对照提取物在浙贝母配方颗粒质量分析中的应用研究

目的 以浙贝母对照提取物(水提)和湖北贝母对照提物(水提)为参照,对12个不同厂家的22批浙贝母配方颗粒进行质量分析。方法 以乙酸乙酯-甲醇-三乙胺-水(17∶1∶1∶0.5)为展开剂进行高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱分析;采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.03%二乙胺溶液,梯度洗脱,柱温25℃,蒸发光检测器,进行高效液相色谱(HPLC)指纹图谱分析。根据浙贝母配方颗粒标准含量测定项下方法测定含量。结果 HPTLC和HPLC分析结果表明,22批标识为浙贝母配方颗粒的样品存在明显差异,其中有3家生产企业的4批浙贝母配方颗粒检出湖北贝母指纹图谱特征,其余18批浙贝母配方颗粒样品贝母素甲和贝母素乙的总量为0.291~3.179 mg·g^(-1),差异较大。结论 目前市售的浙贝母配方颗粒样品质量差异较大,经标准化制备的对照提取物(水提)对分析浙贝母配方颗粒的质量比对照药材具有更好的适用性。

对照提取物在人参配方颗粒质量分析中的应用

目的以人参水提对照提取物(GWERS)为参照,对11个不同厂家的19批人参配方颗粒进行质量分析。方法根据国家药品监督管理局颁布的人参配方颗粒标准(YBZ-PFKL-2021186)鉴别和特征图谱方法进行薄层色谱(TLC)鉴别,以及特征图检测。结果TLC分析结果表明,19批人参配方颗粒样品可以分成3类,第1类样品整体图谱与GWERS一致,相似度高;第2类样品检出西洋参特有成分伪人参皂苷F11;第3类样品图谱比GWERS多4个蓝色荧光斑点。HPLC分析结果表明,19批人参配方颗粒均呈现与GWERS色谱中保留时间相对应的8个特征峰。其中一厂家的3批样品图谱比其他样品图谱多出两个色谱峰,与GWERS图谱相似度低于0.65,其余16批样品图谱与GWERS图谱相似度高于0.94。结论目前市售的人参配方颗粒质量差异较大,疑存在混有西洋参投料的情况。应用GWERS分析人参配方颗粒的质量比对照药材具有更好的适用性。

槐花对照提取物的制备及槐花中4个黄酮类成分的含量测定

目的:制备槐花对照提取物,并以其为对照测定槐花中4个黄酮类成分含量。方法:用水提法制备槐花对照提取物;采用高效液相色谱法测定其中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的含量;色谱柱为Diamonsil C18(2),流动相为甲醇-1%冰乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为360 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以槐花对照提取物为对照测定槐花中4个成分的含量,并与以化学对照品为对照的测定结果进行比较。结果:在所制槐花对照提取物中,4个成分的含量占86.85%;芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、水仙苷和槲皮素的检测进样量线性范围分别为0.076 8~3.07、0.002 24~0.089 6、0.001 59~0.063 7、0.003 40~0.136μg(r均≥0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤2.30%(n=6),加样回收率分别为100.4%、96.99%、102.3%、100.9%(RSD分别为2.51%、1.58%、2.97%、3.20%,n=6)。两种方法中4个成分的含量测定结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以制备的槐花对照提取物为对照建立的测定方法操作简便、重现性好,并能同时测定槐花中4个成分的含量,可用于槐花饮片的质量控制。

定量用三七总皂苷对照提取物的协作定值

目的:建立定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。方法:照《中国药典》2010年版一部三七总皂苷项下方法,以三七皂苷Rd、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd为指标,评价提取物备选原料的均匀性;5个实验室进行协作标定。结果:备选原料均匀性良好;对协作标定的测定结果进行统计分析确定了5种成分的标示值。结论:通过协作标定赋值,建立了首批定量用三七总皂苷对照提取物国家药品标准物质。

