下丘脑多巴胺和5-羟色胺调控鸡就巢机理的研究

利用 350至 4 50日龄的就巢粤黄鸡观察多巴胺 (DA)和 5 羟色胺 ( 5 HT)受体拮抗剂氯丙嗪和赛更啶对就巢的影响。就巢第 2d开始每天口服氯丙嗪 60mg/ (kg·d)或赛更啶 8mg/ (kg·d) ,7d后或于就巢终止后停止药物处理。试验 1:13只氯丙嗪处理鸡中 92 3% ( 12 / 13)于处理后5 4± 1 1d终止就巢 ;15只赛更啶处理鸡有 60 0 % ( 9/ 15)在处理后 3 2± 0 3d终止就巢 ;全部( 10 0 % ) 10只同时处理氯丙嗪和赛更啶的鸡于处理后 3 2± 0 3d终止就巢 ;8只对照组鸡在不受任何处理时持续就巢 ,其就巢期被主观认为 2 2d。试验 2 :7只就巢鸡在就巢的第 2、4、9、14和 19d血浆PRL水平维持在 2 0 0～ 4 0 0ng/ml之间 ;9只氯丙嗪处理后终止就巢的 7只鸡以及 13只赛更啶处理后终止就巢的 6只鸡 ,血浆PRL由就巢第 2d与对照组类似的高水平急剧下降到第 4d小于 2 0ng/ml,并至第 19d一直处于较低水平。对照组在持续就巢期间的血浆LH水平低于 1 0ng/ml,而用药后终止就巢鸡的血浆LH水平从处理前的小于 1 0ng/ml逐渐上升至第 19天的 3 0ng/ml左右。药物处理后仍未终止就巢鸡的血浆PRL和LH水平都与对照组的类似。以上结果说明用DA和 5 HT受体拮抗剂氯丙嗪和赛更啶处理后 ,抑制了垂体PRL的分泌并使鸡终止就巢 ,在整体水平证明了?

马岗鹅的就巢规律及其与产蛋量的相关研究

观察２０７只马岗鹅种母鹉 ３５周间的就巢情况及产蛋量，结果：平均就巢次数为 ４．２次，个体次平均就巢天数为２２．３天，个体就巢天数为９４．８天，表现出较强的就巢性；另外，就巢总天数与产蛋量间呈现中等负相关。个体间就巢性差异很大，可望通过选育提高产蛋量。

马岗鹅产蛋-就巢周期内卵泡发育的内分泌调控

旨在探讨马岗鹅产蛋-就巢周期内卵泡发育的内分泌调控机制。试验1:观察了马岗鹅产蛋-就巢周期内PRL、LH、P4和INB水平的变化和就巢期(第1天)、就巢终止期(第10天)、开产期(第25天)、产蛋高峰期(第40天)、停产期(第55天)和就巢期(第70天)卵泡的发育。试验2:在对马岗鹅终止就巢时(第1天)主动免疫重组鸡PRL蛋白(1 mg.只-1),并在开产前(第23天)和产蛋高峰期(第45天)加强免疫(0.8和0.5 mg.只-1),同时从第33天将每天光照由11 h增至16 h,观察对马岗鹅产蛋和就巢的影响。试验1结果表明,随着就巢的终止,PRL水平下降,LH、P4和INB水平上升。PRL在开产前降至最低,开产后又逐渐上升,就巢期达最高;LH则在开产前和产蛋期呈现两波分泌峰;P4和INB与PRL呈相反变化,在产蛋高峰期最高,就巢期最低。鹅群在第24天恢复产蛋,开产前有约10枚大白卵泡(LWF)发育为小黄卵泡(SYF)和大黄卵泡(LYF);在约30 d的产蛋期内,平均每只产蛋约8枚,产蛋结束后90%的鹅发生就巢。试验2结果表明,对马岗鹅主动免疫PRL蛋白一定程度推迟(P<0.05)了开产后产蛋率的上升,并一定程度抑制就巢的发生;而在延长光照15 d后,免疫组的产蛋和就巢则快速升至与对照组相当水平。整个试验期,2组累计就巢均达到100%,但免疫组比对照组多产蛋1枚(8.0 vs 7.0)。结果提示,PRL和LH的交替分泌调控马岗鹅的产蛋就巢周期;卵泡发育时分泌的INB,以及由P4促进分泌的PRL,调节周期中卵泡发育和产蛋的数量。PRL不仅促进就巢发生并导致周期内较低等级卵泡的闭锁,可能还在开产前后具有促进卵泡发育和产蛋的作用。

