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应用多重PCR检测鉴别对虾白斑综合征病毒和桃拉病毒 被引量:11
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作者 谢芝勋 庞耀珊 +6 位作者 何竞铭 邓显文 唐小飞 刘加波 谢志勤 廖敏 文雪 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-15,共3页
研究建立了一种可同时检测对虾白斑综合征病毒 (WSSV)和桃拉病毒 (TSV)的多重聚合酶链式反应 (多重PCR)技术。根据 WSSV和 TSV基因序列 ,设计合成了 2对分别与 WSSV和 TSV某段基因序列互补的引物 ,用这 2对引物对同一样品中的 WSSV DNA... 研究建立了一种可同时检测对虾白斑综合征病毒 (WSSV)和桃拉病毒 (TSV)的多重聚合酶链式反应 (多重PCR)技术。根据 WSSV和 TSV基因序列 ,设计合成了 2对分别与 WSSV和 TSV某段基因序列互补的引物 ,用这 2对引物对同一样品中的 WSSV DNA和 TSV RNA模板进行多重 PCR扩增 ,结果均同时得到了 2条特异的与实验设计相符的 30 6 bp(WSSV)和 2 31bp(TSV)多重 PCR扩增带 ,而对其他对虾病病原的 PCR扩增结果均为阴性 ;敏感性测定结果表明 ,该多重 PCR技术能检出 10 pg的 WSSV DNA和 1pg的 TSV 展开更多
关键词 WSSV 桃拉病 对虾白斑综合征病毒 引物 多重聚合酶 虾病 多重PCR检测 扩增 鉴别 RNA
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对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP19的单克隆抗体制备及其定位 被引量:8
2
作者 姜有声 战文斌 +1 位作者 程顺峰 王世表 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-74,共6页
为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰... 为了更好地研究对虾白斑综合征病毒(WSSV)蛋白VP19在WSSV感染过程中的作用,利用VP19的单克隆抗体直接对VP19进行了定位。从患白斑综合征的中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)鳃丝中提取WSSV,将提纯的WSSV经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,然后洗脱提纯其病毒蛋白VP19并免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,用间接免疫荧光技术(IFAT)和Western-Blot技术筛选出1株阳性杂交瘤细胞,将检测出的阳性杂交瘤细胞经有限稀释法克隆,研制出抗VP19的单抗,再利用免疫胶体金技术对病毒蛋白VP19进行定位,结果显示,胶体金粒子位于WSSV病毒的囊膜上,说明病毒蛋白VP19位于WSSV囊膜上。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 VP19 单克隆抗体 定位
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不同靶点shRNA干扰对虾白斑综合征病毒增殖效果分析 被引量:8
3
作者 周俊芳 杨先乐 +2 位作者 万夕和 沈辉 房文红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期105-108,共4页
设计合成了靶向对虾白斑综合征病毒(WSSV)基因组不同位点的5个shRNA:RR9、RR1、DP1、DP2和PK1,并在凡纳滨对虾体内实施了RNA干扰(RNAi)抗WSSV增殖的试验。结果显示:5个shRNA不同程度地抑制了WSSV的复制,降低了对虾的死亡率,其中,靶向病... 设计合成了靶向对虾白斑综合征病毒(WSSV)基因组不同位点的5个shRNA:RR9、RR1、DP1、DP2和PK1,并在凡纳滨对虾体内实施了RNA干扰(RNAi)抗WSSV增殖的试验。结果显示:5个shRNA不同程度地抑制了WSSV的复制,降低了对虾的死亡率,其中,靶向病毒核糖核酸还原酶的shRNA RR9的RNA干扰效果最佳。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 对虾白斑综合征病毒 RNA干扰
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对虾白斑综合征病毒分子生物学研究进展 被引量:3
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作者 许雅香 许梓荣 +2 位作者 朱玉芳 杜华华 魏克强 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期63-66,共4页
关键词 白斑综合 对虾白斑综合征病毒 WSSV 对虾养殖业 病原 中国台湾地区 分子生物学研究 亚洲 中部 世界
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对虾白斑综合征病毒VP28免疫后克氏原螯虾血清酶活性及中和活性 被引量:4
5
