L6565小鼠白血病病毒诱发小鼠白血病

为探讨病毒与白血病发生的关系 ,我们用L6 5 6 5小鼠白血病病毒 (L6 5 6 5MLV)悬液感染乳鼠 ,每周观察小鼠的发病情况及病理变化 ,并用逆转录一聚合酶链反应 (RT PCR)动态检测小鼠体内病毒核酸的分布。结果发现 :小鼠感染病毒后 3～ 5周 ,其脾脏和淋巴结呈早期白血病的病理改变。至第 10～ 12周小鼠发生淋巴细胞白血病 ,表现出耸毛、活动减少、腹膨胀等症状。病毒核酸于感染后第 2周首先在小鼠胸腺、脾脏检测到 ,随时间延长 ,病毒核酸广泛分布在外周血、胸腺、脾脏、淋巴结等多种脏器组织中。本实验表明L6 5 6 5小鼠白血病病毒可诱发小鼠白血病 ,其机制可能与病毒促使淋巴细胞向白血病细胞转化有关。

绞股蓝总皂苷对小鼠白血病L1210细胞抑制作用初探

目的:探讨绞股蓝总皂苷(Gypenosides,Gyp)对小鼠白血病L1210细胞生长抑制的作用机制。方法:采用MTT法检测Gyp对体外培养的小鼠L1210细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪检测Gyp对L1210细胞线粒体膜电位的影响;DAPI染色检测Gyp对L1210白血病细胞核的变化;单细胞凝胶电泳法检测Gyp对白血病L1210细胞DNA损伤的影响。结果:浓度为100～500μg/mL的Gyp对L1210细胞增殖生长有抑制作用,350μg/mL的Gyp作用于L1210细胞0、12、24 h,线粒体膜电位显著下降;Gyp(350μg/mL)作用4 h时,细胞的活性氧产量最高。Gyp(350μg/mL)作用4、12、24 h后,单细胞凝胶电泳观测到DNA损伤;DAPI染色发现细胞核发生变化,并有时间依赖性。结论:Gyp能抑制L1210细胞增殖,这种抑制作用与活性氧的产生、线粒体膜电位下降和DNA损伤有关。

混合骨髓移植后过继免疫治疗小鼠白血病

背景:急性白血病自体造血干细胞移植后复发率高,异基因造血干细胞移植后移植相关病死率高,混合造血干细胞移植及移植后过继免疫治疗有可能取长补短,提高疗效。目的:观察自体骨髓混合H-2半相合异体骨髓移植后供体淋巴细胞输注+白细胞介素2治疗对小鼠白血病的疗效。方法:将Balb/c小鼠经直线加速器照射3Gy后分为白血病模型组、白血病模型照射组、混合移植组、自体骨髓移植组,均尾静脉注射5×105K562(GFP+/NeoR+)或K562(GFP-/NeoR-)细胞。7d后6Gy照射,自体骨髓移植组移植自体骨髓细胞或联合白细胞介素2治疗;混合移植组移植小鼠自体骨髓细胞混合1/10的H-2半相合异体骨髓细胞后应用白细胞介素2或联合供体淋巴细胞输注治疗。4周后行小鼠外周血及骨髓细胞形态检查,外周血细胞亚群、GFP及NeoR基因测定,肝、脾匀浆细胞GFP和NeoR基因测定。结果与结论:白血病模型组小鼠因骨髓造血功能衰竭于20d内全部死亡,白血病模型照射组小鼠因造血功能衰竭于14d内全部死亡;自体骨髓移植组、混合移植组均有多少不等小鼠无白血病存活超过28d,且混合骨髓移植后及自体骨髓移植后应用白细胞介素2治疗可提高白血病小鼠长期无病生存率,在此基础上联合供体淋巴细胞输注可更进一步提高白血病小鼠长期无病生存率。

二甲基苯蒽(DMBA)诱发615小鼠白血病的细胞遗传学、免疫表型及移植生物学特性的研究

化学致癌物在人类白血病的发生中占有重要地位,接触苯等溶剂与人类白血病发生的关系已得到流行病学的证明。在我们以前的研究中发现,615近交系小鼠对化学致癌剂——DMBA十分敏感,其诱发率可达54.2％,有时高达100％(本实验室未发表资料),诱发白血病的类型主要为淋巴细胞型,这为我们研究化学致白血病作用的机理提供了良好的模型。