鸡催乳素受体基因多态性与就巢及产蛋性状的关联分析

【目的】揭示与繁殖性状关系密切的催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因与中国地方鸡种的就巢性及产蛋性能的关系。【方法】本试验采用PCR-SSCP方法,以576只宁都黄鸡为材料,检测PRLR基因的多态性,并进行多态性与就巢和产蛋性状间的关联分析。【结果】证实了前人研究过的SNP1(T10862C,外显子3)和SNP2(T25670C,外显子6)均与就巢性状无显著关联(P>0.05);SNP2对300 d产蛋量影响显著(P<0.05);新发现的SNP3(G30716A,内含子8)显著影响开产日龄(P<0.05);新发现的SNP4(A31900G,外显子10)极显著地影响就巢率(P<0.01),显著影响就巢天数和300 d产蛋量(P<0.05)。由4个SNPs构建的不同单倍型在开产日龄上的差异达到极显著水平(P<0.01),在其它性状上的差异不显著(P>0.05)。【结论】PRLR基因的多态性与就巢和产蛋性状相关,SNP4的效应更为突出。

利用抑制消减杂交技术筛选鹅就巢行为相关基因

旨在利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,筛选就巢母鹅上调与下调表达的基因。以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为检测子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵巢差异表达基因文库。从双向文库随机挑选单菌落进行PCR验证,结果表明文库质量良好。选取654个阳性克隆进行测序分析,获得641条表达序列标签(ESTs)。对ESTs进行去除载体序列、质量检测、聚类及拼接,经BLASTn比对,有166条ESTs找到与之匹配的同源序列,其中92个是功能基因。比较就巢与产蛋SSH文库,发现就巢SSH库中参与细胞凋亡、信号转导及细胞结构的基因出现频率较高;产蛋特异性基因文库中参与物质能量代谢、细胞防御的基因较多;尚有许多差异片段属于未知功能蛋白或理论推定蛋白。结果提示,催乳素受体、抗苗勒管激素以及雌激素受体基因在就巢期上调表达可能与鹅就巢行为的启动与维持有关。该结果为进一步研究鹅就巢行为分子调控机制奠定基础。

下丘脑多巴胺和5-羟色胺调控皖西白鹅就巢机理的研究

本试验利用多巴胺(dopamine,DA)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)受体阻断剂作用于皖西白鹅的就巢开始,进行醒抱和就巢的内分泌调控试验。于就巢第1d开始用药(氯丙嗪:80mg/kg·d,赛更啶:8mg/kg·d),连用3d。醒抱试验结果为:氯丙嗪处理组的平均就巢天数为2.5±0.8d,赛更啶处理组为3.8±1.2d,氯丙嗪和赛更啶共同处理组为1.0±0.2d,均极显著低于对照组(35d,P<0.01)。就巢的内分泌调控试验结果为:用药物共同处理后,试验组E2先升后降,并维持较高水平(>256.74±23.98ng/ml),对照组下降较明显,并维持较低水平(<162.65±15.36ng/ml);试验组催乳素(prolactin,PRL)由开始就巢时的0.26±0.06ng/ml降至0.18±0.02ng/ml,而对照组的PRL则从就巢开始的0.26±0.06ng/ml一直上升至0.38±0.06ng/ml;外周P4浓度从就巢开始时的46.18±3.36nmol/ml显著降至16.67±4.35nmol/ml(P<0.05),并维持低水平;而FSH的变化则无显著差异。以上试验结果提示,DA和5-HT阻断剂可以降低禽类机体内PRL分泌,对禽类就巢的发生和维持具有抑制作用,同时表明DA和5-HT对于禽类就巢的发生和垂体PRL的释放具有一定的协同促进作用。