苦杏仁对照提取物替代苦杏仁对照药材的可行性研究

目的：以对照药材技术要求为基础,以等量同质为原则,利用现代的提取制备技术,制备成质量稳定、均匀性好的苦杏仁对照提取物。通过考察不同的薄层系统,建立薄层鉴别用对照提取物的质量标准,供中药标准中薄层鉴别使用。并对其主要药效成分进行方法学考察,确保今后制备的对照提取物的一致性。方法：采用不同薄层色谱系统对苦杏仁对照提取物可替代对照药材进行定性研究;并用高效液相色谱法测定苦杏仁对照提取物中苦杏仁苷的含量。结果：在苦杏仁对照提取物薄层色谱中,展开剂：为甲苯-甲酸乙酯-甲醇-甲酸-水（6∶2∶0.4∶0.1∶0.1）,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。HPLC测定苦杏仁对照提取物中苦杏仁苷含量,苦杏仁苷线性范围461.7~15.39 mg/L（r=0.9995）,平均回收率为101.1%（RSD=2.15%）,该方法准确、可靠、专属性强,重复性好。结论：苦杏仁对照提取可替代对照药材进行定性鉴别。

对照提取物的国内外发展研究概况

目的:对对照提取物的国内外发展研究进行综述。方法:就对照提取物在国内外的发展概况及应用现状进行了综述,结合对照提取物在《中国药典》(2010年版)、欧洲药典(7.0)、美国药典(36)的应用现状,就对照提取物展开讨论并展望。结果:阐明了进一步推动对照提取物的发展对中药国际化进程的积极影响。结论:中药标准物质中的对照提取物在中药质量控制中意义重大,成为中药国际化的重要亮点。

火麻仁薄层色谱鉴别用对照提取物的研制与应用

研制被薄层色谱鉴别用火麻仁对照提取物,以替代对照药材用于火麻仁的薄层鉴别。从制备工艺考察、提取物稳定性影响因素考察以及提取物性状等方面制订薄层色谱鉴别用火麻仁对照提取物的制备和保存方法,并比较对照药材与对照提取物在薄层鉴别中的应用结果。结果表明：制备方法为：火麻仁药材粉末（过二号筛）加25倍乙醚脱脂后,药渣加10倍甲醇加热回流提取1 h,滤过,减压蒸去甲醇,所得浸膏用10倍甲醇复溶,加入与浸膏等重量的柱层析硅胶（200~300目）,混匀,减压蒸干甲醇,过九号筛即得。该对照提取物与火麻仁药材的薄层鉴别效果一致。本研究制备的火麻仁薄层鉴别用对照提取物稳定可靠,可以替代火麻仁对照药材用于火麻仁及其成方制剂的质量控制分析。

对照提取物在中药质量控制中的研究现状及展望

应用对照提取物进行中药质量控制具有专属性强、成本低,对照提取物易于获取、稳定性佳等优势。目前,对照提取物作为一种标准参照物已被广泛应用于中药质量控制领域。对中药对照提取物的概况、发展及近年来国内外有关其在中药质量控制中的研究现状进行综述。同时,在当前中医药发展的新形势下,针对中药质量控制指标与中药有效性关联不强等系列问题,对中药对照提取物的发展进行展望,强化中药对照提取物与其功效的关联性,初步提出“有效对照提取物”这一可应用于中药质量控制、药品开发等方面的提升概念,以期为中药全面药效物质基础及中药质量控制研究提供参考。