作者 袁军法 李莉娟 +2 位作者 谷万港 祝璟琳 石正丽 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第S2期253-258,共6页
利用原核表达的对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)结构蛋白VP28口服免疫克氏原螯虾,以酚氧化酶和溶菌酶指标来监测机体的免疫反应,并检测免疫后的螯虾血清对WSSV的中和能力.结果表明VP28能有效激起机体的免疫反应,酚... 利用原核表达的对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)结构蛋白VP28口服免疫克氏原螯虾,以酚氧化酶和溶菌酶指标来监测机体的免疫反应,并检测免疫后的螯虾血清对WSSV的中和能力.结果表明VP28能有效激起机体的免疫反应,酚氧化酶活性始终处于较低的水平,低于GST对照组和健康组,溶菌酶活性则高于GST对照组和健康组.中和实验表明免疫血清具有一定的中和活性,但其保护作用不是通过VP28进入体内与细胞受体结合,来阻止病毒进入,而可能是通过病毒蛋白进入虾体后刺激机体产生或分泌某种中和因子,从而阻止病毒进入细胞或进入细胞后阻止进一步传播. 展开更多
关键词 克氏原螯虾 对虾白斑综合征病毒 囊膜蛋白 中和
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一种改良的对虾白斑综合征病毒的提纯技术 被引量:11
6
作者 解云礼 张叔勇 +1 位作者 黄茹 石正丽 《中国病毒学》 CSCD 2003年第4期391-393,共3页
对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是对虾养殖业的主要病原,自1992年以来一直严重影响对虾的产量和质量,造成巨大的经济损失.
关键词 对虾白斑综合征病毒 提纯 病毒粒子 病毒囊膜
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cDNA微阵列结合抑制性差减杂交研究对虾白斑综合征病毒部分表达基因 被引量:2
7
作者 曾勇 陆承平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期255-260,共6页
通过抑制性差减杂交技术建立了包含对虾白斑综合征病毒表达性基因的差减文库,并用cDNA微阵列技术进行了鉴定,得到255个正向克隆。对其中的184个正向阳性克隆进行了测序,测序结果通过BLAST与GenBank中序列进行比对,共得到WSSV(whitespots... 通过抑制性差减杂交技术建立了包含对虾白斑综合征病毒表达性基因的差减文库,并用cDNA微阵列技术进行了鉴定,得到255个正向克隆。对其中的184个正向阳性克隆进行了测序,测序结果通过BLAST与GenBank中序列进行比对,共得到WSSV(whitespotsyndromevirus,WSSV)基因30个。此次首次鉴定了5个,其中WSV184具有调控蛋白的结构特征(Cys2/Cys2型锌指),WSV321和WSV322含跨膜结构,且存在可能的糖基化位点。有3个被其它研究推断无polyA结构的阅读框所处的mRNA应有polyA结构。进一步用DotNorthernblot对克隆号PCI118(含WSSV阅读框WSV321和WSV322)进行鉴定,表明确实存在该基因的转录。进而根据已报道的WSSV基因序列设计两条引物,用快速扩增cDNA末端技术,扩增WSV321和WSV322两个阅读框所处的cD NA的5′端片段和3′端片段,分析得到其全长共1109bp,与已报道的WSSV全基因序列(AF332093)的相关序列完全相同。该mRNA存在polyA,并有加尾信号AATAAA;两个阅读框都没有自己的TATA盒,但都有病毒RNA聚合酶Ⅱ的结合位点-CCAAT盒;它们编码的蛋白质分别有117和227个氨基酸,都存在可能的糖基化位点,其中WSV321一个,WSV322两个。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 表达 基因 斑点杂交 CDNA微阵列
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对虾白斑综合征病毒的细胞因子受体基因的分析与表达 被引量:4
8
作者 解云礼 黄茹 石正丽 《中国病毒学》 CSCD 2003年第4期362-366,共5页
在对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的基因组中发现一个具有细胞因子受体特征的开放阅读框,该阅读框全长2022个核苷酸,编码674个氨基酸,蛋白质理论分子量为76kDa。该基因含有真核生物细胞因子gp130受体特征序列。为... 在对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的基因组中发现一个具有细胞因子受体特征的开放阅读框,该阅读框全长2022个核苷酸,编码674个氨基酸,蛋白质理论分子量为76kDa。该基因含有真核生物细胞因子gp130受体特征序列。为了研究该基因的功能,采用PCR方法从病毒基因组中扩增出基因片段,克隆到pGEM-T Easy载体中,经BamH Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切后插入pET28b表达载体中。重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳表明在76kDa处有目的蛋白表达。用冰浴超声波对诱导后的菌液进行处理以获得初步纯化的蛋白,作为抗原人工免疫实验兔子以获得含特异性抗体的抗血清。该基因的表达成功,为其功能的进一步深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 细胞因子受体 基因 表达