免疫血管活性肠肽调节鸡产蛋和就巢的机理研究

旨在研究免疫血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)和抑制催乳素(Prolactin,PRL)分泌对鸡产蛋和就巢的影响机制。试验1:对18周龄未开产的泰和鸡,分别在试验d1、d28、d56和d84免疫含VIP羧基端15肽片段的VIP-BSA偶联蛋白,观察对产蛋和就巢的影响。试验2:利用刚开产的23周龄粤黄鸡,在试验d1、d23、d48、d73、d98免疫VIP串联四聚体重组蛋白,观察对产蛋和就巢的影响,并在第98天检测卵泡发育和下丘脑、垂体、F1～F3级LYF颗粒层和膜层相关基因的表达。试验1中免疫VIP组在开产后高峰期(d55～d61)的产蛋率显著低于对照组,但高峰后的(d89～d103)产蛋率显著高于对照组,同时免疫VIP组的就巢发生也要迟于对照组。试验2中,VIP免疫组的产蛋率在试验初高于对照组;在d33将光照从12h延长至16h后,2组的产蛋率均快速上升;产蛋高峰后,免疫组产蛋率快速下降并在d80～d105显著低于对照组。免疫VIP重组蛋白也降低了就巢的发生。2组鸡在d98的大黄卵泡、小黄卵泡和大白卵泡的数量无显著差异。免疫VIP重组蛋白并不影响下丘脑Gn-RH-Ⅰ和VIP、垂体LHβ和FSHβ的mRNA水平,但显著降低了垂体PRL的表达,也显著降低了垂体和下丘脑PRLR的表达。在检测的F1～F3卵泡组织中,免疫VIP重组蛋白也显著降低了F1和F3颗粒层的PRLRmRNA水平,降低了F1～F3颗粒层和膜层的LHR表达量,但对P450scc和StAR的表达量没有影响。两试验结果表明,免疫VIP能够降低PRL的表达和分泌,从而抑制产蛋引发的就巢发生,但是免疫VIP在抑制PRL表达分泌后也会抑制卵泡发育和产蛋,这一机制可能是通过影响卵泡组织LHR的表达而实现的。

鸭催乳素基因外显子4单核苷酸多态性与就巢性状的相关分析

研究采用 PCR-SSCP 技术研究番鸭不同就巢群体(就巢1月群、就巢2月群、就巢3月群)、番鸭非就巢群和白改鸭5个群体250个个体 PRL 基因第4外显子多态性与就巢性状之间的相关性。结果表明,在外显子4编码区内发现2个 SNP 位点,分别位于该基因的3 777 bp(T/C)和3 785 bp(A/G)处。基因型与就巢性状指标相关分析的结果表明,番鸭非就巢群体与各就巢群体间差异极显著(P<0.01),同时番鸭与白改鸭差异显著(P<0.05.),推测 PRL 基因与就巢性有一定的相关。

皖西白鹅催乳素基因克隆、表达及主动免疫后就巢行为分析

为研究催乳素(PRL)对地方鹅就巢行为的影响,构建含鹅PRL成熟编码区完整序列的原核表达载体,通过转化Escherichia coli BL21(DE3)建立稳定的原核表达系统,IPTG诱导下获得胞外重组PRL(rPRL)。选成年就巢期皖西白鹅100只,随机分为5组,A组(对照组)注射等量生理盐水,B组口服溴隐亭,C^E组分别颈部皮下多点注射1、2、4mg·mL-1 rPRL。间隔10d进行第2次加强免疫,剂量与首次免疫相同。结果表明:rPRL表达量约262.5μg·mL-1,重组蛋白约占总蛋白质的35.2%。经His-tag柱纯化回收,回收率为64.9%。与对照组相比,首次免疫后C^E组就巢率极显著下降;二次免疫后D、E组就巢率显著低于其他各组;二次免疫10d后各组间就巢率差异不显著,且均上升至20%以上。产蛋率比较表明,首次免疫后各组产蛋率无显著差异;二次免疫后D组产蛋率显著高于C组,但与其他各组差异不显著。rPRL主动免疫可显著降低就巢率、增加产蛋量,但维持时间较短,且鹅群受环境条件影响显著。