玄参对照提取物的PULCON法定值研究和其在中药复方增液汤中的应用

目的采用氢核磁脉冲宽度定量法(Pulse length based concentration determination,PULCON)对玄参对照提取物中的哈巴苷、安格洛苷C和哈巴俄苷进行定性及定值研究,探讨玄参对照提取物代替相应对照品在提升玄参复方制剂质量控制水平的可行性。方法采用Bruker Avance III HD 700超导核磁共振波谱仪,以DMSO-d6为溶剂,苯甲酸为外标物,利用PULCON法比较苯甲酸定量峰(δ_(H)7.94)的峰面积和不同批次玄参对照提取物中3种化学成分的不同定量峰(哈巴苷δ_(H)6.24、安格洛苷Cδ_(H)7.08和哈巴俄苷δ_(H)5.97)的峰面积,测定不同批次中3种成分的含量,并采用配对t检验将测定结果与高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)的定值结果进行比对。分别以已知含量的玄参对照提取物和3个相应对照品为对照,建立增液汤的HPLC含量测定方法,采用配对t检验对2种方法所得结果进行比较。结果采用PULCON法测得3种成分的含量与HPLC法的定值结果基本一致,以玄参对照提取物为对照,3种成分的线性关系相关系数均大于0.9997,平均回收率为99.36%~102.31%。t检验结果显示,2种方法测定的哈巴苷、安格洛苷C、哈巴俄苷含量P值分别为0.279、0.105、0.623,均大于0.05,表明2种含量测定方法差异无统计学意义。结论PULCON法可在无对照品且无需分离的条件下,直接、快速、准确地分析玄参对照提取物成分的物质组成和含量,并将已标定准确含量的玄参对照提取物用于玄参复方制剂的质量控制,为中药对照提取物在中药质量研究中的应用提供了科学依据。

枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的应用

目的建立枳实黄酮对照提取物制备方法及定量方法,并探索其在枳实药材质量控制中应用的可行性。方法采用溶剂提取法、色谱分离方法制备枳实黄酮对照提取物,以芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷对照品为对照,对枳实黄酮对照提取物含量进行标定。分别以已知含量的枳实黄酮对照提取物和单体成分对照品(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷)为对照,建立枳实药材HPLC含量测定方法,并测定枳实药材中4种成分的含量,采用t检验和相关性分析对含量测定结果进行统计分析。结果以枳实黄酮对照提取物为对照,芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷进样量在各自范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999 6),平均回收率为100.45%~101.27%。t检验结果显示,2种方法测定的芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷含量P值分别为0.97、0.38、0.69、0.84;相关性分析显示,2种方法测定结果的相关系数均在0.95以上,表明2种方法无明显差异。结论枳实黄酮对照提取物可用于枳实药材的质量控制,本研究为枳实药材的质量控制与评价提供了新方法。

龙胆和坚龙胆对照提取物的制备

目的研究龙胆与坚龙胆对照提取物的制备工艺及质量控制方法。方法以龙胆提取物HPLC指纹图谱中龙胆苦苷和另外4个特征峰峰面积为评价指标,采用L9(34)正交试验优化其制备工艺,并建立龙胆和坚龙胆对照提取物指纹图谱。结果最佳制备工艺为药材最粗粉加10倍量水,回流提取3次,每次1 h,获得粗提物;粗提物浓缩至含原药材6.60 g/100 m L,加3倍量乙酸乙酯,萃取2次,萃取液蒸干,真空干燥。龙胆、坚龙胆对照提取物中龙胆苦苷平均质量分数分别为31.37%、25.20%。龙胆对照提取物指纹图谱标定龙胆苦苷和另外4个特征峰,整体相似度大于0.99;坚龙胆对照提取物指纹图谱标定龙胆苦苷和另外4个特征峰,整体相似度大于0.98。结论对照提取物制备工艺稳定,重复性好,可用于龙胆药材、饮片的质量控制。

基于对照品和对照提取物的中药复方质量控制对比研究

目的:建立以决明子中萘并吡喃酮类对照提取物和对照品为对照物质的脂康颗粒含量测定方法并对结果进行对比分析,探讨中药对照提取物替代单体对照品在中药复方质量控制中应用的适用性和可行性。方法:分别以红镰霉素-6-O-β-D-龙胆二糖苷、决明子苷B_(2)、决明子苷C、决明子苷C_(2)这4个对照品和已知含量的决明子对照提取物为对照,采用高效液相色谱法,测定4种成分在脂康颗粒复方中的含量,并对2种方法所得的结果进行t检验。结果:实验结果表明,4种成分的含量在对照提取物法与对照品法比较,差异有统计学意义(P>0.05)。结论:对照提取物可以作为脂康颗粒质量控制中的对照物质。为萘并吡喃酮类对照提取物用于含决明子的中药复方的质量评价提供了科学依据和研究基础,对中药对照提取物代替化学对照品进行中药复方质量控制的可行性和适用性进行了验证。

