小眼畸形相关转录因子转录调控与白癜风临床类型的相关性研究

目的研究小眼畸形相关转录因子(MITF)及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白(TRPs)与白癜风临床类型的相关性。方法选择非节段型白癜风(NSV)17例和节段型白癜风(SV)13例,对所有病例均取白斑区、远离白斑正常肤色区的表皮片,首先应用免疫组织化学方法原位检测黑素细胞的MITF及其主要转录调控分子酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)的表达情况,并对所有30例远离白斑正常肤色区的表皮黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测培养的黑素细胞MITF及TYR、TYRP1和TYRP2的表达情况。结果 (1)原位表达结果:白斑区:所有病例MITF及TYR、TYRP1和TYRP2的表达均为阴性;正常肤色区:SV的MITF表达显著抑制,与NSV及正常人对比均具有统计学差异(P<0.05),NSV的MITF、NSV与SV的TYR、TYRP1和TYRP2表达与正常人对比均没有统计学差异(P>0.05)。(2)培养黑素细胞的蛋白表达结果:NSV的TYRP2表达下调,与正常人对比具有统计学差异(P<0.05),而MITF、TYR和TYRP1表达正常;SV的MITF与NSV及正常人对比均具有统计学差异(P<0.05),而TYR、TYRP1和TYRP2正常表达。结论 NSV和SV可能存在不同的MITF转录调控机制。

小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用

背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以“MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体”为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。

肥大细胞小眼畸形相关转录因子的研究进展

小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是调节基因表达的转录因子。MITF基因主要在黑素细胞[1]、视网膜色素上皮细胞(Retinal pigment epithelial cells,RPE)[2]、破骨细胞[3]和肥大细胞(Mast cell,MC)[4]中表达。MITF调控的生物过程的范围很广,包括细胞分化、存活、增殖、侵袭、衰老、代谢等[5],肥大细胞的生理功能离不开MITF。

白癜风表皮黑素细胞超微结构及小眼畸形相关转录因子转录调控研究

目的 研究白癜风黑素细胞超微结构和小眼畸形相关转录因子（MITF）及其转录调控的酪氨酸酶相关蛋白（TRP）与白癜风临床类型与病程的相关性.方法 选择不同病程的寻常型白癜风（VV）12例和节段型白癜风（SV）8例,分别取白斑区、白斑边缘正常肤色区和远离白斑正常肤色区的表皮片,经组织学确定其表皮的完整性.透射电镜观察10例患者（VV 6例,SV 4例）不同区表皮黑素细胞的超微结构特点.对所有20例远离白斑正常肤色区的表皮片黑素细胞进行培养,应用免疫印迹方法检测MITF及其转录调控的酪氨酸酶（TYR）、酪氨酸酶相关蛋白1（TYRP1）和酪氨酸酶相关蛋白2（TYRP2）的表达水平.结果 白癜风表皮黑素细胞超微结构病理改变：10例中7例白斑区表皮内未见黑素细胞,1例短病程和2例长病程VV分别可见少量黑素体显著减少或缺失的黑素细胞;白斑边缘正常肤色区,6例VV中,3例病程小于15个月者可见黑素细胞超微结构异常,而4例SV中仅1例异常;远离白斑正常肤色区,10例黑素细胞超微结构均正常.白癜风表皮黑素细胞MITF及其转录调控TRP的表达：VV的MITF表达下调与TYR、TYRP1、TYRP2的表达下调一致;SV存在MITF显著表达下调.而TYR、TYRP1、TYRP2几均正常表达.结论 VV和SV可能存在不同的表皮黑素细胞超微结构病理改变和MITF转录调控机制.

小眼畸形转录因子家族相关性肾细胞癌四例并文献复习

目的探讨小眼畸形转录因子（MiTF）家族相关性肾细胞癌的临床和病理特征、诊断和治疗。方法回顾性分析2016年1月至12月收治的4例MiTF家族相关性肾细胞癌，并结合文献对该病的影像学、病理特征及免疫组织化学结果进行总结。结果4例患者中，3例因无痛性肉眼血尿就诊，入院后常规体检及相应的辅助检查后考虑为肾占位，行根治性肾切除术，术后免疫组织化学确诊为Xp11.2易位/TFE3融合基因相关性肾细胞癌；另1例因糖尿病16年常规体检发现肾占位就诊，入院后检查考虑为肾下极占位，行肾下极部分切除术，术后免疫组织化学确诊为t（6；11）（p21；q12）/TFEB融合基因相关性肾细胞癌。 结论MiTF家族相关性肾细胞癌是一种临床较为少见的易位性肾癌，临床表现与其他类型的肾癌非常相似，确诊需依赖病理检查及免疫组织化学结果，目前根治性手术切除是其主要的治疗方法，预后需密切观察。