北京油鸡就巢产蛋行为特性研究

本文主要研究了散养条件下北京油鸡整个产蛋期间（19～65周）的就巢产蛋行为发生及其特性表现。选用600只18周龄的北京油鸡蛋鸡，为便于行为观察记录随机分为6组，每组单独观察。19～65周龄期间每周末观g,ie～录各组鸡只就巢、产蛋行为发生情况，特别是37～55周龄期间每周选1d由两位专门人员进舍观g-,4：录3次（10：00～11：00、16：00～17：00、20：00～21：00），每组10分钟。结果表明：北京油鸡预产期间（19-21周），产蛋行为表现少（〈1％），此时鸡只无就巢行为发生。产蛋前期（22～28周），鸡只产蛋行为随周龄逐渐增加，尤其是29周之后产蛋行为表现频繁时（58．13％），就巢行为也开始增加并频繁发生（9．47％）；而产蛋后期（44周后）产蛋行为显著降低时（46．18％），就巢行为却并没有减少很多（8．29％）。37～55周期间油鸡就巢两次的比率占总体典型就巢行为发生的54．7％。平均就巢持续时间，就巢一次的要大于就巢两次的（20．4d〉17．8d），典型就巢行为发生率小于非典型就巢行为发生率（9．5％〈12．7％）。最后总结了北京油鸡的就巢产蛋行为特性：主要表现为具有阶段性、明显的目的性，记忆性，个体差异性，对声、光的敏感性，以及发生的不同步性。

石歧杂鸡催乳素基因外显子2的SNP检测与产蛋就巢性状的关联分析

利用PCR-SSCP技术对石歧杂鸡的催乳素(prolactin,PRL)基因外显子2进行SNP检测和测序分析,并对该基因与石歧杂鸡产蛋、就巢性状的相关性进行了研究。结果表明,PRL基因外显子2存在多态性位点,该位点由于在3838位点发生C→T的碱基突变,产生了AA、AB和BB3种基因型,并导致氨基酸的改变,由亮氨酸变为苯丙氨酸。基因型AA和等位基因A的频率最高;BB基因型个体首次就巢时间显著晚于AA和AB基因型(P<0.01);BB基因型的就巢次数显著多于AA和AB基因型(P<0.05);3种基因型与产蛋性状相关性不显著。

石歧杂、琅琊鸡和鲁禽B2产蛋和就巢性状的研究

[目的]研究石歧杂、琅琊鸡和鲁禽B2系就巢性和产蛋性能的关系。[方法]对山东省农业科学院家禽保存品种石歧杂、山东地方品种琅琊鸡和培育品系鲁禽B2系进行就巢表型观察和产蛋性能统计,利用SAS软件分析就巢性和产蛋性能的关系。[结果]3个品种都有不同程度的就巢表现,就巢率分别为15.8%、2.24%和6.95%;3个品种就巢鸡43周产蛋量比正常鸡分别减少17.16%、1.53%和10.8%;3个品种间就巢次数存在显著差异(P<0.05),就巢持续时间、首次就巢日龄、开产日龄、总畸形蛋数和双黄蛋数均存在极显著差异(P<0.01)。[结论]就巢性是影响产蛋性能的主要因素,3个品种中就巢性影响产蛋性能的程度从高到低依次为石歧杂,鲁禽B2和琅琊鸡。