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对虾白斑综合征病毒基因组快速定性定量方法的建立
9
作者 冯博 孙晓红 +1 位作者 潘迎捷 赵勇 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期18-21,共4页
对于对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)全基因组样品,使用限制性内切酶酶切以及荧光绝对定量的方法进行分析,建立了WSSV全基因组快速定性定量的方法。定性实验通过对GenBank中WSSV基因组序列深度分析,选择确定合适的... 对于对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)全基因组样品,使用限制性内切酶酶切以及荧光绝对定量的方法进行分析,建立了WSSV全基因组快速定性定量的方法。定性实验通过对GenBank中WSSV基因组序列深度分析,选择确定合适的限制性内切酶BamHI对基因组进行酶切,通过比对实际酶切结果和软件模拟酶切结果,以定性待测样品。定量实验使用荧光定量试剂盒,通过建立标准曲线的方法对未知浓度的WSSV基因组样品进行绝对定量。实验结果表明,结合使用酶切分析和荧光定量的方法可以准确、快速、方便、经济地对WSSV基因组样品进行定性定量分析,为进一步深入研究WSSV基因组奠定坚实基础。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 全基因组 酶切分析 荧光绝对定量
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对虾白斑综合征病毒胶体金免疫层析试纸条的优化及应用 被引量:3
10
作者 刘鹿山 绳秀珍 战文斌 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期43-48,共6页
在已研制的对虾白斑综合征病毒(WSSV)胶体金免疫层析试纸条的基础上,对影响试纸条检测灵敏度的金标抗体、检测线抗体等关键因素进行优化,制备并纯化了5种IgG型的抗WSSV单克隆抗体2E6、2A3、3B7、4G9、5D2;金标抗体以Au-2E6和Au-2A3按1∶... 在已研制的对虾白斑综合征病毒(WSSV)胶体金免疫层析试纸条的基础上,对影响试纸条检测灵敏度的金标抗体、检测线抗体等关键因素进行优化,制备并纯化了5种IgG型的抗WSSV单克隆抗体2E6、2A3、3B7、4G9、5D2;金标抗体以Au-2E6和Au-2A3按1∶1(V/V)混合,检测线抗体以2A3、3B7、4G9、5D2按2∶4∶2∶1(V/V)混合,优化后的试纸条灵敏度提高到117.2ng/mL。使用该试纸条对人工感染WSSV克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的鳃、肠、心脏、性腺、肌肉、肝胰腺、血淋巴等组织样品进行跟踪检测。发现感染后12h时,肠最早检测为WSSV阳性;24h时,鳃、血淋巴、肠、心脏、性腺、肝胰腺的检测结果为阳性,肌肉为阴性;36h时,各组织均检测为阳性,其中肠、性腺、血淋巴、鳃的阳性信号明显比其他组织强。研究表明,优化后的WSSV胶体金免疫层析试纸条可用于虾类感染WSSV早期的病毒检测,在对虾养殖中推广应用该试纸条,对控制白斑病暴发、减少经济损失有重要意义。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 胶体金免疫层析试纸条 单克隆抗体 灵敏度
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对虾白斑综合征病毒中国地方株变异区基因的比较 被引量:6
11
作者 康桦华 陆承平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期490-493,共4页
According to the conservative sequence in the epitaxial variable region of Thailand strain of WSSV published in GenBank,a pair of primers were designed to amplify the variable region genes of 5 local WSSV strains(ZHSH... According to the conservative sequence in the epitaxial variable region of Thailand strain of WSSV published in GenBank,a pair of primers were designed to amplify the variable region genes of 5 local WSSV strains(ZHSH,ZHJ,HN,QD1,QD2) by PCR and then cloned.In accordance with the CN,the results indicated that the number of nucleotide of 5 strains were deleted more than 591bp of the TW and TH strains.The ZHSH and HN strains that deleted 591bp at