黑素合成相关MITF基因及其表达研究概况

小眼畸形相关转录因子(MITF)是黑素合成过程中最重要的转录因子。介绍了MITF基因及其转录水平的调控;综述了MITF蛋白及其对黑素细胞作用和黑素合成的调控,其主要通过调控酪氨酸酶(TYR)基因家族来控制黑素细胞的生存和分化以及黑素的合成、转运和分布;介绍了MITF在化妆品、医学方面的应用研究现状,并对其在该领域的应用和研究趋势进行了展望。

橘色双冠丽鱼体色相关基因mitf的结构及表达调控特性

为了解小眼畸形相关转录因子mitf基因在鱼类早期体色褪黑过程中的调控作用,本研究采用c DNA末端快速扩增(RACE)技术获得橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)mitf基因c DNA序列全长,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其在橘色双冠丽鱼胚胎不同发育时期、体色褪黑不同时期和各个组织中的表达规律。获得mitf基因2个亚型,其中,mitf1的cDNA全长为1816bp,包括5’非编码区(UTR)158 bp、3’UTR 428 bp、开放阅读框(ORF)1230 bp,共编码409个氨基酸;mitf2的c DNA全长为1638 bp,包括5’UTR 160 bp、3’UTR 428 bp和ORF 1050 bp,共编码349个氨基酸。同源性和系统进化分析显示,mitf1和mitf2聚在一小支,与慈鲷科(Cichlidae)鱼类同源性最高,与哺乳类动物同源性较低。qRT-PCR结果显示,在成鱼各个组织中,mitf1和mitf2均有不同程度表达,其中,眼部表达量最高且显著高于其他组织(P<0.05),肌肉、脑和肾脏也有较高表达;mitf1和mitf2在胚胎各个发育时期均有表达,在受精卵时期表达量最高,显著高于其他胚胎期;随着橘色双冠丽鱼体色由黑色过渡到橘黄色,mitf1和mitf2在鱼皮肤、鳞片、尾鳍中的表达均呈逐渐下降的趋势,表明mitf基因表达与鱼体色由黑到黄转变的表型间存在关联性,推测与鱼体色发育阶段色素细胞的分化和分布比例的动态变化相关。本研究通过了解鱼类体色发育和变异的分子基础,可为鱼类色素细胞发育和体色人工改良积累资料。

小眼畸形相关转录因子在黑色素瘤转移中的作用

小眼畸形相关转录因子（MITF）一直是近几年黑色素瘤细胞研究中的热点.异常表达的MITF与黑色素瘤的发生和转移密切相关,且MITF低表达能促进黑色素瘤细胞的侵袭.研究MITF及与其相关的分子和信号通路的调节关系,将进一步加深对恶性黑色素瘤转移分子机制的理解,为开发新的分子靶向药物提供帮助.

IRF4与MITF协同作用于络氨酸酶启动子的相关机制

目的:探索干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)与小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)协同作用激活络氨酸酶(tyrosinase,T YR)启动子的作用机制。方法:利用荧光素酶检测、细胞免疫荧光蛋白定位、GST融合蛋白沉降技术(GST-pull down)、免疫共沉淀等多种体外细胞实验学方法,观察IRF4与MITF的协同转录激活效应、亚细胞定位和蛋白-蛋白相互作用情况。结果:IRF4与MITF蛋白共同表达于细胞核;IRF4可以增强MITF在TYR启动子上的转录激活作用,产生协同效应,而在其他MITF目标启动子上不产生;IRF4不能单独激活TYR启动子,且与丧失功能的MITF突变蛋白在TYR启动子上不能产生协同作用;两个蛋白之间无直接相互作用。结论:IRF4与MITF在TYR启动子上产生协同作用,该效应主要依靠MITF进行调节;两个蛋白之间的相互作用可能需要DNA参与。