黑番鸭VIPR-1基因单核苷酸多态性与就巢性状的关联性分析

VIPR-1基因是研究家禽就巢性状的重要候选基因,研究选用处在产蛋期、就巢期的黑番鸭为研究对象,通过PCR-RFLP和测序的方法,对VIPR-1基因内含子12进行多态性检测,并分析其与就巢性状之间的关系。结果表明:VIPR-1基因内含子12存在一个AfaⅠ酶切位点,该位点在内含子12的902 bp处发生了C→T的碱基突变,产生了CC,CT和TT三种基因型。通过对产蛋黑番鸭与就巢黑番鸭个体的研究,发现所测产蛋黑番鸭基因型的分布情况为CC(32),TT(40)和CT(42),就巢黑番鸭基因型的分布为CC(18),TT(40)和CT(18),经卡方独立性检验,产蛋黑番鸭与就巢黑番鸭两者之间基因型的分布差异显著(P<0.05)。表明黑番鸭VIPR-1基因第12内含子C902T突变与黑番鸭的就巢性状显著相关。

就巢行为对皖西白鹅产蛋和体重的影响

试验旨在研究皖西白鹅的就巢行为对产蛋、体重的影响以及不同醒抱方法对就巢醒抱时间的影响。选用2~3年龄、体型相近的待产期皖西白鹅210只(165只母鹅,45只公鹅),通过全自动监控视频采集系统记录皖西白鹅的产蛋行为和就巢行为以及就巢性对全年产蛋率的影响;分析皖西白鹅就巢期和产蛋期体重的差异,记录5种不同物理醒抱方法对皖西白鹅醒抱时间的影响。结果表明:就巢中期母鹅的体重极显著低于就巢前期、就巢后期和产蛋期,母鹅体重产蛋期>就巢后期>就巢前期(P>0.05);低就巢鹅的产蛋数显著高于高就巢鹅;与其他物理醒抱方式相比,将各就巢鹅单独关进笼子里并保持流水的方式可以有效缩短其就巢时间。综上可知,皖西白鹅就巢中期的体重最轻,其就巢性和产蛋率存在负相关,且将就巢鹅单独关进笼子里并泼水可以有效促进就巢鹅的醒抱,是最为有效的一个物理醒抱方法。

家禽就巢行为的分子遗传基础

在现代养禽业中,就巢行为已成为制约禽类繁殖性能和饲养效益的重要因素.因此,减少和消除就巢行为已成为重要的育种目标之一.结合本实验室多年来的研究工作,笔者对家禽就巢行为的分子遗传机制进行了综述与展望.……

光周期对蛋用型北京油鸡就巢产蛋行为发生的影响

本研究目的是探讨不同光周期处理对蛋用型北京油鸡就巢、产蛋行为发生的影响。648只18周龄的蛋用型北京油鸡随机分为6组，每组108只，每组设3个重复，每小舍内单独照明，单独饲养。组1为对照组，采用16L：8D，光照时间6：00-22：00；组2～6为试验组：组2为12L：2D：4L：6D，6：00-18：00、20：00-24：00；组3为8L：4D：4L：8D，6：00-14：00、18：00-22：00；组4为16L：8D，3：00～19：00；组5为14L：10D，6：00-20：00；组6为18L：6D，6：00-24：00。所有鸡只采用玉米豆粕型日粮，连续进行43周（19-62周）试验，记录每个组的就巢行为和产蛋行为发生情况。结果表明，蛋用型北京油鸡的就巢行为发生在不同产蛋阶段表现不同，各组均呈现产蛋中期（34-40周龄以及41-47周龄）较高（3．70％-14．81％）、前后两端较低（34周龄前以及48周龄后）（〈3．70％）的特点，尤其是41-47周龄期间就巢行为发生最高（7．41％-14．81％）。不同光周期处理对就巢行为发生具有显著影响，尤其是在34-40周以及41-47周期间（P=0．047和P=0．041）。不同光周期处理对鸡只产蛋行为发生均具有显著影响（P〈0．05）。除了34-40和48-54周外，其它各阶段组2的产蛋率均显著高于对照组（P〈0．05）；组2的全期平均产蛋率（62．91％）显著高于其它各组（P〈0．05）。由此表明41-47周可能是一个光周期调控蛋用型北京油鸡就巢行为发生的重要阶段，此期间就巢行为和产蛋行为发生均较高。而采用组2光周期（12L：2D：4L-6D）因其表现出较高的产蛋率和较低的就巢率则有益于产蛋鸡只的生产性能。