小鼠白血病

小鼠白血症在实验鼠群中感染较广,尤其是当实验小鼠经放射或化学致癌因子处理后,容易使小鼠的淋巴瘤中的白血病病毒颗粒激活,即使是无菌小鼠也不例外。近年来,应用鼠源性材料制备单克隆抗体(Mcab)来治疗的各种疾病日渐增多,为此,对该病的流行病学、病原学、临床表现及实验诊断作一概述。

夜香树提取物对小鼠白血病L1210细胞生长的抑制作用

目的探讨夜香树不同提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、平板集落法和Hoechst33258荧光染色法观察夜香树提取物对L1210细胞的生长抑制和凋亡的影响。结果夜香树提取物中正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞有浓度依赖性的细胞毒性作用,在终浓度为62.5μg.ml-1范围,其正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞的抑制率大于90%,IC50均小于10μg.ml-1,夜香树正丁醇和多糖提取物能抑制L1210细胞集落形成,并可诱导L1210细胞发生凋亡。结论夜香树提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制可能通过诱导L1210细胞发生凋亡而发挥作用。

环六亚甲基双乙酰胺对小鼠白血病L_(1210)细胞系作用的遗传学观察

一、前 言 小鼠白血病L1210细胞系有体内、体外传代两种细胞系,其以对抗肿瘤药物敏感性高,生长周期短为特点而被广泛地用于化疗药物筛选,是抗肿瘤药物研究的较好实验模型。Dowjat等对体内、体外培养的L1210细胞进行核型分析,体外株的标记染色体是5与12号染色体所形成的顶端着丝粒融合,即rob t（5;12）以及9号染色体所形成的标记染色体M4,X染色体呈单体型或缺如。

日本成功利用“新万能细胞”治疗小鼠白血病

日本北海道大学一个研究小组日前宣布，该小组利用被称为“新万能细胞”的诱导多功能干细胞（iPS细胞），培育出了具有抗肿瘤作用的免疫细胞，然后将其注射到患白血病的小鼠体内，成功使患白血病小鼠的存活期大幅延长。

T细胞治愈小鼠白血病

以一种白细胞为基础的新治疗法可以根治或减缓小鼠急性成淋巴细胞白血病。此发现给人类白血病或其他癌症患者带来希望。此项实验性治疗以T淋巴细胞为基础。费城Wistar研究所的Daniela

依达拉奉对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7炎性反应的抑制作用

目的 探讨依达拉奉(EDA)对小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7炎性反应的抑制作用。方法 以脂多糖诱导RAW264.7细胞,复制炎性细胞模型。采用CCK-8法检测EDA的细胞毒性作用。实验分为空白组(等体积培养基)、模型组(等体积培养基)、给药组(40μg/mL EDA)。采用Griess法检测细胞中一氧化氮(NO)水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞中前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、活性氧(ROS)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法测定细胞中IL-1β和IL-18 mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞中JAK2/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路相关蛋白JAK2,p-JAK2,STAT3,p-STAT3,IL-1β,IL-18的蛋白表达水平。结果 与0μg/mL比较,20,40,80,160μg/mL EDA处理下细胞存活率无显著变化(P <0.05)。与模型组比较,给药组细胞中NO,PGE2,IL-1β,IL-18,TNF-α,ROS水平均显著降低(P <0.05);IL-1β与IL-18 mRNA及蛋白表达水平和p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3均显著降低(P <0.05)。结论 EDA可能通过抑制JAK2/STAT3通路的激活而抑制RAW264.7细胞的炎性反应。

小鼠睾丸白血病模型

将微量白血病细胞接种于小鼠睾丸内,建立了辜丸白血病模型。睾丸白血病细胞不仅通过血流播散,引起全身性白血病,而且可沿腹膜后或淋巴管直接播散。小鼠睾丸内和皮下接种同样数量的白血病细胞,前者生存时间比后者短;对环磷酰胺(CY)治疗反应,睾丸内直接给药组的疗效不如皮下接种组注射CY的疗效好。提示睾丸内环境可能有利于白血病细胞的生长。