喉癌及癌旁组织小眼畸形相关转录因子基因表达及临床意义

目的分析喉癌及癌旁组织中小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-asociated transcription factor,MITF)mRNA的表达情况,推测其临床意义。方法收集2014年3月至2016年6月南京鼓楼医院耳鼻咽喉头颈外科就诊的33例患者喉癌及癌旁新鲜组织标本,提取组织RNA,采用qPCR的方法检测MITF mRNA表达情况,收集患者的临床病理资料进行统计分析。结果喉癌组织中MITF mRNA的ΔCt值(10.01±4.61)高于相应的癌旁组织(7.64±6.57),MITF在喉癌中的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P=0.016)。喉癌组织中的MITF基因表达在不同年龄(P=0.259)、不同T分期(P=0.118)、是否淋巴结转移(P=1.000)、不同肿瘤部位(P=0.079)、不同分化程度(P=0.481)之间无统计学差异。但MITF mRNA在晚期(Ⅲ和Ⅳ期)喉癌患者中的表达明显高于早期(Ⅰ和Ⅱ期),差异有统计学意义(P=0.039)。33例喉癌组织中MITF低表达患者的中位总生存期为29个月(12~52个月),高表达患者的中位总生存期为30个月(8~56个月),低表达与高表达患者中位总生存期差异无统计学意义(χ^2=1.594,P=0.207)。结论喉癌组织中MITF mRNA表达较癌旁组织高,且MITF mRNA在晚期喉癌患者组织中的表达高于早期患者,MITF基因的表达可能与喉癌的发生发展相关。

小眼畸形相关转录因子基因表达调控及其相关疾病致病机制研究进展

小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)是一种具有碱性螺旋-环-螺旋亮氨酸拉链结构的转录因子,它在神经嵴源性黑素细胞的生存、增殖和分化以及黑色素的合成、转运和分布过程中起着至关重要的作用。MITF基因突变会影响黑素细胞的功能,从而导致与黑色素相关的疾病。了解MITF对黑素细胞的作用机制可为这些疾病的治疗提供一些线索。本文就MITF基因的表达调控、对黑素细胞的调控作用以及其导致Waardenburg综合征的机制做一综述。

MicroRNA-100-5p通过成纤维生长因子21靶向调控羊驼黑素细胞的黑色素生成

目前已知许多microRNA(miRNA)可以调节动物毛色及黑色素生成,但miR-100-5p调节黑色素的分子机制尚未完全了解。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)是miR-100-5p的预测靶基因,萤光素酶报告基因检测结果表明,miR-100-5p通过与FGF21的3′非翻译区(3′UTR)结合来调节FGF21。在本研究中,用miR-100-5p过表达质粒和阴性对照质粒转染羊驼黑素细胞,结果表明,miR-100-5p过表达显著降低FGF21的mRNA和蛋白质表达。同时,抑制细胞外调控MAP激酶(extracellular regulated MAP kinase,ERK)信号通路,上调小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)和酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2),从而增加了黑色素的产生。结果表明,miR-100-5p可能通过ERK信号通路靶向FGF21,从而调节黑色素生成。

光甘草定-白藜芦醇-虎杖苷组合物的协同美白抗氧抗炎活性

围绕体外美白相关功效,对10种美白成分进行了功效对比,并从中优选出强功效成分进行组合筛选,发现了由虎杖苷、白藜芦醇、光甘草定构成的组合物具备较强美白效果,即使在较低浓度0.0001μmol/L,该组合物可显著抑制细胞内黑色素生成(抑制率19.47%)及酪氨酸酶活性(抑制率23.7%),同时表现出较强自由基清除能力,DPPH的IC50为0.3445 mmol/L,羟自由基的IC50为19.82 mmol/L。另外,该组合物具备一定抗炎活性,可抑制一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子(TNFα)的生成,并显著下调小眼畸形相关转录因子(MITF)通路相关基因表达。为其在化妆品类中的应用提供了理论依据。

中药何首乌促进黑色素生成的作用机理研究

目的研究中药何首乌在B16黑素瘤细胞中促进黑色素生成的作用机理。方法用MTT法、多巴氧化法及NaOH裂解法测定何首乌对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。RT-PCR和Western blotting法分别检测何首乌作用前后酪氨酸酶、小眼相关转录因子(MITF),酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)基因表达和蛋白合成的变化。结果随何首乌加药浓度的增大,细胞增殖率、酪氨酸酶活性和黑素合成能力明显增强;何首乌可明显促进酪氨酸酶和MITF的基因表达和蛋白合成,但对TRP-1、TRP-2的表达几乎没有影响。结论何首乌在体外能显著刺激B16细胞中黑色素的生成,上述变化可能是通过促进酪氨酸酶和MITF的基因表达和蛋白合成以及激活酪氨酸酶的活性来实现的。