鸭催乳素基因外显子4单核苷酸多态性与就巢性状的相关分析

研究采用PCR-SSCP技术研究番鸭不同就巢群体(就巢1月群、就巢2月群、就巢3月群)、番鸭非就巢群和白改鸭5个群体250个个体PRL基因第4外显子多态性与就巢性状之间的相关性。结果表明,在外显子4编码区内发现2个SNP位点,分别位于该基因的3777 bp(T/C)和3785 bp(A/G)处。基因型与就巢性状指标相关分析的结果表明,番鸭非就巢群体与各就巢群体间差异极显著(P<0.01),同时番鸭与白改鸭差异显著(P<0.05),推测PRL基因与就巢性有一定的相关。

北京油鸡就巢行为发生及血清生化指标分析

试验旨在研究北京油鸡就巢行为发生及就巢鸡血清生化指标分析。从1 296只43周龄北京油鸡商品代蛋鸡中选取有就巢行为表现的就巢鸡30只,和无就巢行为表现的产蛋鸡30只,饲养在两个单独的栏舍内。采用人为观察记录的方式研究鸡只就巢行为发生周期及类型,观察期为44~49周龄,50周龄末对所有试验鸡采血,测定血清生化指标。结果显示:一次就巢平均持续时间为9.4 d,发生典型就巢行为比例要低于非典型就巢行为比例(4/30<9/30),两次就巢的北京油鸡其总持续时间要大于一次就巢的,可能因此会影响鸡群产蛋量。就巢鸡与产蛋鸡血清生化指标显著不同,表现在:就巢鸡的催乳素含量显著高于产蛋鸡(P<0.05),而促黄体素、血清总蛋白、乳酸含量均显著低于产蛋鸡(P<0.05)。二者总抗氧化能力没有显著差异,但就巢鸡的谷胱甘肽过氧化物酶活性几乎达到显著水平(P=0.057),同时丙二醛含量显著大于产蛋鸡(P<0.05),提示就巢鸡体内可能存在更多氧化应激。

就巢鸡与产蛋鸡生殖系统发育及相关基因表达量的比较

试验比较了就巢鸡和产蛋鸡生殖系统发育及催乳素(PRL)和褪黑激素受体1c(Mel-1c)基因表达量的变化。从1296只42周龄商品代北京油鸡中挑选出有典型就巢行为表现的就巢鸡30只和无就巢行为表现的产蛋鸡30只,饲养在两个单独的栏舍内,每舍内15只就巢鸡和15只产蛋鸡,43周龄末对所有试验鸡采血测定血清PRL、促黄体素(LH)和雌激素(E2)含量,每舍内分别选取就巢鸡和产蛋鸡各3只进行屠宰,观察卵巢、输卵管发育情况,并取卵巢和输卵管样品,测定PRL和Mel-1c基因的相对表达量。结果表明:就巢鸡的PRL、LH浓度均显著高于产蛋鸡(P<0.05),而E2浓度显著低于产蛋鸡(P<0.05);就巢鸡和产蛋鸡在体重、卵巢发育方面有显著差异;就巢鸡卵巢中PRL基因、Mel-1c基因相对表达量显著高于产蛋鸡(P<0.05),而输卵管中不同生理时期基因相对表达量差异不显著(P>0.05);PRL基因相对表达量在卵巢中显著高于输卵管中(P<0.05),Mel-1c基因相对表达量在卵巢和输卵管中差异不显著(P<0.05)。