双酯型乌头生物碱对照提取物的制备及其应用研究

目的:以定量用双酯型乌头生物碱对照提取物替代单体对照品,修订川乌含量测定方法。方法:制备定量用对照提取物,标定和协作标定,对其中的乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量进行赋值。采用HPLC法,流动相为乙腈和0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调p H至6.2),梯度洗脱,检测波长235 nm;并比较使用单体对照品和对照提取物的含量测定结果。结论:定量用对照提取物可替代乌头碱等单体对照品,用于川乌药材中双酯型生物碱的含量测定。

酸枣仁黄酮对照提取物的制备及其在枣仁安神颗粒含量测定中的方法学验证

本研究制备了酸枣仁黄酮对照提取物,用对照提取物替代单一对照品测定枣仁安神颗粒中斯皮诺素、6-阿魏酰斯皮诺素成分,探讨对照提取物用于中药质量控制的可行性。结果表明,酸枣仁黄酮提取物中斯皮诺素、6-阿魏酰斯皮诺素浓度分别在0.0087~0.4366(r=0.9996)、0.0039~0.1952 mg·mL-1(r=0.9996)范围内与色谱峰面积值呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为100.26%、100.90%,RSD分别为2.45%、1.37%。以酸枣仁黄酮对照提取物为对照,测定12批枣仁安神颗粒样品的结果,与采用单一对照品所测得结果基本一致。综上,对照提取物可替代相应的对照品测定中药成分的含量,用于中药材及其制剂的质量控制。

响应面法优化黄芩茎叶对照提取物纯化工艺及其特征图谱研究

目的:采用响应面法(Box-Behnken)优化黄芩茎叶对照提取物的纯化工艺,并建立其特征图谱。方法:以黄芩茎叶总黄酮含量为评价指标,单因素试验结合响应面法分析,建立数学模型,优选对照提取物纯化工艺参数,并对制备的黄芩茎叶对照提取物采用高效液相色谱法进行特征图谱研究。结果:采用Design-Expert10.0.3软件得到黄芩茎叶总黄酮得率与各因素变量的二次多元回归方程为:Y=65.58+1.68A+0.84B+1.55C+0.44D-0.16AB-1.12AC-0.58AD+0.62BC-0.067BD+0.30CD+0.52A^2-1.46B^2-1.25C^2-1.47D^2(P<0.05),确定纯化工艺为乙醇浓度为80%,上样流速为1.5mL·min^-1,洗脱体积为5BV,洗脱流速为4mL·min^-1。确定11批黄芩茎叶对照提取物高效液相特征图谱有7个共有峰,样品与对照特征图谱的相似度在0.957~0.989。结论:本实验优选的对照提取物纯化工艺稳定、可控,所建立的高效液相特征图谱可为黄芩茎叶对照提取物的研究及应用提供参考。

巴戟天薄层色谱鉴别用对照提取物的研制与应用

目的研制薄层色谱鉴别用巴戟天对照提取物,以解决对照药材的局限性。方法从原料选定、制备工艺研究、稳定性影响因素考察等方面探讨薄层色谱鉴别用巴戟天对照提取物的研究思路,并比较巴戟天对照药材与对照提取物在薄层鉴别中的应用结果。结果巴戟天薄层鉴别用对照提取物的提取条件:巴戟天粗粉加20倍70%乙醇,加热回流提取,提取2次,每次1 h。该对照提取物替代对照药材应用于巴戟天及其成方制剂中的薄层鉴别效果一致。结论本研究制备的巴戟天薄层鉴别用对照提取物,可以替代巴戟天对照药材用于巴戟天及其成方制剂的质量控制分析。

