支持向量机 蛋白质 同源寡聚体 分类 贝叶斯协方差判别法
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基于氨基酸组成分布的蛋白质同源寡聚体分类研究 被引量:9
8
作者 施建宇 潘泉 +1 位作者 张绍武 程咏梅 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-56,共8页
基于一种新的特征提取方法——氨基酸组成分布,使用支持向量机作为成员分类器,采用“一对一”的多类分类策略,从蛋白质一级序列对四类同源寡聚体进行分类研究。结果表明,在10-CV检验下,基于氨基酸组成分布,其总分类精度和精度指数分别... 基于一种新的特征提取方法——氨基酸组成分布,使用支持向量机作为成员分类器,采用“一对一”的多类分类策略,从蛋白质一级序列对四类同源寡聚体进行分类研究。结果表明,在10-CV检验下,基于氨基酸组成分布,其总分类精度和精度指数分别达到了86.22%和67.12%,比基于氨基酸组成成分的传统特征提取方法分别提高了5.74和10.03个百分点,比二肽组成成分特征提取方法分别提高了3.12和5.63个百分点,说明氨基酸组成分布对于蛋白质同源寡聚体分类是一种非常有效的特征提取方法;将氨基酸组成分布和蛋白质序列长度特征组合,其总分类精度和精度指数分别达到了86.35%和67.23%,说明蛋白质序列长度特征含有一定的空间结构信息。 展开更多
关键词 氨基酸组成分布 二维主成分分析 支持向量机 同源寡聚体
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帕金森病患者血浆增强α-突触核蛋白寡聚体形成 被引量:11
9
作者 尹娜 陈予东 +3 位作者 李昕 杨巍巍 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期840-843,共4页
目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡... 目的研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的影响。方法将重组人α-Syn加入PD和对照血浆中,37℃振荡孵育144 h,免疫印迹方法鉴定α-Syn寡聚体形成情况,ELISA方法分析α-Syn寡聚体形成的相对质量浓度。结果α-Syn在PD患者血浆中形成寡聚体含量明显高于对照组。结论 PD患者血浆可促进α-Syn寡聚体形成。 展开更多
关键词 帕金森病 血浆 Α-突触核蛋白 寡聚体
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Aβ42寡聚体对PC12细胞损伤作用的研究 被引量:7
10
作者 王建秀 王德生 +1 位作者 段淑荣 王宇虹 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期147-149,共3页
目的研究Aβ42寡聚体对PC12细胞的损伤作用,观察Aβ42寡聚体的聚集状态的变化。方法用不同浓度Aβ42寡聚体作用于PC12细胞,并与Aβ42作用的PC12细胞、正常PC12细胞进行对照研究。应用MTT、LDH检测细胞活性,原位末端标记(TUNEL)方法检测... 目的研究Aβ42寡聚体对PC12细胞的损伤作用,观察Aβ42寡聚体的聚集状态的变化。方法用不同浓度Aβ42寡聚体作用于PC12细胞,并与Aβ42作用的PC12细胞、正常PC12细胞进行对照研究。应用MTT、LDH检测细胞活性,原位末端标记(TUNEL)方法检测细胞凋亡。应用原子力显微镜(AFM)观察Aβ42寡聚体的聚集状态、PC12细胞表面形貌变化。结果MTT、LDH在Aβ42寡聚体组的改变较对照组、Aβ42组差异有显著意义(P<0.05);TUNEL法测定Aβ42寡聚体组凋亡率高,较对照组、Aβ42组差异有显著意义(P<0.05)。Aβ42寡聚体对PC12细胞的损伤作用随浓度增高而增加。原子力显微镜可观察到Aβ42寡聚体、Aβ42的不同聚集状态。结论Aβ42寡聚体的细胞损伤作用与浓度相关,且强于Aβ42。利用原子力显微镜可观察Aβ的聚集变化。 展开更多
关键词 β-淀粉样蛋白(Aβ) 寡聚体 PC12细胞 凋亡 原子力显微镜(AFM)
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Aβ 42与Aβ 42寡聚体的生物学性质比较研究 被引量:4
11
作者 王建秀 王德生 +2 位作者 段淑荣 赵敬堃 王景贺 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期2577-2580,2584,共5页