the 3′ end,and 454 bp at the 5′ end of varible gene was highly homologous with CN strain about 99.3%.229bp of ZHJ strain at the 5′ end was homologous with CN about 99.3%,and deleted of 816bp at the 3′ end.97bp at the 5′ end and 171bp at the 3′end of QD1 and QD2 strains were homologous with CN strain about 99.3%,and about 777bp were absent in the middle.The above data showed that the variable region genes of WSSV had mutated more in China.The variable region gene of QD2 strain was coincidence with that of QD1 after propagating 10 generations in crayfish.The results indicated that the crayfish inoculation did not result in mutation of variable region genes of WSSV. 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 变异区 缺失
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对虾白斑综合征病毒VP24和VP26原核表达及抗体制备 被引量:3
12
作者 仇知光 张颖 +1 位作者 刘庆慧 黄倢 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第6期9-13,共5页
对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种对对虾养殖业造成巨大威胁的病毒,目前并没有有效治愈该病毒病的方法。论文将WSSV-VP24与WSSV-VP26的部分序列克隆至表达载体pBAD/gⅢA中,构建重组载体pBAD/gⅢA-VP24、pBAD/g... 对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是一种对对虾养殖业造成巨大威胁的病毒,目前并没有有效治愈该病毒病的方法。论文将WSSV-VP24与WSSV-VP26的部分序列克隆至表达载体pBAD/gⅢA中,构建重组载体pBAD/gⅢA-VP24、pBAD/gⅢA-VP26,并转化入大肠埃希菌Top10感受态细胞中。L-阿拉伯糖诱导重组体,Western blot分析表明VP24和VP26获得表达,采用Co2+亲和层析纯化目的蛋白并制备多克隆抗体。ELISA分析表明VP24和VP26多抗效价均为1∶800。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 VP24 VP26 原核表达 多克隆抗体
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对虾白斑综合征病毒VP12的原核表达及其与VP24和VP26的相互作用 被引量:2
13
作者 马方方 刘庆慧 黄倢 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第1期11-15,共5页
根据GenBank上对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白基因VP12(wsv 432)的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到VP12基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ–VP12并转化大肠埃希菌Top 10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经West... 根据GenBank上对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白基因VP12(wsv 432)的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到VP12基因,构建重组表达载体pBAD/gⅢ–VP12并转化大肠埃希菌Top 10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Western blot和SDS-PAGE检测显示有与预期大小19ku相符合的目的蛋白。以Co2+亲和层析方法,获得纯化VP12蛋白。采用Far-Western blot结合ELISA方法,分析VP12与WSSV结构蛋白的作用。结果表明,VP12与囊膜蛋白VP24、VP26具有相互作用,该研究对于揭示WSSV分子组装机制,阐明其致病机理具有重要意义。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 VP12 原核表达 VP24 VP26 相互作用
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对虾白斑综合征病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因的系统进化分析 被引量:2