人参对照提取物的应用研究——人参皂苷成分的质量分析

目的使用人参对照提取物(Ginseng Extract Reference Substance,GS ERS)对人参样品进行定性鉴别及定量分析。方法使用薄层色谱法、硅胶高效薄层板,以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下分层的下层溶剂为展开剂,对人参样品进行定性鉴别。采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速1.0 m L·min^(-1),柱温25℃,检测波长203 nm,进样量10μL。用已知含量的GS ERS外标法测定人参样品中人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rb_1、Rc、Rb_2、Rd 7个成分的含量。结果高效薄层色谱显示GS ERS与人参药材图谱具有一致性,且与西洋参有明显区别;使用GS ERS外标法测定人参及西洋参样品中的人参皂苷成分,结果与使用化学对照品外标法测定结果一致,两种方法相对平均偏差在0.02%~2.90%之间。结论 GS ERS用于人参样品的定性鉴别以及人参药材中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rb1,Rc,Rb2,Rd 7个成分的含量测定,方便有效,经济实惠。对照提取物符合中药整体性和复杂性的特点,更适合中药整体质量控制。

对照提取物在银杏叶制剂特征图谱中的应用

目的建立银杏叶片、胶囊、滴丸特征图谱的评价方法。方法以对照提取物为参照,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法,色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1);ELSD检测器:漂移管温度105℃;氮气(N2)流速:2.5 L·min^(-1)。结果以银杏叶对照提取物和银杏叶总内酯对照提取物为参照,确立12个共有峰作为银杏叶制剂的特征峰,建立了银杏叶制剂的特征图谱。结论该方法简单、重复性良好,可为银杏叶制剂的质量控制提供有效鉴别方法。

对照提取物法测定银杏叶制剂中总黄酮醇苷的含量

目的建立对照提取物法测定银杏叶制剂中总黄酮醇苷的含量,研究对照提取物法在中成药多组分含量测定中的可行性。方法采用Ultimate 3000 UPLC色谱仪,Thermo Scientific Acclaim RSLC120 C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.2μm),流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50),柱温30℃,流速0.3m L·min^(-1),检测波长360 nm。采用自制银杏叶提取物,测定银杏制剂中槲皮素、山柰素和异鼠李素的含量,并与外标法测定结果进行比较。结果槲皮素在7.08~141.6 ng,山柰素在5.22~104.4 ng,异鼠李素在1.10~22.0 ng与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.4%、99.1%、98.2%。结论对照提取物测定法与外标法测定结果差异无统计学意义,具有精密度高,稳定性、重复性好等优点,可以用于银杏叶制剂的质量控制,并为药品质量生产提供一定依据,同时验证了对照提取物在银杏叶制剂中应用的可行性。

对照提取物在浙贝母与湖北贝母高效薄层色谱指纹图谱分析中的应用

目的 使用浙贝母对照提取物(ZBM ERS)和湖北贝母对照提取物(HBBM ERS)对市场上的46批贝母药材进行高效薄层色谱(HPTLC)指纹图谱鉴别,对浙贝母和湖北贝母进行有效的区分。方法 采用薄层色谱法、硅胶高效薄层板,以乙酸乙酯-甲醇-三乙胺-水(17∶1∶1∶0.5)为展开剂,10%硫酸甲醇溶液为显色剂,进行高效薄层色谱指纹图谱鉴别。结果 HPTLC指纹图谱显示,浙贝母和湖北贝母样品分别具有各自的特征,可通过对照提取物作为参照物准确鉴别浙贝母和湖北贝母的差异。结论 ZBM ERS和HBBM ERS能有效鉴别浙贝母和湖北贝母,且使用方便,经济实惠。对照提取物具有中药整体性和复杂性的特点,在中药整体质量控制中应用更具优势。