两种天然产物对B16F10细胞增殖及黑色素合成抑制机理研究

旨在研究10-羟基喜树碱(10-hydroxycamptothecin,HCPT)和白藜芦醇(Resveratrol,Res)对体外培养的小鼠恶性黑色素瘤B16F10细胞的增殖及黑色素合成抑制机理。利用MTT法、显微观察、L-Dopa氧化法、Na OH裂解法分析不同浓度HCPT和Res对细胞增殖、细胞形态、酪氨酸酶活性及黑色素合成含量的影响。荧光半定量PCR方法(Semi-RT-PCR)分析该化合物对黑色素合成关键因子酪氨酸酶(TYR)和小眼相关转录因子(MITF)基因表达的影响。结果表明HCPT(40、80、120、160和200μmol/L)和Res(80、120、160和200μmol/L)能够通过诱导细胞凋亡抑制B16F10细胞的增殖,同时对酪氨酸酶活性和细胞黑色素生成具有明显抑制作用(P<0.05),且呈现浓度依赖性。另外,不同浓度的HCPT以及高浓度Res(120和160μmol/L)能够显著下调B16F10细胞TYR和MITF基因的mRNA水平。HCPT和Res可能通过诱导细胞凋亡抑制B16F10细胞的增殖,同时通过下调MITF基因转录,抑制TYR m RNA的表达及TYR酶活性,进而抑制细胞黑色素的生成。

紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响

目的探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0μg/L)。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平。结果与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低,S期和G_(2)/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论紫铆花素可能通过调节SCF,cKit,MITF的表达而影响A375细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性。

黑芝麻提取物促B16黑素瘤细胞黑素合成及其机制的研究

目的研究黑芝麻的水提取物对B16黑素瘤细胞系酪氨酸酶活性、黑素合成及相关基因和蛋白表达的影响,探讨黑芝麻促进黑色素合成的可能机制。方法选择3种浓度(0.5,1,2 mg/ml)的黑芝麻水提物作用于B16黑素瘤细胞72h,观察其对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性和黑素含量的影响。免疫印迹法和半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测药物作用48 h前后酪氨酸酶(Tyrosinase)、小眼相关转录因子(microphthalmia associated transcription factor,MITF),酪氨酸酶相关蛋白酶1(TRPl)和酪氨酸酶相关蛋白酶2(TRP2)蛋白和mRNA表达水平的变化。结果3种浓度的黑芝麻水提物可轻微促进B16细胞的增殖(P>0.05);试验浓度范围内可明显促进B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性增加(P<0.05),并以浓度依赖方式促进酪氨酸酶和MITF的蛋白和mRNA表达(P<0.05),但对TRP-1、TRP-2的表达几乎没有影响(P>0.05)。结论黑芝麻水提物在体外能直接刺激B16黑素瘤细胞黑色素的合成,上述变化可能通过促进酪氨酸酶和MITF的基因转录和蛋白表达作用来完成。

蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成及其机理的初步研究

目的观察中药蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成的作用,并初步探讨其作用机理。方法 MTT法、L-Dopa氧化法、NaOH裂解法探讨不同浓度蟛蜞菊乙醇提取物作用于小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16)72 h后,对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素含量的影响。RT-PCR检测药物作用前后酪氨酸酶、小眼相关转录因子(MITF)等基因表达的影响。结果与对照组比较,蟛蜞菊乙醇提取物能促进B16细胞的增殖,促进酪氨酸酶活性增加和黑色素生成增多;可剂量依赖性上调酪氨酸酶和MITF的mRNA表达。结论蟛蜞菊乙醇提取物可促进B16细胞黑色素生成,其机制可能是通过促进B16细胞增殖、增强酪氨酸酶和MITF的基因表达来实现。

丙戊酸通过Mitf通路促进企鹅珍珠贝黑色素合成

研究利用HPLC-MS/MS检测、酪氨酸酶活性分析和荧光定量PCR技术,探索丙戊酸(Valproic acid, VPA)作为企鹅珍珠贝[Pteria penguin (R?ding, 1798)]黑色素增强剂的生物毒性、有效性和作用途径。生物毒性分析显示,高浓度(100 mmol/L)丙戊酸作用24h即可显著降低存活率至83.3%(P<0.05),并存在明显的时间依赖效应, 10 mmol/L丙戊酸作用72h是最大的安全使用浓度和作用时间。丙戊酸的作用分析发现, 10和100 mmol/L丙戊酸作用72h可以显著提高企鹅珍珠贝黑色素含量43.7%(P<0.05)和47.1%(P<0.05),并显著提高酪氨酸酶(黑色素合成标志酶)活性59.7%(P<0.05)和136.1%(P<0.01),说明丙戊酸可以有效地促进企鹅珍珠贝的黑色素合成。对丙戊酸的作用途径分析发现,丙戊酸可以显著增加小眼相关转录因子(Melanogenesis associated transcription factor, Mitf)、酪氨酸酶(Tyrosinase, Tyr)、Cdk2 (Cyclin-dependent kinase 2)和Bcl2 (B-cell lymp homa2)等黑色素合成相关基因的表达,但对环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, Creb2)的表达无显著影响,说明丙戊酸是通过Mitf-Tyr-melanin途径参与企鹅珍珠贝黑色素合成的。研究为在生产上建立珍珠贝的色泽优化技术提供了重要数据。