14
作者 李嵚 杨丰 +1 位作者 张景海 陈英杰 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期145-149,155,共6页
目的为了对对虾白斑综合征病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)中最为保守的胸腺嘧啶核苷酸合成酶 (WSV TS)基因 ,进行该病毒的系统发育学研究。方法通过GenBankTM 数据库和DNAMAN分析系统 ,对不同生物来源的胸腺嘧啶核苷酸合成酶进行... 目的为了对对虾白斑综合征病毒 (whitespotsyndromevirus,WSSV)中最为保守的胸腺嘧啶核苷酸合成酶 (WSV TS)基因 ,进行该病毒的系统发育学研究。方法通过GenBankTM 数据库和DNAMAN分析系统 ,对不同生物来源的胸腺嘧啶核苷酸合成酶进行同源性比较并构建了该基因的系统发育进化树。结果 :WSV TS的氨基酸序列与来自高等生物 ,特别是同哺乳动物有着很高的同源性 ,而与多种病毒的同源性较低。结论WSV ts基因是WSSV基因组中最为保守的基因 ,其进化树的构建对于理解WSSV的进化地位有重要的帮助。 展开更多
关键词 胸腺嘧啶核苷酸合成酶 对虾白斑综合征病毒 同源性分析 系统进化分析
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对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示 被引量:1
15
作者 李新新 刘庆慧 +1 位作者 张秀丽 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期61-65,共5页
以pYD1为载体,制备以酒精酵母为载体的基因工程免疫制剂。参照GenBank中对虾白斑综合征病毒VP28基因序列设计引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒... 以pYD1为载体,制备以酒精酵母为载体的基因工程免疫制剂。参照GenBank中对虾白斑综合征病毒VP28基因序列设计引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光检测外源蛋白的表达。结果获得VP28酵母表面展示菌,测得最佳诱导时间为36~48h。以此展示酵母活细胞分设两个浓度组,腹腔注射螯虾,检测其毒性。结果表明,此重组酵母对螯虾是安全的,该研究为下一步对虾用活载体免疫制剂效果的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 VP28 酵母表面展示 安全性
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对虾白斑综合征病毒液相芯片快速检测方法的建立 被引量:1
16
作者 任硕 陈政晓 +1 位作者 王政 王艳 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第6期27-30,共4页
本研究通过设计、合成并修饰基因特异性引物和寡核苷酸探针并标记生物素,利用该探针与荧光编码微球偶联后,与抽提的对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WWSV)的PCR产物进行杂交反应,用液相芯片检测仪(Luminex200)检测荧光信... 本研究通过设计、合成并修饰基因特异性引物和寡核苷酸探针并标记生物素,利用该探针与荧光编码微球偶联后,与抽提的对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WWSV)的PCR产物进行杂交反应,用液相芯片检测仪(Luminex200)检测荧光信号建立了WWSV快速液相芯片检测方法。该方法具有较好的特异性,偶联特异性探针的微球只与相应的病毒基因的PCR产物反应,而不与其他虾病病毒基因反应,可以检测到107的稀释度。本研究初步建立的WSSV液相芯片检测方法为进一步建立几种虾病同时快速检测奠定了基础。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 液相芯片 快速检测
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从噬菌体展示抗体文库筛选对虾白斑综合征病毒的单链抗体 被引量:1
17
作者 钱娟 齐义鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期461-467,共7页
对虾白斑综合征是一种严重危害对虾养殖业的病毒性疾病。由于目前对其病原体对虾白斑综合征病毒(WSSV)的研究不够深入,所以对WSSV的有效防治仍然是一大难题。为此,用完整的对虾白斑综合征病毒粒子作为靶抗原固相包被,淘选噬菌体展示单... 对虾白斑综合征是一种严重危害对虾养殖业的病毒性疾病。由于目前对其病原体对虾白斑综合征病毒(WSSV)的研究不够深入,所以对WSSV的有效防治仍然是一大难题。为此,用完整的对虾白斑综合征病毒粒子作为靶抗原固相包被,淘选噬菌体展示单链抗体文库,得到两个能够与WSSV结合的单链抗体:E2和H4。单链抗体H4能够结合病毒并抑制病毒对原代培养的对虾淋巴细胞的感染,这些结果表明此单链抗体具有开发为诊断试剂盒和抗病毒药物的潜力。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 单链抗体 淘选 噬菌体展示技术 酶联免疫实验