维泰醇对小鼠淋巴白血病细胞促进凋亡的作用及其机制

维泰醇(alternol)是利用红豆杉树皮中一种微生物菌诱变株,经过发酵、纯化等工艺分离出的新型单体化合物。本研究探讨维泰醇对小鼠淋巴白血病(L1210细胞)的作用及其机制。采用MTT法检测维泰醇对细胞活力的影响,用形态学方法、DNA凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡,以Western blotting法检测与凋亡相关蛋白的表达。维泰醇对L1210细胞的增殖有明显抑制作用;处理后的细胞表现出凋亡特有形态学改变,细胞凋亡比率的增加有时间依赖性;维泰醇能降低细胞线粒体跨膜电位(ΔΨm),增加细胞内活性氧(ROS)的水平,并引起细胞DNA发生片段化,形成典型的梯状条带;维泰醇能下调Bcl-2/Bax表达比率,并且上调caspase-3和caspase-9的表达,但是对caspase-8的表达没有明显的影响。维泰醇可能通过激活线粒体调控的凋亡通路诱导L1210细胞凋亡。

日本成功利用诱导多功能干细胞治疗小鼠白血病

日本北海道大学一个研究小组日前宣布，该小组利用被称为“新万能细胞”的诱导多功能干细胞（iPS细胞）培育出了具有抗肿瘤作用的免疫细胞，然后将其注射到患白血病的小鼠体内，成功使患白血病小鼠的存活期大幅延长。

小鼠淋巴细胞白血病（Ｐ３８８）生物学特性的研究

对从国外引进的小鼠淋巴细胞白血病(P388)的生物学特性进行了观察,实验结果表明以DBA/2近交小鼠为宿主,腹腔播种小鼠淋巴细胞白血病(P388)瘤细胞悬液,传代宜用第6一8天荷瘤鼠之腹水,每只鼠接种瘤细胞数宜大于1OO万。其接种成活率为98.6%,有1.4%的自发消退.肿瘤生长潜伏期3-4天,第4～6天为缓慢生长期,第6-12天为迅速生长期,瘤细胞的倍增期略早于腹水的倍增期.第12天后,动物呈明显恶液质状态并进入濒死期,宿主平均存活14.7±3.21天。自第6日起荷瘤小鼠平均每日腹水增长1.26ml.至第14日,平均腹水总量可达12-13ml.

小鼠单核巨噬白血病细胞培养条件优化

目的探讨小鼠单核巨噬白血病细胞的细胞培养方法。方法采用胰酶消化和细胞刮棒的方法获得细胞最适的传代方法,比较培养基酸碱度、培养耗材等确定最佳培养条件。结果采用细胞刮棒方法,沿着细胞培养瓶一端顺势往另一端轻柔刮取细胞比胰酶消化法获得的细胞传代,对细胞的损伤更小,细胞状态更好,在所有细胞培养条件中,培养耗材的高压灭菌和培养基的酸碱度对细胞的影响最大,在培养过程中需要采取180℃高压灭菌和调节酸碱度来获得细胞的最佳状态。结论采用DMEM高唐培养基+10%FBS,细胞刮棒沿着一个方向轻轻刮取细胞,传代的比例最佳为1:4,采用过滤的HEPES每次实验时调节培养基酸碱度,是细胞的最佳培养条件。

低剂量照射增强白血病化疗的疗效及其机理的研究

为了增强化疗药物对白血病细胞的杀伤效应 ,而又最大限度地减少化疗的毒副作用 ,本研究探讨了低剂量照射增强Ara C抗白血病的作用及其作用机理。实验用小鼠急性淋巴细胞性白血病模型 (L615 )进行 ,先确定低剂量全身照射与小剂量Ara C最佳联合治疗方案 ;在此基础上观察该方案对血液系统的毒副作用 ,并从骨髓病理形态学的动态观察、残留白血病细胞检测、骨髓基质细胞GM CSF表达 (免疫酶标法 )、骨髓条件培养上清液GM CSF水平 (微孔滤膜免疫金银染色法 )等探讨其疗效机理。研究结果表明 ,小鼠于接种白血病细胞后第 4天给予 30 0cGy全身照射后 ,间隔 1,2或 3天连续 3天给予 30mg kgAra C ,有 5 8% - 72 %的动物存活 >30天 ,其中 17%的小鼠获得治愈 ,30天内因白血病死亡小鼠的存活时间也比单纯照射和单纯Ara C组明显延长 (P <0 .0 5 )。该治疗方案对外周血白细胞数和骨髓有核细胞数有一过性减少 ,但恢复较快。骨髓病理形态学观察发现 ,30 0cGy照射后小鼠骨髓轻度抑制 ,血窦扩张充血 ;骨髓基质细胞GM CSF表达高于正常 ;骨髓细胞条件培养液的GM CSF水平也高于正常。由此可见 ,低剂量照射与小剂量Ara C联合具有明显的协同作用 ,其机理可能与低剂量照射增加骨髓血窦的通透性 ,诱导骨髓基质细胞产生细胞因子 。