目的比较Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞毒性。应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ42和Aβ42寡聚体的聚集状态。方法应用MTT检测Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞毒性;TUNEL法测定Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞凋亡作用。制备终浓度为50μmol/L的Aβ42寡... 目的比较Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞毒性。应用原子力显微镜(AFM)观察比较Aβ42和Aβ42寡聚体的聚集状态。方法应用MTT检测Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞毒性;TUNEL法测定Aβ42和Aβ42寡聚体的细胞凋亡作用。制备终浓度为50μmol/L的Aβ42寡聚体和Aβ42溶液。在云母片上制作Aβ样品,用原子力显微镜的轻敲模式观察不同时间、温度条件下的Aβ42寡聚体状态,比较Aβ42寡聚体与Aβ42聚集形态的差异。结果MTT、TUNEL结果表明Aβ42和Aβ42寡聚体均可降低PC12细胞的生存率,均有致细胞凋亡作用。10μmol/LAβ42寡聚体较20μmol/LAβ42能引起更多细胞凋亡,凋亡率差异有显著性(P<0.05)。4℃、48h内经HFIP作用的Aβ42以单体、寡聚体形式存在;室温、72h时未经六氟丙醇作用的Aβ42以纤维聚集态存在。结论Aβ寡聚体是Alzheimer病神经细胞损伤过程中的重要因素。相同浓度Aβ42寡聚体较Aβ42细胞毒性大。Aβ42寡聚体纤维随时间延长,室温条件下更利于纤维聚集;Aβ42寡聚体与Aβ42相同条件下聚集状态完全不同。利用原子力显微镜可观察不同Aβ的聚集情况,AFM是研究Aβ的有效手段。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 寡聚体 原子力显微镜 ALZHEIMER病
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Aβ寡聚体与阿尔采末病及其靶点药物研究进展 被引量:3
12
作者 刘明 辛现良 +2 位作者 周瑞宇 杜晓光 耿美玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1554-1557,共4页
Aβ在阿尔采末病(AD)中起着重要的作用,寡聚化的Aβ分子被认为是AD发病的原发性因子,能够通过不同的机制发挥神经毒性作用,引发记忆损伤和神经元丢失,以Aβ为作用靶点的药物开发和应用也已初露端倪。该文对Aβ寡聚体在AD中的毒性作用和... Aβ在阿尔采末病(AD)中起着重要的作用,寡聚化的Aβ分子被认为是AD发病的原发性因子,能够通过不同的机制发挥神经毒性作用,引发记忆损伤和神经元丢失,以Aβ为作用靶点的药物开发和应用也已初露端倪。该文对Aβ寡聚体在AD中的毒性作用和以Aβ为作用靶点的药物开发现状作一综述。 展开更多
关键词 寡聚体 阿尔采末病 作用靶点
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基于ThT荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体 被引量:3
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作者 李成 宋吉雪 +7 位作者 刘婷婷 李妍 刘冰南 王亮 肖珊 李琳 耿旭辉 王际辉 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期90-95,共6页
采用时间分辨荧光技术,检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素T(ThT)荧光寿命.利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体;采用透射电子显微镜(TEM)及ThT稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线,确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特... 采用时间分辨荧光技术,检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素T(ThT)荧光寿命.利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体;采用透射电子显微镜(TEM)及ThT稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线,确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特征和时间.通过时间相关单光子计数(TCSPC)技术测定了蛋清溶菌酶单体、寡聚体和淀粉样纤维的ThT荧光寿命曲线,并拟合、计算其荧光寿命.根据圆二色谱(CD)分析结果推测聚集体的结构不同导致其与ThT的结合状态不同,从而影响ThT荧光寿命.结果表明,通过测定ThT荧光寿命可以区分蛋白单体、寡聚体和纤维样聚集体,并监测蛋白寡聚体的形成,为后续病理蛋白聚集过程中形成寡聚体物质的监测提供了研究基础. 展开更多
关键词 寡聚体 硫磺素T 时间相关单光子计数 荧光寿命
