大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中小白蛋白样阳性神经元的分布与发育(英文)

应用免疫组织化学技术对脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV样阳性神经元的分布与发育进行了观察。结果发现 :①早在胚胎 13d时 ,首先在三叉神经中脑核 (Vme)内观察到许多含小白蛋白 (Parvalbumin ,PV)样阳性神经元 ,主要为大的假单极神经元 ,呈中等阳性反应。②生后 3d时 ,Vme内PV样阳性神经元的数量明显增多 ,免疫反应呈强阳性 ,并可观察到Probst束呈强阳性反应。③生后 10d时 ,在三叉神经脊束核吻侧亚核背内侧部 (Vodm)及三叉神经感觉主核背内侧部 (Vpdm)均出现少量中等强度的PV样阳性神经元。④生后 14d时 ,三叉神经脊束核吻侧亚核邻接的外侧网状结构 (LRF) ,三叉上核尾外侧部 (Vsup CL) ,三叉神经运动核腹侧区 (AVM )及上橄榄核背侧区 (ADO)均出现PV样阳性神经元。⑤生后 2 1d时 ,Vodm和LRF(Vodm -LRF)区、“带状区”包括Vpdm ,Vsup CL ,ADO ,AVM及Probst束内的PV样阳性神经元及纤维的分布均达成年大鼠水平。上述结果表明 ,大鼠脑干内三叉神经本体觉中枢通路中PV样阳性神经元的分布。

老年学习记忆损害大鼠海马和新皮质小白蛋白神经元的丢失

目的 探讨老年学习记忆损害与海马和新皮质 GABA能神经元亚型——小白蛋白 (PV)神经元的关系。方法 通过Morris水迷宫行为检测将相同年龄老年大鼠分为老年学习记忆正常和损害两组 ,采用免疫组化方法定量计数各脑区 PV神经元数密度。结果 老年记忆损害鼠 CA3区和齿状回 PV神经元数密度较老年正常鼠明显减少 ;PV神经元数密度与大鼠在水迷宫中的行为密切相关。结论 CA3区和齿状回 PV神经元丢失可能是老年记忆损害的原因之一 ,提示 GABA能系统可能参与老年学习记忆损害。

Triton损伤成年大鼠嗅上皮对嗅球钙结合蛋白D和小白蛋白表达的影响

目的 探讨嗅觉障碍的可能机制。方法 成年SD大鼠,TritonX 10 0灌流单侧鼻孔,30 ,4 5和6 0d后用免疫组化方法检测嗅球的钙结合蛋白 D(CB)和小白蛋白(PV)表达。结果 损伤后30d ,与对照侧相比,损伤侧嗅球的CB和PV阳性细胞密度减少6 8.9%和6 6 .7% ,4 5d后减少4 6 .4 %和5 0 .0 % ,4 5d的CB和PV阳性细胞密度比30d时增加,6 0d时接近对照侧。结论 大鼠嗅球中CB和PV的表达受Triton诱导的传入神经阻滞的可逆调控。

神经干细胞移植对老年痴呆模型鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元和学习记忆能力的影响

目的:基底前脑是老年性痴呆患者脑皮质下神经元丢失最严重的区域,实验拟验证经神经干细胞移植治疗后老年痴呆鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化以及对其空间学习记忆能力方面的影响。方法:实验于2005-12/2006-07在广州医学院解剖学教研室完成。①动物:清洁级SD雄性大鼠28只,随机数字表法分为3组:正常对照组8只、模型对照组8只、细胞移植组12只。另取10只新生SD鼠用于神经干细胞的分离培养。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:模型对照组、细胞移植组大鼠切断左侧穹隆海马伞,建立老年性痴呆动物模型。利用无血清培养技术获得鼠基底前脑神经干细胞,吸取2.5×1010L-1细胞悬液4μL,术后即刻细胞移植组损伤侧行细胞移植,坐标为前囟+0.6mm,外侧+0.6mm插入,腹侧-5.5mm。③实验评估:移植后4周,采用Y型迷宫对各组动物进行学习记忆能力检测。麻醉后取脑制备组织切片,ABC法免疫组化染色结合图像分析观察各组大鼠基底前脑小白蛋白阳性神经元的变化。结果:①对空间学习记忆能力的影响:细胞移植组空间学习能力、记忆能力均显著高于模型对照组(P<0.05或P<0.01),基本达到正常水平(P>0.05)。②对小白蛋白阳性神经元的影响:与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核和斜角带核的小白蛋白阳性神经元数目分别减少62.5%和30.4%;细胞移植组降低幅度明显小于模型对照组(P<0.01)。与正常对照组比较,模型对照组损伤侧内侧隔核、斜角带核小白蛋白阳性神经元的面积、周长、灰度均显著降低(P<0.05或0.01);细胞移植组上述指标较模型对照组均显著增加(P<0.05或0.01)。③相关性分析:小白蛋白阳性神经元数目与大鼠在Y型迷宫中的学习次数呈显著负相关(r=-0.76^-0.79,P<0.01),与记忆能力呈显著正相关(r=0.78~0.84,P<0.01)。结论:神经干细胞移植对老年性痴呆模型鼠基底前脑退变的小白蛋白阳性神经元具有补充和保护作用,并能够明显改善其学习记忆能力,二者呈正性相关。