AML1-ETO转基因小鼠的建立及初步表型分析

目的:建立AM L1-ETO融合基因转基因小鼠,在整体动物水平研究AM L1-ETO融合蛋白在白血病发病中所起的作用。方法:构建hCG/AM L1-ETO转基因质粒,通过显微注射将该质粒转入小鼠受精卵中,植入假孕母鼠输卵管,获得G0代转基因小鼠;用聚合酶链反应(PCR)方法检测融合基因的整合情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测融合基因的表达情况和组织表达谱。结果:PCR法共检出10只G0代转基因阳性小鼠,其中8个系均产下F1代小鼠,由此建立了8个AM L1-ETO转基因小鼠系。RT-PCR法证实AM L1-ETO融合基因在22系中稳定表达,但血常规、肝脏、脾脏等组织未见异常变化;对该系小鼠的组织表达谱检测表明,融合基因在肝脏、脾脏、心脏和肌肉组织存在不同程度的表达,但在脑组织中不表达。结论:AM L1-ETO融合基因能在转基因小鼠的骨髓等组织中表达,但尚不足以引发白血病,推测其他致病基因在小鼠白血病的发生中也起一定作用。

多抗甲素对小鼠NK细胞活性的影响

已有明确的证据表明,我国新近开发的新抗生素多抗甲素在小鼠体内有显著的促进抗肿瘸免疫反应的作用。自然杀伤细胞(NK细胞)对多种肿瘤细胞均有直接杀伤活性,是机体抗肿瘤免疫反应中的主要效应细胞之一。

青藤碱对α7nAChR参与的巨噬细胞M2极化和小鼠肝癌TAM极化的干预作用

目的 观察青藤碱对巨噬细胞M2极化及小鼠肝癌腹水瘤模型腹腔肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)的影响。方法 细胞实验以白细胞介素(IL)-4(10 ng·mL^(-1))单独或与IL-6联合(即IL-4+IL-6,浓度均为10 ng·mL^(-1))刺激小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7诱导M2极化,青藤碱(400μmol·L^(-1))干预后,ELISA法检测IL-10分泌量;荧光定量PCR法检测精氨酸酶1(Arg-1)、Fizz1和Ym1的mRNA表达水平;免疫印迹法检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)表达。动物实验分为正常组、模型组、青藤碱(40 mg·kg^(-1))组,采用小鼠肝癌细胞H22腹腔注射诱导小鼠腹水瘤模型,灌胃给药4 d,分离各组小鼠腹腔巨噬细胞,流式检测CD86、CD206和α7nAChR表达。结果 IL-4或IL-4+IL-6联合诱导后,M2极化指标Arg-1、Fizz1和Ym1的mRNA相对表达量及IL-10分泌量升高(P<0.05);IL-4+IL-6组明显高于IL-4单独组(P<0.05),且α7nAChR表达升高(P<0.05);青藤碱可下调M2表型,也可下调α7nAChR表达(均P<0.05)。肝癌腹水瘤小鼠腹腔肿瘤相关巨噬细胞与正常小鼠腹腔巨噬细胞比较,其CD86表达下降(P<0.05),CD206、α7nAChR表达上调(P<0.05);青藤碱干预后,CD86表达上调(P<0.05),CD206、α7nAChR表达下降(P<0.05)。结论 α7nAChR表达与M2极化和肿瘤相关巨噬细胞极化正相关,青藤碱能下调α7nAChR表达,抑制M2极化、促进肝癌腹水瘤中肿瘤相关巨噬细胞向M1极化。