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β-淀粉样蛋白1-42寡聚体诱导的阿尔茨海默病大鼠海马的Bcl-2表达和caspase-3活性变化 被引量:5
14
作者 陈雪 孙婧霞 +2 位作者 刘源劼 曹翠丽 蒋常文 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期181-184,共4页
目的:研究β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)寡聚体诱导痴呆大鼠脑海马区的Bcl-2表达和caspase-3活性变化及其意义.方法:采用Morris水迷宫法筛选出逃避潜伏期少于60 s的60只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常对照组、PBS对照组、Aβ1-42纤维组... 目的:研究β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)寡聚体诱导痴呆大鼠脑海马区的Bcl-2表达和caspase-3活性变化及其意义.方法:采用Morris水迷宫法筛选出逃避潜伏期少于60 s的60只SD雄性大鼠随机分为4组,即正常对照组、PBS对照组、Aβ1-42纤维组、Aβ1-42寡聚体组.通过脑立体定位仪将Aβ1-42纤维体、Aβ1-42寡聚体注入大鼠右侧脑室,制备AD大鼠模型.RT-PCR法检测大鼠海马Bcl-2 mRNA、caspase-3 mRNA的表达,用免疫印迹测定大鼠海马区Bcl-2蛋白表达和caspase-3活性.结果:与正常对照组及PBS对照组比较,模型组大鼠海马区Bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白表达较低,Aβ1-42纤维组Bcl-2的蛋白表达高于Aβ1-42寡聚体组;Aβ1-42寡聚体组的caspase-3 mRNA表达以及caspase-3蛋白活性高于Aβ1-42纤维组.结论:Aβ1-42寡聚体可下调Bcl-2表达,活化caspase-3. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白1-42纤维体 β淀粉样蛋白1-42寡聚体 Bcl-2 CASPASE-3 免疫印迹
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两亲性寡聚体Gd(Ⅲ)配合物的合成及肝选择性磁共振造影 被引量:5
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作者 柏正武 俞开潮 卓仁禧 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第8期1582-1584,M011,共4页
Diethylenetriaminepentaacetic dianhydride was co-polymerized with dodecyl ester and benzyl ester of lysine,and octodecyl ester and benzyl ester of lysine respectively to give two terpolymers. These two terpolymer liga... Diethylenetriaminepentaacetic dianhydride was co-polymerized with dodecyl ester and benzyl ester of lysine,and octodecyl ester and benzyl ester of lysine respectively to give two terpolymers. These two terpolymer ligands were reacted with GdCl 3 to afford amphiphilic oligomers of Gd(Ⅲ) complexes. These new ligands and Gd(Ⅲ) complexes were characterized by IR, 1H NMR and elemental analysis. The oligomeric complexes show a higher relaxivity as compared to that of Gd(DTPA) which is widely used in clinic diagnoses. The Gd(Ⅲ) complex derived from octodecyl ester demonstrated liver-selective enhancement for MR imaging of Wistar rat. The ratios of signal to noise ( S/N ) in the proton intensity imaging were enhanced,respectively,by 15%,27%,and 36% at the time of 5,30 and 45 min after injection of this complex. 展开更多