大鼠杏仁体基底外侧核中小白蛋白反应阳性神经元受抑制性神经网络支配(英文)

小白蛋白 (PV)神经元作为杏仁核簇基底外侧核 (BL)中局部神经环路成分 ,对杏仁核的情绪、学习和记忆过程等机能发挥重要作用。为探讨 BL中 PV中间神经元的突触形成状态 ,本研究用抗 PV抗体标示 PV神经元 ,以抗多巴胺 (DA)抗体标示多巴胺能轴突及末梢作为传入纤维的标志 ,对大鼠杏仁核做了免疫电镜双标记研究。结果表明 ,突触主要见于 PV免疫阳性神经元的树突结构上 ,包括从树突干到中间及小型树突的各级分支。其中 68%的突触由未标记的轴突终末形成 ,3 2 %分别由 DA(2 1% )和 PV(11% )免疫阳性轴突末梢形成。 PV免疫阳性神经元与未标记末梢所形成的突触大多数是对称性的 ,仅少数为非对称性。这些非对称性突触见于 PV神经元的树突小棘和连续性突触 ,即一个未标记轴突末梢与另一个未标记轴突末梢形成对称性突触 ,后者又与 PV免疫阳性神经元树突形成非对称性突触。 DA和 PV免疫阳性神经元轴突终末与 PV免疫阳性神经元树突之间的突触全部是对称性的。以上结果表明 ,大鼠杏仁核 BL 的

人胎海马结构小白蛋白免疫反应神经元的分布与发育

目的了解人类海马结构神经元的发育。方法用免疫组织化学方法观察了１６～３８周人胎海马结构内小白蛋白免疫反应性（ＰＶ－ＩＲ）神经元的分布和发育。结果ＰＶ－ＩＲ神经元最早见于２３周海马结构内，主要位于下托和ＣＡ１区的锥体细胞层和多形层（始层），以下托为主。２４周开始，ＰＶ－ＩＲ神经元数量逐渐增加，大多位于下托和ＣＡ１区锥体细胞层／多形层交界处附近，少数见于ＣＡ２。直至３８周，ＣＡ３和齿状回内才可见到少量ＰＶ－ＩＲ神经元。含ＰＶ－ＩＲ神经元均为非锥体细胞，它们的染色强度和突起的数量与长度随着胎龄增大而增加。结论海马结构内ＰＶ－ＩＲ神经元出现的早晚与该细胞分化成熟的早晚密切相关。

孕酮对沙土鼠脑缺血再灌海马小白蛋白免疫反应的影响

目的:观察孕酮对沙土鼠脑缺血再灌海马小白蛋白免疫反应的影响。方法:以双侧颈总动脉夹闭法制作脑缺血再灌注模型,免疫细胞化学方法显示海马小白蛋白免疫反应的变化。结果:脑缺血再灌后1～7 d,海马小白蛋白阳性神经元增多;第7天背侧海马CA1区锥体细胞层呈现小白蛋白阳性致密条带。脑缺血再灌孕酮处理后小白蛋白阳性神经元进一步增加,可见许多串珠状小白蛋白阳性突起,未见海马CA1区锥体细胞层小白蛋白阳性致密条带结构。结论:孕酮可能通过对小白蛋白的表达调控发挥对脑缺血再灌损伤的部分神经保护作用。