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对虾白斑综合征病毒(WSSV)高分子量结构蛋白的分离 被引量:1
18
作者 王向东 黄倢 战文斌 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2005年第1期17-22,共6页
 采用蔗糖密度梯度离心从患病对虾组织中提取 WSSV,应用 SDS PAGE对 WSSV结构蛋白进行了分析。采用12%分离胶,将WSSV样品煮沸5 min,应用SDS PAGE分离了WSSV的中低分子量结构蛋白,并将该结果与其他学者已发表的结果进行了比较。首次通...  采用蔗糖密度梯度离心从患病对虾组织中提取 WSSV,应用 SDS PAGE对 WSSV结构蛋白进行了分析。采用12%分离胶,将WSSV样品煮沸5 min,应用SDS PAGE分离了WSSV的中低分子量结构蛋白,并将该结果与其他学者已发表的结果进行了比较。首次通过延长样品煮沸时间,采用8%分离胶,应用 SDS PAGE分离到了 WSSV 100 kD以上的 13 条高分子量结构蛋白,计算出了每条蛋白带的分子量及其在总蛋白中的百分含量。其中 WSSV高分子量结构蛋白的分离丰富了WSSV的研究范围,对今后深入的研究工作具有重要意义。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 结构蛋白 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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对虾白斑综合征病毒新株型WSSV-CN-Pc的毒力研究 被引量:1
19
作者 李凯 江录志 +2 位作者 夏文旭 潘迎捷 王永杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期92-96,共5页
对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是一种能够感染虾类并且造成其大面积死亡的环状双链DNA病毒。WSSV有多种分离株,其毒力有所差异。从克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中分离得到1株WSSV新分离株WSSV-CN-Pc,其毒力... 对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是一种能够感染虾类并且造成其大面积死亡的环状双链DNA病毒。WSSV有多种分离株,其毒力有所差异。从克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中分离得到1株WSSV新分离株WSSV-CN-Pc,其毒力尚不清楚。本研究采用肌肉注射和经口注射的方法,以WSSVTW型作为阳性对照,分别对克氏原螯虾(P.clarkii)和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)进行活体实验。实验结果显示:肌肉注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第6天出现100%的死亡;罗氏沼虾在肌肉注射WSSV-TW后未出现死亡,但在注射WSSV-CN-Pc后的第9天死亡率达100%。经口注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第16天出现100%的死亡;罗氏沼虾经口注射WSSV-CN-Pc后的第19天死亡率为100%,但注射WSSV-TW的实验组并未出现死亡。结果表明,对于克氏原螯虾,WSSV-CN-Pc具有和WSSV-TW相似的毒力,而对罗氏沼虾存在明显的毒力差异。提示克氏原螯虾是WSSV传播途径中的重要因素。 展开更多
关键词 对虾白斑综合征病毒 分离株 毒力 活体实验
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应用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒研究 被引量:1
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作者 陈定虎 杨雷亮 +3 位作者 冯云 张建威 潘星 徐守振 《中国动物检疫》 CAS 2010年第11期31-33,共3页
用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒,阳性反应呈典型的S曲线,说明本检测探针和引物设计合理。经灵敏度测定,当样品DNA浓度低至100拷贝/μL时,仍可以有效扩增,但在103/μL之上时结果最佳。同时,经过与传统探针检测对比试验得出:用Taqma... 用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒,阳性反应呈典型的S曲线,说明本检测探针和引物设计合理。经灵敏度测定,当样品DNA浓度低至100拷贝/μL时,仍可以有效扩增,但在103/μL之上时结果最佳。同时,经过与传统探针检测对比试验得出:用Taqman标记的探针检测相同量的样品时,AllGlo MAR标记的探针(FAM通道)CT值与FAM标记的探针的CT值没有明显区别,但是MAR标记的探针的荧光信号强度要比FAM标记的探针约高40%,更适合于对虾白斑综合征病毒的检测。 展开更多
关键词 AllGlo探针 对虾白斑综合征病毒 检测
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