关键词 两亲性 三元寡聚体配体 Gd配合物 肝选择性磁共振造影
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一种检测帕金森患者血浆促进α-突触核蛋白寡聚体形成能力的方法 被引量:6
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作者 李昕 杨巍巍 +1 位作者 李雁 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期830-834,共5页
目的建立一种检测帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆促进外源性α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的方法。方法利用本室自制的鼠抗人α-Syn单克隆抗体建立检测α-Syn寡聚体的酶联免疫吸附测定(enzyme linked immun... 目的建立一种检测帕金森病(Parkinson’s disease,PD)患者血浆促进外源性α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的方法。方法利用本室自制的鼠抗人α-Syn单克隆抗体建立检测α-Syn寡聚体的酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent,ELISA)方法。将不同质量浓度(200、100、50、25、12.5μmol/L)重组人α-Syn在正常人和PD患者血浆中分别振荡孵育(37℃、280 r/min)24、48、72、96 h。用所建立的ELISA法检测振荡后血浆中的α-Syn寡聚体含量。结果所建立ELISA方法可以特异性检测α-Syn寡聚体,不识别α-Syn单体。重组人α-Syn在质量浓度为100μmol/L、血浆稀释3倍以下、振荡孵育48h条件下可以在PD患者血浆中形成较多的寡聚体,并与对照血浆中形成的α-Syn寡聚体含量对比差异最大。结论成功建立了一种检测PD患者血浆促进α-Syn寡聚体形成能力的方法,该方法可以用于诊断PD患者血浆的潜在病理变化。 展开更多
关键词 帕金森病 Α-突触核蛋白 血浆 寡聚体
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Alpha-突触核蛋白寡聚体致帕金森病小鼠模型的行为学变化 被引量:4
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作者 王鹏 历春 +1 位作者 王海鹏 盖晓东 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期5227-5230,共4页
目的观察家族型帕金森病(PD)alpha-突触核蛋白(α-Syn)突变体A53T和A30P寡聚体导致小鼠PD模型的行为学变化,探讨α-Syn寡聚体在体内的神经毒性作用。方法制备野生型α-Syn、家族型突变体A53T和A30P的聚集体,对C57BL/6小鼠进行纹状体注... 目的观察家族型帕金森病(PD)alpha-突触核蛋白(α-Syn)突变体A53T和A30P寡聚体导致小鼠PD模型的行为学变化,探讨α-Syn寡聚体在体内的神经毒性作用。方法制备野生型α-Syn、家族型突变体A53T和A30P的聚集体,对C57BL/6小鼠进行纹状体注射。培养至第30、60天,进行爬杆实验、悬吊实验、滚轴实验和平衡木实验评估行为学改变。免疫组织化学方法检测黑质多巴胺能神经元改变。结果实验鼠纹状体α-Syn寡聚体注射后30 d出现PD样运动障碍表现,纹状体注射30 d和60 d后,各组小鼠的爬杆实验结果均与对照组无差异(P>0.05)。注射30 d后,野生型α-Syn寡聚体组小鼠平衡木实验、悬挂实验、滚轴实验与对照组无差异(P>0.05);A53T和A30P组小鼠平衡木时间比对照组长(P<0.05),滚轴上时间比对照组小鼠缩短(P<0.05),悬挂评分比对照组明显降低(P<0.01),与野生型α-Syn寡聚体组相比有统计学差异(P<0.05)。注射60 d后,野生型α-Syn寡聚体组小鼠平衡木实验平均通过时间比对照组小鼠长(P<0.05)、悬挂实验评分较对照组小鼠降低(P<0.05);A53T和A30P组小鼠各项行为学评估与对照组小鼠差异显著(P<0.01)、与野生型α-Syn寡聚体组相比有差异(P<0.05)。A53T和A30P组小鼠黑质多巴胺能神经元数目下降(P<0.05)。结论纹状体注射α-Syn突变体A53T和A30P寡聚体,模型小鼠出现PD样行为学改变和黑质多巴胺能神经元减少。 展开更多
关键词 帕金森病 alpha-突触核蛋白 寡聚体
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原儿茶酸对Aβ_(1-42)寡聚体诱导AD海马神经元的保护作用 被引量:10
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作者 李智勇 罗汉 张海英 《海南医学》 CAS 2015年第14期2029-2031,共3页