人胎视网膜细胞凋亡与小白蛋白免疫阳性神经元的发育

目的 :观察人胎视网膜细胞凋亡与小白蛋白 (Parvalbumin ,PV)免疫阳性神经元的分布与发育。方法 :不同孕龄的人胎 1 6例 ,TUNEL法标记凋亡细胞 ,ABC免疫细胞化学方法观察PV免疫阳性神经元的发育。结果 :(1 )细胞凋亡观察 :1 2周人胎视网膜未见凋亡细胞 ;1 5周、1 7周凋亡细胞较多 ,大小不一 ,分布于视网膜的全层 ;2 0周凋亡细胞主要集中在内核层 ,数量减少 ;2 8周凋亡细胞仅见于内核层 ,呈指环样外观 ,着色较深 ,数量较 2 0周减少明显。 (2 )PV免疫阳性神经元发育 :1 2周人胎视网膜未见PV免疫阳性神经元 ;1 5周、1 7周视网膜节细胞层和内核层有弱阳性的PV免疫阳性神经元 ;2 0周PV免疫阳性神经元主要分布于外核层和内核层 ,内核层的数量较多 ;2 8周PV免疫阳性神经元的分布与 2 0周相似 ,但内核层的数量减少 ,呈整齐的带状排列 ,着色增强。结论 :在胚胎 2 8周视网膜神经元之间的突触联系已基本建立 ,而PV免疫阳性神经元发育和细胞凋亡在时间和数量变化上的一致性提示Ca2 + 在视网膜的发育中起重要作用。

谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核内GFP阳性神经元的分布及与小白蛋白的共存

目的观察谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白（GAD67-GFP）基因敲入小鼠三叉神经尾侧亚核（Vc）浅层内，表达GFP的GABA能神经元的分布及其与小白蛋白（PV）的共存。方法分别运用原位分子杂交与免疫组织化学相结合；GFP与神经元标记物——神经元核蛋白（NeuN）或PV免疫荧光染色相结合的双重标记方法，在光学显微镜和激光共聚焦显微镜下进行观察。结果1．Vc浅层内90％以上的GFP阳性神经元同时表达GAD67 mRNA，而几乎所有表达GAD67 mRNA的阳性神经元都呈GFP阳性；2．GFP阳性神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层内，细胞较小，尤其在Ⅱ层内可见大量密集分布的GFP阳性细胞和突起。GFP阳性神经元分别占Ⅰ、Ⅱ层内NeuN阳性神经元总数的19．4％和24．3％；3．GFP／PV双标神经元主要分布于Ｖc的Ⅰ－Ⅱ层，这些双标神经元大约占PV阳性神经元的62．4％，占GFP阳性神经元的12．8％。结论在Ｖc表达GFP的GABA能神经元主要密集分布于与外周伤害性信息传递关系密切的板层内，且大部分PV样阳性神经元属于GABA能神经元。

神经干细胞和BDNF联用对痴呆模型鼠基底前脑小白蛋白表达的影响

探讨神经干细胞(NSCs)和脑源性神经营养因子(BDNF)联用对老年痴呆大鼠基底前脑小白蛋白(PV)表达的影响。利用无血清培养技术获得新生SD大鼠海马NSCs。切断SD大鼠左侧穹隆海马伞,基底前脑注射NSCs,同时侧脑室注射BDNF。4周后行免疫组织化学结合图象分析技术观察各组大鼠基底前脑PV蛋白表达,同时采用半定量RT-PCR法分析基底前脑PVmR-NA表达水平情况。结果发现,损伤组大鼠PV蛋白在内侧隔核和斜角带的表达较正常组明显下降(P<0.01);移植组PV蛋白表达较损伤组有提高(P<0.05),但与正常组比较有显著性差异(P<0.05);联合组PV蛋白表达与正常组无显著性差异(P>0.05)。RT-PCR结果显示,PVmRNA在损伤组和正常组表达量分别为0.2407±0.0825,0.8536±0.1248,两者有显著差异(P<0.01);移植组的表达量为0.5016±0.1009,与损伤组比较差异显著(P<0.05);联合组的表达量较损伤组明显增高(P<0.01),也高于移植组(P<0.05),与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。本实验结果提示NSC和BDNF联用较单独使用NSC或BDNF更好地提高PV蛋白及其mRNA的表达,二者具有协同作用。

大鼠脊髓前角神经元内维生素D依赖性钙结合蛋白与小白蛋白共存

目的 :观察大鼠脊髓前角神经元内维生素D依赖性钙结合蛋白 (CB)与小白蛋白 (PV)的共存情况 .方法 :免疫荧光组织化学双重标记技术 .结果 :脊髓前角内的部分中、小型神经元呈CB或PV阳性 ;绝大部分CB阳性的前角神经元亦呈PV阳性 ,即CB与PV共存于这些神经元 .结论 :CB与PV共存于部分前角神经元 ,这些神经元可能为Renshaw细胞并参与对前角α运动神经元的反馈抑制调控 .

大鼠隔－斜带复合体中含小白蛋白蛋白和含胆碱乙酰化酶的神经元

用免疫细胞化学ＰＡＰ法，对成年大白鼠隔－斜带（Ｓ－ＤＢ）复合体中，含小白蛋白（ＰＶ）神经元的分布和形态学进行了研究，并与含胆碱乙酚化酶（ＣｈＡＴ）神经元的观察进行了比较。含ＰＶ神经元主要位于内侧隔核（ＭＳ）、斜带垂直支（ｖＤＢ）和斜带水平支（ｈＤＢ）。ＰＶ免疫反应神经元的形状和大小在Ｓ－ＤＢ复合体的各个核区或同一核区都不相同，表明这些神经元具有多样的形态学特征。在整个Ｓ－ＤＢ复合体中，含ＰＶ和含ＣｈＡＴ神经元的比例，各占ＰＶ和ＣｈＡＴ阳性反应细胞总数的４７／和５３／，在ＭＳ、ｖＤＢ和ｈＤＢ中，ＰＶ免疫反应神经元的比例分别为３８％、５４％和５９．５％，其余为含ＣｈＡＴ的胆碱能神经元。

成年鼠穹隆海马伞损伤后基底前脑小白蛋白的变化

目的 :探讨痴呆模型鼠基底前脑含小白蛋白 (parvalbumin ,PV)神经元的变化。方法 :切断老年SD大鼠左侧穹窿海马伞 (fimbria fornix ,FF) ,用免疫组化结合图像分析技术 ,观察大鼠基底前脑PV阳性神经元数目及形态学的变化情况。结果 :穹窿海马伞切断 1个月后 ,损伤组损伤侧内侧隔核 (medialseptum ,MS)和斜角带核(verticaldiagonalband ,VDB)的PV阳性神经元大量减少 (P <0 .0 5 ) ,分别减少 5 8.4 %和 36 .8%。细胞形态学参数改变明显 (P <0 .0 1) ,细胞膜受体含量显著减低 (P <0 .0 5 )。结论 :痴呆模型鼠基底前脑含小白蛋白神经元也逆行性溃变。

传入神经阻滞对成年大鼠嗅球中小白蛋白的影响

目的 :研究传入神经阻滞对成年大鼠嗅球小白蛋白 (PV)的影响情况。方法 :用免疫组化方法检测损伤嗅上皮对嗅球PV的表达的影响。结果 :损伤嗅上皮导致损伤鼻孔同侧嗅球中PV阳性细胞数目减少。结论 :嗅球中PV表达的降低是受传入神经阻滞影响的。

全脑缺血早期大鼠海马各区域小白蛋白免疫反应阳性中间神经元的不同时相变化的定量分析

近十几年来，缺血性脑损伤的细胞分子机制已成为神经科学界的重要研究内容之一。本实验用免疫组织化学定量分析方法对四管阻塞造成的全脑缺血20min后再灌流0～24h的大鼠海马小白蛋白中间神经元的变化进行了观察。结果显示：再灌流0～6h之间CA2、CA3区小白蛋白阳性中间神经元均出现一过性减少．到24h时恢复三缺血前水平：而CA1区小白蛋白阳性中间神经元的减少出现于再灌流12h后。此外齿状回颗粒层及门区小白蛋白阳性中间神经元变化不显著。本实验结果提示，短暂性全脑缺血早期海马各区域小白蛋白阳性神经元减少的不同时相特征．可能与海马各区域的不同缺血敏感性及不同缺血的病理学表现有关。