目的应用Aβ1-42寡聚体诱导SD胎鼠海马神经元制备细胞损伤模型,观察海南益智仁提取物-原儿茶酸(PCA)对模型细胞的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western... 目的应用Aβ1-42寡聚体诱导SD胎鼠海马神经元制备细胞损伤模型,观察海南益智仁提取物-原儿茶酸(PCA)对模型细胞的保护作用。方法采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)检测ERK蛋白,观察原儿茶酸对模型细胞的保护作用。结果 Aβ1-42寡聚体干预SD胎鼠海马神经元后,神经元生存率下降,神经元凋亡率升高,ERK蛋白表达下调。添加原儿茶酸后,模型细胞存活率改善明显、凋亡率显著性降低,且呈现浓度依赖性,并且ERK蛋白表达上调。结论原儿茶酸可拮抗Aβ1-42寡聚体所诱导的海马神经元损伤,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Aβ1-42寡聚体 原儿茶酸 ERK信号通路
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α-突触核蛋白寡聚体抑制大鼠原代培养神经元突起早期生长 被引量:4
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作者 王鹏 李昕 +3 位作者 陈予东 杨巍巍 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期587-591,共5页
目的观察人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和其形成的寡聚体对大鼠原代培养神经元突起生长的影响,明确α-Syn的生理功能,探讨其寡聚化对神经元的毒性及其在帕金森病发病机制中的作用。方法制备α-Syn的寡聚体,向分组培养的大鼠脑... 目的观察人α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)和其形成的寡聚体对大鼠原代培养神经元突起生长的影响,明确α-Syn的生理功能,探讨其寡聚化对神经元的毒性及其在帕金森病发病机制中的作用。方法制备α-Syn的寡聚体,向分组培养的大鼠脑皮质神经元培养基中添加,培养1、2和4 h后固定,观察对神经元突起生长的影响。神经元的突起以成像显微镜观察测量,Western blotting法、免疫荧光法实验进行鉴定。结果添加α-Syn寡聚体组的神经元培养至1、2和4 h时,其突起的平均长度均小于对照组和添加α-Syn单体组(P<0.05)。增加α-Syn寡聚体浓度,随浓度增高神经元突起的平均长度与对照组差异越大(P<0.01)。Western blotting法和免疫荧光实验明确了外源性α-Syn寡聚体可以从培养基进入到神经元内。结论α-Syn寡聚体在原代神经元生长初期对其突起生长具有抑制作用,这一现象可能与其在帕金森病发病机制中的作用有关。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 寡聚体 原代神经元培养 突起生长 帕金森病
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基于加权自相关函数特征提取法的多类蛋白质同源寡聚体分类研究 被引量:2
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作者 张绍武 潘泉 +1 位作者 赵春晖 程咏梅 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期721-726,共6页
我们提出一种新的特征提取方法,即用蛋白质序列的氨基酸组成成分和一系列的氨基酸残基指数加权自相关函数构成特征向量,表示蛋白质序列,与支持向量机算法组合对蛋白质同源二聚体、同源三聚体、同源四聚体、同源六聚体进行分类研究,得到... 我们提出一种新的特征提取方法,即用蛋白质序列的氨基酸组成成分和一系列的氨基酸残基指数加权自相关函数构成特征向量,表示蛋白质序列,与支持向量机算法组合对蛋白质同源二聚体、同源三聚体、同源四聚体、同源六聚体进行分类研究,得到较好的分类结果。在Jackknife检验下,采用支持向量机算法,基于此新特征提取法所构成的参数集QIANA、QIANB、MEEJ、ROBB和SNEP的总分类精度分别为77.63%、77.16%、76.46%、76.70%、75.06%,分别比传统氨基酸组成成分特征提取法(参数集为COMP)提高6.39、5.92、5.22、5.46、3.82个百分点。对于参数集QIANA,支持向量机的总分类精度为77.63%,比协方差算法提高16.29个百分点。这些结果表明:(1新特征提取法是有效和可行的,基于此特征提取法构成的特征向量包含蛋白质四级结构信息,且可能捕获了埋藏在缔合亚基作用部位接触表面的基本信息;(2)对于蛋白质同源寡聚体分类研究,支持向量机是非常有效的。 展开更多
关键词 特征提取 加权自相关函数 支持向量机 同源寡聚体
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