小白蛋白在新生大鼠缺氧后癫痫易感性升高中的作用机制

目的观察新生大鼠早期发育过程中及缺氧性痫性发作后海马小白蛋白(parvalbumin,PV)表达量和海马神经元内Ca2+荧光强度的改变,探讨PV在新生大鼠缺氧后癫痫易感性升高中的作用机制。方法采用出生后10 d的SD大鼠分为缺氧组与对照组(各64只),缺氧组建立改良Jensen缺氧诱导痫性发作模型,于1 d、3 d、7 d、14 d各组分别取16只大鼠取脑,免疫组化和免疫印迹检测海马PV的表达,流式细胞术检测海马神经元内Ca2+荧光强度。结果缺氧后7 d,海马CA1区、CA3区及DG区PV免疫阳性细胞数均明显减少,至缺氧后14 d,稍增加至对照组3 d的水平,而PV含量在缺氧后7 d、14 d则明显减少。对照组PV免疫阳性细胞数和PV含量在CA1区、CA3区及DG区均从3 d开始增加,并持续至14 d。与对照组比较,缺氧后海马神经元内Ca2+荧光强度增加。结论新生大鼠缺氧诱导痫性发作后海马PV表达减少可能导致其癫痫易感性升高。缺氧后细胞内游离Ca2+增加可能导致PV神经元损伤。

人胎海马结构小白蛋白免疫反应性神经元的分布

目的 观察人胎海马结构小白蛋白 (PV)免疫反应性神经元的分布。 方法 取孕龄为 30周的人胎尸体 ,用ABC免疫细胞化学方法显示PV免疫反应性神经元。 结果 海马结构的各区域内均有丰富的PV免疫反应性神经元分布 ,以锥体细胞层最为密集。CA1、CA2、CA3始层PV免疫反应性神经元呈散在分布 ,胞体较小 ,多为三角形或梭形 ,细胞突起 2～ 3个 ,锥体细胞层PV免疫反应性神经元数量最多 ,分布密集 ,细胞形态多样 ,细胞的突起伸向浅层的始层和深层的分子层 ;分子层PV免疫反应性神经元较稀少。门区PV免疫反应性神经元分布密集 ,但细胞分层不明显 ,可见部分细胞的突起伸向齿状回 ;齿状回PV免疫反应性神经元集中分布于颗粒细胞层 ,其余各层有少量散在的PV免疫反应性神经元 ,细胞染色浅淡 ,无明显突起。下托复合体PV免疫反应性神经元主要分布于锥体细胞层 ,始层和分子层较稀少 ,细胞淡染 ,突起不明显。 结论 海马结构的各区域均有丰富的PV免疫反应性神经元分布 ,主要分布于锥体细胞层和齿状回的颗粒层。各区域PV免疫反应性神经元发育成熟的时间可能并不同步 ,CA1～

小白蛋白阳性细胞在大鼠红核内的分布

用卵白素生物素复合物法（ａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎｃｏｍｐｌｅｘｍｅｔｈｏｄ，ＡＢＣ）观察了小白蛋白阳性细胞在大鼠红核内的分布状态．小白蛋白阳性细胞在红核内分布按部位有一定的差异，如吻侧小白蛋白阳性细胞所占比例最多，约占细胞总数的９２％，中间吻侧和中间尾侧分别占细胞总数的８８％和７１％，尾侧则相对较少，约占７３％．根据细胞的大小及微细结构的特点，红核的细胞可分为大、中、小３种细胞．中、小细胞多数为小白蛋白阳性细胞，散在性地分布在红核的全区，而大细胞主要分布于尾侧，小白蛋白阳性细胞相对较少．

新生儿大脑皮质含小白蛋白(Parvalbumin)神经元的免疫组织化学研究

小白蛋白(parvaibumin PV)是一种水溶性低分子量的钙结合蛋白,本实验用免疫疫组化法研究了新生儿大脑皮质含 PV 神经元的分布。PV 阳性神经元为非锥体型,主要分布于中央后回、听皮质及视皮质(17区),在中央前回,wernicke's 区与海马 PV 阳性神经元的数目较少,前额叶很少见到 PV 阳性神经元。在听皮质及中央后回,阳性神经元主要集中于Ⅳ层,少数在Ⅴ、Ⅵ层;在视皮质则分布在Ⅴ、Ⅵ、层及ⅣB 层;wernieke's 区深层(Ⅴ、Ⅵ层)及海马锥体细胞层可见部分阳性神经元。在上述皮质区第Ⅰ层亦可观察到阳性纤维与散在阳性神经元.此外,在中央后回及听皮质的白质内有许多 PV 阳性纤维和终末样结构.